中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 郭志佳山西医科大学 2015年博士导师: 郭政共257页

摘要 : 目的：恢复血供是目前治疗缺血性心脏病的重要途径，而心肌缺血再灌注（I/R）损伤也成为主要并发症和难题。阈下电刺激作为一种安全有效的治疗手段已经在很多领域有广泛的应用，但其对心肌I/R损伤的影响还鲜有报道。本实验拟通过观察心室阈下电... 展开目的：恢复血供是目前治疗缺血性心脏病的重要途径，而心肌缺血再灌注（I/R）损伤也成为主要并发症和难题。阈下电刺激作为一种安全有效的治疗手段已经在很多领域有广泛的应用，但其对心肌I/R损伤的影响还鲜有报道。本实验拟通过观察心室阈下电刺激对大鼠急性心肌I/R损伤引起的血流动力学、心律失常、梗死面积、凋亡程度等指标的影响，评价其对I/R心肌的作用，并进一步从连接蛋白43（Cx43）、P物质（SP）、降钙素基因相关肽（CGRP）、NF-κB和Caspase-3活性等几方面深入探讨可能的机制。方法：成年雄性SD大鼠(350±20g)以结扎冠脉方法建立急性心肌I/R模型。心室电刺激强度为不引起室早的最大阈下强度，频率为动物自身心率65%-70%。动物随机分成4组(每组n=6)：①正常对照组：直接开胸取心肌标本；② I/R组：缺血30min+再灌注60min；③电刺激预处理组：结扎冠脉（CAO）前15min开始持续电刺激直到再灌注结束；○4电刺激后处理组：CAO25min开始电刺激，直到再灌注结束。收集血流动力学（收缩压、舒张压、平均压和心率）和室性心律失常（室早、室速、室颤）数据。用伊文氏蓝-TTC双染法评价心梗面积，用TUNEL法和Caspase-3活性检测心肌凋亡并计算凋亡率(AR)。用ELISA法检测心肌Cx43、SP、CGRP蛋白水平，同时用qRT-PCR法检测心肌SP、CGRP、NF-κB的mRNA水平。结果：电刺激（预/后处理）并不会显著影响I/R组的死亡率、血流动力学或心律失常指标(p>0.05)，但可以显著限制I/R组梗死面积和凋亡率(all p<0.05)，后处理显著下调了I/R组NF-κB、SP的mRNA水平和Caspase-3活性(all p<0.05)。与正常组相比，I/R组心肌Cx43蛋白水平、Cx43侧面化程度显著增高(all p<0.05)；而电刺激（预/后处理）可以显著逆转这种趋势(all p<0.05)，电刺激预处理和后处理之间差别并不显著(p>0.05)。同时电刺激预处理还显著逆转了I/R引起的心肌CGRP蛋白水平增高(p<0.05)。结论：心室阈下电刺激（预/后处理）可以通过减少梗死面积和凋亡率实现对I/R心肌的保护作用，预处理机制可能是抑制了由I/R引起的心肌Cx43、CGRP蛋白过度表达，后处理则与下调心肌SP、NF-κB mRNA水平和Caspase-3活性有关。收起

关键词 : 缺血性心脏病心肌缺血再灌注损伤阈下电刺激心律失常动物模型

2. 基于人文融合的健康社会工作研究

[学位论文] 姚尚满山西医科大学 2020年博士导师: 段志光共239页

摘要 : 研究目的本研究旨在采用理论联系实际、定性研究和定量研究相结合的方法，以健康中国建设为背景，以大健康人文为研究视角，系统研究“医务社会工作”发展到“健康社会工作”的必然性和演变过程，探索构建以人文融合为特征的健康社会工作发展路... 展开研究目的本研究旨在采用理论联系实际、定性研究和定量研究相结合的方法，以健康中国建设为背景，以大健康人文为研究视角，系统研究“医务社会工作”发展到“健康社会工作”的必然性和演变过程，探索构建以人文融合为特征的健康社会工作发展路径，为健康社会工作研究和相关管理决策提供参考依据。数据来源健康社会工作学科文献的题录信息；17位国内健康社会工作研究领域和实务领域的专家学者、资深社会工作者的质性访谈资料。国际数据：选取WebofScience数据库收录的1998年—2018年以“socialwork”为学科类别的健康社会工作研究论文的题录数据。题录信息包括作者、题名、机构、国家/地区、期刊、发表年份、关键词、摘要、被引频次、学科和参考文献等。国内数据：选取中国期刊全文数据库(CNKI)和万方知识服务平台数据库收录的1982年—2018年的健康社会工作期刊论文的题录数据。题录信息包括作者、题名、机构、期刊、发表年份、关键词、摘要等。研究方法 1.德尔菲法。采用现场和通信方式征询专家意见，确定健康社会工作文献检索的关键词和质性访谈的提纲。 2.比较分析法。运用WebofScience数据库的数据分析结果与CNKI、万方数据库收录的国内数据分析结果进行对比分析。 3.质性访谈法。对国内健康社会工作学界和实务界有影响力的学者和专家进行深入的访问，揭示其对健康社会工作理论、实务和学科发展现状、健康社会工作与人文关系的理解，获得第一手的资料。 4.聚类分析。是一种多元统计方法，建立原始数据的矩阵，利用维数技术得到点的二维图。 5.可视化分析法。包括关键词词频分析和关键词共词分析，引文分析法，作者共被引、文献共被引和期刊共被引分析。 6.社会网络分析软件和方法的应用。运用多视角知识网络化分析软件Vosviewer构建知识网络，利用社会网络分析法、合作网络分析法等综合分析。研究结果 1.健康社会工作学科属性分析。从社会工作产生的哲理基础——以“人文”来诠释健康社会工作的本质，是其未来发展中须采取的基本策略。人文理论深刻影响着健康社会工作理论、方法、价值观的建构。健康社会工作是由医务社会工作发展而来。由于缺乏对本土理论的总结，健康社会工作的学科属性尚存在争议，但成为一门学科是自身发展的需要和趋势。健康社会工作基本领域包括医疗照顾，公共卫生，精神障碍，康复与社区康复，医疗慈善与健康公益，生殖健康，中医药与养生保健，灾难、自然灾害与事故，临终关怀与灵性关怀等。 2.健康社会工作研究现状分析。国际健康相关社会工作论文占社会工作总论文比例始终在60%到70%之间波动。我国健康社会工作的发展先后经历了起步——初步发展——高速发展三个阶段，高校是主要的的研究力量，但我国缺乏产生重要影响的机构和学者。通过热点演化、共被引分析发现，健康社会工作的分支学科还没有形成。目前的研究仍然处在学习西方国家理论和实务经验阶段。美国在国际健康社会工作研究中处于绝对的领先地位。在国际期刊上发表文献位于前20的作者和机构大多来自美国。中国大陆排名16位和我们整体的发展体量极不相称。我国健康社会工作研究也存在地域发展不平衡，北京、上海、广东等地是专业化、职业化较为成熟的地区，对弱势群体的人文关怀服务和相关研究比较突出，研究和实务的人文视角更加明显。 3.健康社会工作发展过程中人文因素分析。通过国际经典文献分析，健康社会工作研究已经涵盖了精神病学、公共卫生、职业健康、生物医学、社会科学以及心理学等领域；国际健康社会工作高产作者的研究领域主要有价值观、药物滥用、灵性、循证实践、精神疾病、儿童福利、青少年、服务评估等领域；通过热点分析，目前主要针对儿童、青少年、妇女、老年人等弱势人群，研究精神健康、贫困、家庭暴力、药物滥用、社会支持、抑郁、家庭和社区卫生保健、健康管理等问题。这些研究已经超出传统医务社会工作领域，人文因素在研究中的作用凸显，研究广度在不断延伸。我国健康社会工作也呈现出与国际相同的发展趋势。从大健康人文视角来看，健康社会工作的服务对象已经扩展到一般社会大众，是一种整合性的健康照顾处境的社会工作专业服务。 4.健康社会工作的研究前沿分析。健康社会工作最初主要是从心理学、精神病学等领域开始研究，发展到现在已经涵盖了精神病学、环境健康、生物医学、社会学、行为科学等学科。具有影响力的权威学者、经典文献、前沿期刊也在不断变化，健康社会工作领域研究相互渗透，朝着融合化方向发展，成为一门学科可期。精神健康、弱势群体、循证实践是目前健康社会工作的研究热点和前沿。“健康管理”、“健康照顾”聚类的出现，符合“大健康”的理念，表明专业内涵和外延进一步扩展，其服务和研究领域向一般人群覆盖。 5.健康社会工作科研合作分析。国际健康社会工作研究的作者合作与机构合作率较高，但国家/地区合作率较低。多作者、多机构的合作已经成为研究的主要合作方式。美国的合作点度最大，国际健康社会工作国家/地区合作网络呈现明显的核心边缘结构，美国、英国、澳大利亚和加拿大处于合作网络的中心，其他国家/地区分布于合作网络的边缘。国际研究合作点度靠前的MartinStevens,MarionBogo,Manthorpe，Jill等学者，可以看作是近20多年国际健康社会工作学科的带头人，对弱势群体的人文关怀研究是他们的主要领域。我国健康社会工作学者合作中心度不高。产生了王志中、刘继同等以人文为理论视角开展健康社会工作研究的核心作者。在机构合作网络中，形成了华东理工大学、北京大学、复旦大学3个人文底蕴深厚的合作中心团体。我国健康社会工作省份合作网络也呈现了一定的核心边缘结构，北京、上海、广东、江苏处于合作网络的中心。 6.健康社会工作研究主体分析。通过对国际健康社会工作居于前列的高产学者DavidR.Hodge、MarionBogo等研究领域、《BritishJournalOfSocialWork》等高产期刊发文领域和文献引证网络分析，人文因素始终是学界主要聚焦的热点。近年形成了以北京大学、华东理工大学、山西医科大学等高校为代表的高产机构；刘继同、沈藜、王志中等高产作者一直致力于价值伦理、医学人文、医院人文体系建设研究；30多年的研究热点基本上以老年人、青少年、儿童、残疾人、病人等弱势体为研究对象，以优势视角、精神疾病、临终关怀、伦理、心理健康、药物滥用等为研究领域或视角，充分体现了专业本身追求公平正义、以人文本的价值观，人文因素始终是推动学科发展的不竭动力。 7.人文视角的“医务—健康社会工作”本土发展分析。在“生、心、社、灵”医学模式和“把健康融入一切政策”的健康中国建设要求下，实现医务社会工作从关注疾病状态下的介入向全生命周期健康维护拓展，从医院服务向社区服务延伸，实现医院院后健康服务到社区照顾服务的有效衔接，构建医院医务社会工作与社区相关服务相结合的完整服务链，形成以人的健康为导向、以人的需求为中心，以不同情境下医务社会工作服务为载体的全过程整合型服务模式——健康社会工作。研究结论 1.人文融合是健康社会工作的本质和价值基础，健康社会工作是人文融合的更宽实现路径。 2.人文引领健康社会工作的研究方向，大健康人文成为医务社会工作向健康社会工作转向的视角选择。 3.健康社会工作成为社会工作中最有影响力的研究领域，但区域存在分布不均衡，经济发达地区研究和实务的人文视角更加明显。 4.心理学和精神病学对健康社会工作学科发展产生了重要影响，精神健康、弱势群体、循证实践为研究前沿，“健康管理”、“健康照顾”成为新兴研究领域。 5.国际健康社会工作国家/地区合作网络呈现明显的核心边缘结构，我国大陆学者科研合作率较低；合作网络中处于核心位置的作者和机构一般都有人文视角研究，我国大陆已产生具有一定影响力的人文视角的研究机构和学者。 6.人文是健康社会工作的核心属性和内在推动力，计量学印证了健康社会工作发展中人文因素不断呈现的过程。 7.人文视角的医务社会工作逐步转向，健康社会工作是健康中国建设背景和全人健康理念下的必然选择。对策建议 1.加紧健康社会工作发展的顶层设计。 2.组织医务社会工作向健康社会工作转向的研究和论证。 3.强化健康社会工作的理论自觉学科建设，着手其学科体系建设。 4.以大健康人文为引领，强化医务——健康社会工作者的人文融合意识与理念。 5.加大支持力度，倡导人文视角的国际国内健康社会工作研究合作。主要创新点 1.理论方面的创新本研究从健康中国建设战略背景和大健康人文视角出发，系统论证医务工作发展到健康社会工作的合理性和必然性，深化了人文融合为特征的健康社会工作内涵和外延，探究了健康社会工作的发展趋势。 2.方法方面的创新 (1)计量分析和质性研究方法的相结合。研究突破了过去以定性分析、主观思辩为主的社会工作研究范式，通过对海量国内外健康社会工作学术文献数据的挖掘分析，构建学科科学知识图谱，结合对健康社会工作领域的专家、实务工作者的深入访谈，力求厘清健康社会工作学科知识结构、相互关系及其衍生与发展现状，把握健康社会工作学科发展规律。 (2)从人文视角探讨健康社会工作发展的路径和趋势。从大健康人文视角系统性的梳理健康社会工作的发展演进过程，探寻在健康社会工作本土化过程中的人文因素，并结合实际对人文取向下健康社会工作发展路径进行重构。研究不足与继续开展本研究的设想本研究存在一些不足：健康社会工作与“健康中国”国家战略对接的理论与实践方式研究不够；学科演进分析与评价工作的工具选择可以更丰富一些。继续开展本研究的设想： 1.完善学科分析与信息挖掘方法，采用一些新的分析工具，提升学科研究的质量。 2.从更加广阔的视野对国际国内的社会、经济、政治、文化环境进行深入分析；进一步深入研究健康社会工作与相关学科关系，把握信息化背景下的学科内部的“交叉”“渗透”的信息流。本研究得到“教育部人文社会科学研究青年基金项目：基于知识网络的社会工作学衍生与发展研究(批准号：19YJC840054)”和“山西省‘1331工程’标志性成果奖补项目(晋发科函[2019]43号文件)”的资助。收起

关键词 : 健康社会工作大健康人文融合分析

3. 共载双氢青蒿素和PI3K抑制剂的抗疟逐级靶向纳米递药系统的构建与评价

[学位论文] 王蓉蓉山西医科大学 2023年博士导师: 张淑秋共234页

摘要 : 目的：疟疾是由感染疟原虫的按蚊叮咬或者输入含有疟原虫的血液而导致的一种严重虫媒传染病。在治疗疟疾方面青蒿素类药物有独特的优势，是全球治疗疟疾的一线药物。但近年来青蒿素耐药性疟疾传播的地理范围日益扩大，耐药地区青蒿素类药物治疗... 展开目的：疟疾是由感染疟原虫的按蚊叮咬或者输入含有疟原虫的血液而导致的一种严重虫媒传染病。在治疗疟疾方面青蒿素类药物有独特的优势，是全球治疗疟疾的一线药物。但近年来青蒿素耐药性疟疾传播的地理范围日益扩大，耐药地区青蒿素类药物治疗失败率高达50％。在没有其他替代药物的情况下，青蒿素耐药威胁着全世界为消除疟疾做出的所有努力。基于以上背景，为了实现：①特异性抑制PI3K激酶，减少PI3P的生成，恢复疟原虫对ARTs的敏感性、保障ARTs活化起效;②利用感染红细胞膜和疟原虫膜上特有的代谢转运通道，将两种药物逐级靶向至疟原虫，增加两种药物在疟原虫内的富集，进一步增强ARTs效力。本研究首先通过计算机辅助设计和疟鼠体内的药效学评价，筛选出与PI3K蛋白亲和力高且具有较好抗疟效果的疟原虫PI3K抑制剂。利用药效学和相关脂质变化验证双氢青蒿素（DHA）联合PI3K抑制剂（idelalisib）协同逆转耐药的效果并对耐药相关机制进行初步评价。其次基于葡萄糖转运体、疟原虫还原微环境和疟原虫大分子转运通道，分别制备有无葡萄糖基、有无GSH响应（还原响应，二硫键）及不同粒径（～35 nm和～121nm）修饰的纳米微粒，初步评价这几种转运体（通道）对微粒靶向性和抗疟药效的影响。最后在前述研究的基础上，设计共载DHA和idelalisib的葡萄糖基修饰小粒径还原响应微粒（DHA+idelalisib共载逐级靶向递药微粒），期待微粒可通过大分子转运通道等选择性进入感染红细胞、再经疟原虫膜己糖转运体主动转运进入疟原虫、而后在疟原虫内实现还原响应释药、最后两药协同活化起效，为阐释ARTs耐药机制及治疗耐药性疟疾提供依据和新策略。方法： 1、疟原虫PI3K抑制剂的筛选及其与双氢青蒿素协同作用的评价为了找到对疟原虫PI3K有较强效果的抑制剂，本研究首先以恶性疟原虫PI3K同源模建得到的蛋白结构为基础，选择27种有人类三型PI3K抑制作用的化合物进行分子对接，以对接得分、结合能大小等为考察指标，初步筛选疟原虫PI3K抑制剂候选化合物。在此基础上，使用DHA和候选抑制剂的混合溶液对约氏BY265疟鼠进行治疗，以感染率、抑制率和治愈率等为考察指标，筛选药效最好的疟原虫PI3K抑制剂。为评价DHA和PI3K抑制剂的协同增敏和逆转耐药效果，将DHA和PI3K抑制剂（idelalisib）以不同比例混合后作用于BY265疟鼠、伯氏K173青蒿素敏感和K173青蒿素抗性疟鼠，对两药联用前后的抑制率、协同指数（CI)、半数抑制浓度（ED50）和耐药指数变化等进行考察。 2、DHA+idelalisib联用对疟原虫脂质代谢的影响为探究PI3K耐药和DHA+idelalisib联用对疟原虫脂质代谢的影响，以K173敏感疟鼠为对照，将生理盐水（Control）、DHA溶液、idelalisib溶液和DHA+idelalisib混合溶液注射至K173抗性疟鼠体内，连续给药4天，最后1次给药后提取疟原虫，对疟原虫脂质成分进行测定。分析 Control vs idelalisib、Control vs DHA、Control vs DHA+idelalisib、idelalisib vs DHA+idelalisib、DHA vs DHA+idelalisib 组的耐药相关脂质代谢差异，对PI3P含量、差异倍数大的脂质种类、及鞘脂和固醇的变化量进行不同差异分组间的比较，初步阐释两药联用逆转耐药的机制。结果： 1、疟原虫PI3K抑制剂的筛选及其与双氢青蒿素协同作用 (1)选择idelalisib作为疟原虫PI3K抑制剂以恶性疟原虫PI3K同源模建蛋白中的小分子配体为基础或SYBYL-X2.0软件自动识别构建两种对接口袋，与27种有PI3K抑制作用的化合物对接后使用分子动力学模拟验证对接结果，筛选出对接得分最高的5种候选抑制剂(copanlisib、idelalisib、taselisib、umbralisib、AZD6482)。将 5 种候选抑制剂与 DHA 等摩尔量混合后注射至约氏BY265疟鼠体内，停药1天小鼠尾尖取血涂片，DHA+idelalisib组(0.60±0.56)％和 DHA+taselisib 组(1.3±0.93)％的感染率相比 DHA 组(3.50±1.00)％显著降低;在接种32天内，DHA+idelalisib组转阴率最高，且仅DHA+idelalisib组有小鼠治愈，故选择idelalisib作为疟原虫PI3K抑制剂用于后续考察。 (2)DHA+idelalisib具有协同增敏、逆转耐药的作用将不同摩尔比的DHA和idelalisib混合溶液作用于BY265疟原虫感染的小鼠，停药一天，固定其中一种药物的浓度，感染率会随着另一种药物给药剂量的增加而减小，抑制率反之。不同剂量比的DHA+idelalisib组均表现出不同程度的协同抗疟效果，综合比较CI值和抑制率，idelalisib用量为60.2 μmol/kg/d时与DHA协同作用较佳，DHA+idelalisib 的剂量比(μmol/kg/d)为 1.1∶60.2、2.2∶60.2、4.4∶60.2、8.8∶60.2及17.6∶60.2时分别表现出强度、强度、高度、高度和中度的协同作用。在K173敏感疟鼠中，相比DHA溶液组，DHA+idelalisib联用后对疟原虫的抑制作用增强，两种药物联用达到中度和低度的协同增敏效果。在K173抗性疟鼠中，相比DHA溶液组，DHA+idelalisib联用表现出中、高度的协同作用，抑制率显著增加(P＜0.01)。且在K173抗性疟鼠中，DHA+idelalisib联用显著降低了 DHA的ED50,使得DHA抗性指数由13.82降低到2.75,降低了 5倍，达到较好的协同逆转耐药的作用。 2、DHA+idelalisib联用对疟原虫脂质代谢的影响 (1)DHA+idelalisib联用影响敏感株PI3K相关脂质的表达在K173敏感疟原虫中，与疟鼠对照Control组相比，单用DHA未对疟原虫中的PI3P表达产生明显影响;DHA联合使用idelalisib后，DHA+idelalisib组相比DHA组的PI3P表达明显下调(P=0.004,VIP=1.90)。以P＜0.05,VIP＞1为条件，筛选两组间的差异脂质。Control组和idelalisib溶液组相比，在差异倍数最大的10种上调或下调的脂质中，维生素D类脂质(LMST03020457)上调。这类脂质可通过抑制PI3K-AKT通路介导细胞凋亡，对疟原虫的生长有抑制作用。Control组和DHA溶液组差异倍数最大的10种上调或下调的差异脂质中除发现与idelalisib组相同的维生素D类脂质外还发现有细胞凋亡诱导作用的鞘脂Cer(d16∶1/17∶0)上调。Control组和DHA+idelalisib混合溶液组差异倍数最大的10种上调或下调的差异脂质中有7种和DHA组相同，除和单用DHA或单用idelalisib上调相同的维生素D类脂质及和DHA单用相同上调的Cer(d16∶1/17∶0)细胞凋亡诱导剂外，另1种维生素D类物质(LMST03020502)也被上调。 (2)DHA+idelalisib联用影响抗性株PI3K相关脂质的表达结论： 1、选择的PI3K抑制剂idelalisb在体外分子对接和体内抗疟药效学评价中都具有较好的表现。将DHA+idelalisb注射至敏感和耐药疟原虫感染的小鼠体内，显示出一致的协同作用;且在抗性疟鼠中，idelalisb将DHA的抗性指数从13.82降低至2.75,表明idelalisb一定程度上恢复了 DHA对抗性疟原虫的敏感性。通过分析两种药物治疗前后脂质表达的变化，与DHA组相比，DHA+idelalisb组的PI3P表达显著下调，充分验证了 idelalisb可以抑制疟原虫PI3K,减少PI3P的产生，增强或恢复DHA的抗疟敏感性。在抗性虫株中，idelalisb与DHA联用对疟原虫中囊泡相关脂质的表达也产生了明显的影响(在耐药疟原虫中囊泡过表达)，间接说明idelalisib具有恢复ARTs敏感性的作用。此外，维生素D类物质在idelalisb治疗后显著上调，推断idelalisb还可以通过抑制PI3K-AKT途径介导疟原虫凋亡。这些发现为阐明青蒿素耐药性机制和治疗耐药性疟疾提供了依据和新思路。 2、基于糖转运体、疟原虫还原微环境和大分子转运通道，分别设计了葡萄糖基靶向、还原响应和小粒径微粒;糖转运体或大分子转运通道的响应修饰均使得微粒具有了较好的靶向作用;还原响应二硫键的修饰对增加DHA导致的过氧化损伤产生了一定的辅助作用。将小粒径靶向、葡萄糖靶向和还原响应结合起来后，靶向至疟原虫感染红细胞的微粒含量进一步提高。在证实DHA+idelalisib对敏感和抗疟疟原虫有强效抑制作用的基础上，将DHA+idelalisib共载在葡萄糖靶向的小粒径还原响应微粒中，增加了两种药物在敏感和抗性疟原虫中的有效含量，达到了更好的抗疟疗效。为抗疟药递送系统的设计提供了新策略。收起

关键词 : 纳米递药系统双氢青蒿素 PI3K抑制剂抗疟疾疗效

4. 山西省因伤害住院儿童特征、疾病负担及其变化趋势研究

[学位论文] 王莉山西医科大学 2017年博士导师: 郑建中共217页

摘要 : 伤害不仅严重威胁着儿童青少年的身心健康，且造成严重的疾病负担，是全球关注的公共卫生问题。伤害发生后是否能够得到及时的救助是影响伤害结局的重要因素。目前国内外针对0～14岁因伤害住院儿童伤害特点、住院后诊疗情况、疾病负担及其相互之间关系... 展开伤害不仅严重威胁着儿童青少年的身心健康，且造成严重的疾病负担，是全球关注的公共卫生问题。伤害发生后是否能够得到及时的救助是影响伤害结局的重要因素。目前国内外针对0～14岁因伤害住院儿童伤害特点、住院后诊疗情况、疾病负担及其相互之间关系缺乏系统研究。本研究选择卫生服务研究的弱势群体之一儿童为关注对象，以山西省2008～2013年因伤害住院儿童作为切入点，围绕伤害发生、发展、转归及最终造成的疾病负担进行系统分析，并探讨儿童伤害发生及疾病负担变化趋势，为有针对性的开展预防干预、伤害应急处置的检伤分类以及儿童伤害的医疗资源配置提供依据。目的： 1.揭示因伤害住院儿童伤害流行特征及变化趋势。 2.了解因伤害住院儿童住院特点，并分析影响入院儿童伤害危重程度、发生并发症、手术与否及不良转归的危险因素。 3.探讨因伤害住院儿童疾病负担状况及其影响因素。方法：分别选取山西省大同市（北部）、太原市（中部）、运城市（南部）共7所有代表性的三级甲等医院2008年至2013年因伤害住院儿童作为研究对象。由经过统一培训的调查员回顾性查阅电子病历。设定年龄检索范围为0～14岁，以ICD10中损伤中毒外因编码（V01-Y98）为主检索码，同时设置出院主诊断码（S00-T98）为二级检索码进行病例检索。整群选取11177人次进行回顾性调查。调查内容包括： ①因伤害住院儿童一般情况：病案号、性别、年龄、出生日期、家庭住址、联系人、联系人电话； ②伤害流行病学特征：伤害类型、损伤部位、损伤性质、伤害发生原因、伤害发生地点； ③住院特征：入院时间（年份、月份），入院时危重程度（一般、紧急、危重）、入住科室、有无并发症、是否手术治疗、预后转归（治愈、好转、残疾、死亡、其他）。疾病负担指标包括：住院日，潜在减寿年数，伤残调整寿命年，住院费用，付费方式（城镇居民医保，新型农村合作医疗，商业保险，自费）。用Microsoft Excel2003建立数据库，导入SPSS13.0软件进行统计分析。统计描述：计数资料（构成比），计量资料（中位数）。统计推断：用χ2检验或秩和检验进行组间比较；采用Spearman’s等级相关分析不同指标的相关性；采用多重线性回归分析住院日的影响因素；二分类Logistic回归分析治疗方式、并发症影响因素；有序Logistic回归分析入院时危重程度、转归影响因素；动态数列分析因伤害住院儿童的人次数、住院日、住院费用变化趋势。通径分析（SAS9.2）因伤害住院儿童住院费用的影响因素。均以P<0.05为差异有统计学意义。结果：第一部分：因伤害住院儿童伤害流行特征及变化趋势 1.因伤害住院的11177人次中，男童占63.0%（7040人次），女童占37.0%（4137人次），男女比为1.70:1，性别比随年龄的增加而增高（1.32:1～2.60:1）；城市儿童占37.4%（4181人次），乡村儿童占62.6%（6996人次），城乡比为1:1.67。各年龄组中，以1～4岁组所占构成比最高46.7%（5219人次）。11177人次儿童的中位数年龄为3岁。 2.从2008年～2013年间，因伤害住院人次呈逐年上升趋势，年平均发展速度114.7%，平均增长速度为14.7%。随着年龄的增加女童因伤害住院人次平均增长速度（-12.24%）小于男童（-7.66%），乡村儿童（-10.28%）小于城市儿童（-7.38%）。 3.因非故意伤害住院儿童占98.72%（11034人次），前3顺位伤害类型分别是：跌伤（25.6%），交通伤害（18.9%），异物伤害（18.7%）。因故意伤害住院儿童占1.28%（143人次），其中自害（16.9%），加害（83.1%）。跌伤原因：跌倒（55.7%），跌落（44.3%）。发生交通伤害时步行（62.6%），乘坐机动车（31.0%），骑/乘非机动车辆（6.5%）。异物伤害中气管内异物（82.7%），食道异物（9.5%），消化道异物（胃、小肠）（2.2%）。 4.经χ2检验，因非故意伤害住院儿童各年龄组、性别、城乡之间主要伤害类型总体分布均不同（χ2分别为2119.741，90.799，107.471，P<0.001）。 5.250人因医源性非故意伤害住院1820人次。其中42.4%（106人）住院1次，57.6%（144人）住院2次以上，最大住院次数93次，平均7.92次；住院2次及以上者均为因同一医源性非故意伤害后多次住院治疗。 6.因伤害住院儿童主要损伤部位：头部（32.0%），胸部（18.9%），颈部（17.3%）。非故意伤害中发生头部损伤的3503人次中50.5%由跌伤造成，胸部损伤的2104人次中92.2%异物伤害造成，颈部损伤的1926人次中91.4%由医源性非故意伤害造成。经χ2检验，因伤害住院儿童伤害类型、非故意伤害与故意伤害、性别、城乡之间损伤部位总体分布均不同（χ2分别为17314.117，74.232，123.139，87.254，P<0.001）；经Spearman’s相关分析，头部损伤、腹部-下背部-腰-骨盆损伤、肩上臂损伤、肘前臂损伤、膝小腿损伤与年龄呈正相关(?s分别为0.125，0.127，0.138，0.134，0.146，P<0.01)；颈部损伤、胸部损伤与年龄呈负相关(?s分别为-0.328，-0.206， P<0.01)。 7.因伤害住院儿童主要损伤性质为器官损伤（24.2%），94.4%发生在头颈部；异物损伤（18.2%），96.8%发生在胸腹部；神经脊髓损伤（16.1%），98.8%发生在头颈部。非故意伤害中器官损伤55.7%由跌伤造成，异物损伤99.6%由异物伤害造成；神经-脊髓损伤98.2%由医源性非故意伤害造成。经χ2检验，因伤害住院儿童非故意伤害与故意伤害、性别、城乡之间损伤性质总体分布均不同（χ2分别为179.214，147.167，168.569，P<0.001)；经 Spearman’s相关分析，神经-脊髓损伤、异物损伤与年龄呈负相关(?s分别为-0.358，-0.219， P<0.01)，骨折与年龄呈正相关(?s=0.255，P<0.05)。 8.发生伤害的主要场所：家中占47.6%，街道/公路占26.9%，公共场所占18.1%，学校/幼儿园占7.4%。经χ2检验，因伤害住院儿童各年龄组之间、城乡、性别、非故意伤害与故意伤害之间发生伤害的主要场所总体分布不同（χ2分别为2272.817，44.816，59.646，509.032，P<0.001）。第二部分：因伤害住院儿童住院特征分析 1.因伤害住院11177人次中入院时情况一般的占38.0%（4246人次），情况紧急的占48.8%（5452人次），情况危重的占13.2%（1479人次）。经χ2检验，因伤害住院儿童各年龄组、城乡、性别之间入院情况总体分布均不同（χ2分别为970.322，50.066，23.231，P<0.001）。经χ2检验，因伤害住院儿童非故意与故意伤害之间入院情况总体分布不同。（χ2=30.288，P<0.001）。经Kruskal-Wallis检验，因伤害住院儿童不同损伤部位、不同损伤性质之间入院情况总体分布均不全相同（H分别为3255.702，3808.929， P<0.001）。年龄、乡村儿童、因交通伤害造成头部器官损伤（颅脑损伤）是儿童入院情况危重程度增加的危险因素。在控制其他自变量不变的情况下，年龄每增加一岁，因伤害住院儿童入院情况危重发生概率增加0.057倍；乡村儿童入院情况危重发生概率是城市儿童的1.300倍；交通伤害造成头颈部器官损伤是其它伤害造成多部位其他损伤的4.973倍。 2.11177人次中56.0%的儿童采用了手术治疗。经χ2检验，因伤害住院儿童年龄组、城乡、性别、有无并发症之间治疗方式总体分布均不同（χ2分别为840.390，141.735，21.671，6.830，P<0.001）。经χ2检验，非故意伤害各种类型、损伤部位、损伤性质之间治疗方式总体分布均不全相同（χ2分别为3968.257，3699.798，4971.473， P<0.001）。经Kruskal-Wallis H检验，因伤害住院儿童入院情况之间治疗方式总体分布不全相同（H=489.605，P<0.001）。有并发症、入院情况危重提示因伤害住院儿童采用手术治疗的可能性增加。在控制其他自变量不变的情况下，有并发症儿童采用手术治疗概率是无并发症儿童的1.362倍；入院情况危重儿童采用手术治疗概率是入院情况一般儿童的2.850倍。 3.有并发症的记录8430人次中，有并发症儿童占55.4%（4671人次），无并发症儿童占44.6%（3759人次）。因伤害住院儿童来自于城市、入院情况紧急、医源性非故意伤害造成的头颈部损伤、交通伤害所造成的器官损伤、发生在头部的器官损伤是并发症发生的危险因素。在其他自变量不变的情况下因伤害住院城市儿童发生并发症的概率是乡村儿童的1.126倍，入院情况紧急的儿童发生并发症的概率是入院情况一般的儿童的1.173倍，因医源性非故意伤害造成头颈部损伤发生并发症的概率是其它伤害造成多部位损伤儿童的5.837倍，因交通损伤造成器官损伤的儿童发生并发症的概率是因其它伤害造成其它损伤性质的2.297倍，发生头颈部器官损伤的儿童发生并发症的概率是多部位其它损伤的2.269倍。 4.因伤害住院的11177人次中，治愈60.9%，好转32.4%，残疾4.8%，死亡0.3%（29人）。非手术治疗、入院情况危重、医源性非故意伤害造成头颈部损伤、医源性非故意伤害造成多部位损伤、撞击伤造成胸腹部损伤、因异物伤害造成器官损伤、头颈部神经脊髓损伤是转归不良程度增加的危险因素。在控制其他自变量不变的情况下，非手术儿童转归不良程度增加的概率是手术儿童的1.411倍，入院情况危重儿童转归不良程度增加的概率是入院情况一般儿童的2.052倍，医源性非故意伤害造成头颈部损伤、医源性非故意伤害造成多部位损伤、撞击伤造成胸腹部损伤转归不良程度增加的概率分别是其它伤害造成多部位损伤的3.102倍、3.031倍、1.921倍，因异物伤害造成器官损伤表现为转归不良程度增加的概率是异物伤害造成其他损伤性质的5.286倍，头颈部神经脊髓损伤表现为转归不良程度增加的概率是发生头颈部其他损伤性质的45.513倍。第三部分：因伤害住院儿童疾病负担及变化趋势分析 1.11177人次中位住院天数7（4，11）天。经Wilcoxon秩和检验，因伤害住院儿童城乡、是否手术、有无并发症之间住院日总体分布均不同（Z分别为-7.971，-5.871，-3.483，P<0.001）；经Kruskal Wallis检验，因伤害住院儿童年龄组、伤害类型、损伤部位、损伤性质、入院情况、转归之间住院日总体分布均不全相同（H分别为468.167，3028.277，2469.297，3144.523，188.977，140.845，P<0.001）。乡村儿童、入院情况危重、手术治疗、伤害类型中的交通伤害、撞击伤害、医源性非故意伤害，损伤部位中头颈部损伤、胸腹部损伤、上肢损伤、下肢损伤，损伤性质中的骨折关节/肌肉损伤、器官损伤是影响住院日的危险因素（R2=0.358，校正R2=0.357，F=234.893，P<0.001）。 2.2008年至2013年儿童因伤害住院总天数呈增加趋势；平均住院日环比增长速度呈下降趋势。城市儿童因伤害平均住院日环比呈现下降趋势，年平均增长速度为-0.01%；农村儿童因伤害平均住院日环比呈现上升趋势，年平均增长速度为0.22%。 3.因伤害住院死亡所造成收起

关键词 : 儿童伤害流行特征变化趋势不良转归疾病负担

5. 喉鳞癌中Hsa-miR-145-5p及靶基因FSCN1调控紊乱的新机制及临床意义

[学位论文] 高伟山西医科大学 2013年博士导师: 王斌全共211页

摘要 : 【研究目的】 1.获得喉鳞癌中差异性microRNA表达谱，从中挑选预研究的靶标分子； 2.结合喉鳞癌临床病理参数评价Hsa-miR-145-5p及其靶基因FSCN1的临床意义，探讨它们与喉鳞癌预后的关系； 3.验证Hsa-miR-145-5p及其靶基因FSCN1的调控... 展开【研究目的】 1.获得喉鳞癌中差异性microRNA表达谱，从中挑选预研究的靶标分子； 2.结合喉鳞癌临床病理参数评价Hsa-miR-145-5p及其靶基因FSCN1的临床意义，探讨它们与喉鳞癌预后的关系； 3.验证Hsa-miR-145-5p及其靶基因FSCN1的调控关系，并明确他们在喉鳞癌细胞系Hep-2及TU-177中的体外、体内生物学功能； 4.初步明确两者在喉鳞癌中调控紊乱的分子生物学机制。【研究方法】 1.利用基因芯片技术获得喉鳞癌中差异性microRNA的表达谱； 2.通过生物信息学预测并结合文献，定位与喉鳞癌侵袭转移相关的microRNA及其靶基因； 3.利用qRT-PCR、Westernblot及免疫组化技术回顾性研究它们与喉鳞癌患者临床病理参数及预后的关系； 4.利用双荧光报告载体验证他们之前的靶向调控关系； 5.利用基因转染技术，通过loss-of-function及gain-of-function体外观察他们对喉鳞癌细胞恶性表型的影响，通过裸鼠移植瘤模型观察抑制肿瘤效果； 6.通过荧光共聚焦技术、电镜技术观察他们对喉鳞癌细胞骨架形成及细胞生物学结构的影响； 7.利用生物信息学技术预测Hsa-miR-145-5p甲基化位点，结合甲基化测序进行定量验证； 8.体外校正Hsa-miR-145-5p-FSCN1轴后，检测EMT关键分子的变化水平；数据全部录入SPSS21.0。率的比较用卡方检验，计量资料用t检验或方差检验，强度用秩和检验，生存分析用KM法及Cox模型。P<0.05认为差异有统计学意义。【研究结果】 1.基因芯片筛查发现Hsa-miR-145-5p是喉鳞癌中显著下调的差异性microRNA之一； 2.经生物信息学预测，同时利用双荧光报告载体验证了FSCN1是Hsa-miR-145-5p的直接靶基因；Hsa-miR-145-5p发挥对FSCN1转录后的调控作用； 3.miR-145-5p（抑癌基因）在喉鳞癌组织中存在显著异常低表达，而其靶基因FSCN1（癌基因）则存在显著异常高表达；miR-145-5p与喉鳞癌患者T分期、颈淋巴结转移、临床分期、分化程度呈负相关，而FSCN1与喉鳞癌患者T分期、颈淋巴结转移、临床分期、分化程度呈正相关（P<0.05）； 4.miR-145-5p低表达及FSCN1蛋白高表达提示喉鳞癌患者预后不良。其中FSCN1是喉鳞癌患者预后不良的单独影响因素；特别是同时伴有miR-145-5p低表达且FSCN1蛋白高表达这一分子特征是患者预后不良的独立风险因子。 5.体外实验证实恢复miR-145-5p的表达或敲减FSCN1的表达，则可抑制喉鳞癌细胞增殖、平板克隆、迁移及侵袭的恶性表型，同时可将喉鳞癌细胞阻滞在G0/G1期，并促进其凋亡；化学修饰的miR-145-5p及si-FSCN1药物具有体内抑制肿瘤生长的效果； 6.miR-145-5p启动子高甲基化引发其转录障碍，导致靶基因FSCN1调控紊乱，并在肿瘤细胞恶性间质转化（EMT）中发挥重要生物学效应。【研究结论】 1.喉鳞癌中存在显著差异性microRNA表达谱。miR-145-5p在喉鳞癌中显著下调，扮演抑癌基因角色，而其靶基因FSCN1扮演癌基因角色。同时伴有miR-145-5p低表达且FSCN1高表达的个体预后不良，且这一分子特征是喉鳞癌患者预后的独立危险因素。 2.miR-145-5p启动子高甲基化导致其功能失调，促进喉鳞癌细胞增殖、侵袭转移、间质转化等恶性表型，这一生物学效应是通过其靶基因FSCN1异常上调所介导。 3.本研究以microRNA这一新视角，明确了miR-145-5p及靶基因FSCN1调控紊乱是喉癌中的重要分子事件。也为以microRNA为靶点对喉鳞癌行分子靶向治疗提供新思路及理论依据。收起

关键词 : 喉鳞癌 Hsa-miR-145-5p基因靶基因FSCN1 调控机制

6. 藏羚羊粪便和高原鼠兔肠内容物可培养菌群结构与新种发现

[学位论文] 李俊琴山西医科大学 2020年博士导师: 徐建国共207页

摘要 : 目的：藏羚羊和高原鼠兔是青藏高原的特有动物，生活在寒冷、低氧和高海拔地区，携带的微生物多是未知的。本课题旨在系统分析藏羚羊粪便和鼠兔肠内容物的可培养菌群，分离疑似新种，发现新的细菌，并探讨其可能的生物学意义。方法： ... 展开目的：藏羚羊和高原鼠兔是青藏高原的特有动物，生活在寒冷、低氧和高海拔地区，携带的微生物多是未知的。本课题旨在系统分析藏羚羊粪便和鼠兔肠内容物的可培养菌群，分离疑似新种，发现新的细菌，并探讨其可能的生物学意义。方法： 1.在28℃和37℃两种温度下，普通和5%CO2气体环境下，采用脑心浸液含羊血培养基、TSA培养基、NA培养基等，根据菌落形态的多样性进行可培养菌群的分离培养与纯化。提取细菌分离株的基因组核酸，PCR扩增和Sanger测序获得16SrRNA基因序列。通过GenBank和EzTaxon数据库在线比对获得16SrRNA基因序列与已知菌种的相似性，完成菌株的初步鉴定。 2.对鉴定结果为疑似新种的菌株，采用革兰氏染色、透射电镜、孔雀蓝染色、动力实验等进行细菌基本特征检测，基于16SrRNA和基因组序列进行系统进化树分析，采用糖发酵、酶活性、药敏实验等检测菌株的生理生化特征，采用反相高压液相色谱法、二维薄层色谱法、HITACHIL-8900高速氨基酸分析仪等检测菌株的菌体成分，采用基因注释和基因组杂交完成基因组分析。综合分析菌株表型、基因型和生化特征，确定菌株的分类学位置，并完成新种的命名和模式菌株的保藏工作。对分离的已知菌，进行多样性和医学意义分析。结果： 1.本课题采用2种相同的培养条件，从鼠兔肠内容物成功鉴定到525株菌，隶属于3个细菌门、6个细菌纲、12个细菌目、20个细菌科、23个属、52个种；从藏羚羊粪便中，成功鉴定到734株菌，隶属于3个细菌门、4个细菌纲、9个细菌目、20个细菌科、28个属、73个种。采用22种培养条件，从青藏高原藏羚羊粪便中成功鉴定1977株菌，分布于4个细菌门、7个细菌纲、15个细菌目、30个细菌科、44个属、123个种。报道从临床患者中分离到的条件致病菌有23个种，包括中华不动杆菌、约翰逊放线菌、圆形芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、摩加夫芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、沙福芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、产气荚膜梭状芽胞杆菌、脂黄素棒杆菌、海迪茨氏菌、Dietzianatronolimnaea、杜兰肠球菌、粪肠球菌、孟氏肠球菌、鹑鸡肠球菌、玫瑰考克氏菌、骚动厄氏菌、栖稻假单胞菌、科尼葡萄球菌、马胃葡萄球菌、华氏葡萄球菌、人葡萄球菌新霉素败血症亚种。从藏羚羊粪便中分离获得的优势种为柠檬节杆菌、木聚糖芽孢杆菌、屎肠球菌。 2.从藏羚羊粪便中分离鉴定细菌新种7个，分别为菌株449T、194T、2129T、2251T、2183T、2184T、592T。经鉴定：(1)菌株449T为栖霉菌属的新种，命名为朱既明栖霉菌(Mycetocola zhujimingii)，是一种以anteiso-C15:0为主要脂肪酸，以MK-10和MK-11为主要呼吸醌，以二磷脂酰甘油和磷脂酰甘油为主要极性脂，以赖氨酸为诊断性氨基酸，与M.zhadangensis进化关系较近；(2)菌株194T为盐地杆菌属的新种，命名为洪涛盐地杆菌(Salinibacterium hongtaonis)，对NaCl呈高耐受性，以anteiso-C15:0和anteiso-C17:0为主要脂肪酸，以赖氨酸、丙氨酸、甘氨酸和谷氨酸为细胞壁主要氨基酸，以MK-11和MK-10为主要呼吸醌,以二磷脂酰甘油和磷脂酰甘油为主要极性脂，不能发酵D-甘露糖，且萘酚-AS-BI-磷酸水解酶活性阴性；(3)菌株2129T命名为李兰娟放线菌(Actinomyces lilanjuaniae)，以C18:1ω9c和C16:0为主要脂肪酸，以二磷脂酰甘油、糖脂、磷脂酰肌醇、磷脂酰肌醇甘露糖苷和磷酸糖脂为主要极性脂，可以发酵D-己糖醇和D-木糖，但是不能发酵D-甘露糖和D-蜜二糖、酯酶(C4)和脯氨酸芳酰胺酶活性阴性，与A.dentalis和A.slackii进化关系较近；(4)菌株2251T命名为廖万清副球菌(Paracoccus liaowanqingii)，以C18:1ω7c为主要脂肪酸，以泛醌10为主要呼吸醌，以磷脂酰乙醇胺、二磷脂酰甘油、磷脂酰甘油、磷脂、糖脂为主要极性脂，以meso-2,6-二氨基庚二酸、丙氨酸和谷氨酸为细胞壁肽聚糖氨基酸，分类学地位与P.gahaiensis进化关系较近；(5)菌株2183T和2184T分别命名为俞东征棒杆菌(Corynebacterium yudongzhengii)和梁国栋棒杆菌(Corynebacterium liangguodongii)，是两个硝酸盐还原反应阴性、α-胰凝乳蛋白酶和过氧化氢酶活性阳性、D-果糖和5-钾酮葡萄糖酸酵解阳性、D-乳糖酵解阴性的菌种，两株菌均以二磷脂酰甘油、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇和磷脂酰肌醇甘露糖苷为主要极性脂，以MK-8(H2)和MK-9(H2)为主要呼吸醌，肽聚糖中含有meso-2,6-二氨基庚二酸。进化关系上，俞东征棒杆菌与C.doosanense和C.tapiri近，梁国栋棒杆菌与C.lipophiloflavum和C.mycetoides近；(6)菌株592T命名为陈薇气微菌(Aeromicrobium chenweiae)，菌株可以发酵L-鼠李糖、D-木糖和D-纤维二糖，但无法还原硝酸盐，主要脂肪酸为C18:1ω9c和C18:010-methyl，主要极性脂为二磷脂酰甘油、磷脂酰甘油和磷脂酰肌醇，主要呼吸醌为MK-9(H4)和MK-8(H4)，且细胞壁肽聚糖含有LL-二氨基庚二酸。 3.从高原鼠兔肠内容物中分离鉴定细菌新种2个，分别为MF30-AT和MF47T。经鉴定：(1)菌株MF-30AT命名为巴德年壤霉菌(Agromyces badenianii)，为需氧、革兰氏阳性菌，菌株在28℃、有氧、pH7.0的TSA培养基上生长最佳，不能发酵熊果苷、D-果糖、D-蔗糖、糖原、水杨素和淀粉，β-葡萄糖苷酶活性为阴性；(2 )菌株MF-30AT与陈薇气微菌不属于同一个种，被命名为严杰气微菌(Aeromicrobium yanjiei)，菌株可以发酵L-鼠李糖、D-木糖和D-纤维二糖，但无法还原硝酸盐，主要脂肪酸为C18:1ω9c和C18:010-methyl，主要极性脂为二磷脂酰甘油、磷脂酰甘油和磷脂酰肌醇，主要呼吸醌为MK-9(H4)和MK-8(H4)，且细胞壁肽聚糖含有LL-二氨基庚二酸。结论： 1.采用2种相同的培养条件，从鼠兔肠内容物成功鉴定到525株菌，隶属于3个细菌门、6个细菌纲、12个细菌目、20个细菌科、23个属、52个种；从藏羚羊粪便中，成功鉴定到734株菌，隶属于3个细菌门、4个细菌纲、9个细菌目、20个细菌科、28个属、73个种。采用22种培养条件，从藏羚羊粪便中成功分离到1977株菌，鉴定为4个门、7个纲、15个目、30个科、44个属和123个种，报道从临床患者样本中分离到的细菌种有23个。 2我们发现和命名了九个细菌新种，分别是朱既明栖霉菌(Mycetocola zhujimingii)、洪涛盐地杆菌(Salinibacterium hongtaonis)、李兰娟放线菌(Actinomyces lilanjuaniae)、廖万清副球菌(Paracoccus liaowanqingii)、巴德年壤霉菌(Agromyces badenianii )、俞东征棒杆菌(Corynebacterium yudongzhengii)、梁国栋棒杆菌(Corynebacterium liangguodongii)、陈薇气微菌(Aeromicrobium chenweiae)和严杰气微菌(Aeromicrobium yanjiei)。已经发表新种5个，正在投稿新种4个。收起

关键词 : 细菌藏羚羊鼠兔菌群结构菌株鉴定

7. 加味不忘散对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆的影响及其抗炎机制的研究

[学位论文] 刘晓蕾山西医科大学 2018年博士导师: 李新毅共203页

摘要 : 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)，是一种常见的神经系统退行性疾病，以进行性记忆力减退、认识功能障碍、执行能力障碍、失语、失用、视空间障碍以及精神行为异常为主要临床特征。随着世界人口老龄化程度的不断加剧，AD的发病率逐年升高，在... 展开阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)，是一种常见的神经系统退行性疾病，以进行性记忆力减退、认识功能障碍、执行能力障碍、失语、失用、视空间障碍以及精神行为异常为主要临床特征。随着世界人口老龄化程度的不断加剧，AD的发病率逐年升高，在老年人群中 AD 已成为继心脑血管疾病和恶性肿瘤之后的第 4 位致死原因，给社会和家庭带来了沉重的负担。AD的发病机制复杂，至今尚未明确，目前存在的假说包括β淀粉样蛋白毒性学说、Tau蛋白代谢异常学说、基因突变学说、胆碱能缺乏学说、兴奋性氨基酸毒性学说、神经炎症学说、钙超载学说、代谢综合征学说等。因其发病机制复杂，AD仍缺乏有效的治疗手段。目前经FDA批准用于治疗AD的药物只有多奈哌齐和美金刚，然而这两种药物只能改变神经递质水平，不能改变AD的病理过程、阻止AD的病情进展，因此对AD的治疗仍是世界范围内医学研究者所面临的挑战之一。研究证实AD患者脑内小胶质细胞在Aβ刺激下激活，被长期、慢性活化，进而合成和释放大量炎症介质，最终造成神经元的损伤和丢失。存在于小胶质细胞中的NF-κB 作为多效性的核转录因子，能够调控多种炎症因子的信号转导，其中一条重要的炎症信号通路就是NF-κB-NLRP3炎症体-caspase-1-IL-1β。NF-κB被激活后转移到细胞核内，一方面诱导IL-1β基因表达，产生大量无活性的IL-1β前体(pro-IL-1β)，另一方面诱导NLRP3表达。NLRP3在外界损伤刺激下，募集接头蛋白ASC和效应蛋白 caspase-1 组成 NLRP3 炎症体，后者会将 pro-IL-1β 剪切为有强烈促炎活性的 IL-1β，进而诱导其他炎症因子、趋化因子等的合成，导致脑内的炎症级联反应。目前已有多项研究证实，抑制 NLRP3 炎症体可以减少 Aβ 的沉积，改善认知功能。因此， NLRP3炎症小体成为了目前AD防治研究领域的热点。临床流行病研究显示，长期服用非甾体抗炎药物(nonsteroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDs)的患者AD的发病率明显减低。这一现象提示我们：以调控神经炎症为靶点来治疗 AD，可能会获得良好的治疗效果。然而，目前已开展的针对 NSAIDs治疗AD的数项临床试验大多因药物的胃肠道副作用而中止，从而限制了抗炎疗法在AD治疗领域中的探索性研究。中医药是中华民族的伟大瑰宝之一，以其低毒、调节全身机体功能的整体观，以及多靶点、多环节的作用特点，在众多疾病的防治中起到了良好的效果。基于对痴呆的中医病机的理解和阅读经典中医古籍，结合前期的研究成果，我们在古代经方“不忘散”基础上，根据单味中药之间的有机配伍和协同作用，构建了由远志、石菖蒲、人参、茯苓、茯神、当归、白术和黄连组成的“加味不忘散”。该组方更加合理全面，既扶正又祛邪，切中、兼顾了AD的主要病机。目前已应用于临床，收到了较好的效果。在前期研究基础上，本研究以神经免疫炎症学说为根据，以信号转导通路途径为切入点，从体内实验和体外实验两个层次，验证加味不忘散治疗AD的有效性，并进一步观察该组方对AD神经炎症的影响。第一部分加味不忘散对AD模型大鼠学习记忆功能及海马组织结构的影响目的： 1. 观察加味不忘散对AD模型大鼠学习记忆功能影响； 2. 观察加味不忘散对AD模型大鼠海马组织结构和神经元凋亡的影响。方法： 1. 将SD大鼠分为假手术组、AD模型组、加味不忘散低剂量干预组、加味不忘散中剂量干预组、加味不忘散高剂量干预组和MCC950干预组； 2. 通过脑立体定位技术向双侧海马注射Aβ1-42制备AD大鼠模型； 3. 运用Morris水迷宫试验评估大鼠学习记忆功能； 4. 大脑切片进行HE染色，在光镜下观察大鼠海马的组织结构； 5. 利用透射电镜观察海马超微结构变化，并计数突触数量进行比较； 6. 运用TUNEL染色法观察海马神经元凋亡情况。结果： 1. 加味不忘散对AD模型大鼠学习记忆试验的影响：假手术组大鼠第1天到第5天的逃避潜伏期分别为 69.79±13.54 s、52.16±3.87 s、34.75±17.10 s、19.71±5.39 s、10.57±3.85 s。AD 模型组大鼠第 1 天到第 5 天的逃避潜伏期分别为 79.21±16.37s、74.46±5.58 s、65.00±8.62 s、41.82±8.87 s、28.96±6.73 s，与假手术组相比，在第2-5天的逃避潜伏期均明显延长(p<0.01)。加味不忘散低剂量干预组大鼠第1天到第5天的逃避潜伏期分别为77.96±13.83 s、75.78±7.92 s、62.91±7.99 s、38.82±10.93 s、25.75±6.77 s，与AD模型组相比无显著差异(p > 0.05)。加味不忘散中剂量干预组大鼠第1天到第5天的逃避潜伏期分别为76.21±12.80 s、64.28±8.37 s、50.87±8.61 s、30.82±5.33 s、19.82±2.68 s，第2-5天的逃避潜伏期较AD模型组和加味不忘散低剂量干预组明显缩短(p < 0.05)。加味不忘散高剂量干预组大鼠第 1 天到第 5 天的逃避潜伏期分别为70.42±14.08 s、54.74±10.40 s、38.07±8.31 s、22.59±5.42 s、14.39±3.51 s，第2-5天的逃避潜伏期较AD模型组和加味不忘散低剂量干预组明显缩短(p<0.01)，较加味不忘散中剂量干预组也缩短(p<0.01)。MCC950干预组大鼠第1天到第5天的逃避潜伏期分别为71.65±16.03 s、54.51±10.01 s、39.36±7.14 s、22.24±5.11 s、13.93±3.68 s，第2-5天的逃避潜伏期较AD模型组和加味不忘散低剂量干预组明显缩短(p<0.01)，较加味不忘散中剂量干预组也缩短(p<0.01)，与加味不忘散高剂量干预组相比无显著差异（p值分别为0.938、0.815、0.928、0.857）。 2. 加味不忘散对AD模型大鼠空间探索能力的影响：假手术组、AD模型组、加味不忘散低、中、高剂量干预组和MCC950干预组大鼠的原平台象限停留时间分别为41.14±4.22 s、23.28±8.34 s、24.57±7.33 s、31.71±6.97 s、39.43±5.44 s、39.15±4.06 s。其中AD模型组大鼠的原平台象限停留时间明显短于假手术组(p < 0.001)，加味不忘散低剂量干预组大鼠的原平台象限停留时间也明显短于假手术组(p < 0.001)，与 AD模型组无明显差异(p=0.703)。加味不忘散中剂量组大鼠的原平台象限停留时间较AD模型组(p=0.016)和加味不忘散低剂量干预组(p=0.040)均有所延长。加味不忘散高剂量组大鼠的原平台象限停留时间较AD模型组(p < 0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p=0.027)均延长。MCC950干预组大鼠的原平台象限停留时间较AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p = 0.033)均延长，与加味不忘散高剂量组相比无统计学差异(p=0.933)。假手术组、AD模型组、加味不忘散低、中、高剂量干预组和MCC950干预组大鼠的跨台次数分别为 12.71±2.63、5.29±1.38、7.43±1.62、9.71±1.50、12.14±2.41、12.29±3.39。其中AD模型组大鼠的跨台次数明显少于假手术组(p<0.001)，加味不忘散低剂量干预组大鼠的跨台次数也明显少于假手术组(p < 0.001)，与AD模型组无明显差异(p=0.056)。加味不忘散中剂量组大鼠的跨台次数较AD模型组(p<0.001)和加味不忘散低剂量干预组(p=0.042)均增多。加味不忘散高剂量组大鼠的跨台次数较AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p=0.031)均增多。MCC950干预组大鼠的跨台次数较AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p=0.023)均显著增多，与加味不忘散高剂量组相比无统计学差异(p=0.895)。 3. 加味不忘散对AD模型大鼠海马组织结构的影响：HE染色显示，AD模型组和加味不忘散低剂量组海马神经元数量明显减少，细胞体积缩小，核固缩，排列紊乱；加味不忘散中、高剂量干预组和 MCC950 大鼠海马神经元数量明显增多、排列变整齐、异常细胞减少。 4. 加味不忘散对AD模型大鼠海马超微结构的影响：通过透射电镜观察到，AD模型组大鼠海马大量神经元变性、坏死，核固缩，线粒体肿胀明显。与AD模型组相比，随着加味不忘散干预剂量的增加，大鼠海马神经元形态逐渐变完整，变性或坏死的神经元逐渐减少，细胞浆内细胞器数量逐渐增多、形态逐渐转为正常。 5. 加味不忘散对 AD 模型大鼠海马突触结构和数量的影响：通过透射电镜观察海马突触结构发现，AD模型组大鼠海马内的突触结构被破坏，突触结构不完整，突触间隙增大，突触后膜内的致密物质变薄。与AD模型组相比，随着加味不忘散干预剂量的增加，海马内突触结构逐渐由不完整变完整，突触间隙由大变小，突触后膜内的致密物也由少变多。假手术组、AD模型组、加味不忘散低、中、高剂量干预组和MCC950干预组大鼠海马的突触数量分别为27.31±6.99、10.76±3.19、13.64±3.53、19.61±3.69、25.77±7.21、24.93±5.97。其中AD模型组大鼠海马的突触数量较假手术组明显减少(p<0.001)，加味不忘散低剂量干预组大鼠海马的突触数量也明显少于假手术组(p < 0.001)，与 AD模型组无明显差异(p = 0.248)。加味不忘散中剂量组大鼠海马的突触数量较AD模型组(p=0.001)和加味不忘散低剂量干预组(p=0.015)均增多。加味不忘散高剂量组大鼠海马的突触数量较AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p = 0.013)均增多。MCC950 干预组大鼠海马的突触数量较 AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p=0.031)均显著增多，与加味不忘散高剂量组相比无统计学差异(p=0.709)。可见，加味不忘散对AD模型大鼠突触结构和数量具有改善作用，并具有剂量依赖性。 6. 加味不忘散对AD模型大鼠海马神经元凋亡的影响：TUNEL染色显示，假手术组、AD模型组、加味不忘散低、中、高剂量干预组和MCC950干预组大鼠海马的细胞凋亡率分别为 5.50±2.13 %、38.06±12.87 %、31.33±11.57 %、22.71±7.55 %、16.43±4.25%、14.38±5.28%。AD模型组可见到大量凋亡细胞，与假手术组相比明显增多(p < 0.001)。加味不忘散低剂量干预组大鼠海马内也可见到大量凋亡细胞与 AD模型组无明显差异(p=0.623)。加味不忘散中剂量干预组大鼠海马凋亡细胞，较AD模型组明显减少(p < 0.001)，较加味不忘散低剂量干预组有减少趋势，但无显著性差异(p = 0.058)。加味不忘散高剂量干预组大鼠海马的凋亡细胞明显少于较AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和中剂量干预组 (p=0.16)。MCC950干预组大鼠海马的凋亡细胞数较AD模型组明显减少(p < 0.001)，与加味不忘散高剂量干预组相比无显著差异(p= 收起

关键词 : 加味不忘散阿尔茨海默病小胶质细胞学习记忆抗炎机制

8. 生物医学领域科研合作现状及预测研究——以心血管病、肿瘤和健康管理研究领域为例

[学位论文] 于琦山西医科大学 2014年博士导师: 段志光共200页

摘要 : 目的：本研究旨在采用理论联系实际、定性和定量相结合的方法，将知识网络背景下的科学计量学理论应用于生物医学研究评价，系统梳理传统的科研合作理论体系，并试图开辟科研合作理论的新领域，即科研合作关系预测研究，最后通过实证研究进一步证实。... 展开目的：本研究旨在采用理论联系实际、定性和定量相结合的方法，将知识网络背景下的科学计量学理论应用于生物医学研究评价，系统梳理传统的科研合作理论体系，并试图开辟科研合作理论的新领域，即科研合作关系预测研究，最后通过实证研究进一步证实。力求使各级科研管理工作者和科研人员更好地理解国家科研创新体系，认识科研合作的重要性和必要性，为我国科研管理决策提供参考依据。对象：本研究选取死亡原因第一位的心血管病研究领域、总体死亡率居高不下的肿瘤研究领域以及作为现代医学五大创新体系之一的健康管理研究领域作为研究对象。数据来源： 1.心血管病研究领域数据国内数据:选取《中文核心期刊要目总览》（2008版）涵盖的心血管病研究领域全部5种核心期刊，从中国知网和重庆维普数据库获取2000-2010年期间上述期刊发表所有论文的题录信息。国际数据:a、从Web of Science(WoS)的Science Citation Index-expanded(SCI-E)中获取1981-2010年期间所有主题词为“coronary”的文献的题录信息;b、选取期刊引证报告“Cardiac& Cardiovascular System”学科中影响因子大于10的4种期刊，从SCI-E中获取2001-2010年上述期刊发表所有论文的题录信息。 2.肿瘤研究领域数据国内数据:选取中国科学引文数据库涵盖的肿瘤研究领域的全部10种核心期刊，从中国知网和重庆维普数据库获取2000-2009年上述期刊发表所有论文的题录信息。国际数据:选取期刊引证报告中“Oncology”学科内影响因子和被引频次均处前10％的30种期刊，从WoS中的SCI-E、CPCI-SSH数据库和生物医学领域PubMed数据库获取2001-2010年上述期刊发表所有论文的题录信息。 3.健康管理研究领域数据国内数据:从万方数据知识服务平台、维普网以及《中华健康管理学杂志》纸质及光盘版，获取2007-2012年期间《中华健康管理学杂志》发表的所有论文的题录信息。国际数据:从WoS中获取1999-2011年期间主题为“health management”的所有论文的题录信息。方法： 1.文献分析法通过纸质文献和电子期刊文献检索已发表的相关文献，获取原始资料并进行相关分析。 2.科学计量学方法利用合著分析研究生物医学领域合作现象，利用共词分析分析领域研究热点。 3.社会网络分析使用Pajek、Ucinet和CiteSpaceⅡ等社会网络分析软件实现Component分析、Centrality分析、K-core分析和M-slice分析、Clique分析等，并绘制网络图。 4.统计方法主要包括曼-惠特尼U检验、Logistic回归、序次Logistic回归分析、聚类分析和多维尺度分析。 5.机器学习利用LPmade软件计算合著网络中作者对之间的拓扑特征，运用WEKA软件实现监督式机器学习Logstic Regression(LR)模型和Support Vector Machine(SVM)模型。 6.计算机编程和数据库利用Java和Python编程语言实现原始数据向矩阵数据的转换、各项指标的计算，利用MySQL数据库管理原始数据。 7.实证研究方法采用理论研究与实证研究相结合的方法，分析生物医学领域科研合作情况。结果： 1.生物医学领域科研合作现状分析 (1)心血管病研究领域国内:2000-2010年期间，我国心血管病研究领域的合著率和篇平均作者数总体上呈增长趋势;科研合作研究的区域分布极不平衡;在该领域的合著网络中，三种中心度排名均在前1％的作者共87位、机构共5所;10-core及以下合著网络中的作者占总数的92.8％;3-slice以下的合著网络中的作者占总数的90.93％; M-slice分析发现了63个合作密切的科研团队;冠状动脉疾病、心肌梗死等为合作研究的热点。国际:1981-2010年期间，国际冠心病研究领域作者、机构和国家层面的科研合作都处于增长趋势;从作者合作网络、机构合作网络和国家合作网络中分别发现了3000名合作最为密切的作者、572个合作最为密切的机构以及52个合作最为密切的国家;合作最为密切的作者形成了766个Clique，合作最为密切的机构形成了308个Clique;西方国家之间的合作最为密切，并处于国际合作网络的核心，而东方国家/区域则处于网络的边缘位置;国家经济发展水平影响着国际合作行为。 (2)肿瘤研究领域国内:2000-2009年期间，我国肿瘤研究领域的科研合作主要集中于北京、上海、广东等东部地区;作者的三种中心度排名与其生产能力成正比;合著网络的最大Component包含的作者占总数的58.10％;8-core及以下合著网络中的作者占总数的90％;3-slice及以下的合著网络中的作者占总数的92.25％;11-slice及以上的合著网络包含480位作者（约占全部作者人数的1％）;通过聚类分析发现了该领域12个合作密切的科研团队;通过多维尺度分析发现了该领域6个合作密切的科研团队。国外:2001-2010年期间，国际肿瘤研究领域最具代表性的作者合著网络形成36个较为密集的凝聚子群;产量最高的作者为Nakamura Y，发表论文117篇;最大的学术共同体由8位作者组成，主要来自哈佛大学医学院Dana Farber癌症研究所和波士顿中心的杰罗姆·理柏多发性骨髓瘤研究中心，第二大聚类由5位作者组成，大都来自皮奥里亚大学、伊利诺伊大学医学院神经外科部，第三大聚类由4位作者组成，来自美国德州大学MD安德森癌症中心;36个大型合作网络群体的研究主要集中在多发性骨髓瘤、血管生成和急性淋巴细胞白血病等前沿领域。 (3)健康管理研究领域国内:2007-2012年期间，《中华健康管理学杂志》期刊中共有1933位作者和625所机构参与了657篇论文的创作工作，平均约每3位作者发表1篇论文;发文量不小于4篇或中心度大于0的作者共有54位，其中学者黄建始、武留信和曾强的发文量及中心度都位于前列，并与白书忠、田京发、韩静等学者形成了影响力较为广泛的合作区域网络，王培玉、杜兵等学者也组成了各自的合作团队;发文量较高的作者多集中于解放军空军航空医学研究所、北京大学医学部、北京市体检中心、中国医学科学院等机构。国际:1999-2011年期间，国际健康管理领域的研究无论在科研产量，还是在作者、机构和国家层面的科研合作程度都呈上升趋势;通过中心度指标遴选出以O'Toole T1为代表的17名高影响力作者和以明尼苏达大学为代表的37所高影响力研究机构;通过Component分析在作者合著网络中发现了22个具有固定合作关系的科研团队，从机构合著网络中发现了8个具有固定合作关系的机构合作团队;美国、英国、澳大利亚等国处于国际研究合作的中心位置;高频关键词中的Care、Disease、System和Model均与健康管理研究密切相关。 2.生物医学领域科研绩效与国际合作关系研究科研人员科研绩效与国际合作的关系:心血管病研究领域国际合作论文的被引频次最高，机构间合作论文的被引频次次之，机构内合作论文的被引频次最低;科研人员的科研产量和质量在决定其国际合作度时具有正作用;科研人员的国际合作率与其科研产量和质量之间也存在正依赖性。国家科研绩效与国际合作关系:国际冠心病研究领域中，高产国家为美国、日本、德国和英国等;高影响力国家为美国、英国和德国等;而国际合作程度最高的国家为匈牙利、瑞士、丹麦、奥地利、芬兰和挪威等。 3.生物医学领域科研合作关系预测研究国际冠心病研究领域科研合作预测结果显示，LR模型和SVM模型在四个准确度指标上的得分都很高，其中SVM模型在Precision率、Recall率和AUC三个指标上优于LR模型;两个模型对于产量高的作者集预测结果的准确性较高，而对于产量低的作者集预测结果的准确性较低;通过选取的最优特征值对上述两个模型检验发现，二模型的测试结果均有一定的提高，且SVM模型优于LR模型;各个拓扑特征单独预测的测试结果低于综合各个拓扑特征测试的结果。结论： 1.生物医学领域的科研合作分布不均衡虽然我国心血管病研究领域中科研人员的合作趋势、国际冠心病研究领域各层面的合作趋势在不断加强，但是我国心血管病研究领域科研合作的区域合作分布却极不平衡，东部地区科研合作较为密切，且区域内部的合作远远大于区域之间的合作。同时，西方发达国家在冠心病研究领域的国际合作活动中处于核心地位。此外，高收入国家的首选合作对象为高收入国家，其次才是中等收入国家和低收入国家。 2.中心度指标可用于遴选生物医学领域学科带头人Degree中心度、Closeness中心度和Betweenness中心度可作为衡量作者产量的指标，帮助科研管理部门遴选生物医学领域的学科带头人。 3.凝聚子群可用于发现生物医学领域的优秀科研合作团队凝聚子群分析，如Compnent分析、K-core分析、M-slice分析和Clique分析等，可以帮助科研管理部门发现生物医学领域的优秀科研合作团队。 4.科研人员的科研绩效与国际科研合作水平存在正相关性论文质量受科研人员科研合作水平的影响;科研人员的科研产量和质量与其国际科研合作程度之间存在显著的正相关性。 5.利用合著网络中的拓扑特征进行科研合作关系的预测具有可行性传统的LR模型与新兴的SVM模型在预测合作关系时性能都很好;高产作者之间的合作关系比低产作者之间的合作关系更容易预测;通过拓扑特征的选取可使模型的准确率得以提升;应当综合多个拓扑特征进行链接预测，避免仅选择单一的拓扑特征进行预测。对策建议： 1.通过加强科研合作提高科研人员的科研绩效鼓励生物医学领域的国际科研合作可以提高该领域的科研产量和质量。而研究结果显示，虽然生物医学领域科研合作程度呈现上升趋势，但是科研合作分布却极不均衡。因此，应当一方面鼓励我国各区域之间进行科研合作研究，另一方面鼓励与发达国家之间进行国际合作研究，促进生物医学科研水平协调发展。 2.社会网络分析法应有效用于学术网络的分析本研究将社会网络分析法应用于大型合著网络的分析，发现其中心性指标可以帮助科研管理部门遴选学科带头人和科研团队，而凝聚子群方法可以帮助科研管理部门挖掘优秀科研创新团队，再一次证明了社会网络分析在科学计量学领域的适用性和可行性。 3.数据挖掘技术应作为科学计量学方法的有益补充本研究对数据挖掘技术在科学计量学中的应用进行了初步尝试，通过监督式机器学习方法，利用合著网络中的拓扑结构特征建立链接预测模型，发现这些模型可以用于预测潜在合作关系，从而帮助组建和管理强大的科研团队，为科研管理工作和科技政策制定提供参考和指导。主要创新点： 1.开辟科研合作理论研究的新领域——科研合作预测研究将科研合作的预测研究与传统的科研合作理论研究结合，形成完整的科研合作理论体系。科研合作关系预测问题的解决，可为组建和管理强大的科研创新团队提供帮助，并大大提高科研部门的工作效率。 2.实现了数据挖掘、机器学习、社会网络分析、多元统计以及计算机编程技术等多种方法在计量学研究领域的结合和合理应用在研究方法方面引入了数据挖掘技术、机器学习、社会网络分析、多元统计等多种方法，大大拓展了科学计量学的方法体系。利用计算机编程技术开发各种应用软件，用于CSV、TSV和XML文件向关系数据库格式的转化、数据关系矩阵的构建以及拓扑特征数据向机器学习软件所需格式的转化，实现数据处理完全自动化，提高研究效率以及结果的准确性。 3.高影响力个收起

关键词 : 生物医学科研合作肿瘤学健康管理科学计量学知识网络

9. 区域卫生信息化建设中利益博弈与合作机制的研究

[学位论文] 王艳军山西医科大学 2017年博士导师: 郑建中共198页

摘要 : 目的：整合区域卫生信息化研究领域的研究热点，比较不同国家的研究特色，分析其相关因素；以政策为切入点提取区域卫生信息化建设中的主要利益相关集团，分析其中的利益关系、存在的囚徒困境以及利益博弈过程，完善合作机制，为该领域的学者、... 展开目的：整合区域卫生信息化研究领域的研究热点，比较不同国家的研究特色，分析其相关因素；以政策为切入点提取区域卫生信息化建设中的主要利益相关集团，分析其中的利益关系、存在的囚徒困境以及利益博弈过程，完善合作机制，为该领域的学者、管理者、政策制定者开展研究、制定政策提供信息。方法：运用关键词词频分析、关键词共现分析、主成分分析、多维尺度分析法、可视化技术分析区域卫生信息化领域的研究热点。运用内容分析法和社会网络分析法提取国内2009—2013年区域卫生信息化政策中的主要利益相关集团。运用案例分析、专题讨论、定性访谈及主要利益相关集团分析法分析各利益集团之间的合作现状及存在的问题。运用博弈论分析各利益集团之间的利益博弈过程。结果： ①区域卫生信息化研究的关键词数量逐年上升，研究领域广泛。1994—2014年，区域卫生信息化研究热点由医院规划转向社区卫生规划，与信息技术相关的关键词数量增多，与组织管理相关的研究明显增多。部分关键词浓缩成知识群。6国的研究除了与主流研究趋势相似以外，相互之间在研究水平和新兴热点之间存在差异。 ②远程医疗文献中的MeSH数量随着时间呈上升趋势。1962—2015年间远程医疗文献中最常见学科分支为：Remote Consultation、Teleradiology和Telepathology，最常见的信息媒介为Internet和Cell phones。近年来，与Patient Satisfaction，Treatment Outcomes和Home Care Services相关的远程医疗文献数量明显增多，近6年中包含Cell Phones和 Self-Care的文献急剧增多。不同国家的文献热点不同。 ③国内研究大约于1984年起步，共形成了9大主流知识群，其中，基础信息化研究和医疗信息化研究占据最大份额。研究方法偏重于定性的描述性研究。国内科研合作群体规模小，71.74%（165/230）的2-plexes的规模为3，E-I Index=－0.901，表明该研究领域派系林立程度小，研究关系趋向于发生在群体之内。主要科研力量集中在军队医院。全国各省市之间建立了科研合作网络，北京、广东、江苏、湖北为研究的核心地区。 ④政策分析提取了主要利益集团，构建了部门关系图，其中，政府、医院、基层医疗卫生机构、医保部门、居民是目前区域卫生信息化建设中的核心部门和人群。纵向的行政隶属关系和横向的部门关系构成了复杂的部门合作网络。各利益集团之间需要进行的投入、可动用的资源不同、立场不同，但相互之间又存在利益契合点。 ⑤利益博弈贯穿在系统整合的整个过程，合作机制是建设和完善的重点。在所有参与人中，政府是投资主体、监督者，同时也是主要参与人。居民健康档案中死档、假档案、不规范档案问题突出。现有的建设机制和政府监督机制难以解决这些问题。 ⑥各部门在利益博弈过程中会因为信息不对称，或者参与人不够理性、监督机制不完善、政府官员腐败而陷入利益博弈的囚徒困境：横向政府部门之间的替代性，纵向政府之间的单边囚徒困境、医疗机构联网涉及的公共产品提供的囚徒困境，居民健康档案督导中的不合理博弈等影响区域卫生信息化建设的进程。通过政府界定部门职能，完善奖罚机制，增加博弈的次数，完善市场机制等可以解决当前区域卫生信息化建设中存在的囚徒困境，达成部门合作。增加基层医疗机构与居民之间的互动可以解决当前居民健康档案造假、死档、不规范等问题。结论：区域卫生信息化研究内容一直在不断拓展，研究热点不断演变。不同国家研究热点不同，与各国卫生政策、卫生体制、地理环境等因素有关。其中，政策是不可忽视的重要因素。以政策为切入点提取到了我国区域卫生信息化建设的主要利益相关集团，这些利益相关集团之间纵横交错，利益关系复杂，利益博弈贯彻其中。政府作为投资者、监督者和重要的参与人，在区域卫生信息化政策制定过程中以利益博弈的视角分析不同阶段各利益集团之间的利益关系，完善合作机制，可以引导各部门走出利益博弈的囚徒困境。博弈论是研究区域卫生信息化建设中利益博弈和合作机制的理想方法。本研究客观、系统的分析为该领域的学者、管理者、政策制定者提供了有用的信息，为区域卫生信息化的研究和建设提供了方向。收起

关键词 : 区域卫生信息化建设利益博弈合作机制

10. 胎盘细胞凋亡在HBsAg阳性孕妇PBMC母-胎转运机制中的作用

[学位论文] 魏俊妮山西医科大学 2012年博士导师: 王素萍共198页

摘要 : 目的: 探讨PBMC母.胎转运与HBV宫内感染的关系，了解其作用的生物学基础；探讨胎盘细胞凋亡对胎盘通透性的影响，了解其与PBMC母-胎转运及新生儿HBV感染的关系；探讨PBMC作为HBV的载体，将孕妇体内HBV转运至胎儿体内导致HBV宫内感染的作用机制。 ... 展开目的: 探讨PBMC母.胎转运与HBV宫内感染的关系，了解其作用的生物学基础；探讨胎盘细胞凋亡对胎盘通透性的影响，了解其与PBMC母-胎转运及新生儿HBV感染的关系；探讨PBMC作为HBV的载体，将孕妇体内HBV转运至胎儿体内导致HBV宫内感染的作用机制。方法: 1.人群研究连续收集2005年1月至2009年2月间太原市区各省市级医院筛检，并在太原市传染病院（太原市第三人民医院）妇产科进行产前检查并分娩的HBsAg阳性孕妇为研究队列，从产前检查追踪观察至分娩，排除孕期有其他感染性疾病或接受免疫治疗的孕妇，共收集HBsAg阳性孕妇及其新生儿共450对作为研究对象。收集孕妇孕期及产后新生儿的流行病学基线资料：采集孕妇分娩前肘静脉血及其新生儿出生24小时内注射乙肝疫苗和乙肝高效价免疫球蛋白(HBIG)前的股静脉血；无菌条件下采集孕妇足月分娩时胎盘组织。进行下述研究： (1)采用等位基因特异性PCR(As-PCR)法检测HBsAg阳性孕妇及其新生儿PBMC中HUMGSTM1、ACE基因多态性，筛选母亲为GSTM1基因表达型(GSTM1+)和/或为ACE基因杂合子（ID型），且其新生儿为GSTM1基因缺失型（GSTM1-）和/或为ACE基因纯合子（纯合插入Ⅱ型或纯合缺失DD型）者作为信息病例对。将GSTM1和ACE基因作为母亲的特异性等位基因，从信息病例对的新生儿外周血PBMC中检测母亲基因，判定是否发生PBMC母—胎转运。 (2)采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上述方法确定的信息病例对中孕妇及其新生儿外周血HBeAg、HBe-Ab、HBc-Ab及新生儿外周血HBsAg。 (3)采用荧光定量聚合酶联反应(FluorescenceQuantitativePCR，FQ-PCR)检测信息病例对中母儿外周血血清、PBMC中HBVDNA含量及PBMCHBVcccDNA含量。 (4)采用FQ-PCR检测新生儿PBMC中的母亲信息，用△Ct值（Ct目的基因/Ctβ-globin）表示PBMC母-胎转运量。 (5)采用免疫组织化学ABC法检测胎盘组织HBsAg。 (6)采用脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)介导的核苷酸(dUTP)缺口末端标记法，原位末端标记技术（Tunel法）检测胎盘组织凋亡指数(AI)，采用免疫组化SP法检测胎盘组织Caspase3蛋白表达，采用real-timeRT-PCR检测胎盘组织Caspase3mRNA表达。 (7)采用巢式病例对照研究分析母-胎细胞转运及新生儿PBMCHBV感染复制及宫内感染的危险因素研究。 (8)采用免疫荧光双标技术检测PBMC涂片上HBsAg和GST，判断感染HBV的PBMC转运情况。 2.体外实验 (1)采用100μlHBVDNA含量为5.0×106(copies/ml)的病人血清感染PBMC，用CCK-8试剂盒检测不同共培养时间点12h、24h、48h和72h细胞的生长状况。将共培养的细胞清洗4次，用荧光定量PCR法检测PBMC和洗液中的HBVDNA的含量。 (2)在1μm孔径Transwell小室共培养模型中，用流式细胞技术(FACS)检测Transwell小室上室感染HBV的PBMC与Bewo的融合现象。再用8μm孔径Transwell小室共培养模型观察PBMC的迁移，用流式细胞技术(FACS)检测下室中标记有绿色荧光的PBMC。 (3)共培养时设立三个组：正常对照组(Bewo)、Bewo+HBV血清共培养组、Bewo+感染HBV的PBMC共培养组，在共培养0h、12h、24h、48h后分别收集各组Bewo细胞，通过流式细胞技术(FACS)检测Bewo的凋亡情况。 (4)用FQ-PCR法检测感染HBV的PBMC与Bewo共培养组不同时间点(0h、12h、24h、48h)的Bewo细胞caspases3mRNA的表达情况。 (5)用FQ-PCR法检测感染HBV的PBMC与Bewo共培养组下室中的PBMC的HBVDNA和HBVcccDNA含量。 3.统计分析资料核实后输入数据库，采用SPSS16.0forwindows软件进行统计分析。计数资料采用X2-test，计算各指标阳性率、x2值、OR值及其95％可信区问；计量资料采用t检验、方差分析及相关性分析。结果: 1.HBsAg阳性孕妇PBMC母.胎转运与孕妇HBV感染及新生儿HBV感染的关系 (1)对连续收集的450对HBsAg阳性孕妇及其新生儿的PBMC采用等位基因特异性PCR检测GSTM1、ACE基因多态性：检出86对母亲GSTM1+基因型且其新生儿GSTM1-基因型的信息病例对，84对母亲ID基因型且其新生儿II/DD基因型的信息病例对，合计将GSTM1、ACE基因作为母亲的特异性等位基因时，共检出155对信息病例对。 (2)孕妇HBsAg、HBeAg双阳性组△Ct值（PBMC转运Ct/β-globinCt值）低于非双阳性组，但差异无统计学意义（r=0.81，P=0.42）；孕妇大、小三阳组△Ct值（PBMC转运Ct/β-globinCt值）均分别低于非大、小三阳组（t=1.42，P=0.16；t=0.02，P=0.98），但差异均无统计学意义。HBsAg阳性孕妇血清HBVDNA各组△Ct值（PBMC转运Ct/β-globinCt值）差别无统计学意义（F=0.37，P＞0.05）。 (3)HBsAg阳性孕妇PBMCHBVDNA阳性组△Ct值（PBMC转运Ct/β-globinCt值）低于阴性组，差异有统计学意义（t=6.42，P=0.00）；HBsAg阳性孕妇PBMCHBVcccDNA阳性组△Ct值（PBMC转运Ct/P-globinCt值）高于阴性组，差异有统计学意义(t=2.13，P=0.04)。 (4)将新生儿血清HBsAg、HBVDNA任一项阳性作为判断新生儿宫内感染的指标，则宫内感染组△Ct值（PBMC转运Ct/β-globinCt值）高于非宫内感染组，但差异无统计学意义(t=0.34，P=0.73)。将新生儿血清HBsAg、HBVDNA及PBMCHBVDNA任一项阳性作为判断新生儿宫内感染的指标，则宫内感染组△Ct值（PBMC转运Ct/β-globinCt值）低于非宫内感染组，差异有统计学意义(t'=6.25，P=0.00)。 2.胎盘HBV感染与HBsAg阳性孕妇母-胎细胞转运及新生儿HBV感染的关系 (1)胎盘HBV感染组△Ct值（PBMC转运Ct/β-globinCt值）高于非感染组，但差异无统计学意义（t=0.38，P=0.70）；胎盘各型细胞HBV感染组△Ct值（PBMC转运Ct/β-globinCt值）除母体面的蜕膜细胞高于非感染组外其它均分别低于非感染组，但差异均无统计学意义（t=0.38,P=0.70；t=0.49,P=0.63；t=0.17,P=0.87；t=1.72，P=0.09）。 (2)胎盘HBV感染与新生儿血清HBsAg有关（x2=4.88，P=0.03）而与新生儿HBVDNA无关（x2=0.10，P=0.76）。将新生儿血清HBsAg、HBVDNA任一项阳性作为判断宫内感染的标准，胎盘HBV感染组的新生儿HBV宫内感染率高于非胎盘HBV感染组，但差异无统计学意义（x2=2.71，P=0.10）。胎盘HBV感染与新生儿PBMCHBVDNA、PBMCHBVcccDNA均无关(x2=1.89、0.76，P=0.17、0.38)。将新生儿血清HBsAg、HBVDNA及PBMCHBVDNA任一项阳性作为判断宫内感染的标准，胎盘HBV感染组的新生儿HBV宫内感染率高于非胎盘HBV感染组，但差异无统计学意义（x2=2.09，P=0.15）。 3.胎盘细胞凋亡与HBsAg阳性孕妇母一胎细胞转运及新生儿HBV感染的关系 (1)采用Tunel法检测155例HBsAg阳性孕妇胎盘的凋亡情况。胎盘细胞胞核出现棕黄色颗粒为凋亡阳性信号表达。从母体面至胎儿面的蜕膜细胞(DC)、滋养层细胞(TC)、绒毛间质细胞(VMC)和绒毛毛细血管内皮细胞(VCEC)凋亡指数分别为4.53±0.07,5.56±0.06,4.66±0.05,4.05±0.06，合计胎盘细胞凋亡指数为4.75±0.05。凋亡指数在HBsAg阳性孕妇胎盘各层细胞上的分布总体上有统计学差异(F值为102.60，P=0.00)，其中以滋养层细胞的凋亡为主，绒毛毛细血管内皮细胞的凋亡少见。采用SNK法进一步比较胎盘各层细胞凋亡指数，结果显示：蜕膜细胞(DC)凋亡指数与滋养层细胞(TC)、绒毛毛细血管内皮细胞(VCEC)的凋亡指数差异均有统计学意义（P值均小于0.05），DC的凋亡指数低于TC而高于VCEC；TC与DC、VMC及VCEC的凋亡指数差异均有统计学意义，TC的凋亡指数高于DC、VMC和VCEC；DC的凋亡指数低于VMC的凋亡指数，但差异无统计学意义。 (2)发生PBMC母-胎转运组的胎盘细胞凋亡指数高于未发生转运组的胎盘细胞凋亡指数，差异有统计学意义（t=3.44，P=0.00）。发生PBMC母-胎转运组的胎盘各层细胞凋亡指数均高于未发生转运组，差异均有统计学意义(t=2.86，P=0.01；t'=4.86，P=0.00；t=2.53，P=0.01；t=2.23,P=0.03)。 (3)将新生儿血清HBsAg、HBVDNA任一项阳性作为判断新生儿HBV宫内感染的标准，宫内感染组的胎盘细胞凋亡指数高于非宫内感染组，但差异无统计学意义（t=1.97，P=0.05）。将新生儿血清HBsAg、HBVDNA和/或PBMCHBVDNA任一项阳性作为判断新生儿HBV宫内感染的标准，宫内感染组的胎盘细胞凋亡指数高于非宫内感染组，差异有统计学意义(t=3.22，P=0.00)。 (4)新生儿外周血PBMCHBVDNA阳性组的胎盘蜕膜细胞(DC)、滋养层细胞(TC)的凋亡指数高于阴性组，差异均有统计学意义(t=2.08，P=0.04；F3.47，P=0.00)。绒毛间质细胞(VMC)、绒毛毛细血管内皮细胞(VCEC)的凋亡指数均高于阴性组，但差异无统计学意义(t'=0.92，P=0.36；t=0.77，P=0.44)。 (5)用免疫组织化学SP法检测155例HBsAg阳性孕妇胎盘Caspase3的表达，胎盘细胞细胞浆和/或细胞膜出现棕黄色染色为Caspase3阳性信号表达。从母体面的蜕膜细胞至胎儿面的蜕膜细胞(DC)、滋养层细胞(TC)、绒毛间质细胞(VMC)和绒毛毛细血管内皮细胞(VCEC)Caspase3阳性表达的灰度值分别为98.40±1.86，82.05±1.39，86.41±1.57，89.10±1.70，合计胎盘Caspase3阳性表达的灰度值为88.99±1.47；积分光密度值分别为15.58±0.33，18.59±0.29，17.67±0.31，17.31±0.35，合计胎盘Caspase3阳性表达的积分光密度值为17.29±0.29。Caspase3蛋白在HBsAg阳性孕妇胎盘各层细胞上的分布总体上有统计学差异(F值分别为17.81、15.54，P值均小于0.05)。进一步采用SNK法进行两两比较，结果显示：蜕膜细胞(DC)Caspase3阳性表达的灰度值与滋养层细胞(TC)、绒毛间质细胞(VMC)和绒毛毛细血管内皮细胞(VCEC)的灰度值差异均有统计学意义（P值均小于0.05），DC的Caspase3阳性表达灰度值均高于TC、VMC和VCEC，TC的Caspase3灰度值最小，即TC凋亡率最高，其次VMC、VCEC，DC凋亡率最低；TC与VMC、VMC与VCEC的Caspase3阳性表达的灰度收起

关键词 : 乙型肝炎病毒外周血单个核细胞宫内感染细胞凋亡胎盘 HBsAg阳性孕妇 PBMC母-胎转运机制