中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 张淳中国中医科学院 2000年硕士导师: 孙树椿共63页

摘要 : 目的:应用硅胶颗粒压迫法,建立一种颈髓受压的动物模型.方法:在大鼠C<,5-6>椎管内硅胶颗粒压迫并造成颈髓损伤,采用电生理学、病理学和神经学方法进行评价.结果:硅胶颗粒压迫导致明显的颈髓损伤,脊髓受压节段及其相邻部位产生损害.结论:用硅胶颗粒法可成功制... 展开

关键词 : 颈髓受压动物模型动物模型硅胶颗粒法颈髓损伤

2. 糖尿病合并高血脂动物模型的研制及其有效中药的研究

[学位论文] 孙立红北京协和医学院(中国医学科学院) 2001年硕士导师: 杜力军共71页

摘要 : 糖尿病病人常伴有高血脂,这种高血糖伴高血脂是加重糖尿病病人严重致死性并发症的主要因素之一,因为缺乏相宜的动物模型,因而阻碍了对其病生理及相应有效药物的研究,该研究通过对wistar大鼠、KM小鼠的诱导,建立了高血糖伴高血脂的动物模型,初步研究了... 展开

关键词 : 动物模型糖尿病高血脂动物模型降血糖药调血脂药

3. SNHG12在乙肝病毒X蛋白诱导肝癌发生中的作用研究

[学位论文] 吴勇 2022年硕士导师: 冯涛共61页

摘要 : 目的：探究长链非编码RNASNHG12在乙肝病毒X蛋白（HBx）诱导肝癌发生过程中的作用。方法：把课题组构建的肝前体细胞14-19、EGFP-14-19、HBx-EGFP-14-19通过小鼠肝门静脉注射到体内；采用qRT-PCR、Westernblot方法检测30d，90d，18... 展开

关键词 : 肝癌 HBx SNHG12 动物模型

4. 脐血移植的裸鼠模型

[学位论文] 刘红雨北京协和医学院(中国医学科学院) 1999年硕士导师: 兰炯采共60页

摘要 : 采用BALB/Cnu... 展开

关键词 : 脐血移植动物模型裸鼠

5. 肿瘤疾病动物模型选择及制作技术规范的研究

[学位论文] 陈志高中国农业大学 2006年硕士导师: 赵德明共45页

摘要 : 肿瘤是危害人类健康的重大疾病。肿瘤疾病动物模型是肿瘤研究的重要手段，每一次新的建模方法的发现都极大地促进了实验肿瘤学的发展。肿瘤疾病动物模型较其他的动物模型在研究和使用时具有更多的影响因素。但是，当前在肿瘤动物模型的研究和使用过程... 展开

关键词 : 肿瘤动物模型肿瘤模型

6. 同种异体肾移植的临床和实验研究

[学位论文] 孟小鑫南京医科大学 2003年硕士导师: 张炜;吴宏飞共30页

摘要 : 为研究肾移植后的免疫变化和各种药物对移植肾的影响,建立一种稳定可靠的大鼠异体肾移植动物模型.分别使用40对SOD雄性大鼠为供受体,供肾取左侧肾脏,输尿管全长带膀胱瓣,原位灌注后移植肾置受体左侧,血管直接吻合,输尿管带膀胱瓣与受体膀胱吻合,术中切... 展开

关键词 : 肾移植大鼠动物模型

7. 荷泽口服液对大白鼠减肥的实验研究

[学位论文] 许培斌湖北中医药大学 1996年硕士导师: 熊先敏;王大宪共20页

摘要 : 对刚断奶的幼小大白鼠喂以高脂高营养饮料,造成大鼠实验性肥胖模型,分别观察中药复方制剂荷泽口服液在大鼠致肥过程中及形成肥胖后对大鼠的影响.两部分实验结果显示,荷泽口服液对大鼠肥胖指数(Lee's index)、脂肪指数(g/100g体重)及血胆固醇、甘油三酯... 展开

关键词 : 肥胖动物模型预防治疗

8. 跑步运动对去睾大鼠负重骨和非负重骨骨量及骨结构影响的研究

[学位论文] 楼红侃浙江中医药大学 2009年硕士导师: 成羿共40页

摘要 : 目的：探讨不同强度的跑步运动对于去睾大鼠的腰椎和胫骨骨量和骨显微结构的影响和机制。方法： 12周龄SD雄性大鼠40只，随机分为5组每组，即假手术组(SHAM)、模型组(ORX)、去睾后低强度运动组(ORX+ EX1)、去睾后中强度运动组(ORX+ ... 展开

关键词 : 跑步运动去睾动物模型胫骨骨量骨显微结构动物模型

9. 膀胱癌腔内种植模型体系的建立及相关因素的初步探讨

[学位论文] 杨德林昆明医学院 2008年博士导师: 宋波;王剑松共121页

摘要 : 目的：筛选具有高侵袭及高腔内种植潜能的膀胱癌细胞亚系，建立可动态观察的膀胱癌腔内种植动物模型，并对相关因素进行初步研究，为膀胱癌腔内种植的基础及临床研究提供理想的模型及平台。方法：以膀胱癌细胞系EJ穿透人工基底膜能力为依据筛选... 展开目的：筛选具有高侵袭及高腔内种植潜能的膀胱癌细胞亚系，建立可动态观察的膀胱癌腔内种植动物模型，并对相关因素进行初步研究，为膀胱癌腔内种植的基础及临床研究提供理想的模型及平台。方法：以膀胱癌细胞系EJ穿透人工基底膜能力为依据筛选具有体外高侵袭能力的膀胱癌细胞亚系，并对筛选前后膀胱癌细胞的基本生物学特性进行比较；采用脂质体介导质粒转染的方法将质粒pEGFP-C1导入母、子代膀胱癌细胞中，筛选出稳定高表达EGFP的膀胱癌细胞亚系；将稳定高表达EGFP的膀胱癌细胞灌注裸小鼠膀胱中，成瘤后取肿瘤组织体外再培养，连续多次，建立具有高侵袭高腔内种植潜能且表达EGFP的膀胱癌细胞亚系，并对其基本生物学行为进行鉴定。在此基础上，建立膀胱癌腔内种植的动物模型，运用扫描电子显微镜、整体荧光成像系统、激光扫描共聚焦显微镜及流式细胞仪对人膀胱肿瘤细胞裸小鼠膀胱腔内种植的成瘤过程进行动态观察；通过倒置显微镜观察在除菌尿液中培养的膀胱癌细胞；MTT法对比人膀胱癌细胞EJ、人肝癌细胞HepG2和人血管内皮细胞Ecv304分别在尿液、生理盐水和无血清1640中的存活情况；逐渐增加培养基中尿液的方法，诱导并筛选建立高尿液适应性的膀胱癌细胞；ELESA法检测膀胱粘膜损伤与未损伤时小鼠膀胱CXCL12(SDF-1)含量的变化，裸小鼠体内实验对膀胱粘膜的损伤和炎症与膀胱癌腔内种植的关系进行研究。结果：筛选后获得的体外高侵袭力子代细胞(EJ—m3)，经15代以上传代后，细胞形态与母代无明显变化，细胞增殖速度较母代有明显加快(P<0.05)，体外侵袭能力较母系明显提高(P<0.001)，动物体内实验证实高侵袭力的子代细胞较母代细胞成瘤率高；成功获得具有高侵袭力和稳定高表达EGFP的单克隆细胞株(EJ-m3-GFP)，该细胞EGFP的表达率为98.9%，增殖指数、生长曲线和体外侵袭力与未转染前相似(P>0.05)；建立了高腔内种植潜能的膀胱癌细胞亚系(EJ-im3-GFP)，并且该亚系细胞CXCR4的表达率显著高于膀胱癌细胞EJ(P=0.001)；构建出可以通过体视荧光镜和流式细胞仪对肿瘤进行有效评价的膀胱癌细胞膀胱腔内种植的动物模型；观察到人膀胱癌细胞裸鼠腔内种植的过程呈倒抛物线型；EJ细胞在尿中12h贴壁，24h仍可见到存活细胞，经多元方差分析，在尿液中培养相同时间时，EJ较HepG2(P<0.001)和Ecv304(P=0.014)的存活数目多；HepG2与Ecv304的差异无统计学意义(p=0.062)；高尿液适应性的膀胱癌细胞在尿液中，24h时有大量细胞存活，48h仍有细胞存活；胰霉损伤的小鼠膀胱粘膜出现充血水肿和炎症细胞侵润，趋化因子CXCL12(SDF-1)的含量增加；出现膀胱粘膜损伤和炎症的裸小鼠，膀胱腔内种植的发生率更高。结论：膀胱肿瘤细胞的侵袭力，与膀胱癌的腔内种植呈正相关；EGFP转染人膀胱癌细胞EJ及其体外高侵袭力亚系EJ-m3未对其基本生物学特性产生明显影响；CXCR4在膀胱癌细胞中有表达，并且高腔内种植潜能膀胱癌细胞亚系EJ-im3-GFP的表达率显著高于膀胱癌细胞EJ；膀胱癌细胞腔内种植的动物模型成瘤率高，可以在不处死裸鼠的情况下体外、动态观察肿瘤的生长；人膀胱肿瘤细胞裸小鼠膀胱腔内种植的形成过程为倒抛物线型。膀胱肿瘤细胞对尿液具有高适应性，体外培养的膀胱肿瘤细胞可以在尿液中存活一定时间(至少12h)；膀胱粘膜损伤后会出现局部炎症反应及趋化因子CXCL12(SDF-1)的高表达；并且膀胱粘膜损伤与膀胱癌腔内种植呈正相关。收起

关键词 : 膀胱癌动物模型腔内种植

10. 人类冠状病毒229E（HCoV-229E）感染小鼠肺炎模型的建立及应用

[学位论文] 徐英莉中国中医科学院 2021年硕士导师: 崔晓兰共117页

摘要 : 近年来，新发冠状病毒性疾病的不断出现（如SARS、MERS、COVID-19等），迫使人类寻找有效地应对策略，从多方面建立控制突发疫情的手段及方法迫在眉睫。适宜的动物模型是疫苗及药物筛选的基础，建立能在P2实验室中应用且成本较低的冠状病毒小鼠肺炎模... 展开近年来，新发冠状病毒性疾病的不断出现（如SARS、MERS、COVID-19等），迫使人类寻找有效地应对策略，从多方面建立控制突发疫情的手段及方法迫在眉睫。适宜的动物模型是疫苗及药物筛选的基础，建立能在P2实验室中应用且成本较低的冠状病毒小鼠肺炎模型，对于控制疫情、药物筛选及病毒免疫学研究具有重要意义。中医药治疗疫病有几千年的实践积累，自西汉至清末，有记载的大型瘟疫超过300余次，在此过程中形成了大量经典名方以及现代中药。中医药治疗疫病的理论及相关中药的应用是我国历次应对突发疫病的重要依据及手段[1][2]。近年来，在SARS、COVID-19治疗中积累了大量有价值的临床应用数据，其经验已向世界范围内推广。因此提供适宜动物模型的现代科学数据支持，是推动中医药走向世界不可或缺的条件。本文共分为两大部分: 第一部分中建立了人类冠状病毒229E(HCoV-229E)小鼠肺炎模型:首先根据体外易感性、细胞病变程度、病毒载量等条件筛选建立体外模型。继而考察不同病毒体系、小鼠品系、感染量、感染次数等不同感染条件，建立人类冠状病毒229E(HCoV-229E)体内小鼠肺炎模型。最后以连花清瘟胶囊为阳性药建立了HCoV-229E感染的小鼠肺炎模型的指标评价体系，使其达到客观化、科学化、标准化、规范化。第二部分为人类冠状病毒229E(HCoV-229E)小鼠肺炎模型的应用:在人类冠状病毒229E(HCoV-229E)小鼠肺炎模型基础上进一步应用该模型，对《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第八版）》[3]中推荐试用药物:干扰素、磷酸氯喹、金花清感颗粒、疏风解毒胶囊及相关方剂1-2、方剂2-2、方剂4-2对HCoV-229E小鼠肺炎模型的治疗作用进行研究。解决国家疫情期间药物筛选的亟需，也证明了该模型的可行性、稳定性和重复性。目的: 本实验采用人类冠状病毒229E(HCoV-229E)建立了小鼠肺炎模型，以期构建适宜病毒复制，模拟冠状病毒临床症状，且能应用于冠状病毒药物筛选的新动物模型。为紧急疫情时期应急筛选有效的药物提供可行的动物模型，也为相关冠状病毒感染基础研究及新药研发奠定基础。方法: 1HCoV-229E体外感染体内外模型的建立体外实验中，采用HCoV-229E病毒感染人胚肺细胞、人肺癌细胞、巨噬细胞、犬肾细胞，通过考察各个细胞对HCoV-229E的易感性、细胞病变程度、病变出现的时间、细胞上清液中病毒载量，建立体外细胞模型。 HCoV-229E动物感染模型中，共筛选了3个小鼠品系:BALB/c小鼠、BALB/c-nude小鼠及ICR小鼠。病毒滴鼻感染后，通过肺指数及肺组织病毒载量检测筛选了不同病毒体系、小鼠品系、感染量、感染次数等造模条件。 2HCoV-229E感染的BALB/c小鼠肺炎模型评价指标的建立体内实验中，并采用连花清瘟胶囊作为阳性药进行小鼠肺炎模型评价指标的建立。BALB/c小鼠分别于第1天、第3天用异氟烷轻度麻醉后，以100TCID50稀释度的HCov-229E病毒液经滴鼻感染，50μL/只。第5天进行肺部CT检测、淋巴细胞分型比例检测、肺指数及抑制率计算。HE染色进行肺组织及全身主要器官的组织病理学检查及肺组织病毒载量检测，并采用ELISA法进行肺组织中炎性细胞因子含量测定。 3HCoV-229E感染的BALB/c小鼠肺炎模型的应用应用HCoV-229E感染的BALB/c小鼠肺炎模型，进行西药(磷酸氯喹、干扰素α2b)，中药复方（方剂1-2、方剂2-2、方剂4-2），上市中成药（金花清感颗粒、疏风解毒胶囊）药效学作用进行评价。造模方法同实验方法2，第5天进行淋巴细胞分型比例检测，进行肺指数及抑制率测定。采用RT-PCR进行肺组织病毒载量检测，采用ELISA法进行肺组织中炎性细胞因子含量测定。结果: 1HCoV-229E体外感染体内外模型的建立对HCoV-229E对MDCK、A549、MRC-5以及人类巨噬细胞4种细胞的易感性进行了评价，从病变程度、出现时间、稳定性、保存等方面最终选取了A549细胞、MDCK细胞作为病毒增殖载体，HCoV-229E病毒对MDCK、A549的TCID50均为10-2。 HCoV-229E动物感染模型中，本实验共筛选了3个小鼠品系、2种病毒体系、2个病毒稀释度。其中采用A549培养病毒液在100TCID50浓度经滴鼻感染1次，感染HCoV-229E3天后，BALB/c小鼠及BALB/c-nude小鼠模型组肺指数均显著升高，肺指数均值大于0.9(P＜0.01)，肺组织中病毒核酸显著增高(P＜0.01)，达到模型建立标准。但感染4天后，小鼠肺指数及肺组织中病毒核酸表达明显降低，模型呈恢复趋势。在此基础上并进一步进行了感染次数考察，采用A549传代病毒液以100TCID50稀释度，2次滴鼻感染BALB/c小鼠。第5天，模型对照组小鼠肺指数明显增高(肺指数＞0.9，P＜0.01)，肺组织中病毒核酸显著增高(P＜0.01)，小鼠肺组织呈现弥漫性灶状肺泡坏死，并有部分肺泡支架塌陷，以上指标表明，该建模方法达到模型建立标准。 2HCoV-229E感染的小鼠肺炎模型评价指标的建立采用连花清瘟胶囊作为阳性药进行小鼠肺炎模型评价指标的建立，经滴鼻感染100TCID50HCoV-229E病毒2次，感染后5d，HCoV-229E模型对照组小鼠体重下降＞1g，肺指数较正常对照组显著升高(P＜0.1)，肺组织中HCoV-229E核酸表达较正常组显著升高(P＜0.1)。模型对照组小鼠肺组织匀浆中炎症因子IL-6、IL-10及TNF-α蛋白表达显著增高(P＜0.1)。小鼠外周血中免疫细胞CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞及B细胞的百分比均明显降低(P＜0.1)。模型对照组肺部CT可见纹理增粗斑点状阴影。肺组织弥漫性肺泡坏死，肺泡支架塌陷，周围肺间隔增宽。全身主要脏器均出现与临床表现较为一致的病理学改变。治疗给予连花清瘟胶囊4天后，连花清瘟胶囊在其治疗范围内，肺指数及肺组织病毒载量、病毒核酸表达均有较为明显的改善作用。以上结果表明，小鼠体重、病毒载量、肺部炎症、炎症因子表达、淋巴细胞分型、CT及病理学改变可以做为HCoV-229E BALB/c小鼠轻症肺炎模型的评价指标。 3HCoV-229E感染的小鼠肺炎模型的应用磷酸氯喹及干扰素α2b经治疗性给药均有一定的治疗作用。磷酸氯喹可以明显降低炎症因子TNF-α的含量及升高CD8+T细胞百分比。磷酸氯喹可能通过抑制小鼠炎症及改善免疫发挥作用。干扰素α2b可以明显降低肺指数，抑制炎症因子TNF-α的表达，可能通过抑制炎症发挥作用。治疗性给药4天后，与模型组比较，方剂1-2、2-2在治疗范围内，可明显降低HCoV-229E感染的BALB/c小鼠肺指数、肺组织中HCoV-229E病毒载量、小鼠肺组织匀浆中炎症因子IL-6、IL-10及TNF-α含量，其中1-2小剂量、2-2大剂量组还能显著提高B细胞百分比。方剂4-2在治疗范围内，与模型组比较，均可显著降低肺指数，肺组织病毒载量、小鼠肺组织炎症因子IL-6、IL-10及TNF-α含量，其中小剂量组还能显著升高CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞及B细胞的百分比。金花清感胶囊、疏风解毒胶囊在治疗范围内均可降低肺指数、肺组织HCoV-229E病毒载量及肺组织匀浆中炎症因子IL-6、IL-10及TNF-α的蛋白表达水平，其中金花清感胶囊小剂量组还能显著升高CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的百分比。疏风解毒胶囊小剂量能够显著升高CD3+T细胞和CD4+T细胞的百分比。结论: 1成功建立了人类冠状病毒229E体内外感染模型。 2构建了HCoV-229E感染的小鼠肺炎模型评价指标评价体系。 3应用HCoV-229E感染的小鼠肺炎模型，明确了金花清感颗粒、疏风解毒胶囊、方剂1-2、方剂2-2、方剂4-2的药效学作用，也证明了该模型的可行性、稳定性和重复性。创新点: 1本实验首次建立了HCoV-229E感染BALB/c小鼠肺炎模型，并形成规范的评价标准，国内外尚未见报道。 2本研究为《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第八版）》[4]中推荐试用药物金花清感颗粒、疏风解毒胶囊、方剂1-2、方剂2-2、方剂4-2治疗HCoV-229E感染BALB/c小鼠肺炎模型的有效性提供了实验室基础。收起

关键词 : 肺炎动物模型药物筛选