摘要: Erbin(ErbB2 interacting protein)可通过其PDZ结构域介导ErbB2定位到上皮细胞基底外侧膜。为了深入研究Erbin PDZ结构域的配体识别特性，本实验以ErbinPDZ为诱饵蛋白，用酵母双杂交系统来筛选新型随机多肽文库Ⅱ。研究发现，除了报道的Ⅰ类配体-[E/D... 展开 Erbin(ErbB2 interacting protein)可通过其PDZ结构域介导ErbB2定位到上皮细胞基底外侧膜。为了深入研究Erbin PDZ结构域的配体识别特性，本实验以ErbinPDZ为诱饵蛋白，用酵母双杂交系统来筛选新型随机多肽文库Ⅱ。研究发现，除了报道的Ⅰ类配体-[E/D]-[t/s]-W-V之外，Erbin PDZ还可识别属于类的-[E/D]-[t/s]-W-V类的-D-E-W-V。在配体-1位，除了报道的芳香族氨基酸之外，酸性的E或D也可被识别。实验同时得到了高亲和力的ETWV配体，也发现了低亲和力的ESDV。综合分析所有得到的阳性克隆，发现其在C-末端呈现规律。利用规律搜索Swiss-Prot数据库预测Erbin PDZ潜在的天然配体。经过初步验证，得到了4个新的天然配体，为深入研究Erbin PDZ的功能提供了线索。上述结果表明用酵母双杂交一次筛选随机多肽文库既可以全面研究Erbin PDZ结构域的结合特性，又可以在全蛋白质组水平上找到表达于不同细织的天然配体。 收起