中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

1. 共载双氢青蒿素和PI3K抑制剂的抗疟逐级靶向纳米递药系统的构建与评价

[学位论文] 王蓉蓉山西医科大学 2023年博士导师: 张淑秋共234页

摘要 : 目的：疟疾是由感染疟原虫的按蚊叮咬或者输入含有疟原虫的血液而导致的一种严重虫媒传染病。在治疗疟疾方面青蒿素类药物有独特的优势，是全球治疗疟疾的一线药物。但近年来青蒿素耐药性疟疾传播的地理范围日益扩大，耐药地区青蒿素类药物治疗... 展开目的：疟疾是由感染疟原虫的按蚊叮咬或者输入含有疟原虫的血液而导致的一种严重虫媒传染病。在治疗疟疾方面青蒿素类药物有独特的优势，是全球治疗疟疾的一线药物。但近年来青蒿素耐药性疟疾传播的地理范围日益扩大，耐药地区青蒿素类药物治疗失败率高达50％。在没有其他替代药物的情况下，青蒿素耐药威胁着全世界为消除疟疾做出的所有努力。基于以上背景，为了实现：①特异性抑制PI3K激酶，减少PI3P的生成，恢复疟原虫对ARTs的敏感性、保障ARTs活化起效;②利用感染红细胞膜和疟原虫膜上特有的代谢转运通道，将两种药物逐级靶向至疟原虫，增加两种药物在疟原虫内的富集，进一步增强ARTs效力。本研究首先通过计算机辅助设计和疟鼠体内的药效学评价，筛选出与PI3K蛋白亲和力高且具有较好抗疟效果的疟原虫PI3K抑制剂。利用药效学和相关脂质变化验证双氢青蒿素（DHA）联合PI3K抑制剂（idelalisib）协同逆转耐药的效果并对耐药相关机制进行初步评价。其次基于葡萄糖转运体、疟原虫还原微环境和疟原虫大分子转运通道，分别制备有无葡萄糖基、有无GSH响应（还原响应，二硫键）及不同粒径（～35 nm和～121nm）修饰的纳米微粒，初步评价这几种转运体（通道）对微粒靶向性和抗疟药效的影响。最后在前述研究的基础上，设计共载DHA和idelalisib的葡萄糖基修饰小粒径还原响应微粒（DHA+idelalisib共载逐级靶向递药微粒），期待微粒可通过大分子转运通道等选择性进入感染红细胞、再经疟原虫膜己糖转运体主动转运进入疟原虫、而后在疟原虫内实现还原响应释药、最后两药协同活化起效，为阐释ARTs耐药机制及治疗耐药性疟疾提供依据和新策略。方法： 1、疟原虫PI3K抑制剂的筛选及其与双氢青蒿素协同作用的评价为了找到对疟原虫PI3K有较强效果的抑制剂，本研究首先以恶性疟原虫PI3K同源模建得到的蛋白结构为基础，选择27种有人类三型PI3K抑制作用的化合物进行分子对接，以对接得分、结合能大小等为考察指标，初步筛选疟原虫PI3K抑制剂候选化合物。在此基础上，使用DHA和候选抑制剂的混合溶液对约氏BY265疟鼠进行治疗，以感染率、抑制率和治愈率等为考察指标，筛选药效最好的疟原虫PI3K抑制剂。为评价DHA和PI3K抑制剂的协同增敏和逆转耐药效果，将DHA和PI3K抑制剂（idelalisib）以不同比例混合后作用于BY265疟鼠、伯氏K173青蒿素敏感和K173青蒿素抗性疟鼠，对两药联用前后的抑制率、协同指数（CI)、半数抑制浓度（ED50）和耐药指数变化等进行考察。 2、DHA+idelalisib联用对疟原虫脂质代谢的影响为探究PI3K耐药和DHA+idelalisib联用对疟原虫脂质代谢的影响，以K173敏感疟鼠为对照，将生理盐水（Control）、DHA溶液、idelalisib溶液和DHA+idelalisib混合溶液注射至K173抗性疟鼠体内，连续给药4天，最后1次给药后提取疟原虫，对疟原虫脂质成分进行测定。分析 Control vs idelalisib、Control vs DHA、Control vs DHA+idelalisib、idelalisib vs DHA+idelalisib、DHA vs DHA+idelalisib 组的耐药相关脂质代谢差异，对PI3P含量、差异倍数大的脂质种类、及鞘脂和固醇的变化量进行不同差异分组间的比较，初步阐释两药联用逆转耐药的机制。结果： 1、疟原虫PI3K抑制剂的筛选及其与双氢青蒿素协同作用 (1)选择idelalisib作为疟原虫PI3K抑制剂以恶性疟原虫PI3K同源模建蛋白中的小分子配体为基础或SYBYL-X2.0软件自动识别构建两种对接口袋，与27种有PI3K抑制作用的化合物对接后使用分子动力学模拟验证对接结果，筛选出对接得分最高的5种候选抑制剂(copanlisib、idelalisib、taselisib、umbralisib、AZD6482)。将 5 种候选抑制剂与 DHA 等摩尔量混合后注射至约氏BY265疟鼠体内，停药1天小鼠尾尖取血涂片，DHA+idelalisib组(0.60±0.56)％和 DHA+taselisib 组(1.3±0.93)％的感染率相比 DHA 组(3.50±1.00)％显著降低;在接种32天内，DHA+idelalisib组转阴率最高，且仅DHA+idelalisib组有小鼠治愈，故选择idelalisib作为疟原虫PI3K抑制剂用于后续考察。 (2)DHA+idelalisib具有协同增敏、逆转耐药的作用将不同摩尔比的DHA和idelalisib混合溶液作用于BY265疟原虫感染的小鼠，停药一天，固定其中一种药物的浓度，感染率会随着另一种药物给药剂量的增加而减小，抑制率反之。不同剂量比的DHA+idelalisib组均表现出不同程度的协同抗疟效果，综合比较CI值和抑制率，idelalisib用量为60.2 μmol/kg/d时与DHA协同作用较佳，DHA+idelalisib 的剂量比(μmol/kg/d)为 1.1∶60.2、2.2∶60.2、4.4∶60.2、8.8∶60.2及17.6∶60.2时分别表现出强度、强度、高度、高度和中度的协同作用。在K173敏感疟鼠中，相比DHA溶液组，DHA+idelalisib联用后对疟原虫的抑制作用增强，两种药物联用达到中度和低度的协同增敏效果。在K173抗性疟鼠中，相比DHA溶液组，DHA+idelalisib联用表现出中、高度的协同作用，抑制率显著增加(P＜0.01)。且在K173抗性疟鼠中，DHA+idelalisib联用显著降低了 DHA的ED50,使得DHA抗性指数由13.82降低到2.75,降低了 5倍，达到较好的协同逆转耐药的作用。 2、DHA+idelalisib联用对疟原虫脂质代谢的影响 (1)DHA+idelalisib联用影响敏感株PI3K相关脂质的表达在K173敏感疟原虫中，与疟鼠对照Control组相比，单用DHA未对疟原虫中的PI3P表达产生明显影响;DHA联合使用idelalisib后，DHA+idelalisib组相比DHA组的PI3P表达明显下调(P=0.004,VIP=1.90)。以P＜0.05,VIP＞1为条件，筛选两组间的差异脂质。Control组和idelalisib溶液组相比，在差异倍数最大的10种上调或下调的脂质中，维生素D类脂质(LMST03020457)上调。这类脂质可通过抑制PI3K-AKT通路介导细胞凋亡，对疟原虫的生长有抑制作用。Control组和DHA溶液组差异倍数最大的10种上调或下调的差异脂质中除发现与idelalisib组相同的维生素D类脂质外还发现有细胞凋亡诱导作用的鞘脂Cer(d16∶1/17∶0)上调。Control组和DHA+idelalisib混合溶液组差异倍数最大的10种上调或下调的差异脂质中有7种和DHA组相同，除和单用DHA或单用idelalisib上调相同的维生素D类脂质及和DHA单用相同上调的Cer(d16∶1/17∶0)细胞凋亡诱导剂外，另1种维生素D类物质(LMST03020502)也被上调。 (2)DHA+idelalisib联用影响抗性株PI3K相关脂质的表达结论： 1、选择的PI3K抑制剂idelalisb在体外分子对接和体内抗疟药效学评价中都具有较好的表现。将DHA+idelalisb注射至敏感和耐药疟原虫感染的小鼠体内，显示出一致的协同作用;且在抗性疟鼠中，idelalisb将DHA的抗性指数从13.82降低至2.75,表明idelalisb一定程度上恢复了 DHA对抗性疟原虫的敏感性。通过分析两种药物治疗前后脂质表达的变化，与DHA组相比，DHA+idelalisb组的PI3P表达显著下调，充分验证了 idelalisb可以抑制疟原虫PI3K,减少PI3P的产生，增强或恢复DHA的抗疟敏感性。在抗性虫株中，idelalisb与DHA联用对疟原虫中囊泡相关脂质的表达也产生了明显的影响(在耐药疟原虫中囊泡过表达)，间接说明idelalisib具有恢复ARTs敏感性的作用。此外，维生素D类物质在idelalisb治疗后显著上调，推断idelalisb还可以通过抑制PI3K-AKT途径介导疟原虫凋亡。这些发现为阐明青蒿素耐药性机制和治疗耐药性疟疾提供了依据和新思路。 2、基于糖转运体、疟原虫还原微环境和大分子转运通道，分别设计了葡萄糖基靶向、还原响应和小粒径微粒;糖转运体或大分子转运通道的响应修饰均使得微粒具有了较好的靶向作用;还原响应二硫键的修饰对增加DHA导致的过氧化损伤产生了一定的辅助作用。将小粒径靶向、葡萄糖靶向和还原响应结合起来后，靶向至疟原虫感染红细胞的微粒含量进一步提高。在证实DHA+idelalisib对敏感和抗疟疟原虫有强效抑制作用的基础上，将DHA+idelalisib共载在葡萄糖靶向的小粒径还原响应微粒中，增加了两种药物在敏感和抗性疟原虫中的有效含量，达到了更好的抗疟疗效。为抗疟药递送系统的设计提供了新策略。收起

关键词 : 纳米递药系统双氢青蒿素 PI3K抑制剂抗疟疾疗效

2. 市井生活导向下延安市老城区街道空间更新策略研究

[学位论文] 王蓉蓉长安大学 2022年硕士导师: 李明共204页

摘要 : 街道自诞生初始就作为人们群居交往、公共生活组织的线型空间。现代化的机动交通方式改变了街道的结构、形式、功能和特征，固有的生活功能被机动交通功能所替代；人们习惯的、随机的活动空间形式消逝了，城市变得冷漠、弃人而去；而街道空间因缺乏人... 展开街道自诞生初始就作为人们群居交往、公共生活组织的线型空间。现代化的机动交通方式改变了街道的结构、形式、功能和特征，固有的生活功能被机动交通功能所替代；人们习惯的、随机的活动空间形式消逝了，城市变得冷漠、弃人而去；而街道空间因缺乏人的活动而丧失了原有的生气、活力与文化特色，唤起街道公共生活功能成为宜居城市建设、城市特色构建和城市活力提升的一大举措。市井生活是人们最本源、安全、随机而自由、完全以人为主体的活动方式，它是城市地域文化的主要组成部分。将原本属于街道的市井生活重新注入街道空间，对凸显城市文化特色、唤起城市活力、繁荣公共生活，实现慢生活、绿色生活等方面具有重大意义。本文以延安市老城区街道空间为研究对象，针对其近几年市井生活衰退的状况，拟通过对延安市井生活因子的挖掘、探寻其在街道空间中的表现特征；以市井生活需求唤起空间形式，以合乎逻辑的空间形式来促进市井活动的发育，从而建构以市井文化为主体的文化街区，丰富延安市文化旅游的内涵。首先，文章从市井生活的内涵入手，梳理了“市”的交易功能和“井”的交往功能，初步探讨了市与井的关系；梳理了市井生活的构成要素、演变过程和影响因素。其次，通过对街道空间的要素构成、类型、空间特征的解析，探寻了市井生活与街道空间的内在联系；从市井需求、市井行为、市井文化三个方面来解读街道空间中的市井生活，明确了市井生活视角下街道空间的特征；并通过相关案例研究、总结出街道空间相应的更新方法。最后，在对延安市老城区街道空间市井生活状况评判的基础上，从重整功能设施、重织交通廊道、重塑步行场所、重构街道空间、重振文化特色五个层面提出延安市老城区街道空间中市井生活的培育、传承和延续等更新策略，在此基础上对其中的二道街街道空间进行了更新设计实践。本文研究成果对延安市老城区街道空间更新具有实践指导价值；对其它城市街道空间更新设计具有借鉴意义。收起

关键词 : 老城区更新街道空间市井生活城市文化

3. 机载相干激光雷达三维成像中的振动误差补偿方法研究

[学位论文] 王蓉蓉中国科学院大学 2022年博士导师: 向茂生共168页

摘要 : 激光波长比微波波长短三个数量级以上，相较于微波雷达成像技术，激光雷达成像系统具备更高的分辨率以及高数据率成像能力。此外，激光散射机理与微波不同，其频率特性更接近于可见光，因此，激光雷达能够对目标进行精细成像，且成像结果更接近光学图... 展开激光波长比微波波长短三个数量级以上，相较于微波雷达成像技术，激光雷达成像系统具备更高的分辨率以及高数据率成像能力。此外，激光散射机理与微波不同，其频率特性更接近于可见光，因此，激光雷达能够对目标进行精细成像，且成像结果更接近光学图像。传统脉冲激光雷达发射短脉冲激光信号，通过计算回波延时获取目标的测距结果。而相干激光雷达是激光雷达技术与相干探测技术相结合的新型雷达系统，通过调频连续波(FrequencyModulatedContinuousWave，FMCW)相位测量技术进行数据处理，可利用较低的功率实现大尺寸、高精度、无盲区的远距离测量。机载相干激光雷达三维成像系统在相干激光雷达高精度距离测量的基础上，结合平台的快速扫描，对被探测区域进行三维成像，在军事、航空航天观测以及民用三维传感等领域发挥了重要作用。由于机载平台飞行过程中的不稳定会在回波数据中引入振动误差，而激光波长在微米量级，因此平台引入的微米量级的振动都会扰乱回波信号的距离判定。此外，雷达系统在产生信号及获取信号的过程中会引入噪声、调频非线性等系统误差。振动、噪声及调频非线性产生的测距误差会传递到后续的三维定位解算中，影响三维定位精度及三维场景的重构效果。然而，传统振动误差补偿方法主要针对微波雷达信号特征设计，难以直接应用于相干机载激光雷达信号，是限制相干机载激光雷达在上述领域进一步推广应用的瓶颈问题之一。针对上述问题，本文在时间.频率域建立了相干机载激光雷达瞬时测距模型和调频非线性误差模型，研发了匹配相干激光雷达信号特征的振动误差补偿方法及系统误差校正方法，进而发展了高精度机载相干激光雷达三维成像方法，论文主要工作以及创新点总结如下: 针对相干激光雷达中的FMCW信号的调频非线性误差校正问题，通过同步挤压小波变换(SynchroSqueezingWaveletTransform，SSWT)建立了调频非线性误差模型，提出了基于SSWT的非线性误差校正方法，以校正差频信号中的非线性误差。本文提出的非线性校正方法在远距离探测时能够准确补偿发射信号的非线性误差，并且在噪声环境下具有较强的鲁棒性。此外，研发了基于奇异值谱约束的集合经验模态分解(EnsembleEmpiricalModeDecomposition，EEMD)方法进行噪声压制，该噪声压制方法从相干激光雷达信号特征出发，具有良好的信号自适应性，相对于传统EEMD方法具有更好的去噪效果。针对机载相干激光雷达系统中的平台振动误差补偿问题，根据不同的振动模型，提出了三种不同的解决方案。第一，根据振动在单个观测周期内的表现形式，分析了二阶振动误差对相干激光雷达测距的影响，并提出一种基于分段干涉的二阶振动误差补偿方法。该方法不需要改变系统设计，只需要一个周期的数据就能够有效消除二阶振动误差。第二，分析了时变振动误差对相干激光雷达测距的影响，证明当机载平台振动频率较高时，相干机载激光雷达信号中高阶振动误差难以忽略，仅校正二阶振动误差无法得到高分辨率成像结果。基于此，将传统测距模型拓展为瞬时测距模型，利用瞬时测距模型准确刻画回波信号中的时变振动误差，提出了一种基于瞬时测距模型的时变振动误差补偿方法。该方法不需要增加系统的硬件设备，能够提高时变振动干扰下的测距精度。第三，考虑到相干激光雷达系统中振动误差和调频非线性误差的耦合效应，分析了耦合非线性误差的时变振动误差对测距的影响，并基于瞬时测距模型提出了耦合非线性误差的时变振动误差补偿方法。该方法只需要一个调频周期的回波信号，即可消除耦合误差，从而准确估计出目标距离。上述振动误差补偿方法的有效性和鲁棒性均通过仿真实验或实际数据处理进行了验证。最后，利用相干激光雷达三维成像系统采集了两个场景的地面实验数据，并模拟验证了平台振动对测距以及后续三维成像的影响，并通过所提出的振动误差补偿方法对地面模拟实验数据进行了处理，有效地降低每个观测周期的测距误差，提高了三维目标成像质量。综上所述，本文建立了新的相干机载激光雷达瞬时测距模型，研发了匹配相干激光雷达信号特征的振动误差补偿方法及系统误差校正方法，具有重要的理论意义。该研究能够提高机载相干激光雷达三维成像精度，在高分辨观测领域具有广阔的应用前景。收起

关键词 : 相干激光雷达三维成像振动误差补偿误差校正

4. 基于TRP通道靶标三种植物物质基础研究

[学位论文] 王蓉蓉青岛大学 2019年硕士导师: 王克威;王威共165页

摘要 : 瞬时受体电位(Transient Receptor Potential，TRP)通道是细胞膜上的一种非选择性阳离子通道，其中温度敏感型TRP通道为外周感觉神经不同细胞群的温度感受器和化学感受器，包括TRPC通道、TRPV通道、TRPA通道和TRPM通道，可成为疼痛和瘙痒的治疗靶标。... 展开瞬时受体电位(Transient Receptor Potential，TRP)通道是细胞膜上的一种非选择性阳离子通道，其中温度敏感型TRP通道为外周感觉神经不同细胞群的温度感受器和化学感受器，包括TRPC通道、TRPV通道、TRPA通道和TRPM通道，可成为疼痛和瘙痒的治疗靶标。本课题组前期筛选了20种植物提取物对温度敏感型TRP通道的调节作用，结果表明：白鲜皮和蓍草的提取物对瞬时受体电位香草酸3型受体(TRPV3)具有抑制作用，辣椒提取物对瞬时受体电位香草酸1型受体(TRPV1)具有激活作用。本研究为阐明白鲜皮中具有抑制TRPV3通道止痒作用的活性成分，采用现代分离鉴定技术研究白鲜皮提取物中的化学成分。为进一步筛选TRPV3通道抑制剂，将白鲜皮的ODS组分进行FlexStation测定，结果显示活性部位BXP-2、BXP-4、BXP-5、BXP-6、BXP-9和BXP-10对TRPV3通道具有较强抑制作用，对以上部位进行活性追踪，分离得到29个化合物，包括倍半萜类化合物7个：5β-乙酰基-7β,10α-二羟基-10β-甲基-双环[4.3.0]壬烷(1)、1β,4α,6α,11,14β-pentahydroxy-eudesmane(2)、6β,14-epoxyeudesm-4(15)-en-1β,11-diol(3)、4α,14-epoxyeudesm-1α,6β,11-triol(4)、4β,14-epoxyeudesm-3β,6β,11-triol-1-one(5 )、4β,14-epoxyeudesm-5,6-en-1β,11α-diol(6)、4β,10α-二甲基-1β,5α-双环-6-烯基-4α,10β-二醇(7)；生物碱类化合物20个，分别为：3-异丙基-四氢-咪唑[1,2-a]吡啶-2,5-二酮(8)、2,3-二氢-3-羟基-4-甲氧基呋喃-[2,3-b]-喹啉(9)、Ribalinine(10)、异阔果芸香碱(11)、阔果芸香碱(12)、7,8-二甲氧基-阔果芸香碱(13)、7-羟基-8-甲氧基-阔果芸香碱(14)、白鲜碱(15)、异白鲜碱(16)、Dictangustine-A(17)、Isopteleine(18)、合帕洛平(19)、茵芋碱(20)、大叶桉亭(21)、异-γ-花椒碱(22)、Isomaculosidine(23)、γ-花椒碱(24)、Lemobiline(25)、Ifflaiamine(26)、N-demethyl-ifflaiamine(27)；其他类：5-羟甲基糠醛(28)、(+)-Lyoniresinol(29)。其中新化合物6个，分别为化合物1、2、3、5、11和14，化合物8、9、25和27为首次从白鲜属中分离得到。将活性部位分离得到的化合物与TRPV3晶体结构进行分子对接，得到13个结合能较低的化合物，分别为：化合物3、5、6、8、10~14、19、22、25和26。综合考虑结合能和化合物质量，选取化合物3、5、6、12、25和26，进行TRPV3通道电生理评价，得到TRPV3通道抑制剂。另外，本研究建立了运用氧化铝柱快速制备白鲜碱和梣酮的工艺，当洗脱剂为正己烷∶乙酸乙酯=9∶1时，洗脱液中白鲜碱和梣酮的纯度明显提高。将洗脱液蒸干回收，采用制备液相快速分离得到白鲜碱和梣酮单体。为研究蓍草基于抑制TRPV3通道治疗皮肤炎症的活性成分，采用高速逆流色谱分离蓍草提取物中化学成分，得到2个化合物，鉴定结构为化合物30：3,4-二咖啡酰奎宁酸(异绿原酸B)和化合物31：3,5-二咖啡酰奎宁酸(异绿原酸A)。化合物30和化合物31均为首次从该属植物中分离得到。电生理实验结果表明：异绿原酸B(50μM)和异绿原酸A(50μM)能显著抑制TRPV3激动剂2-Aminoethoxydiphenylborate(2-APB)(50μM)引发的电流，抑制率分别为90.6±2.7%(n=7)、81.8±2.6%(n=8)。为探究异绿原酸A和异绿原酸B抑制TRPV3电流的具体机制，运用AutoDock4.2进行分子对接，将异绿原酸A、异绿原酸B以及2-APB与TRPV3晶体结构对接，结果显示，化合物与激动剂2-APB位于相同活性口袋，表明二者与2-APB的化学结构具有相似性。化合物30(-6.85 kcal/mol)和31(-6.55 kcal/mol)的结合能比2-APB(-5.43 kcal/mol)低，解释了异绿原酸A和异绿原酸B能有效抑制2-APB引发TRPV3电流的原因。运用PyMOL分析对接结果发现，化合物具有共同的关键残基His430和Arg696，推测这两个关键残基对介导TRPV3的开放和关闭非常重要。为研究辣椒中具有激活TRPV1通道进行镇痛作用的活性成分，采用现代分离鉴定技术研究辣椒提取物中化学成分，分离到10个化合物，鉴定化合物结构为辣椒素(32)、二氢辣椒素(33)、N-香草基丁酰胺(34)、N-香草基-4E,6E-二烯-8-甲基壬酰胺(35)、降二氢辣椒素(36)、N-香草基癸酰胺(37)、高辣椒素(38)、N-香草基-4,8-甲基戊酰胺(39)、高二氢辣椒素Ⅱ(40)和高二氢辣椒素Ⅰ(41)，其中化合物N-香草基-4E,6E-二烯-8-甲基壬酰胺(35)是新化合物。本研究发现了白鲜皮治疗瘙痒和蓍草治疗皮肤炎症的物质基础，共得到41个化合物，包括7个新化合物。其中，化合物8、9、25和27为首次从白鲜属中分离得到，化合物30和化合物31为首次从蓍属植物中分离得到，丰富了白鲜皮、蓍草和辣椒的化合物样品库。利用分子对接技术筛选出8个TRPV3通道抑制剂，为开发新型镇痛止痒药物奠定了基础。收起

关键词 : 白鲜皮蓍草辣椒瞬时受体电位止痒作用活性成分

5. 狭鳕和牛肌肉组织提取物在牛肉嫩化中的作用机理研究

[学位论文] 王蓉蓉南京农业大学 2012年博士导师: 彭增起共155页

摘要 : 嫩度、多汁性和风味是牛肉食用品质的重要指标。嫩度主要由肌原纤维和肌内结缔组织的结构和性质共同作用决定的。目前市场上常用的嫩化剂主要破坏肌原纤维的结构，同时存在过度嫩化、影响牛肉风味和口感的问题，这一问题多少年来一直未有解决。本研究... 展开嫩度、多汁性和风味是牛肉食用品质的重要指标。嫩度主要由肌原纤维和肌内结缔组织的结构和性质共同作用决定的。目前市场上常用的嫩化剂主要破坏肌原纤维的结构，同时存在过度嫩化、影响牛肉风味和口感的问题，这一问题多少年来一直未有解决。本研究以狭鳕和牛肌肉组织中提取的组织提取物为嫩化手段，利用蛋白质凝胶电泳、圆二色谱、拉曼光谱、扫描电镜等方法研究了该两种肌肉组织提取物对牛肉肌原纤维蛋白和牛肉肌束膜的水解作用及蛋白质二级结构的变化，同时观察了水解过程中蛋白质显微结构的变化，从而探讨了狭鳕和牛肌肉组织提取物嫩化牛肉的潜在可能性，为牛肉嫩化提供新途径，并为实际生产提供理论依据。具体研究内容和结果如下: 狭鳕和牛肌肉组织提取物具有组织蛋白酶B和L的活性。对狭鳕和牛肌肉组织提取物的成分进行鉴定，并测定其中组织蛋白酶B和L的活性。SDS-PAGE电泳结果显示，狭鳕和牛肌肉组织提取物为55kDa以下的蛋白质混合物，与前人关于组织蛋白酶B和L分子量的研究结果一致。同时狭鳕和牛肌肉组织提取物能够特异性水解肽底物苄氧羰基-精氨酰-精氨酰-酰胺-甲基香豆素（Z-Arg-Arg-MCA），显示出明显的组织蛋白酶B的活性，狭鳕和牛肌肉组织提取物中组织蛋白酶B的活性分别为21.86U和19.10U;同时狭鳕和牛肌肉组织提取物能够水解特异性荧光合成肽底物苄氧羰基-苯丙胺酰前氨酰-酰胺-甲基香豆素（Z-Phe-Arg-MCA），因而具有组织蛋白酶L的活性，分别为22.36U和20.72U。因此，肌肉组织提取物即为组织蛋白酶B和L的混合物。狭鳕和牛肌肉组织提取物能够特异性水解组织蛋白酶B底物Z-Arg-Arg-MCA的最适温度分别为50℃和40℃，最适pH分别为5.0和5.5;狭鳕和牛肌肉组织提取物能够特异性水解组织蛋白酶L底物Z-Phe-Arg-MCA的最适温度分别为50℃和40℃，最适pH分别为5.0和5.5。DTT和L-Cys分别是肌肉组织提取物中蛋白酶B和组织蛋白酶L的激活剂;E-64能显著抑制狭鳕和牛肌肉组织提取物中蛋白酶B和L的活性。肌肉组织提取物影响牛肉肌原纤维蛋白质的二级结构，并表现出明显的水解活性。狭鳕和牛肌肉组织提取物添加量及作用时间处理牛肉肌原纤维蛋白，通过SDS-PAGE电泳和CD圆二色谱观察肌原纤维蛋白的水解变化及其过程中二级结构的变化。结果表明，狭鳕肌肉组织提取物作用12h后，肌球蛋白完全水解;肌钙蛋白T和原肌球蛋白在24h后被完全水解;肌球蛋白经过牛肌肉组织提取物作用24h后才完全水解;两种肌肉组织提取物均部分水解肌动蛋白。狭鳕和牛肌肉组织提取物的水解作用降低了肌原纤维蛋白中α-螺旋的含量，最低含量分别为7.51％和17.53％，同时形成了稳定的β-折叠结构，含量最高达到了42.82％和33.53％。肌原纤维蛋白发生了水解，从而对牛肉具有嫩化作用。结合透射电镜观察和SDS-PAGE的结果显示，肌肉组织提取物中的组织蛋白酶B和L首先从明带处水解肌球蛋白，而后降解肌动蛋白。而肌肉组织提取物中的组织蛋白酶B和L对Z盘的结构基本没有影响，可能对骨架蛋白没有裂解作用。肌肉组织提取物影响牛肉胶原蛋白的二级结构，并表现出明显的水解活性。利用不同添加量的狭鳕和牛肌肉组织提取物作用牛肉肌束膜不同时间，测定酶解胶原蛋白的含量，利用拉曼光谱观察水解过程中胶原蛋白二级结构和脯氨酸、羟脯氨酸强度的变化，同时通过扫描电镜观察肌束膜超微结构的变化。结果表明，随着狭鳕和牛肌肉组织提取物添加量的增加和作用时间的延长，从肌束膜中溶出的酶解胶原蛋白含量逐渐增加，其最大溶出量分别达到了34.81％和15.93％。在此水解过程中，α-螺旋含量逐渐降低，β-折叠的含量升高，在作用6h时分别达到相应的极值，狭鳕肌肉组织提取物处理后的肌束膜中胶原蛋白的α-螺旋含量和β-折叠含量分别为8.26％和55.44％;牛肌肉组织提取物处理后的肌束膜中胶原蛋白的α-螺旋含量和β-折叠含量分别为18.58％和47.53％。扫描电镜观察结果显示，肌肉组织提取物中组织蛋白酶B和L破坏了肌束膜中的胶原纤维结构，并使其分散成胶原纤维粗丝（collagen macrofibers），而后逐步分散形成均匀的胶原纤维细丝(collagen microfibers)，从而对牛肉产生嫩化作用。肌肉组织提取物嫩化牛肉的机制是:肌肉组织提取物中的组织蛋白酶B和L水解肌原纤维，肌球蛋白和肌动蛋白发生降解，而不影响Z盘的结构;同时破坏胶原纤维结构，使之分裂分散形成胶原纤维粗丝（collagen macrofibers）和胶原纤维细丝（collagen microfibers），酶解胶原蛋白溶出，从而对牛肉产生嫩化作用。肌肉组织提取物能够嫩化牛肉且不影响牛肉风味及口感。利用从狭鳕和牛肌肉中提取组织提取物作用于牛肉背最长肌，观察其对牛肉的潜在嫩化效果。结果数据显示狭鳕的牛肌肉提取物对牛肉均具有良好的嫩化效果，狭鳕和牛肌肉组织提取物作用后的牛肉剪切力值分别下降了30％和48％，显著提高了牛肉嫩度，同时对牛肉的风味、色泽及多汁性均无显著影响。结果表明，狭鳕和牛肌肉组织提取物是较好的潜在牛肉嫩化剂，具有广泛的应用前景。收起

关键词 : 狭鳕牛肌肉组织提取物牛肉嫩化水解作用组织蛋白酶成分鉴定

6. 站城融合视角下铁路客站站域空间步行体系研究

[学位论文] 王蓉蓉东南大学 2022年硕士导师: 王静;周旭宏共136页

摘要 : 铁路客站作为一种建筑类型，随着我国铁路轨道交通的大力发展，学者们逐步对其进行了深入的研究和探索。作为交通类型的建筑而言，铁路客站承担着城市对外及对内交通换乘的功能需求。在交通上，大量的城市外部及城市内部的旅客客流需要较为集中地快速... 展开铁路客站作为一种建筑类型，随着我国铁路轨道交通的大力发展，学者们逐步对其进行了深入的研究和探索。作为交通类型的建筑而言，铁路客站承担着城市对外及对内交通换乘的功能需求。在交通上，大量的城市外部及城市内部的旅客客流需要较为集中地快速送达或送离铁路客站。因此在设计上铁路客站的接驳交通是一项较为复杂的系统，在铁路客站周边需要考虑其与城市对外交通系统、城市综合交通系统的一体化衔接，长途客站、市内公交、轨道交通等交通站点多围绕铁路客站布局，使之实现交通上的快速集散。在城市空间上，铁路客站同时承担有城市客厅等功能，其将铁路站点与周边的城市空间紧密联系起来，通过铁路客站的“节点效应”激活周边城市的整体活力，实现节点与场所的转换。其中，步行作为铁路客站与其他交通方式、城市空间衔接的最基础的联系方式，是站城融合背景下值得探索的内容之一。本文主要以站城融合作为研究的理论背景，将研究重点设置为铁路客站站域空间的步行体系。笔者通过对已建设完成的铁路客站实际案例进行调研分析，并结合站城融合背景下尚未完成的铁路客站案例的文献资料阅读，对站域步行体系作出初步的研究。以站域步行体系为核心，构建研究框架。通过对步行体系组织方式及空间形态研究，总结出铁路客站在站域空间设计中常见的组织方式及空间形态设计的注意点。本文首先在第二章界定了本次站域的空间范围，并概述了我国站域步行体系的演变时期。同时阐述了在研究中所发现的步行体系的功能作用。第三章主要是根据前一章节的功能作用，构建了站域空间步行体系的四大组成系统，即交通换乘系统、城市功能空间联系系统、城市公共空间步行系统以及景观步行系统。并在后续对各步行系统中的空间布局、构成要素及特征进行了分别的梳理，以便后续文章的研究。其次，第四章在对不同步行系统组织方式的研究中，借助调研案例进行了典型组织方式上的总结，阐述了形成不同组织方式的原因及交通组织特征。最后，在第五章中通过对重要的步行空间进行空间形态上的研究，阐述站域步行空间设计中的形态特点和空间塑造策略。收起

关键词 : 铁路客站站域空间步行体系站城融合

7. 钇铝石榴石透明陶瓷的低温制备及致密化机理研究

[学位论文] 王蓉蓉武汉理工大学 2017年博士导师: 朱教群;王玉成共135页

摘要 : 钇铝石榴石(Y3Al5O12, YAG)透明陶瓷具有优异的光学性质和良好的机械性能，是一种很有潜力的光功能陶瓷。高性能的透明陶瓷不仅需要优异的光学性能，其作为陶瓷具有的机械性能如硬度、抗热震性等要远优于一般的光学材料（如玻璃和单晶），而材料的机械... 展开钇铝石榴石(Y3Al5O12, YAG)透明陶瓷具有优异的光学性质和良好的机械性能，是一种很有潜力的光功能陶瓷。高性能的透明陶瓷不仅需要优异的光学性能，其作为陶瓷具有的机械性能如硬度、抗热震性等要远优于一般的光学材料（如玻璃和单晶），而材料的机械性能与晶粒大小密切相关。在不损害致密化的前提下，减小晶粒尺寸，有利于提高机械性能。目前制备YAG透明陶瓷最常用的方法是真空无压烧结和热等静压烧结。这两种烧结方法均需在高温下(>1700℃)长时间保温，导致晶粒长大，难以获得晶粒细小的显微结构。相变辅助放电等离子烧结作为一种低温烧结技术，在密实化过程中产生相变反应，并伴随着价键的断裂和重组，提高了物质粒子流动性，从而提高了致密化速率，适于在低温下制备显微结构均匀细小的透明陶瓷。本文首先采用溶胶-凝胶燃烧法结合场致快速合成技术制备了亚稳态的YAlO3(YAH)粉体。以此粉体为原料，采用相变辅助放电等离子烧结YAG透明陶瓷。烧结过程主要分为两个阶段：第一阶段为YAH向YAG转变的相变过程，并伴随着颗粒重排；第二阶段为YAG的致密化过程。在烧结过程中产生的YAH→YAG相变提高了致密化速率，降低了烧结温度。比较了YAH粉体与YAG粉体的致密化过程，YAH粉体的烧结温度较YAG粉体的烧结温度降低了300℃。主要的研究结论如下： (1)以溶胶-凝胶燃烧合成的前驱体粉体为原料，研究了场致快速合成的结晶过程，揭示了其与传统合成方法结晶过程的区别，讨论了合成工艺对结晶过程的影响规律。研究发现合成气氛和升温速率是影响结晶过程的重要因素。在缺氧环境下，YAH相作为一种中间相产生，随着温度的升高，YAH相转变为YAG相。利用场致快速合成技术在真空、快速升温(≥50℃/min)条件下合成YAG的结晶路径可表示为amorphous→YAH→YAG。传统慢速升温(5℃/min)条件下，结晶路径分为两种情况：在空气气氛下前驱体粉体直接从无定形相转变为YAG相，无中间相产生；在缺氧气氛下，YAH则作为一种伴生相与YAG相同时产生，其结晶过程可表示为amorphous→YAH+YAG→YAG。YAH相作为一种亚稳态物质，只有在快速升温、短保温时间条件下才能够得到结晶性良好的YAH粉体。 (2)研究了前驱体粉体的球磨工艺对YAH粉体的合成及烧结致密化的影响，讨论了YAH相转化为YAG相的相变过程及控制方法。基于YAH粉体的热分析结果，确定了YAH→YAG相变过程受球磨工艺的影响规律。研究表明相变激活能随着球磨转速的增大而减小。随着相变激活能的降低，YAH粉体的烧结过程由两步致密化突变为一步快速致密化，烧结过程中的快速收缩致使样品边缘的致密化速率大于样品中间的致密化速率，密实的边缘阻碍样品内部继续致密化，样品内部留下大的气孔，影响最终样品的显微结构和光学性能。选择合适的球磨工艺既能够促进相变反应，同时促进致密化过程。通过优化球磨工艺可以获得显微结构均匀的YAG块体。 (3)以YAH粉体为原料，采用相变辅助放电等离子烧结技术制备YAG陶瓷。系统研究了烧结温度、保温时间、压力及升温速率等工艺参数与显微结构和光学透过率的关系。在80 MPa压力下，以10℃/min的升温速率加热至1050℃并保温20 min，所得块体晶粒细小均匀，平均晶粒尺寸为375 nm，硬度为16.67±0.7 GPa，在680 nm和1000 nm处的直线透过率分别为55%和71%。 (4)基于Coble蠕变模型和S.L. Kang的气孔拖拽蠕变模型，研究了相变辅助放电等离子烧结YAG陶瓷的致密化机制及晶粒生长机制。研究结果表明低温慢速烧结YAG陶瓷的致密化机制主要为晶界扩散。随着烧结的进行，烧结末期YAG的晶粒长大不可避免，其晶粒生长机制主要为晶界迁移。收起

关键词 : 钇铝石榴石透明陶瓷 YAH粉体低温烧结场致快速合成致密化速率

8. 荣成（人和）方言初探

[学位论文] 王蓉蓉苏州大学 2011年硕士导师: 汪平共133页

摘要 : 荣成市位于山东半岛最东端，属于威海市。在《中国语言地图集》中，荣成方言属于胶辽官话。此次调查主要描写分析了荣成方言的语音和特色词汇：一、语音部分，介绍了荣成方言的音系及其特点、声韵调的配合关系、与普通话及中古音的比较、文白异... 展开

关键词 : 荣成方言胶辽官话特色词汇文白异读

9. 大气水凝物中THz波和红外波的辐射传输特性

[学位论文] 王蓉蓉西安电子科技大学 2014年博士导师: 吴振森共123页

摘要 : 随着太赫兹辐射源、太赫兹探测和成像技术的发展，太赫兹波的辐射传输特性在宽带通信、雷达探测、电子对抗、电磁武器等领域倍受关注。太赫兹波段在空间大气水凝物中的辐射传输特性，对研究空间环境太赫兹雷达探测、通信等领域具有重要的应用价值，是... 展开随着太赫兹辐射源、太赫兹探测和成像技术的发展，太赫兹波的辐射传输特性在宽带通信、雷达探测、电子对抗、电磁武器等领域倍受关注。太赫兹波段在空间大气水凝物中的辐射传输特性，对研究空间环境太赫兹雷达探测、通信等领域具有重要的应用价值，是建立战场环境中太赫兹波/脉冲的散射和传输仿真计算模型的基础。本论文基于地球大气传输概况及波在离散随机介质中的传输理论，研究了太赫兹波、红外波在大气水凝物中的辐射传输特性。得到了不同模型下的太赫兹波段水的复折射率随频率的变化关系；基于时变离散随机介质的脉冲传播理论分析了红外、太赫兹信号在不同浓度雾中的双频互相关函数；对比了太赫兹脉冲波在水凝物中的展宽、畸变和时延，得到了红外高斯脉冲在雾天气、沙尘性气溶胶中的时延，以及太赫兹高斯脉冲在雨中的时延；考虑单次散射近似理论及多次散射理论，运用蒙特卡罗法得到了红外、太赫兹信号在雨中的衰减特性及在雾中的多次散射特性；考虑雾滴粒子谱分布，得到了红外、太赫兹信号的透过率、反射率、前向后向散射强度随角度的变化关系等。论文的主要内容如下： 1.分析了气体分子能级跃迁与光谱特性，比较了大气典型气体分子的吸收谱线，对比发现大气中水汽和氧气对太赫兹波的吸收不可忽略。水凝物是由水（降雨、雾、云）和冰组成的。由此知道水凝物对于太赫兹波的传输影响较大。用几种不同的模型得到了太赫兹波段水的复折射率随频率的变化，并与HITRAN数据库提取值做了对比。 2.计算了太赫兹波段大气背景辐射特性，给出了0.1~1THz频段内的大气背景辐射亮温。该工作对于研究随机介质中太赫兹波的辐射传输特性，掌握不同温度、能见度等条件下，太赫兹频段大气透过率窗口的位置和宽度，及促进该频段在传输、通信、雷达探测等方面的应用具有重要意义。 3.基于时变离散随机介质的脉冲传播理论，详细分析了红外波、太赫兹波在雾中的双频互相关函数，对比了不同能见度、频率下信号的双频互相关函数的幅度及相位变化；得到了高斯脉冲输入时信号的展宽和畸变及时延，对比了红外高斯脉冲在雾天气、沙尘性气溶胶中的时延，以及太赫兹高斯脉冲在雨中的时延。结果表明，脉冲时延和输入脉冲波长、传输距离以及粒子浓度有关。该结果对于研究修正脉冲信号在大气水凝物中传输产生的形变具有重要的理论意义。 4.基于降雨的物理特性，重点分析了单个球形雨滴粒子的消光特性、散射特性及相函数，对比了考虑不同雨滴粒子谱时，红外、太赫兹信号的衰减。所得不同雨滴谱分布下信号的衰减与 ITU-R数据做了对比。该结果为研究太赫兹频段在雨介质中的信号衰减实验提供了理论参考。 5.基于雾的物理特性，详细分析了红外信号、太赫兹信号在雾中的单次散射、多次散射特性，重点分析了单个雾滴粒子的消光特性、散射特性，以及考虑雾滴粒子群时信号的透过率、反射率、前向后向散射强度随角度的变化关系等。以上工作对于分析雾天气对于不同波段信号的影响效果，扩展现有通信系统的频率选择，以及促进通信技术发展和应用都有着重要的参考价值。收起

关键词 : 太赫兹波段大气水凝物红外波双频互相关函数辐射传输特性

10. 重庆市主城区老年人长期照护需求评估分级标准构建

[学位论文] 王蓉蓉重庆医科大学 2020年硕士导师: 王富兰共122页

摘要 : 目的： 1.基于《国际功能、残疾和健康分类》概念框架和马斯洛需求层次理论构建重庆市主城区老年人长期照护需求评估分级指标体系，并在此基础上设计调查问卷，以此进行指标实证调查，验证评估工具的可靠性及稳定性，为下一步实现老年人长期照护... 展开目的： 1.基于《国际功能、残疾和健康分类》概念框架和马斯洛需求层次理论构建重庆市主城区老年人长期照护需求评估分级指标体系，并在此基础上设计调查问卷，以此进行指标实证调查，验证评估工具的可靠性及稳定性，为下一步实现老年人长期照护需求等级的划分提供数据支持。 2.界定重庆市主城区老年人长期照护需求等级，描述老年人长期照护需求及相应等级照护服务内容，为形成重庆市统一老年人长期照护需求评估分级标准提供依据。方法： 1.以《国际功能、残疾和健康分类》概念框架和马斯洛需求层次理论为理论指导，通过文献分析、半结构式访谈，形成初始重庆市主城区老年人长期照护需求评估分级指标体系。 2.通过每轮19名专家的2轮专家函询筛选评估分级指标体系的最终条目，并以专家评分法计算指标权重值。 3.在指标体系基础上，经过5名专家的2轮征询形成重庆市主城区老年人长期照护需求评估分级问卷。采用分层随机抽样法，从重庆市主城九个行政区中抽取渝中区、九龙坡区、大渡口区、巴南区中的4个社区、5个养老机构的464名老年人作为评估对象。通过一致性信度、折半信度、项目分析、内容效度、结构效度评价问卷的信效度。 4.根据问卷调查的结果，采用秩和比综合评价法初步确定老年人长期照护需求等级，在此基础上经调试确立等级界值。 5.在需求评估等级标准形成的基础上，采用对应分析聚焦不同照护需求等级老年人的主要照护问题。结果： 1.结合文献分析、半结构式访谈和课题组讨论结果，形成的初始重庆市主城区老年人长期照护需求评估分级指标体系包括躯体功能、活动能力、精神心理状态、社会功能4项一级指标，10项二级指标和37项三级指标。 2.两轮专家函询表回收率皆为100%，专家权威系数为0.945，各级指标的专家协调系数为0.394～0.453(P<0.05)，最终确立的需求评估分级指标体系包括躯体功能、自理能力、精神心理状态、社会功能4个一级指标，12个二级指标，40个三级指标。 3.老年人长期照护需求评估分级问卷包括躯体功能、自理能力、精神心理状态、社会功能4个部分，共40个条目。评估问卷的有效回收率为98.28%，总的内部一致性系数和折半信度分别为0.890和0.809，各子问卷的内部一致性系数为0.641～0.808；问卷内容效度指数为1，各维度与所属子问卷总分相关系数为0.464～0.956；问卷的结构效度经验证性因子分析显示模型适配度良好，各分问卷结构稳定。 4.重庆市主城区老年人长期照护需求被划分为三级，具体为：问卷评估得分在0～31.9分范围内为轻度依赖，在32～58.9分范围内为中度依赖，在59～159分范围内为重度依赖。 5.轻度依赖类老年人出现药物管理、拒绝照护类问题的比例相对较高，中度依赖类老年人与平衡、注意力、抑郁、社会活动参与照护问题聚集性大，进食、修饰、洗澡、如厕、穿脱衣、特殊护理项目与重度依赖照护老人有较大聚集性。结论： 1.本研究构建的重庆市主城区老年人长期照护需求评估分级指标体系包括躯体功能、自理能力、精神心理状态、社会功能4个一级指标，12个二级指标，40个三级指标，经转化为问卷应用显示信效度良好，可作为重庆市不同长期照护环境中老年人照护需求动态性监测的评估工具。 2.本研究依据实证数据所形成的重庆市主城区老年人长期照护需求评估分级标准包含轻度依赖、中度依赖、重度依赖3级，照护需求评估分数越高，照护依赖程度就越高。且不同照护依赖等级的老年人所需长期照护服务内容存在差异，有利于指导照护人员对老年人进行分级照护和管理。收起

关键词 : 长期照护需求评估指标体系老年人