中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 张海华北京协和医学院(中国医学科学院) 2004年博士导师: 柯美云;陈建德共925页

摘要 : 功能性消化不良(Functional Dyspepsia,FD)指具有消化不良症状,但无明显胃肠道器质性病变的一种临床综合征.其病因和发病机制仍不清楚,目前认为胃电紊乱、胃肠运动异常、近端胃感觉异常在其中起重要作用.胃电图(electrogastrography,EGG)是用体表电极... 展开

关键词 : 功能性消化不良胃电紊乱多通道胃电图

2. PDZ、SH2结构域结合特性的研究

[学位论文] 高诗娟北京协和医学院(中国医学科学院) 2006年博士导师: 高友鹤共429页

摘要 : Erbin(ErbB2 interacting protein)可通过其PDZ结构域介导ErbB2定位到上皮细胞基底外侧膜。为了深入研究Erbin PDZ结构域的配体识别特性，本实验以ErbinPDZ为诱饵蛋白，用酵母双杂交系统来筛选新型随机多肽文库Ⅱ。研究发现，除了报道的Ⅰ类配体-[E/D... 展开

关键词 : PDZ Erbin 酵母双杂交随机多肽文库磷酸化酪氨酸病理生理学

3. 某市交响乐团员工健康危险因素与健康相关的工作效率低下的关系研究

[学位论文] 张晓方北京协和医学院(中国医学科学院) 2009年硕士导师: 黄建始共422页

摘要 : 背景：健康是一种躯体、精神及社会和谐融合的完美状态，而不仅仅是没有疾病或身体虚弱。生产率是一个工人每小时工作能生产的物品与劳务的数量。决定生产率的最重要的因素之一就是人力资本。所以员工的健康作为人力资本的主要组成部分也受到了... 展开背景：健康是一种躯体、精神及社会和谐融合的完美状态，而不仅仅是没有疾病或身体虚弱。生产率是一个工人每小时工作能生产的物品与劳务的数量。决定生产率的最重要的因素之一就是人力资本。所以员工的健康作为人力资本的主要组成部分也受到了越来越多的关注。自20世纪八十年代起，就有许多研究证明了员工的健康状况可以影响企业的生产率，而其中，工作效率低下(在此定义为“员工因健康问题而导致工作时效率下降”)比缺勤和残疾导致了更多的生产率降低和经济损失。由于健康危险因素的可干预性以及对其干预有更高的成本效益比，许多学者把重点放在了对健康危险因素和工作效率低下的研究上，并均证明了二者之间的关联。但是在国内，笔者尚未见到有关健康危险因素与工作效率低下关系的研究报道。本研究以某市交响乐团员工为研究对象，探讨员工的健康危险因素与其工作效率低下是否有关联。目的：通过本研究检验：某市交响乐团员工的健康危险因素与工作效率低下是否有关联？其中包括：一、某市交响乐团员工的哪些健康危险因素与工作效率低下有关联？二、某市交响乐团员工的健康危险因素个数与工作效率低下是否有关联？三、某市交响乐团员工的健康危险等级与工作效率低下是否有关联? 方法：本研究采用类实验(Quasi—experiment)这一研究方法。在国外的《健康和绩效调查问卷》(HPQ，Health and Performance Questionnaire)、《工作能力快速调查问卷》(WPSI，Work Productivity Short Inventory)、《健康和工作问卷》(HWQ，Health and Work Questionnaire)和密歇根大学的健康风险估卷基础上开发出本研究所用的《健康危险因素及工作效率评估调查问卷》，对某市交响乐团131名员工进行了三次横断面调查，并根据某市交响乐团员工的健康危险因素分布和小组访谈结果对其进行了6个月的健康干预，通过基线调查以及干预后调查与基线调查的对比，来检验健康危险因素与工作效率低下之间是否存在关联，并计算工作效率低下所导致的经济损失及其在健康相关经济损失中所占的比例。结果：一、在基线调查的员工的12个健康危险因素中，压力大占69.4%，其次分别为自我感觉健康差(60.3%)、吸烟(57.0%)、身体活动少(43.8%)、血压高(38.8%)和超重/肥胖(37.2%)。员工拥有的健康危险因素个数从0-8个不等。拥有中等健康危险的员工有53名，占43.8%；拥有中等健康危险的员工有46名，占38.0%。干预后，所有健康危险因素所占的比例均出现了降低。其中，干预3个月后，有5个健康危险因素在员工中所占的比例出现了有统计学意义的显著降低，分别为血压高(P<0.001)、自我感觉健康差(P=0.031)、超重朋巴胖(P=0.021)、胆固醇高(P<0.001)和工作满意度差(P=0.003)。干预6个月后，有3个健康危险因素在员工中所占的比例出现了有统计学意义的显著降低，分别为血压高(P<0.001)、超重/肥胖(P=0.002)和胆固醇高(P<0.001)。干预后和基线相比，员工拥有的最多的健康危险因素个数从8个降到了6个，中期时(干预3个月后)有65.9%的员工出现了健康危险因素个数的减少，末期时(干预6个月后)有66.7%的员工出现了健康危险因素个数的减少，并且健康危险因素减少2个或2个以上的员工人数连续增加，健康危险因素个数增加的员工人数连续减少。中期和基线相比，员工的平均健康危险因素个数减少了1.01个，且具有统计学意义(P<0.001)；末期和基线相比，员工的平均健康危险因素个数减少了1.22个，且具有统计学意义(P<0.001)。中期和基线相比，49.5%的员工的健康危险等级出现降低；末期和基线相比，47.6%的员工的健康危险等级出现降低。二、基线调查显示，某市交响乐团中有52.1%的员工自我报告存在工作效率低下。女性比男性(x2=6.629，P=0.010)、从事行政管理工作的员工比从事演奏指挥的员工(x2=6.629，P=0.010)、年龄<38岁的员工比年龄>38岁的员工(x2=5.873，P=0.016)更多地自我报告了具有工作效率低下。女性比男性(Z=2.117，P=0.034)、年龄<38岁的员工比年龄>38岁的员工(Z=—2.748，P=0.006)、学历大学及以上的员工比学历在大学以下的员工(Z=—2.151，P=0.032)的工作效率低下等级要高。干预后和基线相比，无工作效率低下的员工比例增多，严重工作效率低下的员工比例减少。3个月的干预可使工作效率低下平均值降低3%左右，6个月的干预可使工作效率低下平均值降低2.5%左右。某市交响乐团员工的月薪酬均值约为6，361元，按此计算，3个月或6个月的干预可使该乐团每人每月避免因工作效率低下带来的隐形损失约159元～190元。三、通过横断面调查，本研究发现压力大和生活满意度差与工作效率低下存在关联(压力大，OR=7.045，95%CI：1.627—30.507；生活满意度，OR=7.229，95%CI：1.455—35.921)；本研究末期和基线相比较时，发现身体活动少的改变与工作效率低下等级的改变之间存在关联(Z=2.308，P=0.021)。基线时，压力大和无压力大的员工的工作效率低下平均值分别为5.11%和0.95%，生活满意度差和无生活满意度差的员工的工作效率低下平均值分别为8.80%和2.79%，身体活动少和无身体活动少的员工的工作效率低下平均值分别为4.60%和3.25%。某市交响乐团员工的月薪酬均值约为6，361元，按此计算，有压力大者因工作效率低下每月给企业带来隐形损失要比无压力大者多出265元左右；生活满意度差者因工作效率低下每月给企业带来隐形损失要比无生活满意度差者多出382元；身体活动少者因工作效率低下每月给企业带来隐形损失要比无身体活动少者多出86元。如果按2周有80个工作小时计算，有压力大者比无压力大者2周内因为工作效率低下要多损失3.3小时的工作时间；生活满意度差者比无生活满意度差者2周内因为工作效率低下要多损失4.8小时的工作时间；身体活动少者比无身体活动少者2周内因为工作效率低下要多损失1.1小时的工作时间。本研究未发现健康危险因素个数与工作效率低下之间的关联，但发现健康危险等级越高的员工的工作效率低下程度越大，每增加一个健康危险等级，工作效率低下值约升高2%。四、某市交响乐团员工每年因工作效率低下带来的隐形损失为383，980元，占健康相关经济损失的54.4%。某市交响乐团员工每年因病缺勤带来的损失为219，988元，占健康相关经济损失的31.2%。某市交响乐团2008年为其员工总共支付员工个人医疗保险费用101，640元，占健康相关经济损失的14.4%。6个月的健康干预可以使某市交响乐团减少经济损失297，989元，其中减少因工作效率低下造成的经济损失249，987元，减少因病缺勤造成的经济损失47，998元。结论：一、某市交响乐团员工最普遍的健康危险因素有压力大、自我感觉健康差、吸烟、身体活动少、血压高和超重/肥胖，其中压力大、吸烟、血压高、超重/肥胖率均高于普通人群。员工的平均健康危险因素个数为4个。有43.8%的员工处于中健康危险等级，38.0%的员工处于高健康危险等级。干预后，12个健康危险因素所占的比例均出现了降低，中期和基线相比，员工的平均健康危险因素个数减少了1.01个；末期和基线相比，员工的平均健康危险因素个数减少了1.22个。中期和基线相比，49.5%的员工的健康危险等级出现降低，末期和基线相比，47.6%的员工的健康危险等级出现降低。二、基线调查显示，某市交响乐团中有52.1%的员工自我报告存在工作效率低下。年龄≤38岁、女性、从事行政管理工作和学历大学及以上的员工自我报告了较多的工作效率低下。干预后，某市交响乐团员工的工作效率低下情况出现了好转。3个月的干预可使工作效率低下平均值降低3%左右，6个月的干预可使工作效率低下平均值降低2.5%左右。3个月或6个月的干预可使该乐团每人每月可避免因工作效率低下而带来的隐形损失约159元～190元。三、压力大、生活满意度差和身体活动少与工作效率低下存在关联，即跟心理/感觉有关的健康危险因素与工作效率低下的关联较强。有压力大的员工因工作效率低下每月给企业带来隐形损失要比无压力大的员工多出265元左右；生活满意度差的员工因工作效率低下每月给企业带来隐形损失要比无生活满意度差的员工多出382元；身体活动少的员工因工作效率低下每月给企业带来隐形损失要比无身体活动少的员工多出86元。健康危险等级越高的员工的工作效率低下程度越大，每增加一个健康危险等级，工作效率低下值约升高2%。四、工作效率低下导致的隐形损失占健康相关经济损失的54.4%，而因病缺勤和医疗保险费用分别占健康相关经济损失的31.2%和14.4%。6个月的健康干预可使某市交响乐团减少经济损失297，989元，其中减少因工作效率低下造成的经济损失249，987元，减少因病缺勤造成的经济损失47，998元。收起

关键词 : 健康危险因素工作效率低下因病缺勤健康干预

4. 珍珠菜属两种药用植物化学成分的研究

[学位论文] 田景奎北京协和医学院(中国医学科学院) 2002年博士导师: 徐丽珍;杨世林共356页

摘要 : 珍珠菜属(Lysimachia)是报春花科(Primulaceae)的一个药用大属,关于本属植物化学成分和药理活性研究较少.我们对珍珠菜属两种药用植物黄连花(Lysimachia davurica.Ledeb.)和细梗香草(Lysimachia capillipes Hemsl.)的化学成分进行了系统研究.从黄连花... 展开

关键词 : 珍珠菜属黄连花细梗香草化学成份皂苷合成 5-O-咖啡酰奎宁酸酯 HPLC-ELSD-UV 药理活性

5. 大理白前化学成分及其生物活性研究;大理白前中甾体苷类化学成分ESI-MS裂解行为研究

[学位论文] 刘悦北京协和医学院(中国医学科学院) 2006年博士导师: 庾石山共324页

摘要 : 大理白前(CynanchumforrestiiSchltr.)为萝藦科(Asclepiadaceae)鹅绒藤属植物。分布于云南、西藏、甘肃、四川、贵州等省。其根有清热散邪、利尿、生肌止痛等作用。其根与同属植物白薇(CynanchumatratumBunge)和变色白前(CynanchumvisicolorBunge)相似... 展开大理白前(CynanchumforrestiiSchltr.)为萝藦科(Asclepiadaceae)鹅绒藤属植物。分布于云南、西藏、甘肃、四川、贵州等省。其根有清热散邪、利尿、生肌止痛等作用。其根与同属植物白薇(CynanchumatratumBunge)和变色白前(CynanchumvisicolorBunge)相似，一些地方将其作为“白薇”的代用品。药理实验表明：大理白前根乙醇提取物具有一定的细胞毒活性；乙酸乙酯及氯仿部分的第3、5和9流分具有一定的抑制单胺氧化酶的活性；氯仿部分具有较好的抗炎作用。为寻找其活性成分，本课题组对植物乙醇提取物的石油醚部分、氯仿部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分进行了化学成分研究，从中分离得到了28个化合物，其中包括1个具有较强细胞毒活性的生物碱类化合物；1个新的3，4-开环-13，27-成环的乌苏烷型三萜类化合物；16个新的甾体苷类化合物，包括10个13，14：14，15-二裂孕甾烯苷、5个14，15-裂孕甾烯苷以及1个苷元骨架未变形的孕甾烯苷。15个变形的孕甾烯苷的分子中，糖链部分多由5个或6个糖单元组成，糖链的外侧通常为1→4或1→6相连的两分子葡萄糖单元，内侧为1个或多个去氧糖单元。利用MTT法对所得的以上化合物进行了几种人实体瘤细胞株的细胞毒活性测定，实验结果表明：化合物28对HCT-8、Bel-7402、BGC-823、A549和A2780细胞均具有较强的细胞毒活性，IC50值均小于0.1μM。孕甾烯苷类化合物的电喷雾质谱学研究报道较少，特别是上述两类变形孕甾烯苷类化合物在电喷雾质谱中的裂解特征无系统研究。因此，我们对从大理白前根中分离得到的孕甾烯苷类化学成分(特别是其中两类变形的孕甾烯苷类化学成分)的ESI-MS的裂解行为进行了研究，对变形的孕甾烯苷元的特征性裂解行为以及糖链部分的糖苷键裂解和交叉环切除等质谱学规律进行了深入探讨，从中总结出一些具有规律性的结论。在此次基础上，推测了3个微量的甾体苷类化合物的结构。收起

关键词 : 大理白前化学成分生物活性植物乙醇提取物

6. 四种中草药的活性成分研究

[学位论文] 田小雁北京协和医学院(中国医学科学院) 2006年博士导师: 庾石山;方唯硕共321页

摘要 : 中草药无论在历史上还是在今天都对中华民族的健康乃至繁衍和生存起到了极其重要的作用。中草药发挥生理作用的物质基础是其中的活性成分。为了从中草药中寻找活性化合物，开发新药和阐明中药作用的机理，我们用活性追踪的方法对四种中草药的化学成分... 展开中草药无论在历史上还是在今天都对中华民族的健康乃至繁衍和生存起到了极其重要的作用。中草药发挥生理作用的物质基础是其中的活性成分。为了从中草药中寻找活性化合物，开发新药和阐明中药作用的机理，我们用活性追踪的方法对四种中草药的化学成分和药理活性进行了研究。对川续断科川续断属植物续断的干燥根的95％乙醇提取物，用噻唑蓝显色法(MTT)法确定其抗肿瘤活性部位为正丁醇部分，通过活性追踪的方法对正丁醇部分进行了化学成分研究，寻找到了抗肿瘤活性成分—酚酸类化合物，分离和鉴定了两个酚酸类化合物，并测定了其细胞毒活性；在活性追踪的过程中分离得到了三萜及其苷类化合物5个，鉴定了2个；分离得到了环烯醚萜苷类化合物14个，鉴定了13个。从续断中共分得21个化合物，鉴定了17个化合物，包括8个新化合物，其中两个为首次分离和测定的环烯醚萜苷四聚体化合物。对菊科千里光属植物千里光干燥全草的95％乙醇提取物，用MTT法确定了其抗肿瘤活性部位并对活性部位的化学成分进行了研究，寻找到了千里光中的主要抗肿瘤活性成分和一些微量活性成分。在活性追踪的过程中从千里光的抗肿瘤有效部位分离测定了12个jacaranone类活性化合物，包括8个新化合物；6个黄酮苷类化合物；1个倍半萜；1个木脂素；2个甾体类化合物；1个单糖。测定了jacaranone类化合物的体外细胞毒活性和jacaranoneethylester的体内抗肿瘤活性，对jacaranone类化合物的构效关系进行了初步探讨。同时，利用DPPH法对千里光的甲醇部分的抗氧化活性进行了研究，寻找到了具有抗氧化作用的活性成分—酚酸类化合物，分离并鉴定了8个酚酸类化合物和一个腺苷类化合物。从千里光中共分到37个化合物，测定了32个化合物，包括8个新化合物。对天南星科千年健属植物千年健干燥根茎的95％乙醇提取物，石油醚和氯仿萃取部分显示了一定的β-分泌酶抑制活性，用活性追踪的方法对这两个部位进行了化学成分研究，寻找到了4个活性成分-酚酸酯类化合物。同时在活性追踪的过程中，分离和鉴定了倍半萜类化合物9个，包括一个新倍半萜；分离得到了长链脂肪烃类化合物4个，鉴定了1个；酚酸酯类化合物4个，包括2个新化合物；杂环类化合物1个；甾体类化合物1个。从千年健中共分离得到了20个化合物，鉴定了17个化合物，包括三个新化合物，其中一个为新骨架的倍半萜类化合物。回心草为真藓科植物大叶藓和南大叶藓的干燥或新鲜全草。通过大鼠离体心脏Langendoff灌流模型确定了回心草抗心肌缺血的活性部位。用活性追踪的方法，对活性部位的化学成分进行了研究。在活性追踪的过程中，分离和鉴定了1个新的黄酮苷类化合物；1个吡喃酮类化合物；2个邻苯二甲酸酯类化合物；5个甾体类化合物；2个糖类化合物。从回心草中已分离得到了10个化合物，鉴定了8个化合物，包括一个新的黄酮苷类化合物。目前正在对活性部位继续进行化学成分的研究。总之，用活性追踪的方法对四种中草药的活性部位进行了化学成分的研究，找到了续断和千里光中的细胞毒成分，千年健中具有β-分泌酶抑制作用的活性成分和回心草中具有抗心肌缺血作用的活性部位。从常用中药千里光、续断、千年健、回心草的活性部位共分离得到了88个化合物，测定了74个化合物，包括20个新化合物，其中三个为新骨架的化合物。收起

关键词 : 续断化学成分药理活性中草药提取物千里光千年健回心草

7. 山葡萄根和海南买麻藤藤茎中抗炎低聚芪类化合物的研究及活性低聚芪的仿生合成

[学位论文] 黄开胜北京协和医学院(中国医学科学院) 2000年博士导师: 林茂共302页

摘要 : 天然低聚芪类化合物是由白藜芦醇可其它二苯乙烯单体(如异丹叶大黄素、氧化白藜芦醇等)以不同的聚合方式、不同的聚合度聚合而成的一类结构复杂、具有多种生物活性的化合物.该文对该类化合物的化学研究概况进行了综述,并建议用一种新的分类方法对该类... 展开

关键词 : 山葡萄根买麻藤低聚芪类活性低聚芪仿生合成

8. PPARγ激动剂罗格列酮及GLP02的抗肿瘤作用及机制研究hPPARγ2质粒的构建和高表达细胞模型的建立及生物学功能探讨hPPARγ2单克隆抗体的制备

[学位论文] 李燕北京协和医学院(中国医学科学院) 2006年博士导师: 陈晓光共300页

摘要 : 过氧化酶体激活物增殖受体(peroxisome proliferator-activated receptors，PPARs)属于配体激活的转录因子，目前己发现三种亚型：PPARα、PPAR γ和PPARδ。PPAR γ在脂肪组织中表达较高，在乳腺、结肠、肺、卵巢等其它组织中也有不同程度的表达。研... 展开过氧化酶体激活物增殖受体(peroxisome proliferator-activated receptors，PPARs)属于配体激活的转录因子，目前己发现三种亚型：PPARα、PPAR γ和PPARδ。PPAR γ在脂肪组织中表达较高，在乳腺、结肠、肺、卵巢等其它组织中也有不同程度的表达。研究结果表明PPARγ激活后除了可促进脂肪形成及发挥抗炎作用外，还可抑制肿瘤细胞的增殖、诱导其分化并促进凋亡、对其侵袭转移也有一定的抑制作用。噻唑烷二酮类(thiazolidinediones，TZDs)是一类具有强烈PPAR γ激动活性的化合物，其中以罗格列酮(Rosiglitazone，ROZ)的活性最强，可达纳摩尔水平。GLPO2则为一新合成的化合物，也属于PPAR γ激动剂，由我所合成室郭宗儒教授课题组提供。在该部分研究中，将主要探讨ROZ和GLPO2对结肠癌、乳腺癌和黑色素瘤细胞株的抗肿瘤作用及相关机制。 1．对人结肠癌HT-29细胞的抗肿瘤作用 ROZ和GLPO2均可明显抑制HT-29细胞的生长及集落形成，后者的抑制作用明显强于前者。两者均可抑制HT-29细胞DNA和蛋白质的合成，对后者的抑制尤为显著。 ROZ和GLPO2可减少G1期细胞比例，而增加G2期和S期细胞的比例。HT-29细胞经两化合物处理72h后可出现明显的DNA梯状条带(DNA Ladder)，ROZ处理细胞后，凋亡细胞所占比例明显升高， Western Blot结果显示，ROZ和GLPO2可明显降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平。 RT-PCR、Westem Blot和免疫组化的结果显示，ROZ可促进HT-29细胞PPARγ的表达，并呈剂量依赖性；GLPO2在低剂量时即可明显提高PPAR γ的表达，而增加剂量后反而抑制其表达。 ROZ不影响ERK1／2的表达，但可以明显促进p-ERK的表达，推测ROZ可能是通过促进ERK磷酸化而增加PPAR γ磷酸化水平，从而导致PPAR γ活性降低，影响细胞增殖并诱导凋亡。与ROZ不同，GLPO<,2>可明显降低ERK1／2和p-ERK的表达，推测该化合物可能是通过抑制ERK1／2及其磷酸化，而发挥抑制细胞增殖和诱导凋亡的作用。与体外研究结果一致，裸鼠实验结果显示ROZ和GLPO<,2>均可使肿瘤组织发生明显纤维化，抑制裸HT-29异体移植瘤的生长，GLPO<,2>的抑制效果强于ROZ。相关研究报道显示PPARy和类视黄醇x受体(retinoid X receptor，RXR)两者只有在组成异二聚体同时活化时才能充分发挥作用，其中任一受体单独激活都不足以完全抑制肿瘤细胞的增殖。故本研究将PPARy激动剂ROZ与RXR激动剂全反式维甲酸(all-trans retinoic acid，ATRA)同时应用，观察后者是否可增强ROZ对HT-29细胞的抑制作用，以期为结肠癌的治疗提供实验依据。 2．ROZ和ATRA联合应用在人结肠癌HT-29的抗肿瘤作用两者联合应用的结果显示，ATRA可明显增强ROZ对HT-29的生长抑制作用，提高其诱导细胞凋亡的能力。在两者单独使用均不引起细胞凋亡的剂量下联合使用，可使HT-29细胞的凋亡比例达到37.9％和60-6％。单独使用ATRA对Bc1-2的表达无影响，ROZ则可降低Bc1-2的表达，并呈剂量依赖性，两者联合应用后降低HT-29细胞Bc1-2表达的作用显著增强。 ROZ和ATRA单独应用时仅轻微升高HT-29细胞中碱性磷酸酶(alkalinephosphatase，AKP)的活性，而联合使用对AKP活性的影响明显增强。提示两者联合使用可促进HT-29细胞的分化。 HT-29细胞分别经ROZ和ATRA单独作用以及两者联合作用后接种于裸鼠体内，ATRA单独作用后形成的肿瘤其大小与对照组相比无明显差别，ROZ作用后形成的肿瘤体积约为对照组的一半，而两者联合处理后形成的肿瘤明显缩小，仅为对照组的10%左右。 ROZ和ATRA联合作用于HT-29细胞后，其G1期细胞降低的比例较单药更为明显，G2期细胞下降的比例也很明显，而S期的比例则呈上升趋势。 ROZ对ERK的表达没有明显影响，但联合应用ATRA后，ERK的表达明显增加，同时，ROZ还可增加ERK的磷酸化水平，联合应用ATRA后，p-ERK的表达在ROZ低剂量时升高，高剂量时抑制。 3.对乳腺癌的抗肿瘤作用 ROZ和GLP02对MCF-7细胞的生长均有明显地抑制作用，可抑制其DNA的合成，GLP02的作用强于ROZ。ROZ和GLP02可引起少部分细胞发生凋亡，对凋亡相关蛋白Bcl-2的表达也具有一定的降低作用，同样GLP02的作用略强于ROZ。细胞周期分析结果显示，ROZ可以升高G1+G2期细胞比例，同时降低S期细胞的比例。GLP02对G1期细胞比例无明显影响，增加G2期+S期细胞的比例。 ROZ使MCF-7细胞中的PPAR γ表达升高，而GLP02使其剂量依赖性地降低。对蛋白P53的分析结果显示，ROZ和GLP02对P53的表达均有增强作用。两化合物在低于诱导细胞凋亡的剂量下可诱导细胞成衰老样表型，维持细胞衰老状态。体内裸鼠移植瘤实验结果与体外实验结果一致，ROZ可以明显抑制MCF-7裸鼠移植瘤的生长，作用强度与阿霉素相当，而且对裸鼠体重无明显影响。 4.对黑色素瘤的抗肿瘤作用综上所述，ROZ和GLPO2可能是通过诱导分化，促进凋亡以及抗侵袭转移等多种机制而发挥其抗肿瘤作用，该类化合物有望成为新型的抗肿瘤药物。 PPAR γ与肿瘤的关系还未完全清楚阐明，存在着诸多矛盾的结论，究其原因可能是PPAR γ作用范围广泛，作用机制复杂，影响PPAR γ发挥作用的影响因素多，并且受PPAR γ调控的靶基因多且复杂，相互之间亦存在交互作用。乳腺癌与PPAR r的表达尤为密切，因此在本研究中，为了比较PPAR γ在正常细胞与肿瘤细胞之间、在乳腺癌细胞雌激素受体阳性和受体阴性细胞之间作用的联系与差异，初步探讨PPAR γ基因在抗肿瘤作用中的功能及可能的信号传导途径，将hPPAR γ2基因转染入NIH3T3、MCF-7、MDA-MB-231细胞，经过鉴定筛选出稳定高表达的转基因细胞株。研究中发现转入hPPAR γ2基因后，三株细胞中PPAR γ的表达无论在mRNA水平还是在蛋白质水平均明显升高。对于未转入基因的细胞，ROZ均增高原有：PPAR γ的表达，对于转基因的细胞，ROZ同样升高NIH3T3细胞中PPAR γ表达，而降低MDA-MB-231中PPAR γ的表达，对于MCF-7细胞则是低剂量时增高，高剂量时抑制，而这也正与诱导分化的结果一致。 1．NIH3T3细胞与Pγ2-NIH3T3细胞 2.MDA-MB-231细胞与Py2-MDA-MB-231细胞 3．MCF-7细胞与Pγ2-MCF-7细胞综上所述，转入hPPARγ2基因后可使细胞形态改变，致瘤性增强、细胞粘附能力降低，运动功能增强，肿瘤细胞分化能力降低、侵袭转移能力增加，而且hPPARγ2主要影响MAPK通路、一些生长因子的通路(如TGFβ、IGFl、EGFR)以及激素水平和周期凋亡相关的蛋白，反过来，MAPK及其它生长因子及激素也影响hPPARγ2的表达。因此可以认为hPPARγ2基因有可能成为肿瘤治疗和诊断的一个靶点，而其激动剂有望成为治疗肿瘤或者辅助治疗肿瘤的一类新药。首先，利用论文第二部分建立的pMD18-T／hPPARγ2亚克隆扩增出hPPARγ2前1017bp cDNA。利用pET原核表达系统表达了含有hPPAR72前339个氨基酸(C-Histag)融合蛋白，并成功地进行了纯化。其次利用原核表达的重组hPPARγ2蛋白制备了特异性抗hPPARγ2单克隆抗体1B4，3H2，3H10，10D6和10D8。通过ELISA和Western Blot方法对抗体进行了特异性鉴定。证明这5株单抗均为hPPARγ2的特异性抗体。综上所述，这些系统的建立和鼠源抗hPPARγ2单克隆抗体的制备为后续的针对hPPART2抗肿瘤作用及机制研究提供了良好的工具，同时为细胞水平高通量筛选模型的建立奠定了基础，节约了成本。收起

关键词 : 过氧化酶体激活物增殖受体激动剂罗格列酮抗肿瘤作用 hPPAR&gamma 2质粒单克隆抗体

9. 长穗桑化学成分和生物活性研究

[学位论文] 谭永霞北京协和医学院(中国医学科学院) 2009年博士导师: 于德泉;陈若芸共281页

摘要 : 长穗桑为桑科桑属植物，又名黔鄂桑、黄蚕桑、花桑，是重要农作物栽培桑的野生近缘种，产于我国南部地区。其根、枝、叶、果实均可作药用。对长穗桑茎皮95%乙醇提取物和水提取物分别进行抗氧化和降糖活性筛选，结果表明，95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位... 展开长穗桑为桑科桑属植物，又名黔鄂桑、黄蚕桑、花桑，是重要农作物栽培桑的野生近缘种，产于我国南部地区。其根、枝、叶、果实均可作药用。对长穗桑茎皮95%乙醇提取物和水提取物分别进行抗氧化和降糖活性筛选，结果表明，95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位有显著的抗氧化活性；95%乙醇提取物的丙酮、甲醇部位以及水提取物有明显的降糖活性。本论文运用多种色谱技术和波谱技术，并结合化学方法，对长穗桑茎皮的乙醇提取物和水提取物分别进行了系统的化学成分研究，并对其中的单体化合物进行了生物活性筛选。长穗桑茎皮采自广西壮族自治区金秀县，由广西中医学院刘寿养教授鉴定。从长穗桑茎皮中共分离鉴定了74个化合物，包括乙醇提取物中得到63个，以及水提取物中得到11个。其中31个化合物(1—31)为新化合物，其余均为首次从该植物中分离得到。从乙醇提取物中分离并鉴定的63个化合物中，包括24个Diels—Alder型加合物，30个2—苯基苯并呋喃类衍生物，6个黄酮类化合物，3个二苯乙烯类化合物，分别为：wittiorumin A(1)，wittiorumin B(2)，wittiorumin C(3)，wittiorumin D(4)，wittiorumin E(5)，wittioruminF(6)，wittiorumin G(7)，wittifuran A(8)，wittifuran B(9)，wittifuran C(10)，wittifuran D(11)，wittifuranE(12)，wittifuran F(13)，wittifuran G(14)，wittifuranH(15)，wittifuran I(16)，wittifuran J(17)，wittifuran K(18)，wittifuran L(19)，wittifuran M(20)，wittifuran N(21)，wittifuran O(22)，wittifuranP(23)，wittifuran Q(24)，wittifuranR(25)，wittifuranS(26)，wittifuranT(27)，wittifuranU(28)，wittifuran V(29)，wittifuran W(30)，wittifuran X(31)，chalcomoracin(32)，mongolicin F(33)，mulberrofuran J(34)，mulberrofuran K(35)，mulberrofuran G(36)，guangsangon L(37)，kuwanon J(38)，kuwanon X(39)，guangsangon G(40)，guangsangon B(41)，guangsangon D(42)，kuwanon P(43)，albafuranC(44)，sorocein A(45)，mulberrofuranE(46)，mulberrofuran F(47)，mulberrofuran O(48)，moracin M(49)，moracin C(50)，2—(3，5—dihydroxyphenyl)—5，6—dihydroxybenzofuran(51)，moracin P(52)，mulberroside C(53)，austrafuran C(54)，quercetin(55)，5，7，3'，4'-Tetrahydroxy—3—metho—xyflavone(56)，norartocarpanone(57)，dihydrokaempferol(58)，euchrenone a7(59)，morachalcone A(60)，resveratrol(61)，oxyresveratrol(62)，4'-Prenyloxyresveratrol(63)。从长穗桑茎皮水提取物中分离并鉴定的11个化合物中，包括7个多羟基生物碱类化合物，2个酰胺类化合物，1个氨基酸，以及甜菜碱，分别为：1—deoxynojirimycin(64)，fagomine(65)，3—epi—fagomine(66)，1，4—dideoxy—1，4—imino—D—arabinitol(67)，2—O-α—D—galactopyranosyl—1—deoxynojirimycin(68)，4—O-β—D—glucopyranosyl—fagomine(69)，1，4—dideoxy—1，4—imino—(2—O-β—D—glucopyranosyl)—D—arabinitol(70)，(2S)—citrullina—mide(71)，grateloupinamide(72)，asparagic acid(73)，betaine(74)。另外，结合降糖活性筛选，分别对95%乙醇提取物的丙酮、甲醇部位进行分离后发现，具有抑制α—葡萄糖苷酶活性部分的物质基础均为多羟基生物碱类化合物。通过对长穗桑茎皮乙醇提取物中分离到的15个2—苯基苯并呋喃类化合物(化合物8—11，13—14，17—18，21—27)的正离子ESI—MS/MSn质谱进行分析后发现，化合物中含有异戊烯基，()牛儿基等取代基，一般发生苄基裂解。此外，这些取代基往往与邻位羟基环合形成六元氧环，此类化合物的ESI—MS/MSn质谱裂解因六元氧环部分的差异而有所不同。而且，不同结构类型的2—苯基苯并呋喃类化合物裂解后产生特征离子，可用于此类化合物的快速检测以及在线鉴定。长穗桑茎皮乙醇提取物乙酸乙酯部分中分离到的29个化合物(化合物1—3，8，10，12—14，16—17，21—23，25—26，33—36，39—41，43，45，47，49—51，56)，浓度为10-5 M时，对Fe2+—半胱氨酸诱导的肝微粒体脂质过氧化有抑制活性(抑制率>50%)。在抑制PAF刺激的多形核白细胞β—葡萄糖苷酸酶释放的模型上，11个化合物(化合物10-11，16，32，34，49—51，54，60，62)具有抗炎活性(抑制率大于50%，P<0.05)。采用MTT法测定了长穗桑茎皮中分离得到的56个化合物对五种人肿瘤细胞(A549：人肺腺癌细胞；Bel—7402：人肝癌细胞；BGC—823：大胃癌细胞；HCT—8：人结肠癌细胞；A2780：人卵巢癌细胞)的抑制作用。结果显示26个化合物(化合物8，10-11，13—14，16，21—26，29，32—36，39，47，50-52,56，61，62)，对入癌细胞有抑制作用；水提取物中得到的单体化合物(化合物64—73)均无抗肿瘤活性(超过10μg/mL，认为无活性)。对长穗桑茎皮水提取物中得到的10个化合物进行α—葡萄糖苷酶抑制活性(蔗糖底物)筛选，测试结果显示7个多羟基生物碱(化合物64—70)以及1个酰胺类化合物(化合物72)有较强的抑制α—葡萄糖苷酶的活性，40μg/mL时抑制率均大于80%。其中化合物64的IC50为0.07μM；化合物68的IC50为0.39μM，与阳性对照阿卡波糖(Acarbose)(IC50=0.52μM)相当；化合物69，70，72的IC50值在1—5μM。收起

关键词 : 长穗桑黔鄂桑黄蚕桑化学成分生物活性

10. 苦绳化学成分及其生物活性研究;苦绳中甾体苷类成分ESI-MS裂解行为研究及HPLC-ESI-MS/MS<'n>在线结构测定研究

[学位论文] 刘云宝北京协和医学院(中国医学科学院) 2007年博士导师: 庾石山共261页

摘要 : 苦绳(Dregea sinensis var．corrugata)为萝藦科(Asclepiadaceae)南山藤属植物，具有驱风除湿、化痰止咳、解毒活血的功效。药理实验表明：苦绳95％乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇部位具有一定的抑制单胺氧化酶的活性。苦绳石油醚部位、乙酸乙酯部位和... 展开

关键词 : 苦绳化学成分生物活性甾体苷类成分裂解行为结构测定植物中药中药化学