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[学位论文] 刘晓蕾山西医科大学 2018年博士导师: 李新毅共203页

摘要 : 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)，是一种常见的神经系统退行性疾病，以进行性记忆力减退、认识功能障碍、执行能力障碍、失语、失用、视空间障碍以及精神行为异常为主要临床特征。随着世界人口老龄化程度的不断加剧，AD的发病率逐年升高，在... 展开阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)，是一种常见的神经系统退行性疾病，以进行性记忆力减退、认识功能障碍、执行能力障碍、失语、失用、视空间障碍以及精神行为异常为主要临床特征。随着世界人口老龄化程度的不断加剧，AD的发病率逐年升高，在老年人群中 AD 已成为继心脑血管疾病和恶性肿瘤之后的第 4 位致死原因，给社会和家庭带来了沉重的负担。AD的发病机制复杂，至今尚未明确，目前存在的假说包括β淀粉样蛋白毒性学说、Tau蛋白代谢异常学说、基因突变学说、胆碱能缺乏学说、兴奋性氨基酸毒性学说、神经炎症学说、钙超载学说、代谢综合征学说等。因其发病机制复杂，AD仍缺乏有效的治疗手段。目前经FDA批准用于治疗AD的药物只有多奈哌齐和美金刚，然而这两种药物只能改变神经递质水平，不能改变AD的病理过程、阻止AD的病情进展，因此对AD的治疗仍是世界范围内医学研究者所面临的挑战之一。研究证实AD患者脑内小胶质细胞在Aβ刺激下激活，被长期、慢性活化，进而合成和释放大量炎症介质，最终造成神经元的损伤和丢失。存在于小胶质细胞中的NF-κB 作为多效性的核转录因子，能够调控多种炎症因子的信号转导，其中一条重要的炎症信号通路就是NF-κB-NLRP3炎症体-caspase-1-IL-1β。NF-κB被激活后转移到细胞核内，一方面诱导IL-1β基因表达，产生大量无活性的IL-1β前体(pro-IL-1β)，另一方面诱导NLRP3表达。NLRP3在外界损伤刺激下，募集接头蛋白ASC和效应蛋白 caspase-1 组成 NLRP3 炎症体，后者会将 pro-IL-1β 剪切为有强烈促炎活性的 IL-1β，进而诱导其他炎症因子、趋化因子等的合成，导致脑内的炎症级联反应。目前已有多项研究证实，抑制 NLRP3 炎症体可以减少 Aβ 的沉积，改善认知功能。因此， NLRP3炎症小体成为了目前AD防治研究领域的热点。临床流行病研究显示，长期服用非甾体抗炎药物(nonsteroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDs)的患者AD的发病率明显减低。这一现象提示我们：以调控神经炎症为靶点来治疗 AD，可能会获得良好的治疗效果。然而，目前已开展的针对 NSAIDs治疗AD的数项临床试验大多因药物的胃肠道副作用而中止，从而限制了抗炎疗法在AD治疗领域中的探索性研究。中医药是中华民族的伟大瑰宝之一，以其低毒、调节全身机体功能的整体观，以及多靶点、多环节的作用特点，在众多疾病的防治中起到了良好的效果。基于对痴呆的中医病机的理解和阅读经典中医古籍，结合前期的研究成果，我们在古代经方“不忘散”基础上，根据单味中药之间的有机配伍和协同作用，构建了由远志、石菖蒲、人参、茯苓、茯神、当归、白术和黄连组成的“加味不忘散”。该组方更加合理全面，既扶正又祛邪，切中、兼顾了AD的主要病机。目前已应用于临床，收到了较好的效果。在前期研究基础上，本研究以神经免疫炎症学说为根据，以信号转导通路途径为切入点，从体内实验和体外实验两个层次，验证加味不忘散治疗AD的有效性，并进一步观察该组方对AD神经炎症的影响。第一部分加味不忘散对AD模型大鼠学习记忆功能及海马组织结构的影响目的： 1. 观察加味不忘散对AD模型大鼠学习记忆功能影响； 2. 观察加味不忘散对AD模型大鼠海马组织结构和神经元凋亡的影响。方法： 1. 将SD大鼠分为假手术组、AD模型组、加味不忘散低剂量干预组、加味不忘散中剂量干预组、加味不忘散高剂量干预组和MCC950干预组； 2. 通过脑立体定位技术向双侧海马注射Aβ1-42制备AD大鼠模型； 3. 运用Morris水迷宫试验评估大鼠学习记忆功能； 4. 大脑切片进行HE染色，在光镜下观察大鼠海马的组织结构； 5. 利用透射电镜观察海马超微结构变化，并计数突触数量进行比较； 6. 运用TUNEL染色法观察海马神经元凋亡情况。结果： 1. 加味不忘散对AD模型大鼠学习记忆试验的影响：假手术组大鼠第1天到第5天的逃避潜伏期分别为 69.79±13.54 s、52.16±3.87 s、34.75±17.10 s、19.71±5.39 s、10.57±3.85 s。AD 模型组大鼠第 1 天到第 5 天的逃避潜伏期分别为 79.21±16.37s、74.46±5.58 s、65.00±8.62 s、41.82±8.87 s、28.96±6.73 s，与假手术组相比，在第2-5天的逃避潜伏期均明显延长(p<0.01)。加味不忘散低剂量干预组大鼠第1天到第5天的逃避潜伏期分别为77.96±13.83 s、75.78±7.92 s、62.91±7.99 s、38.82±10.93 s、25.75±6.77 s，与AD模型组相比无显著差异(p > 0.05)。加味不忘散中剂量干预组大鼠第1天到第5天的逃避潜伏期分别为76.21±12.80 s、64.28±8.37 s、50.87±8.61 s、30.82±5.33 s、19.82±2.68 s，第2-5天的逃避潜伏期较AD模型组和加味不忘散低剂量干预组明显缩短(p < 0.05)。加味不忘散高剂量干预组大鼠第 1 天到第 5 天的逃避潜伏期分别为70.42±14.08 s、54.74±10.40 s、38.07±8.31 s、22.59±5.42 s、14.39±3.51 s，第2-5天的逃避潜伏期较AD模型组和加味不忘散低剂量干预组明显缩短(p<0.01)，较加味不忘散中剂量干预组也缩短(p<0.01)。MCC950干预组大鼠第1天到第5天的逃避潜伏期分别为71.65±16.03 s、54.51±10.01 s、39.36±7.14 s、22.24±5.11 s、13.93±3.68 s，第2-5天的逃避潜伏期较AD模型组和加味不忘散低剂量干预组明显缩短(p<0.01)，较加味不忘散中剂量干预组也缩短(p<0.01)，与加味不忘散高剂量干预组相比无显著差异（p值分别为0.938、0.815、0.928、0.857）。 2. 加味不忘散对AD模型大鼠空间探索能力的影响：假手术组、AD模型组、加味不忘散低、中、高剂量干预组和MCC950干预组大鼠的原平台象限停留时间分别为41.14±4.22 s、23.28±8.34 s、24.57±7.33 s、31.71±6.97 s、39.43±5.44 s、39.15±4.06 s。其中AD模型组大鼠的原平台象限停留时间明显短于假手术组(p < 0.001)，加味不忘散低剂量干预组大鼠的原平台象限停留时间也明显短于假手术组(p < 0.001)，与 AD模型组无明显差异(p=0.703)。加味不忘散中剂量组大鼠的原平台象限停留时间较AD模型组(p=0.016)和加味不忘散低剂量干预组(p=0.040)均有所延长。加味不忘散高剂量组大鼠的原平台象限停留时间较AD模型组(p < 0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p=0.027)均延长。MCC950干预组大鼠的原平台象限停留时间较AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p = 0.033)均延长，与加味不忘散高剂量组相比无统计学差异(p=0.933)。假手术组、AD模型组、加味不忘散低、中、高剂量干预组和MCC950干预组大鼠的跨台次数分别为 12.71±2.63、5.29±1.38、7.43±1.62、9.71±1.50、12.14±2.41、12.29±3.39。其中AD模型组大鼠的跨台次数明显少于假手术组(p<0.001)，加味不忘散低剂量干预组大鼠的跨台次数也明显少于假手术组(p < 0.001)，与AD模型组无明显差异(p=0.056)。加味不忘散中剂量组大鼠的跨台次数较AD模型组(p<0.001)和加味不忘散低剂量干预组(p=0.042)均增多。加味不忘散高剂量组大鼠的跨台次数较AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p=0.031)均增多。MCC950干预组大鼠的跨台次数较AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p=0.023)均显著增多，与加味不忘散高剂量组相比无统计学差异(p=0.895)。 3. 加味不忘散对AD模型大鼠海马组织结构的影响：HE染色显示，AD模型组和加味不忘散低剂量组海马神经元数量明显减少，细胞体积缩小，核固缩，排列紊乱；加味不忘散中、高剂量干预组和 MCC950 大鼠海马神经元数量明显增多、排列变整齐、异常细胞减少。 4. 加味不忘散对AD模型大鼠海马超微结构的影响：通过透射电镜观察到，AD模型组大鼠海马大量神经元变性、坏死，核固缩，线粒体肿胀明显。与AD模型组相比，随着加味不忘散干预剂量的增加，大鼠海马神经元形态逐渐变完整，变性或坏死的神经元逐渐减少，细胞浆内细胞器数量逐渐增多、形态逐渐转为正常。 5. 加味不忘散对 AD 模型大鼠海马突触结构和数量的影响：通过透射电镜观察海马突触结构发现，AD模型组大鼠海马内的突触结构被破坏，突触结构不完整，突触间隙增大，突触后膜内的致密物质变薄。与AD模型组相比，随着加味不忘散干预剂量的增加，海马内突触结构逐渐由不完整变完整，突触间隙由大变小，突触后膜内的致密物也由少变多。假手术组、AD模型组、加味不忘散低、中、高剂量干预组和MCC950干预组大鼠海马的突触数量分别为27.31±6.99、10.76±3.19、13.64±3.53、19.61±3.69、25.77±7.21、24.93±5.97。其中AD模型组大鼠海马的突触数量较假手术组明显减少(p<0.001)，加味不忘散低剂量干预组大鼠海马的突触数量也明显少于假手术组(p < 0.001)，与 AD模型组无明显差异(p = 0.248)。加味不忘散中剂量组大鼠海马的突触数量较AD模型组(p=0.001)和加味不忘散低剂量干预组(p=0.015)均增多。加味不忘散高剂量组大鼠海马的突触数量较AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p = 0.013)均增多。MCC950 干预组大鼠海马的突触数量较 AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和加味不忘散中剂量干预组(p=0.031)均显著增多，与加味不忘散高剂量组相比无统计学差异(p=0.709)。可见，加味不忘散对AD模型大鼠突触结构和数量具有改善作用，并具有剂量依赖性。 6. 加味不忘散对AD模型大鼠海马神经元凋亡的影响：TUNEL染色显示，假手术组、AD模型组、加味不忘散低、中、高剂量干预组和MCC950干预组大鼠海马的细胞凋亡率分别为 5.50±2.13 %、38.06±12.87 %、31.33±11.57 %、22.71±7.55 %、16.43±4.25%、14.38±5.28%。AD模型组可见到大量凋亡细胞，与假手术组相比明显增多(p < 0.001)。加味不忘散低剂量干预组大鼠海马内也可见到大量凋亡细胞与 AD模型组无明显差异(p=0.623)。加味不忘散中剂量干预组大鼠海马凋亡细胞，较AD模型组明显减少(p < 0.001)，较加味不忘散低剂量干预组有减少趋势，但无显著性差异(p = 0.058)。加味不忘散高剂量干预组大鼠海马的凋亡细胞明显少于较AD模型组(p<0.001)、加味不忘散低剂量干预组(p<0.001)和中剂量干预组 (p=0.16)。MCC950干预组大鼠海马的凋亡细胞数较AD模型组明显减少(p < 0.001)，与加味不忘散高剂量干预组相比无显著差异(p= 收起

关键词 : 加味不忘散阿尔茨海默病小胶质细胞学习记忆抗炎机制

2. ROS介导的NLRP3-caspase-1-IL-1β/IL-18信号通路改变在PM2.5暴露致认知功能下降中的作用

[学位论文] 赵星星山西医科大学 2021年博士导师: 李新毅共140页

摘要 : 随着经济的快速发展，空气污染日益显著。近几十年以来，越来越多的学者关注空气中细颗粒物（FineParticulateMatter，PM2.5）对人体健康的影响。目前的证据已充分证明，PM2.5暴露与心肺疾病的发病率及死亡率相关，其机制研究主要集中于氧化应激和炎症... 展开随着经济的快速发展，空气污染日益显著。近几十年以来，越来越多的学者关注空气中细颗粒物（FineParticulateMatter，PM2.5）对人体健康的影响。目前的证据已充分证明，PM2.5暴露与心肺疾病的发病率及死亡率相关，其机制研究主要集中于氧化应激和炎症。最近一些流行病学研究结果显示PM2.5与中枢神经系统疾病如神经退行性变、脑血管病和神经发育障碍等密切相关，尤其是PM2.5对认知功能的影响已经成为当今研究的热点。然而PM2.5是如何影响大脑的认知功能，其作用机制远未阐明，探索并明确其机制对PM2.5的防治具有非常重要的指导意义。本课题拟通过气管滴注方法构建PM2.5暴露小鼠模型，探索PM2.5对认知功能的影响及其分子机制，同时观察抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（N-Acetyl-L-cysteine,NAC）能否改善PM2.5对认知的损伤作用并探讨其可能的调控机制。目的： 1.观察PM2.5暴露对小鼠学习记忆能力的影响； 2.研究PM2.5暴露对小鼠海马组织结构、超微结构，血脑屏障通透性及胶质细胞活化的影响； 3.探索PM2.5暴露导致小鼠认知功能变化的分子机制及NAC能否改善PM2.5所致认知功能变化及其调控机制。方法： 1.以雄性C57BL/6J小鼠为实验动物随机分为对照组，PM2.5低、中、高剂量组及PM2.5高剂量加NAC组，通过气管滴注的方法构建PM2.5暴露模型，每三天滴注一次，共8次； 2.通过Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力； 3.采用HE染色法观察小鼠海马组织结构的变化； 4.通过透射电镜观察小鼠海马超微结构的改变； 5.利用荧光显微镜观察小鼠脑组织冰冻切片伊文思蓝外渗的情况，利用免疫荧光法检测:小鼠海马组织星形胶质细胞和小胶质细胞标志物GFAP及Iba-1的表达、紧密连接蛋白ZO-1和occludin表达及海马组织ROS水平； 6.采用试剂盒检测小鼠海马氧化应激指标SOD、MDA、GSH-PX；运用ELISA技术检测海马内氧化应激指标8-OHdG及小鼠血清和海马内炎症介质TNF-α、IL-1β和IL-6； 7.应用qRT-PCR技术检测小鼠海马组织中NLPR3、caspase-1、IL-1β和IL-18mRNA的水平； 8.通过Westernblot技术检测海马组织中ZO-1、occludin、NLPR3、caspase-1、IL-1β和IL-18的蛋白水平。结果： 1.在Morris水迷宫定位巡航实验中：随着训练天数的延长，各组小鼠的平均逃避潜伏期均缩短。对照组小鼠第1-5天的平均逃避潜伏期分别为55.67±2.17s、49.06±4.15s、38.38±4.46s、29.04±2.26s、16.75±2.76s。PM2.5低剂量组小鼠第1-5天的平均逃避潜伏期分别为55.27±1.47s、50.13±3.37s、41.96±6.99s、30.06±3.90s、17.27±2.67s,与对照组相比无统计学差异。PM2.5中剂量组小鼠第1-5天的平均逃避潜伏期分别为55.58±2.28s、51.86±2.84s、44.10±3.64s、33.55±1.55s、21.20±2.04s，第3-5天平均逃避潜伏期较对照组明显延长(Plt;0.05)。PM2.5高剂量组小鼠第1-5天的平均逃避潜伏期分别为56.74±1.87s、51.09±4.62s、46.80±4.43s、38.16±2.95s、31.44±3.20s，其中第3-5天平均逃避潜伏期较对照组显著延长(Plt;0.01)。在定位巡航的第4-5天PM2.5高剂量组小鼠的平均逃避潜伏期较PM2.5中剂量组延长(Plt;0.01)，PM2.5中剂量组小鼠平均逃避潜伏期较PM2.5低剂量组延长(Plt;0.05)，提示PM2.5暴露对小鼠空间学习能力影响具有剂量依赖性。PM2.5高剂量+NAC组第1-5天平均逃避潜伏期分别为：55.61±3.44s、50.16±4.42s、42.71±2.36s、32.36±1.98s、22.16±2.14s，第3-5天的平均逃避潜伏期较PM2.5高剂量组明显缩短（Plt;0.05）,但仍高于对照组（Plt;0.05）。 2.在Morris水迷宫空间探索实验中：对照组、PM2.5低、中、高剂量组小鼠目标象限停留时间分别为26.91±4.01s、25.1±3.65s、21.33±3.67s、17.23±3.21s。其中PM2.5低剂量组与对照组相比目标象限停留时间无统计学差异；PM2.5中剂量组小鼠目标象限停留时间较对照组明显缩短（Plt;0.01）；PM2.5高剂量组小鼠目标象限停留时间较对照组显著缩短(Plt;0.001)；其中PM2.5高剂量组小鼠在目标象限停留时间最短。PM2.5高剂量+NAC组小鼠在目标象限停留时间为22.03±4.91s，较PM2.5高剂量组明显延长（Plt;0.05）,仍短于对照组（Plt;0.05）。在探索实验中，对照组、PM2.5低、中、高剂量组小鼠跨台次数依次为7.88±1.46、7.75±0.71、6.25±1.67、4.63±0.92。其中PM2.5低剂量组小鼠跨台次数与对照组相比无统计学差异（Pgt;0.05）。PM2.5中、高剂量组小鼠跨台次数较对照组明显减少(Plt;0.05，Plt;0.001)。PM2.5高剂量+NAC组小鼠跨台次数比PM2.5高剂量组明显增加（Plt;0.05），但仍少于对照组（Plt;0.05）。 3.采用HE染色观察小鼠海马组织结构改变：对照组小鼠海马CA1区锥体细胞层结构致密，排列整齐；随着PM2.5暴露浓度的增加，CA1区锥体细胞层结构逐渐松散，并且排列逐渐紊乱。PM2.5高剂量+NAC组CA1区病理改变较PM2.5高剂量组有所改善，锥体细胞层结构较为紧密，排列尚整齐。 4.通过透射电镜观察海马超微结构的改变：与对照组对比，随着PM2.5暴露剂量升高小鼠海马神经元细胞出现不同程度的水肿、细胞核形态不规则甚至畸形、线粒体肿胀、粗面内质网和高尔基体扩张，其中以PM2.5高剂量组导致损伤程度最为严重。PM2.5高剂量+NAC组较PM2.5高剂量组海马组织病理损伤得到明显改善。与对照组相比，随着PM2.5暴露浓度增加，小鼠海马区突触数量逐渐减少，突触结构逐渐变得不完整，突触后致密物逐渐变薄，活性区长度逐渐变短，突触间隙逐渐变宽。PM2.5高剂量+NAC组较PM2.5高剂量组突触结构相对完整，突触数量较前有所增加。 5.在血脑屏障通透性测定实验中：（1）荧光显微镜下发现PM2.5低、中、高剂量组渗入脑组织中伊文思蓝量较对照组逐渐增多，其中PM2.5高剂量组最为显著。PM2.5高剂量+NAC组渗入脑组织中伊文思蓝量较PM2.5高剂量组明显减少。（2）Westernblot结果显示：随着PM2.5暴露浓度的增高，ZO-1和occludin蛋白表达水平逐渐下降(Plt;0.01)。PM2.5高剂量+NAC组ZO-1和occludin蛋白表达水平较PM2.5高剂量组明显升高（Plt;0.05），但仍少于对照组（Plt;0.05）。免疫荧光平均光密度值结果分析显示：ZO-1和occludin表达水平变化趋势同Westernblot结果基本一致。 6.在免疫荧光检测胶质细胞的实验中：免疫荧光平均光密度值分析显示，与对照组相比，PM2.5低剂量组GFAP、Iba-1表达量无统计学差异，PM2.5中、高剂量组GFAP、Iba-1表达量显著升高（Plt;0.05）。PM2.5高剂量+NAC组GFAP、Iba-1表达量较PM2.5高剂量组明显下降（Plt;0.01），较仍高于对照组（Plt;0.01）。 7.海马内氧化应激水平的测定：随着PM2.5暴露剂量增高，小鼠海马内ROS、MDA、8-OHdG水平逐渐升高，SOD、GSH-PX水平逐渐下降。PM2.5高剂量+NAC组海马内ROS、MDA、8-OHdG水平较PM2.5高剂量组明显下降（Plt;0.05）,SOD、GSH-PX水平较PM2.5高剂量组明显上升（Plt;0.01）。 8.通过ELISA检测血清和海马炎症水平：PM2.5低剂量组小鼠血清和海马内炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平与对照组相比无统计学差异，PM2.5中、高剂量组血清和海马内炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6较对照组明显升高（Plt;0.05）。 9.通过分子生物学技术检测海马内NLRP3、caspase-1、IL-1β和L-18的改变：qRT-PCR和Westernblot结果显示，随着PM2.5暴露浓度增高，海马内NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18的转录和表达水平逐渐升高，其中以PM2.5高剂量组最为显著（Plt;0.001）。给予NAC后该组小鼠NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18的转录和表达水平较PM2.5高剂量组明显下降（Plt;0.05），但仍高于对照组（Plt;0.05）。结论： 1.PM2.5暴露可导致小鼠的学习记忆能力下降，呈剂量依赖性。 2.PM2.5暴露可导致小鼠海马组织病理损伤、胶质细胞活化、氧化应激水平的升高，血脑屏障通透性增加。 3.PM2.5暴露可提高小鼠血清和海马内炎症介质水平，激活NLRP3炎症体-caspase-1-IL-1β/IL-18通路。 4.NAC可通过抑制ROS下调PM2.5所致NLRP3炎症体-caspase-1-IL-1β/IL-18通路激活进而改善认知功能。收起

关键词 : PM2.5 信号通路认知功能 ROS NLRP3炎症体 NAC

3. 前庭神经炎患者临床特征的真实世界观察

[学位论文] 李紫东山西医科大学 2023年硕士导师: 李新毅共70页

摘要 : 目的: 探讨前庭神经炎患者病程中临床特征的动态变化以明确其内在规律，分析不同因素对临床表现和预后的影响，并探寻可以准确判断患者病情变化和预后的指标。方法: 本研究属于前瞻性的观察性研究。我们观察了 41例就诊于山西医科大学... 展开目的: 探讨前庭神经炎患者病程中临床特征的动态变化以明确其内在规律，分析不同因素对临床表现和预后的影响，并探寻可以准确判断患者病情变化和预后的指标。方法: 本研究属于前瞻性的观察性研究。我们观察了 41例就诊于山西医科大学第三医院神经内科的急性单侧前庭神经炎患者病程中临床特征的变化。对所有患者进行了基本临床信息及其他疾病史采集，并详细记录现病史、神经系统体格检查，包括自发眼震、床旁头脉冲试验、Fukuda试验、闭目难立征等临床体征;进行了眩晕残障量表及欧洲眩晕评估量表的评估和视频头脉冲试验、双温试验、前庭诱发肌源性电位等检查。首次信息采集均在眩晕症状出现3日内完成，并在疾病发生后4周及12周患者复诊时再次进行症状学评估、体格检查和前庭功能检查。分析前庭神经炎患者在不同疾病阶段主观眩晕症状的变化，静态、动态前庭功能受损恢复程度的整体变化趋势及其差异，并对各个指标变化趋势之间进行差异分析，解释其临床意义。分析激素治疗和前庭康复等常见的干预措施对于疾病预后的影响。最后，利用多元线性回归分析的方法确定与主观量化评估结果存在线性回归关系的客观体征或辅助检查结果，并对结果进行进一步的相关性分析。所有数据采用SPSS26.0统计软件进行统计学分析，所有检验均为双侧检验，P＜0.05被认为具有统计学意义。结果: 前庭神经炎患者眩晕残障量表总分、自发性眼球震颤慢相水平角速度、头脉冲试验异常率、Fukuda试验阳性率、闭目难立征阳性率、双温试验中的半规管轻瘫值、视频头脉冲试验中单侧水平半规管增益减低和双侧增益不对称比等在发病时、发病后4周时和12周时两两之间均存在统计学差异(P＜0.001)。以Fukuda试验与头脉冲试验阳性存在时间超过12周分组无统计学差异，而以闭目难立征与头脉冲试验阳性持续时间超过12周分组存在统计学差异(x2=14.519,P＜0.001)。发病后12周时，41例前庭神经炎患者中28例存在静态前庭功能受损，27例患者存在动态前庭功能受损，经统计学分析，两组中动态、静态前庭功能受损患者构成比存在统计学差异(x2=8.26,P＜0.05)。发病4周时，增益不对称比异常组中增益减低的构成比与增益不对称比正常组中增益减低的构成比存在显著统计学差异(x2=7.345,P＜0.01)。发病后4周时，有基础疾病组与无基础疾病组的欧洲眩晕评估量表得分(t=2.252,P＜0.05)、增益值(t=2.028,P＜0.05)、半规管轻瘫值(t=2.234,P＜0.05)存在统计学差异，无基础疾病组欧洲眩晕评估量表得分、半规管轻瘫值、增益值恢复较好。发病后12周时，有基础疾病组与无基础疾病组的眩晕残障量表总分存在统计学差异(t=2.150,P＜0.05),有基础疾病组的眩晕残障量表总分恢复较差，而欧洲眩晕评估量表得分、增益值、半规管轻瘫值组间均无显著统计学差异。发病后4周时，激素治疗组与无激素治疗组的眩晕残障量表总分变化值(t=2.956,P＜0.01)、欧洲眩晕评估量表得分变化值(t=3.575,P＜0.01)、患侧水平半规管增益变化值(t=2.515,P＜0.05)、半规管轻瘫值变化值(t=2.168,P＜0.05)存在统计学差异，激素治疗组上述指标恢复程度较好。发病后12周时，两组间仅欧洲眩晕评估量表得分变化值(t=3.198,P＜0.01)之间存在统计学差异，余各项观察指标均无显著统计学差异。经逐步回归分析，发病后4周时和12周时眩晕残障量表得分变化值(t=7.406,P＜0.001)、欧洲眩晕评估量表变化值(t=8.470,P＜0.001)均与视频头脉冲试验中患侧水平半规管增益变化值呈正线性相关。而以患侧水平半规管增益变化值为因变量，发病后4周和12周时增益的变化值主要与欧洲眩晕评估量表变化值呈正线性相关(t=7.669,P＜0.001)。结论: 前庭神经炎患者的主观眩晕症状、阳性神经系统体征及异常客观辅助检查结果随病程发展均逐渐好转，尤其是发病后4周内恢复程度较大。前庭神经炎患者病程中，视频头脉冲试验中单侧增益减低相对于双温试验的半规管轻瘫值、前庭诱发肌源性电位中振幅不对称比和视频头脉冲试验中的双侧增益不对称比均更敏感。有无前驱感染病史、不稳感改善时间长短和是否合并基础疾病等因素，以及是否接受激素治疗和前庭康复等治疗措施并不影响前庭神经炎患者中长期的预后。而无基础疾病以及接受激素治疗可以显著促进患者短期内的客观前庭功能检查结果的恢复，而对主观眩晕症状改善需要更多的证据支持。可以将视频头脉冲试验中患侧水平半规管增益值恢复情况作为前庭症状改善程度的参考指标。收起

关键词 : 前庭神经炎临床特征病情变化预后评估

4. 免疫营养对急性重症脑卒中患者营养、免疫及病情变化的影响

[学位论文] 茹妍妮山西医科大学 2016年硕士导师: 李新毅共59页

摘要 : 目的： 1.研究免疫增强型肠内营养在急性重症脑卒中患者临床治疗中的意义。比较免疫增强型肠内营养和标准肠内营养对急性重症脑卒中患者营养、免疫及病情变化的影响。 2.分析重症脑卒中患者急性期血清皮质醇变化规律及其与蛋白质代谢指标之... 展开目的： 1.研究免疫增强型肠内营养在急性重症脑卒中患者临床治疗中的意义。比较免疫增强型肠内营养和标准肠内营养对急性重症脑卒中患者营养、免疫及病情变化的影响。 2.分析重症脑卒中患者急性期血清皮质醇变化规律及其与蛋白质代谢指标之间的关系，以指导临床合理的营养及能量支持。方法：选取山西大医院神经内科监护室2014年9月至2015年10月收治的急性重症脑卒中患者62例，随机分为免疫增强型肠内营养组（IEN）和标准肠内营养组（SEN），均在入院24小时内留置鼻胃管。急性期能量供给标准为25Kcal/（kg·d）。IEN组给予肠内营养乳剂（TPF-T），SEN组给予肠内营养混悬液（TPF），均使用营养泵匀速泵入。分别于入院第1天、第4天、第7天、第10天、第13天检测早8点皮质醇水平，蛋白质代谢指标：血清白蛋白（ALB）、血清前白蛋白（PA）、转铁蛋白（TF）、氮平衡。于入院第1天、第7天、第13天检测免疫指标：T细胞亚群（CD4、CD8、CD4/CD8）、免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）；炎症指标：C-反应蛋白（CRP）；格拉斯哥昏迷评分（GCS），并在入院第1天完成急性生理及慢性健康评分（APACHEⅡ评分）。对所得数据进行统计分析，计量资料采用重复测量方差分析，组内各时间点比较采用LSD-t检验；计数资料采用χ2检验，相关性分析采用双变量相关分析，认为P＜0.05有统计学意义。结果： 1.基线资料：IEN组、SEN组入选患者入院时的年龄、性别、疾病种类、神经功能评分及蛋白质代谢指标、免疫指标、炎症指标之间无统计学差异（P＞0.05）。2.皮质醇水平变化：IEN组和SEN组患者早8点皮质醇水平呈动态变化，在入院第7天测量值最高，组内比较示两组患者入院第13天皮质醇水平均较第7天显著升高（P＜0.05）。组间比较示入院第13天IEN组患者皮质醇升高水平显著低于SEN组（P＜0.05）。 3.蛋白质代谢指标：动态观察示IEN组、SEN组患者发病后血清白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、氮平衡水平均呈下降趋势，在入院第7天测量值最低，组内比较示两组患者上述指标在入院第13天的测量值均较入院第7天显著升高（P＜0.05）。组间比较示IEN组患者上述指标在入院第13天的观察值显著高于SEN组（P＜0.05）。 4.蛋白质代谢指标与血清皮质醇变化相关性分析：IEN组和SEN组患者血清白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白及氮平衡与血清皮质醇变化均呈负相关（相关系数分别为r=-0.590，P＜0.05；r=-0.359，P＜0.05；r=-0.528，P＜0.05；r=-0.434，P＜0.05）。 5.免疫指标：IEN组和SEN组患者发病后CD4、CD4/CD8、IgG、IgA、IgM水平均呈上升趋势，在入院第1天最低，而CD8呈下降趋势，在入院第13天最低。组内比较示两组患者入院第13天时CD4、CD4/CD8、IgG、IgA、IgM水平均较入院第1天显著升高（P＜0.05），入院第13天时CD8水平较入院第1天显著降低（P＜0.05）。组间比较示入院第13天时IEN组患者CD4、CD4/CD8、IgG、IgA、IgM水平显著高于SEN组（P＜0.05），IEN组患者CD8水平显著低于SEN组（P＜0.05）。 6.炎症指标：IEN组和SEN组患者发病后CRP水平均呈动态下降趋势，在入院第1天测量值最高。组内比较示两组患者入院第13天CRP水平较入院第1天显著降低（P＜0.05）。组间比较示在入院第13天IEN组患者CRP水平显著低于SEN组（P＜0.05）。 7.格拉斯哥昏迷量表评分（Glasgow Coma Scale，GCS）：IEN组和SEN组患者发病后GCS评分呈升高趋势，在入院第1天分值最低。组内比较示两组患者入院第13天GCS评分较第1天均显著增高（P＜0.05）。组间比较示IEN组与SEN组的GCS评分之间无统计学差异（P＞0.05）。 8.感染率及病死率：IEN组临床感染发生率显著低于SEN组（χ2=5.406，P＜0.05）。两组患者病死率无统计学差异（χ2=0.936，P＞0.05）。结论： 1.对急性重症脑卒中患者，即使给予积极的营养及能量支持治疗，机体仍会表现为营养不良。2.重症脑卒中患者早期应激水平越显著（皮质醇水平越高），出现蛋白质代谢紊乱的风险越高。3.由于营养不良、代谢紊乱及应激等因素，急性重症脑卒中患者会出现免疫功能受损。4.免疫增强型肠内营养较标准肠内营养更有助于改善重症脑卒中患者受损的免疫功能，控制持续性升高的炎症反应。5.相较于标准肠内营养，免疫增强型肠内营养能明显降低重症脑卒中患者临床感染的发生率。6.在改善急性重症脑卒中患者近期意识状态和降低患者病死率方面，免疫增强型肠内营养并不优于标准肠内营养。收起

关键词 : 免疫增强型肠内营养重症脑卒中蛋白质代谢能量支持临床治疗

5. 急性眩晕起病的急性后循环缺血性卒中风险预警模型研究

[学位论文] 樊艳泓山西医科大学 2023年硕士导师: 李新毅共55页

摘要 : 目的: 1、探讨急性眩晕起病的急性后循环缺血性卒中(Acute Posterior-circulation Ischemia,aPCI)患者的风险因素; 2、建立急性眩晕起病的aPCI的风险预警模型，评估其诊断价值; 3、对比ABCD3评分和本风险预警模型在预测aPCI发生的差异... 展开目的: 1、探讨急性眩晕起病的急性后循环缺血性卒中(Acute Posterior-circulation Ischemia,aPCI)患者的风险因素; 2、建立急性眩晕起病的aPCI的风险预警模型，评估其诊断价值; 3、对比ABCD3评分和本风险预警模型在预测aPCI发生的差异。方法: 选择2021年10月-2023年2月以急性眩晕或头晕为主诉就诊于山西白求恩医院神经内科符合纳排标准的655例住院患者。采集入组患者最初入院时未采取明确治疗手段时的各类临床资料比如基本信息、既往史、症状、体征、血清学结果等，并完成ABCD3评分。将655例入组患者按照建模组人数:验证组人数为7∶3的比例随机分组，即建模组461例患者，验证组194例患者，再将建模组与验证组的患者按照出院主诊断分为aPCI组和非aPCI两个亚组。通过单因素Logistic回归分析查找急性眩晕起病的aPCI患者的风险因素;采用多因素Logistic回归分析建立回归方程，并绘制列线图风险预警模型，绘制受试者工作特征曲线图(Receiver Operating Characteristic curve ROC),得出曲线下面积(Area Under Curve AUC)、敏感度、特异度等信息，并对风险预警模型进行区分能力、校准度、临床有效性的评价及外部验证;对比上述风险预警模型与ABCD3评分的各项指标，评估二者诊断aPCI的价值。该回顾性研究经过山西白求恩医院伦理委员会批准(YXLL-2023-046)。结果: 1、建模组和验证组临床资料对比:对两组患者的连续变量进行t检验结果示:两组患者在年龄、即刻血糖、血小板计数、血白细胞计数、NLR、INR这6项临床资料中差异均无统计学意义(p＞0.05)。对两组患者的分类变量进行x 2检验结果示:两组患者在是否为aPCI、共济失调、恶心呕吐、饮水呛咳、吞咽困难、构音障碍、单侧肢体麻木、单侧肢体无力、复视、指鼻试验不稳、眼震、Babinski征(+)、吸烟史、饮酒史、冠心病史、血脂异常病史、高血压病史、糖尿病史、脑卒中病史、性别这20项临床资料中差异均无统计学意义(p＞0.05),故可用该验证组对模型进行验证。 2、建模组中aPCI组和非aPCI组临床资料对比:共有461例建模组患者按出院主诊断分为非aPCI组(86例，18.7％)和aPCI组(375例，81.3％)。采用t检验两组样本的连续变量，年龄、即刻血糖、NLR、血小板、INR这5项连续变量差异无统计学意义(P＞0.05);而血白细胞计数在两组中差异具有统计学意义(P＜0.05)。其次采用x2检验两组样本分类变量，其中共济失调、饮水呛咳、构音障碍、单侧肢体无力、单侧肢体麻木、复视、指鼻试验不稳、眼震、Babinski征(+)、吸烟史、饮酒史、高血压病史、冠心病史、性别，共14项差异具有统计学意义(p＜0.01或p＜0.05);而恶心呕吐、吞咽困难、糖尿病史、脑卒中病史、血脂异常病史这5项在两组间差异无统计学意义(p＞0.05)。 3、建模组患者发生aPCI的单因素及多因素logistic回归分析:采用单因素Logistic回归分析得到风险因素:吸烟史、饮酒史、糖尿病史、NLR、INR、共济失调与aPCI发生显著相关(p＜0.05)。多因素logistic回归分析证实上述6项临床资料与aPCI发生相关性较强，根据多因素logistic回归系数得到回归方程:ln(p/1-p)=1.166+1.133* 吸烟史+1.011* 饮酒史+2.100* 糖尿病史+0.191*NLR+1.117*共济失调-5.3*INR,并绘制列线图模型。 4、风险预警模型的区分能力、校准度、临床有效性的评价:绘制风险预警模型的ROC曲线，得到AUC为0.819,标准误0.024,最佳界值0.512,95％CI为0.773～0.866,P=0.000＜0,01,Cut-off 值为 0.856 分，敏感度为 0.640,特异度为 0.872,表明该风险预警模型具有较高的诊断价值。Hosmer-Lemeshow拟合优度检验，x 2=7.805,p=0.453＞0.05,提示风险预测模型有较好的校准能力。经过1000次Bootstrap自抽样进行内部校正，平均绝对误差=0.017,n=461。依据临床决策曲线得出阈概率在0.07～0.73的区间内列线图预测模型净收益更高。 5、风险预警模型的外部验证:将验证组中数据代入风险预测模型中得到相应结果，并绘制ROC,了解验证组中风险预警模型对aPCI的诊断价值:AUC为0.793,标准误0.049,95％CI为0.697～0.889,P=0.000＜0.01,表明该风险预警模型对aPCI有一定诊断价值。 6、ABCD3对aPCI的诊断价值，建模组中aPCI亚组的375例患者ABCD3评分为(3.57±2.109)分，非aPCI亚组86例患者ABCD3评分为(2.30±1.617)分，2组比较差异具有统计学意义(P=0.024＜0.05)。通过绘制ROC,了解ABCD3评分对 aPCI 的诊断价值:AUC 为 0.673,95％CI 为 0.607～0.739,P=0.000＜0,01,Cut-off值为2.000分，敏感度为0.660,特异度为0.635,提示ABCD3评分诊断aPCI有一定意义，虽然二者的敏感度类似，但ABCD3的AUC、特异度均比风险预警模型低，故诊断aPCI的意义较差。结论: 1、吸烟史、饮酒史、糖尿病史、NLR、共济失调与aPCI的发生呈正相关，糖尿病史与aPCI发生的正相关性最强; 2、INR与aPCI发生呈负相关; 3、本研究提出的风险预警模型具有较高的诊断价值; 4、在诊断预测aPCI的发生中，ABCD3评分有一定诊断预测能力，但低于风险预警模型。收起

关键词 : 急性后循环缺血性卒中风险预警模型诊断价值 ABCD3评分

6. “加味不忘散”在血管性痴呆大鼠认知功能中的作用及血管再生机制的研究

[学位论文] 李文霞第三临床医学院 2022年硕士导师: 李新毅共55页

摘要 : 目的: 血管性痴呆（VascularDementia,VaD）是一种由卒中等多种脑血管疾病引起的临床综合征，其特征为学习记忆减退及认知能力下降。近年来，VaD的发病率随着高发的脑血管疾病而逐年上升。因此，对于VaD发病机制及治疗的研究迫在眉睫。研究目的如... 展开目的: 血管性痴呆（VascularDementia,VaD）是一种由卒中等多种脑血管疾病引起的临床综合征，其特征为学习记忆减退及认知能力下降。近年来，VaD的发病率随着高发的脑血管疾病而逐年上升。因此，对于VaD发病机制及治疗的研究迫在眉睫。研究目的如下： 1.研究“加味不忘散”（ModifiedBu-WangPowder,MBWP）对VaD大鼠认知功能的改善作用； 2.探讨“加味不忘散”改善VaD大鼠认知功能的血管再生机制。方法: 1.选取71只成年健康的雄性SD大鼠，将其随机分为假手术组（Shamcontrol,n=15）和造模组（n=56）； 2.对造模组大鼠使用双侧颈动脉血流阻断术进行VaD模型制备，将造模成功的VaD大鼠随机分为VaD模型组（VaDmodel,n=12）、“加味不忘散”低剂量治疗组（LowMBWP,n=12）、“加味不忘散”中剂量治疗组（MediumMBWP,n=11）和“加味不忘散”高剂量治疗组（HighMBWP,n=11）。制备模型10天后，对各治疗组大鼠予以“加味不忘散”灌胃治疗28天； 3.采用水迷宫及Y迷宫实验方法检测各组大鼠的认知功能； 4.利用免疫组化方法研究“加味不忘散”对VaD大鼠海马微血管密度（MicrovesselDensity,MVD）的影响； 5.借助蛋白质印迹法（WesternBlot）探讨“加味不忘散”对VaD大鼠海马组织中缺氧诱导因子1α（Hypoxia-InducibleFactor-1α,HIF-1α）和血管内皮生长因子（VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF）表达水平的影响。结果： 1.行为学实验结果：水迷宫实验结果显示：（1）定向巡航实验：VaD模型组的平均逃避潜伏期从第2天起与假手术组相比逐渐延长。与VaD模型组比较，“加味不忘散”治疗组的潜伏期从第3天开始显著缩短，其中，高剂量组的潜伏期最短。（2）空间探索实验：VaD模型组大鼠较假手术组在原平台所在象限（第IV象限）的活动时间占比明显减少，差异具有统计学意义（29.55±0.40%vs.59.34±0.14%,Plt;0.001）；“加味不忘散”低剂量组在第IV象限的活动时间占比与模型组相比无统计学差异（39.51±0.22%vs.29.55±0.40%,Pgt;0.05），中、高剂量组大鼠较模型组在第IV象限活动时间占比明显增多，差异具有统计学意义（49.71±0.24%vs.29.55±0.40%,Plt;0.001;55.48±0.39%vs.29.55±0.40%,Plt;0.001）；而高剂量组的第IV象限活动时间所占百分比较中剂量组延长（55.48±0.39%vs.49.71±0.24%,Plt;0.001）。大鼠找到可视平台的平均时间以及平均速度在各组间未见显著差异（Pgt;0.05）。 Y迷宫实验结果显示：就自发交替反应率而言，VaD模型组较假手术组显著降低，差异具有统计学意义（55.00±6.81%vs.81.50±6.72%,Plt;0.001）。中、高剂量治疗组大鼠的自发交替反应率均较模型组明显增高（67.75±6.50%vs.55.00±6.81%,Plt;0.05;76.83±5.71%vs.55.00±6.81%,Plt;0.001）；高剂量治疗组大鼠的自发反应交替率比低剂量组增多，差异有统计学意义（76.83±5.71%vs.57.14±10.78%,Plt;0.001）。而高剂量组大鼠的自发交替反应率与假手术组之间的差异无统计学意义（76.83±5.71%vs.81.5±6.72%,Pgt;0.05）。Y迷宫的进臂总次数在每组大鼠之间未见明显差异。 2.免疫组织化学染色实验结果：通过免疫组织化学染色观察各组大鼠海马组织中MVD的差异。与假手术组相比，VaD模型组大鼠海马区MVD增多（25.55±2.91num./mm2vs.11.45±1.37num./mm2,Plt;0.001）。MBWP低剂量组大鼠海马区MVD较VaD模型组增多，但无统计学意义（27.69±1.37num./mm2vs.25.55±2.91num./mm2,Pgt;0.05），而中、高剂量治疗组大鼠的海马区MVD较VaD模型组显著增多，差异有统计学意义（42.54±2.57num./mm2vs.25.55±2.91num./mm2,60.45±1.54num./mm2vs.25.55±2.91num./mm2,Plt;0.001）。与中剂量组相比，“加味不忘散”高剂量组大鼠海马区MVD增加，且差异有统计学意义（60.45±1.54num./mm2vs.42.54±2.57num./mm2,Plt;0.001）。 3.WesternBlot实验结果：通过WesternBlot实验观察各组大鼠海马内HIF-1α和VEGFA的表达情况。结果提示，VaD模型组大鼠海马内的HIF-1α和VEGFA的表达水平较假手术组的增多，“加味不忘散”治疗组海马内HIF-1α和VEGFA的表达水平也较假手术组升高，且差异具有统计学意义（Plt;0.05）。与VaD模型组相比，“加味不忘散”治疗组大鼠海马内HIF-1α和VEGFA的表达水平随着“加味不忘散”给药浓度的增加而逐渐提高（Plt;0.05）。结论： 1.“加味不忘散”可以剂量依赖地改善VaD大鼠的学习记忆功能。 2.“加味不忘散”可以增加VaD大鼠脑组织中的MVD，促进大脑海马区的血管再生，且作用呈剂量依赖性。 3.“加味不忘散”可以提高VaD大鼠脑组织内血管新生相关因子的表达，通过上调HIF-1α/VEGF信号通路，促进VaD大鼠海马组织内的血管再生。综上所述，“加味不忘散”通过上调HIF-1α/VEGF信号通路，促进微血管再生，进而改善VaD大鼠的认知功能。本课题受2020年山西白求恩医院人才引进科研启动金项目“加味不忘散对血管性痴呆模型大鼠认知功能的影响及血管再生机制的研究（编号：2020RC007）”资助。收起

关键词 : 血管性痴呆加味不忘散认知功能血管再生发病机制

7. 恶性大脑中动脉梗死风险预测模型的构建与验证

[学位论文] 王佳琪山西医科大学 2023年硕士导师: 李新毅共54页

摘要 : 目的: 1、本研究侧重于早期非增强CT成像体征和临床相关信息的预测，将NEMMI评分与大脑半球大面积脑梗死(Large cerebral infarction in the hemisphere,LHI)发展为恶性大脑中动脉梗死(Malignant Middle Cerebral Artery Infarction,MMI)的其他常... 展开目的: 1、本研究侧重于早期非增强CT成像体征和临床相关信息的预测，将NEMMI评分与大脑半球大面积脑梗死(Large cerebral infarction in the hemisphere,LHI)发展为恶性大脑中动脉梗死(Malignant Middle Cerebral Artery Infarction,MMI)的其他常见预测指标进行简单比较，评估NEMMI评分的预测能力。2、本研究目的是探寻可以预测LHI患者发生MMI的危险因素，通过筛选出的独立预测因素，开发和验证一种临床预测模型，为临床早期识别MMI风险人群和早期干预提供参考。方法: 回顾性收集2019年1月到2022年12月山西医科大学第三临床医院于神经内科重症监护室已被确诊为LHI的住院患者，收集临床资料，人口统计学资料:性别、年龄、吸烟史、饮酒史;临床特征资料:基线血压(收缩压和舒张压)、入院时的美国国立卫生院脑卒中量表(National Institutes of Health stroke scale,NIHSS)评分、高血压病史、糖尿病病史、冠心病病史、TIA(Transient Ischemic Attack)/脑梗死病史、房颤病史、入院时是否进行急性干预治疗(包括溶栓和取栓);实验室资料:包括基线血糖、中性粒淋巴细胞比NLR、淋巴单核细胞比LMR、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、白蛋白、D-二聚体、纤维蛋白原、尿素肌酐比值、蛋白尿等;影像学资料:包括梗死侧别、出血性转化(Hemorrhagic transformation,HT)、大脑中动脉高密度征(Middle cerebral artery hyperdensity sign,HMCAS)、累及 ACA 和 PCA 供血区、NEMMI 评分、Alberta 卒中项目早期 CT 评分(Alberta Stroke Program Early CT,ASPECTS)。根据MMI的进展情况分为MMI组和非MMI组。对两组间一般资料、临床特征及实验室指标、影像学特征等进行组间差异性分析。将NEMMI评分与ASPECTS评分和NIHSS评分进行简单比较，评估NEMMI评分预测能力。采用单因素二元Logistic回归方法筛选出所有潜在的风险指标，进而通过多因素二元Logistic回归方法的向前步进算法确定MMI的独立影响指标。利用R软件构建MMI风险预测模型，采用列线图(Nomogram图)来进行模型的呈现，并通过绘制受试者操作特征曲线(ROC)、校准曲线和决策分析曲线(DCA)来评估所建模型的预测效能和临床实用价值。模型的验证通过循环1000次Bootstrap的自抽样方式，对其进行内部测验。结果: 1、本研究分析结果表示:LHI患者发生MMI的风险是33.22％(96/289)。2、N EMMI 评分(AUC:0.84)与 ASPECTS 评分(AUC:0.57)及 NHISS 评分(AUC:0.60)相比，显示出良好的区分度。3、多因素二元Logistic回归分析表明年龄[比值比(Odds ratio,OR):1.06,95％置信区间(Confidence interval,CI):1.03-1.10,P＜0.001]、基线血糖(OR=1.17,95％CI:1.03-1.33,P=0.014)、NEMMI 评分(OR=1.13,95％CI:1.09-1.17,P＜0.001)、NIHSS 评分(OR=0.95,95％CI:0.91-0.99,P=0.024)、蛋白尿(OR=2.84,95％CI:1.24-6.24,P=0.015)、HT(OR=3.56,95％CI:1.53-8.51,P=0.003)、HMCAS(OR=4.49,95％CI:2.06-10.33,P＜0.001)是 L HI进展转化为MMI的独立危险因素。4、基于以上7个指标构建的风险列线图模型的敏感度为0.89,特异度为0.86,曲线下面积(Area under the cuerve,AUC)为0.93,95％CI为0.90～0.96。行Bootstrap内部验证法，自抽样次数为1000次，均方根误差(RMSE)为0.339,均值绝对误差(MAE)为0.260,R2为0.492,提示符合度良好;Calibration验证显示该模型的预测值及实际值的一致性较好，平均绝对误差为0.019。决策分析曲线(DCA)表明应用该模型进行临床决策并干预，患者能尽可能获益。结论: 1、NEMMI评分在MMI预测中表现出较好的预测潜力;2、入院时的较高的年龄、血糖、NIHSS评分、NEMMI评分和出现蛋白尿、出血性转化及MCA高密度征这7个因素可以作为MMI发生的独立危险因素;3、本研究所建立的列线图模型具有良好的精确度和区分度,能够有效地提升大面积脑梗死病人转化为MMI的诊断能力，有助于医生进行疾病评估、临床决策，具有重要的临床应用价值。收起

关键词 : 大脑半球大面积脑梗死恶性大脑中动脉梗死风险预测列线图模型

8. 远志总皂苷对AD模型大鼠海马CA1区BDNF及其受体TrkB表达的影响

[学位论文] 陈伟荣山西医科大学 2014年硕士导师: 李新毅共53页

摘要 : 研究背景:阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是一种神经系统变性病，常见于老年人，其病理特征为老年斑、神经元纤维缠结、海马锥体细胞颗粒空泡变性及神经元缺失，临床主要表现为进行性智能减退，病程通常8-10年。据《2013世界阿尔茨海默病报告... 展开研究背景:阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是一种神经系统变性病，常见于老年人，其病理特征为老年斑、神经元纤维缠结、海马锥体细胞颗粒空泡变性及神经元缺失，临床主要表现为进行性智能减退，病程通常8-10年。据《2013世界阿尔茨海默病报告》显示，随着世界人口的老龄化，到2050年，生活不能自理的老人将增至2.77亿，其中一半患有阿尔茨海默病。依靠现有的治疗方法，尚不能逆转或阻止AD的病情进展，因此，探讨药物作用的靶点、开发研制抗AD的新药，将是一项迫切而艰巨的任务。远志是一种常用的益智中药，始载于《神农本草经》，至今已有两千余年的临床应用实践。近年来，国内一些研究小组已就远志的抗衰老、益智作用及其可能机制展开了探索性的研究工作，发现远志及其主要成分可以通过抗氧化、抗炎、抗Aβ毒性，以及提高单胺类神经递质、促进神经生长等作用起到防治AD的效果。我们的研究小组也发现远志的主要成分远志总皂苷(Tenuigenin，TEN)具有保护胆碱能系统、改善长时程增强、提高阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力之功效。脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)，在维持神经元的生长、分化和神经损伤后的修复、再生及突触可塑性中发挥着重要作用，尤其BDNF与其特异性酪氨酸激酶受体B(Tyrosine Kinase B，TrKB)结合后可以易化长时程增强(Long-term potentiation，LTP)。BDNF及其受体TrKB的损害与AD的形成、发展及治疗密切相关。前期我们发现TEN对AD模型大鼠LTP具有易化作用，并具有改善AD模型大鼠的学习记忆的作用。那么，TEN对BDNF、TrKB的表达是否具有影响呢？为了进一步深入探讨TEN对AD模型大鼠突触可塑性影响的机制，我们拟采用D-半乳糖(D-galactose，D-gal)亚急性致衰老联合鹅膏覃氨酸(ibotenic acid，IBO)定向Meynert基底核损毁法建立阿尔茨海默病大鼠模型，免疫组化法检测高、低剂量TEN分别对AD模型大鼠海马CA1区BDNF及其受体TrkB表达阳性产物的影响。第一部分:远志总皂苷对AD模型大鼠海马CA1区BDNF表达的影响目的:观察远志总皂苷对阿尔茨海默病模型大鼠海马CA1区脑源性神经营养因子表达的影响，揭示远志总皂苷对阿尔茨海默病干预作用的机制。方法:雄性Wistar大鼠60只，通过编号、取随机数、排序，随机分为对照组、模型组、远志总皂苷低剂量治疗组(12.5mg·ml-1)和远志总皂苷高剂量治疗组(37.5mg·ml-1)，每组15只，采用D-半乳糖亚急性致衰老，再联合鹅膏覃氨酸定向Meynert基底核双侧损毁法建立阿尔茨海默病大鼠模型。远志总皂苷低、高剂量组在建模的同时分别用不同剂量的远志总皂苷灌胃治疗。造模结束后，再继续灌胃2周制备脑组织切片，免疫组化SABC染色法检测各组大鼠海马CA1区BDNF的表达。BI-2000医学图像分析系统软件检测单个视野中BDNF灰度值及光密度值，并计算其平均值。结果:光学显微镜观察显示，不同处理组大鼠海马CA1区BDNF免疫染色阳性物质着色呈棕黄色，主要表达于神经元胞膜。其中，对照组大鼠海马CA1区免疫染色阳性神经元排列规则、密集，细胞免疫着色较深;模型组大鼠免疫染色阳性神经元排列欠规则、分布稀疏，染色较淡;远志总皂苷低、高剂量治疗组大鼠免疫染色阳性神经元排列较模型组规则，染色较深。对照组、模型组、TEN低剂量组、TEN高剂量组大鼠海马CA1区BDNF的平均灰度值分别为111.87±3.84，147.91±5.29，139.55±4.52，125.63±5.74，模型组明显高于对照组(P＜0.05)，TEN低、高剂量组显著低于模型组(P＜0.05)，且TEN高剂量组显著低于低剂量组(P＜0.05);对照组、模型组、TEN低剂量组、TEN高剂量组大鼠海马CA1区BDNF的平均光密度值分别为0.47±0.02，0.30±0.02，0.35±0.05，0.43±0.05，模型组显著低于对照组（P＜0.05)，TEN低、高剂量组显著高于模型组（P＜0.05），且TEN高剂量组显著高于低剂量组(P＜0.05)。第二部分:远志总皂苷对AD模型大鼠海马CA1区TrkB表达的影响目的:观察远志总皂苷对阿尔茨海默病模型大鼠海马CA1区BDNF之特异性酪氨酸激酶受体B表达的影响，揭示远志总皂苷对阿尔茨海默病干预作用的机制。方法:大鼠分组、造模、脑组织切片制备同第一部分，免疫组化法检测各组大鼠海马CA1区TrkB的表达。BI-2000医学图像分析系统软件检测单个视野中TrKB灰度值及光密度值，并计算其平均值。结果:光学显微镜观察显示，不同处理组大鼠海马CA1区TrkB免疫染色阳性物质着色呈棕黄色，主要表达于神经元胞膜。其中，对照组大鼠海马CA1区免疫染色阳性神经元排列规则、密集，细胞免疫着色较深;模型组大鼠免疫染色阳性神经元排列欠规则、分布稀疏，染色较淡;远志总皂苷低、高剂量治疗组大鼠免疫染色阳性神经元排列较模型组规则，染色较深。对照组、模型组、TEN低剂量组、TEN高剂量组大鼠海马CA1区TrKB的平均灰度值分别为110.72±5.41，120.03±6.68，115.83±4.34，111.70±5.19，模型组显著高于对照组（P＜0.05），TEN低、高剂量组显著低于模型组(P＜0.05)，且TEN高剂量组显著低于低剂量组（P＜0.05）;对照组、模型组、TEN低剂量组、TEN高剂量组大鼠海马CA1区TrKB的平均光密度值分别为0.46±0.05，0.21±0.07，0.32±0.07，0.37±0.03，模型组显著低于对照组（P＜0.05），TEN低、高剂量组显著高于模型组(P＜0.05)，且TEN高剂量组显著高于低剂量组（P＜0.05)。结论远志总皂苷可显著提高阿尔茨海默病模型大鼠海马CA1区BDNF及其受体TrkB的表达，且具有剂量依赖性，这可能是其改善认知功能的机制之一。收起

关键词 : 远志总皂苷阿尔茨海默病海马CA1区脑源性神经营养因子 TrkB受体动物模型

9. 加味不忘散对血管性痴呆模型大鼠的认知功能及胆碱能系统的影响

[学位论文] 徐振伟第三临床医学院 2022年硕士导师: 李新毅共52页

摘要 : 血管性痴呆（Vasculardementia,VaD）是仅次于阿尔兹海默症的第二大痴呆类型，患者的认知功能障碍严重影响了生活质量，也为家庭和社会带来了较重的负担，目前尚无治疗VaD的特效药物，本实验旨在探索一种新的中药复方——加味不忘散治疗VaD的可能性。... 展开血管性痴呆（Vasculardementia,VaD）是仅次于阿尔兹海默症的第二大痴呆类型，患者的认知功能障碍严重影响了生活质量，也为家庭和社会带来了较重的负担，目前尚无治疗VaD的特效药物，本实验旨在探索一种新的中药复方——加味不忘散治疗VaD的可能性。目的：研究加味不忘散对VaD模型大鼠的学习记忆能力和认知功能的影响，探索加味不忘散对VaD模型大鼠胆碱能系统的影响，并揭示其作用机制。方法：将60只健康雄性SD大鼠（200g±20g）随机平均分为6组，每组10只，分别标记为假手术组、VaD模型组（简称模型组）、多奈哌齐组、加味不忘散低剂量组（简称低剂量组）、加味不忘散中剂量组（简称中剂量组）、加味不忘散高剂量组（简称高剂量组）。采用双侧颈动脉结扎术进行VaD模型的制备，其中假手术组仅将颈动脉分离，不结扎。术后10天，加味不忘散各治疗组分别给予0.05g/mL、0.15g/mL和0.45g/mL的加味不忘散溶液灌胃治疗；多奈哌齐组按0.5mg/kg给予盐酸多奈哌齐溶液；模型组、假手术组给予同等剂量的生理盐水灌胃。灌胃30天后，采用Morris水迷宫实验和旷场实验评价大鼠的学习记忆能力认知功能。行为学实验结束后，分离大鼠双侧海马组织，制备组织匀浆，采用Westernblot方法检测组织中胆碱乙酰转移酶（CholineAcetyltransferase，ChAT）及乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase，AChE）的含量。结果： 1.行为学实验结果：（1）Morris水迷宫：定位航行实验中，各组大鼠的逃避潜伏期随着训练天数的延长呈现下降趋势。空间探索实验中，与模型组相比较，低剂量组无统计学差异（27.2±2.71VS23.78±3.14，P＞0.05），而中、高剂量组在原平台象限停留时间百分比明显延长，差异具有统计学意义（28.58±2.57VS23.78±3.14，Plt;0.05；32.69±2.72VS23.78±3.14，Plt;0.01）。可视平台实验中，各组大鼠爬上平台所需时间及游泳速度均无统计学差异（P＞0.05）。（2）旷场实验：与模型组相比较，低、中、高剂量组穿格次数增加，差异有统计学意义（80±10.28VS61.125±16.5，Plt;0.01；92.75±4.95VS61.125±16.5，Plt;0.01；111.75±7.8VS61.125±16.5，Plt;0.01），且随着加味不忘散浓度的升高，穿格次数也在升高。高剂量组与多奈哌齐组相比，穿格次数无统计学差异（111.75±7.8VS124.375±6.32，P＞0.05）。 2.WesternBlot实验结果：（1）与模型组相比，低、中、高剂量组海马组织表达ChAT的水平均提高，差异具有统计学意义（0.622±0.029VS0.442±0.058，Plt;0.01；0.715±0.035VS0.442±0.058，Plt;0.01；0.809±0.028VS0.442±0.058，Plt;0.01）。高剂量组与假手术组之间ChAT的含量无明显差异（0.809±0.028VS0.84±0.033，Pgt;0.05）。（2）与模型组相比，中、高剂量组大鼠海马组织中AChE的含量降低（0.76±0.102VS0.888±0.063，Plt;0.05；0.648±0.104VS0.888±0.063，Plt;0.01）；与多奈哌齐组比较，高剂量组大鼠海马组织中AChE的含量没有差异（0.648±0.104VS0.725±0.053，Pgt;0.05）；高剂量组与假手术组比较，两者之间无统计学差异（0.648±0.104VS0.598±0.033，Pgt;0.05）。结论： 1.加味不忘散可能改善VaD模型大鼠的学习记忆能力，且其作用呈剂量依赖性。 2.加味不忘散可能呈剂量依赖性地升高VaD模型大鼠海马组织内ChAT的表达水平，降低AChE的表达水平。收起

关键词 : 血管性痴呆加味不忘散认知功能胆碱能系统

10. 远志总皂苷对AD模型大鼠海马Ng及pCaMKⅡα表达的影响

[学位论文] 燕毅男山西医科大学 2014年硕士导师: 李新毅共52页

摘要 : 研究背景阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是一种常见的神经系统变性病，以进行性学习记忆功能障碍为特征，发病机制目前尚不完全清楚。已有证据表明突触可塑性损害参与了AD的病理进展，且与认知功能损害密切相关。长时程增强(long-term ... 展开研究背景阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是一种常见的神经系统变性病，以进行性学习记忆功能障碍为特征，发病机制目前尚不完全清楚。已有证据表明突触可塑性损害参与了AD的病理进展，且与认知功能损害密切相关。长时程增强(long-term potentiation，LTP)作为一种神经电生理现象，反映了突触功能的可塑性，是学习与记忆细胞水平的机制之一。神经颗粒素(neurogranin，Ng)是突触后与多数Ca2+敏感性钙调蛋白(calmodulan，CaM)结合的亲和蛋白和蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)的作用底物，主要通过调控Ca2+和CaM依赖性酶包括Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶Ⅱ（calcium/calmodulin-dependent protein kinasetypeⅡ，CaMKⅡ）等参与学习记忆过程。Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶Ⅱ（calcium/calmodulin-dependent protein kinase typeⅡ， CaMKⅡ）作为突触后致密区(postsynaptic density，PSD)的主要组成部分，被称为“记忆的分子开关”。CaMKⅡα亚基在海马高度表达，通过Thr286位点自身磷酸化成为活化状态，是LTP形成过程中的关键分子。远志总皂苷(tenuigenin，TEN)作为益智安神类中药远志的有效作用成分，可改善AD患者的认知功能，但机制却不完全清楚。我们前期研究表明TEN增强海马CA1区LTP，本研究拟进一步深入探讨其分子机制，为AD的临床防治及新药开发提供理论依据。目的通过观察TEN对AD模型大鼠海马CA1区Ng以及pCaMKⅡα表达的影响，旨在探讨TEN防治AD的部分作用机制。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为4组:对照组，AD模型组，低剂量TEN治疗组(12.5mg/ml)和高剂量TEN治疗组（37.5mg/ml），每组15只。腹腔注射D-半乳糖(d-galactose，D-gal)导致大鼠早衰的基础上采用鹅膏覃氨酸(ibotenicacid，IBO)定向损毁双侧Meynert基底核建立AD大鼠模型，低、高剂量TEN治疗组(12.5mg/ml、37.5mg/ml)则在造模的同时用TEN灌胃治疗8周，对照组予以等体积的生理盐水。采用免疫组化方法来检测大鼠海马CA1区Ng及pCaMKⅡα的表达水平。结果 (1)与对照组相比，AD模型组大鼠海马CA1区Ng及pCaMKⅡα平均吸光度值显著降低(P＜0.05)，提示AD模型组Ng及pCaMKⅡα表达明显减少; (2)低、高剂量TEN治疗组(12.5mg/ml、37.5mg/ml)两组平均吸光度值均较AD模型组显著增加(P＜0.05)，提示低、高剂量TEN治疗组Ng及pCaMKⅡα表达水平均增加; (3)与低剂量TEN治疗组(12.5mg/ml)相比，高剂量TEN治疗组(37.5mg/ml)的平均吸光度值增高(P＜0.05)，提示高剂量TEN治疗组的Ng及pCaMKⅡα表达水平明显高于低剂量TEN治疗组。结论 (1)TEN可提高AD模型大鼠海马CA1区Ng及pCaMKⅡα的表达。 (2)TEN提高AD模型大鼠海马CA1区Ng及pCaMKⅡα的表达呈剂量依赖性。收起

关键词 : 远志总皂苷阿尔茨海默病突触可塑性神经颗粒素动物模型分子机制新药开发