中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 申晨曦山西大学 2020年硕士导师: 闫艳共140页

摘要 : 选题依据：酸枣仁和理枣仁同为鼠李科枣属植物的干燥成熟种子，具宁心安神、敛汗之功效。酸枣仁是中医临床改善睡眠的首选中药，而理枣仁多作为云南民间习用药材。近年来，随着酸枣仁药用需求不断增加，野生资源萎缩，市场上频频出现酸枣仁和理枣仁混... 展开选题依据：酸枣仁和理枣仁同为鼠李科枣属植物的干燥成熟种子，具宁心安神、敛汗之功效。酸枣仁是中医临床改善睡眠的首选中药，而理枣仁多作为云南民间习用药材。近年来，随着酸枣仁药用需求不断增加，野生资源萎缩，市场上频频出现酸枣仁和理枣仁混用的现象，但由于酸枣仁和理枣仁的物质基础及化学差异尚不明确，两者混用无法保障中药临床用药安全。中药是中华文化的精髓，已有几千年的历史。中药物质基础复杂，包含氨基酸、糖、脂肪酸等初级代谢物以及黄酮、皂苷、生物碱等次级代谢物。因此，寻找和建立适合中药整体性特点及复杂物质体系的中药分析方法尤为重要。近年来，核磁共振技术、气质联用技术、液质联用技术等分析技术蓬勃发展，但各种仪器适合分析的物质不同，单凭一种技术无法满足中药复杂的物质分析，故创新性的开发和建立整合多种平台技术，系统表征中药化学成分，可以推动中药物质基础研究发展。目前，质谱技术可以与多种色谱技术联用，高分辨质谱技术可以串联多种质谱仪，具有高灵敏度、高分辨率、信息量丰富的特点，受到越来越多中药研究学者的青睐，并应用于各种中药分析。植物代谢组学是代谢组学的一个重要分支。核磁共振技术、气质联用技术和液质联用技术都是植物代谢组学中常用的研究测试工具，具有检测时间短、重复性好、可以批量分析等优势。代谢组学技术将获得高通量的数据，而多元统计分析可以从庞大的数据中提取有用信息，去除干扰信息，反映样本分组的整体差异性。综上，采用高分辨质谱技术建立快速识别酸枣仁化学成分的方法，应用多种分析技术平台，基于非靶向植物代谢组学技术，全面分析酸枣仁和理枣仁化学轮廓并进行对比研究，找出两者差异代谢物，并对其代表性成分进行靶向定量分析，为酸枣仁和理枣仁药效物质基础研究提供依据。目的：建立快速、高效、准确的酸枣仁化学成分表征方法；应用建立的成分表征方法，对酸枣仁和理枣仁中成分进行快速鉴定，通过非靶向代谢组学技术比较酸枣仁和理枣仁中初级和次级代谢物；建立LC-MS/MS同时测定9种成分的靶向定量方法，并应用于酸枣仁和理枣仁的质量研究中。方法：1.采用UHPLC-Q-OrbitrapMS分析技术，FullMS/ddms2数据采集模式，得到酸枣仁的质谱数据。建立酸枣仁化学成分的本地数据库、构建不同类型化合物的理论分子网络，将黄酮类、皂苷类和生物碱类在不同碰撞能量下获得的特征碎片离子，导入CompoundDiscoverer软件CompoundClassScoring模块进行化合物桥接，并与理论分子网络进行匹配，结合化合物二级质谱图实现对酸枣仁中化合物结构的快速识别。2.基于1HNMR、GC-MS及UHPLC-Q-OrbitrapMS技术，结合参考文献和HMDB数据、NIST数据库及酸枣仁化学成分快速识别策略对酸枣仁和理枣仁中氨基酸和糖类、脂肪酸以及次级代谢物进行鉴定。根据主成分分析、正交偏最小二乘判别分析和s-plot分析等化学计量学手段对16批酸枣仁和13批理枣仁进行分析，结合VIP>1和p<0.05筛选出酸枣仁和理枣仁的差异代谢物。运用差异代谢物相对峰面积进行相对含量分析。3.采用UPLC-MS/MS同时测定酸枣仁中9种化学成分的方法，分别对标准曲线线性关系、仪器精密度、样品稳定性、重复性、加样回收率进行方法学考察。运用建立的方法对29批酸枣仁和理枣仁样品进行含量测定，并将结果进行主成分分析和偏最小二乘判别分析。结果： 1.通过UHPLC-Q-OrbitrapMS分析技术，构建了酸枣仁中化学成分快速识别的分析策略。首先建立了酸枣仁本地数据库，共114个化合物，包含黄酮50个，皂苷36个，生物碱类成分28个。其次基于化合物的结构特征，建立酸枣仁中化学成分的理论分子网络，分别预测144个黄酮、240个生物碱和32个皂苷。靶向分析各类型化合物的裂解规律，分别确定黄酮、生物碱、皂苷各类成分的特征离子。通过与CD软件进行桥接，共匹配到169个化学成分，其中共90个化合物被初步鉴定，分别为64个黄酮类成分、21个生物碱类成分以及5个皂苷类成分。 2.采用1HNMR技术，参考文献和数据库，共指认酸枣仁和理枣仁中30个初级代谢物，结合VIP>1和p<0.05筛选出亮氨酸，异亮氨酸，丙氨酸，赖氨酸，谷氨酰胺，天冬酰胺，蛋氨酸，胆碱，柠檬酸，乙酸，蔗糖和棉子糖12个初级差异代谢物。根据聚类热图进行相对含量分析发现，酸枣仁中亮氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、蛋氨酸、胆碱、柠檬酸和乙酸含量较高，而理枣仁中蔗糖和棉籽糖含量较高；通过GC-MS代谢组学技术，结合NIST数据库，共指认脂肪酸类成分28个，结合多元统计分析，VIP>1和p<0.05筛选出7个脂肪酸类初级差异代谢物分别为硬脂酸、棕榈酸、花生酸、油酸、山嵛酸、亚油酸和维生素E。其中单不饱和脂肪酸如硬脂酸、棕榈酸、花生酸、油酸和二十二烷酸在理枣仁中的含量明显高于酸枣仁，而多不饱和脂肪酸如亚油酸和维生素E在酸枣仁中的含量更高；基于UHPLC-Q-OrbitrapMS技术的次级代谢物分析，采用建立的次级代谢物快速识别策略，在正负离子模式下从酸枣仁中鉴定90个成分，理枣仁中69个成分，综合VIP>1和p<0.05筛选出29个差异代谢物，包括4种皂苷，19种类黄酮和6种生物碱。其中9种芫花素黄酮碳糖在理枣仁中含量较高，环肽生物碱在理枣仁中含量较高。 3.建立了同时测定酸枣仁和理枣仁中乌药碱、木兰花碱、当药黄素、斯皮诺素、6'''-阿魏酰斯皮诺素、维采宁、山奈酚-3-O-芸香糖苷、酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B的9个成分的UPLC-MS/MS含量测定方法，方法学考察试验证明该方法合理可行，并对29批酸枣仁和理枣仁进行了含量测定。结果显示，酸枣仁中乌药碱、木兰花碱、当药黄素、山奈酚-3-O-芸香糖苷、酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B的含量均较理枣仁中含量高，而酸枣仁皂苷A在理枣仁中无法检测。而酸枣仁中维采宁、斯皮诺素、6'''-阿魏酰斯皮诺素的含量较理枣仁中含量低，与非靶向研究结果一致。多元统计分析PCA和PLS-DA分析结果显示，该9个成分可以很好的将酸枣仁和理枣仁明显区分开，以实现对酸枣仁样品整体质量的控制。结论：通过以上研究，本论文建立了基于UHPLC-HRMS技术快速识别酸枣仁化学成分的分析策略，应用该策略共鉴定酸枣仁中90个成分。采用1HNMR、GC-MS和LC-MS非靶向代谢组学技术对酸枣仁和理枣仁中初级和次级代谢物进行全面表征，共鉴定酸枣仁中90个次级代谢物，30氨基酸等初级代谢物已及28个脂肪酸类成分，理枣仁中69个次级代谢物，30氨基酸等初级代谢物已经26个脂肪酸类成分，结果表明，两者的化学成分类型及其相似；在此基础上结合多元统计分析，共找到两者12个氨基酸等初级差异代谢物，7个脂肪酸类差异代谢物以及29个次级差异代谢物，结果表明，两者化学成分在含量上呈现较大的化学差异。建立了UPLC-MS/MS同时测定酸枣仁和理枣仁中9种化学成分的方法，为构建科学合理的中药酸枣仁质量标准提供了科学依据。收起

关键词 : 酸枣仁理枣仁化学成分药效物质高分辨质谱

2. 《事林广记》非汉源草本药物类名物词研究

[学位论文] 李紫琳内蒙古师范大学 2018年硕士导师: 闫艳共133页

摘要 : 中药历史悠久，中药中的草本药物占很大比例。《事林广记》作为一部民间百科类全书，其中包含了大量医药内容。经笔者统计，西园精舍本、郑氏积诚堂本、和刻本《事林广记》中共收录288味药材，其中非汉源草本药物有33种。目前，学界主要从现代医药学角... 展开

关键词 : 《事林广记》草本药物非汉源名物词文化内涵

3. 整合体内代谢与失眠代谢网络的中药酸枣仁有效成分群研究

[学位论文] 刘佳星山西大学 2022年硕士导师: 闫艳共124页

摘要 : 选题依据：酸枣仁是临床上治疗失眠的常用中药。在以活性为导向的传统分离模式下，已阐明了酸枣仁治疗失眠的一些有效成分，但该模式难以从整体上揭示其有效成分的全貌。课题组前期基于血清化学与网络药理学关联分析了酸枣仁治疗失眠的潜在效应成分。... 展开选题依据：酸枣仁是临床上治疗失眠的常用中药。在以活性为导向的传统分离模式下，已阐明了酸枣仁治疗失眠的一些有效成分，但该模式难以从整体上揭示其有效成分的全貌。课题组前期基于血清化学与网络药理学关联分析了酸枣仁治疗失眠的潜在效应成分。然而，中药成分的体内过程可以引起内源性代谢物组的变化，与机体的生理、病理状态平衡直接相关。因此，那些吸收的成分如何在体内代谢转化及如何影响失眠病理模型下内源性小分子的代谢等问题仍不清晰。代谢组学技术是通过考察生物体受刺激或扰动后（如将某个特定的基因变异或环境变化后），分子质量为1,000以下的小分子物质的变化来研究生物体代谢途径，为人类表型提供了一种更直接的特征标签和更敏感的检测方法。其思维与中医整体观理念十分契合。本研究整合体内代谢过程与代谢组学研究酸枣仁的有效成分群，为酸枣仁质量控制关键成分群的选择提供实验依据。目的：全面表征酸枣仁水提物口服给予失眠大鼠后体内化学成分群，明确失眠大鼠血清、尿液、胆汁、粪便主要原型成分及代谢产物；并总结不同类型化学成分代谢规律；探讨酸枣仁调控失眠的关键靶点及代谢通路，从而阐明酸枣仁治疗失眠的有效成分群。研究内容及方法：1．采用UHPLC-Q-Orbitrap-MS/MS分析酸枣仁中已知化合物裂解规律，并结合课题组前期工作，确定诊断离子和特征离子，对不同类型的结构类似物进行快速鉴别和表征。 2．复制PCPA失眠大鼠模型，收集其口服酸枣仁水提物7g/kg（相当于生药30g/kg）后血清、尿液、粪便和胆汁样品；建立UHPLC-Q-Orbitrap-MS/MS耦合数据依赖扫描（DDA）模式采集大鼠血清、尿液、胆汁和粪便样品数据，基于诊断离子和特征离子相结合的体内与体外关联分析方法，并使用CompoundDiscover?（CD）软件分析与鉴别已知原型成分和代谢产物及未知化合物；并阐明酸枣仁的体内代谢途径。 3．比较对照组、模型组、地西泮组和酸枣仁组大鼠脑组织和肝组织病理切片。分别建立基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术的大鼠血清、海马和肝脏代谢组学分析方法，对所有组别内源性代谢物进行表征，获得归一化的数据矩阵。采用Simca-p14.0软件进行PCA和OPLS-DA分析，以VIPgt;1为基准，找到正常组与模型组的差异代谢物。采用ABSCIEX配备的OSI/SMMS软件进行化合物匹配，寻找酸枣仁干预后机体中变化较大的生物标志物，采用MetaboAnalyst进行代谢途径分析。 4.通过网络药理学预测酸枣仁吸收成分治疗失眠的潜在作用靶点及通路，并整合非靶向代谢组学结果，遴选酸枣仁治疗失眠的有效成分群。研究结果：1.在酸枣仁水提物中共鉴定和表征了48个化合物，包括21个黄酮碳（C）糖苷类成分、2个黄酮氧（O）糖苷类成分、11个达玛烷型三萜皂苷类成分、13个生物碱类成分和1个其它类成分。 2.在失眠大鼠血清、尿液、胆汁和粪便样本中共鉴定与表征了27种原型成分和132种代谢产物。以芫花素为母核的黄酮碳糖苷可经肠道菌群代谢脱去糖基转化为相应的苷元芫花素，且芫花素生成I相或II相代谢产物，吸收进入血液循环或通过肠肝循环经胆汁和粪便排泄。芹菜素碳糖苷类化合物主要经肠道菌群代谢生成苷元芹菜素，并发生I相和II相代谢，主要通过胆汁和粪便排泄。山奈酚类O糖苷主要发生II相代谢，通过尿液排泄，且肝胆循环显著。酸枣仁皂苷元及其I相代谢产物主要通过胆汁和粪便排泄；原型化合物主要通过肾脏排泄。生物碱主要进行去氢和去甲基化I相代谢反应，可进一步与葡萄糖醛酸和硫酸结合形成II相代谢产物。 3.组织病理切片显示酸枣仁可明显改善PCPA致失眠大鼠的脑组织和肝组织损伤，提示酸枣仁对PCPA致失眠大鼠的脑和肝脏具有保护作用。酸枣仁能够升高海马中5-HT、GABA、DA和NE水平，降低Glu水平及Glu/GABA水平。此外，酸枣仁能够提高血清中PGD2、IL-1β、IL-6水平，降低TNF-α水平，但对TNF-α无显著影响。以上研究结果表明酸枣仁治疗失眠与调节脑内神经递质代谢网络及外周炎症水平密切相关。代谢组学研究结果表明，酸枣仁能显著影响多条紊乱的代谢通路，苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成是血清、海马和肝脏共有的代谢通路，提示苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成是大鼠失眠及酸枣仁调节涉及到的重要代谢通路。其中酸枣仁能显著影响肝脏亚油酸和花生四烯酸代谢。基于以上分析，酸枣仁改善睡眠可能与脑内神经递质水平，外周炎性因子及激素水平及肝脏脂质代谢有关。 4.综合体内代谢结果，以入血成分为指导，选取了22个化学成分进行网络药理学分析。通过成分收集了108个与失眠相关的靶点，并筛选得到9个与酸枣仁治疗失眠密切相关的靶点SLC6A4、DRD1、DRD2、SLC6A3、ESR1、AR、PTGS2、TNF和IL6，通过Cytoscape软件构建成分-靶点-通路网络，并甄别了木兰花碱，山矾碱，乌药碱，去甲异紫堇定，芫花素，juzinrine，芹菜素，酸枣仁皂苷元，山奈酚-3-O-芸香糖苷，酸枣仁皂苷A，酸枣仁皂苷B和斯皮诺素12种成分作为有效成分群。将网络药理学所分析代谢通路与代谢组学分析结果进行整合分析，结果显示酸枣仁治疗失眠症与5-羟色胺能突触、色氨酸代谢和花生四烯酸代谢通路密切相关。结论：本研究建立了基于诊断离子-特征离子桥接的酸枣仁体内-体外化学关联表征方法；建立了基于液质联用技术的酸枣仁抗失眠的血清、海马和肝脏组织代谢组学方法，并评价了酸枣仁治疗失眠的药效及作用机制；以入血成分为指导，整合分析了体内代谢与代谢组学结果，并佐以网络药理学进行成分-靶点-通路-代谢物分析，辨识了酸枣仁治疗失眠症的有效成分群。研究结果为阐明酸枣仁养心补肝、宁心安神治疗失眠的作用特点提供了实验基础。收起

关键词 : 酸枣仁有效成分体内代谢代谢组学质量控制

4. 今草草诀歌四版本比勘

[学位论文] 牛靖内蒙古师范大学 2013年硕士导师: 闫艳共124页

摘要 : 草书的草诀歌是研究草书的一个重要突破口。通过对《草诀歌·引言》及采真子有关文献的考证，发现《草诀歌》的发展有着悠久的历史，在不同时期存在不同版本。对不同版本进行比勘，对于研究草诀歌的发展脉络、发展趋势具有十分重要的意义。在草诀歌各... 展开

关键词 : 草书草诀歌修辞手法草字写法

5. 酸枣仁汤改善CRS模型小鼠焦虑样行为的药效成分研究

[学位论文] 李佳涵山西大学 2023年硕士导师: 闫艳共122页

摘要 : 选题依据：酸枣仁汤首载于东汉末年张仲景所著的《伤寒杂病论》，由酸枣仁、知母、茯苓、川芎和甘草五味中药组成，具有养血安神、清热除烦之功效。其拟方初衷是为了缓解百姓颠沛流离，精神焦虑不安引起的睡眠障碍。新近的临床研究表明，酸枣仁汤对于... 展开选题依据：酸枣仁汤首载于东汉末年张仲景所著的《伤寒杂病论》，由酸枣仁、知母、茯苓、川芎和甘草五味中药组成，具有养血安神、清热除烦之功效。其拟方初衷是为了缓解百姓颠沛流离，精神焦虑不安引起的睡眠障碍。新近的临床研究表明，酸枣仁汤对于广泛性焦虑和抑郁症等疾病的治疗也具有良好的疗效。目前，酸枣仁汤已被开发为锭剂、颗粒剂、浓缩散剂和合剂等不同的制剂类型，用于虚烦不眠、心悸盗汗、头晕眩晕等的治疗。焦虑症是指与实际情况不相符并干扰日常功能的过度、不切实际的担心和焦虑。临床上焦虑症患者常因持续紧张、恐惧不安等焦虑情绪而引起睡眠障碍。流行病学调查显示，焦虑患者中40%首发表现为失眠，72%的人在患焦虑障碍后或患焦虑障碍的同时伴有失眠。因此，寻找安全有效的替代药物成为亟待解决的问题。中药复方化学成分复杂，其疗效的发挥有赖于进入机体，且作用于相应的靶点而发挥整体药效。即通常认为中药药效成分必须吸收进入血液、到达靶器官并作用于相应靶点后方能发挥抗焦虑的整体药效作用。本研究以酸枣仁汤为研究载体，以药效学为指导，从“体内、外关联分析-体内、网络关联分析-网络、分子对接关联分析”角度，探索了酸枣仁汤防治焦虑症的药效成分及作用机制研究的全新模式。以期通过体外、体内两个层次进行研究，准确、有效地辨识酸枣仁汤中的药效成分，并探究其改善慢性束缚应激（Chronicrestraintstress，CRS）模型小鼠焦虑样行为的作用机制。目的：明确酸枣仁汤改善慢性束缚应激模型小鼠焦虑样行为的药效成分，并探讨其作用机制。研究内容及方法：1.酸枣仁汤的化学物质基础研究。建立基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的酸枣仁汤化学成分表征分析方法；建立酸枣仁汤HPLC-DAD-ELSD指纹图谱与多成分含量测定相结合的质量评价方法；收集不同产地、不同来源的酸枣仁汤原料药材制备10批酸枣仁汤，收集来自中国大陆、中国香港、中国台湾和日本不同剂型酸枣仁汤，采用已建立的方法对10批自制酸枣仁汤及10批不同剂型市售产品进行指纹图谱相似度评价及13种成分的含量测定。 2.酸枣仁汤改善焦虑症的药效学研究。针对焦虑症的关键病理环节，采用CRS诱导焦虑模型，从整体动物水平评价酸枣仁汤防治焦虑的有效性。以地西泮作为阳性对照，采用高架十字迷宫实验、戊巴比妥诱导的睡眠实验、旷场实验、水平横丝等，测定海马组织中五羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、去甲肾上腺素（Norepinephrine，NE）、γ-氨基丁酸（γ-aminobutyricacid，GABA）及血清皮质酮（Corticosterone，CORT）和促肾上腺皮质激素释放素（Corticotropinreleasinghormone，CRH）中生化指标，评价酸枣仁汤（7、14g/kg）对CRS模型小鼠的药效学。 3.酸枣仁汤潜在药效成分的发现。利用方证代谢组学策略，建立基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的血清代谢组学研究方法，采用多元统计分析筛选空白组与模型组差异代谢物，并采用无监督的主成分分析和相对距离法进行代谢轮廓分析及KEGG通路分析；同时进行血清化学分析，鉴别血清移行成分；采用Spearman相关分析对血清移行成分与生物标志物进行相关性分析，以相关系数绝对值大于0.55为指标，辨识出潜在药效成分。 4.药效成分的筛选与确证。利用SWISStargetprediction、TCMIP、TCMSP和Genecards等数据库分别对酸枣仁汤成分、焦虑及失眠靶点进行预测；采用STRING数据库对交集靶点的蛋白间相互作用强度进行计算；以DAVID数据库对筛选得到的关键靶点进行KEGG通路富集；聚焦关键通路后建立“复方-成分-靶点-通路”网络。采用分子对接技术验证潜在药效成分与关键靶点的相互作用，确证药效成分及酸枣仁汤改善焦虑症的潜在途径。研究结果：1.采用已建立的UPLC-Q-TOF-MS/MS方法，共鉴定了酸枣仁汤中110个化学成分，其中主要以黄酮类、皂苷类及生物碱类化合物为主，其次为苯酞类、苯酚类及苯丙素类化合物，对化合物进行生药学归属，其中35个成分归属于酸枣仁，19个归属于知母，3个归属于茯苓，23个归属于川芎，32个归属于甘草。采用水煎煮法，自制10批酸枣仁汤，出膏率均值为21.57%，在同一色谱条件下，在282nm标定了5个共有峰，335nm标定了4个共有峰，相似度分别为0.907～0.999、0.926～0.999；HPLC-ELSD指纹图谱中标定了4个共有峰，相似度为0.946～0.999，不同批次批间差异较小。含量测定结果表明，13种成分在各自的线性范围内拟合系数大于0.9959，线性关系良好，平均加样回收率为93.69%，RSD值平均为2.04%。10批不同剂型市售产品中新芒果苷、乌药碱、芒果苷、异芒果苷、甘草苷、斯皮诺素、阿魏酸、6′′′-阿魏酰斯皮诺素、异甘草苷、知母皂苷BII、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B和甘草酸的质量分数分别为0.30～3.38、0.02～0.20、0.27～6.04、0.33～1.38、1.54～12.02、0.16～0.87、0.16～1.27、0.04～0.35、0.25～3.12、3.66～20.92、0.36～0.98、0.32～0.89、4.90～36.37mg/g，波动范围大。结果表明，不同生产厂家，不同剂型对酸枣仁汤中13种成分的含量影响较大。该方法的建立，不仅为酸枣仁汤类产品的质量评价提供了新的分析方法，也为进一步的药效学和药动学样品的稳定性提供了保证。 2.成功复制CRS诱导的焦虑小鼠模型。酸枣仁汤（7g/kg）能够增加进入高架十字迷宫实验（EPM）中进入开臂的百分比和进入开臂的时间占比；显著增加旷场实验（OFT）中直立次数和移动距离；显著延长戊巴比妥诱导的焦虑小鼠睡眠时间，并缩短睡眠潜伏期。酸枣仁汤显著升高CRS模型下小鼠海马组织5-HT、GABA和NE水平，降低血清CORT和CRH水平。此外，酸枣仁汤以上2个剂量均未产生肌肉松弛作用。 3.建立了基于UPLC-Q-TOF-MS技术的血清移行成分及血清代谢组学分析方法；鉴定了CRS模型下小鼠血清中28种内源性差异代谢物，共涉及花生四烯酸代谢、色氨酸代谢等7条主要的代谢通路。酸枣仁汤高剂量能够回调21种代谢产物，涉及花生四烯酸、色氨酸和鞘脂代谢3条代谢通路；酸枣仁汤低剂量回调21种代谢产物，涉及花生四烯酸、色氨酸、鞘脂和亚油酸代谢。在此条件下，小鼠血清中鉴定出的20个原型成分。相关性分析对28个差异代谢物与20个血清移行成分进行分析，辨识了14个成分作为潜在的药效成分。 4.网络药理学结果表明，435个与酸枣仁汤成分相关的潜在靶点和397个与焦虑及失眠的相关的潜在靶点，得到67个共有靶点。选择了蛋白作用强度较强（degree值大于平均值）的32个靶点进行通路富集，优选了TNF信号通路、色氨酸生物合成等前51条关键通路。构建了复方-血清成分-靶点-通路关系网络，包括11个成分，32个靶点，51条通路。分子对接结果显示，8个成分与4个蛋白（TNF、HTR1A、MAOB、SLC6A4）结合力均小于-6mmol/kcal，酸枣仁皂苷元与知母皂苷元与四个蛋白的结合力（除TNF与知母皂苷元）也均小于-6mmol/kcal。结论：本研究全面表征了酸枣仁汤的化学成分，建立了准确可靠的酸枣仁汤HPLC-DAD-ELSD的指纹图谱与多成分含量测定的质量评价方法，为市售酸枣仁汤产品的质量控制提供了参考。探索了方证代谢组学与网络药理学相结合筛选和确证酸枣仁汤药效成分及作用机制的研究模式。研究结果为酸枣仁汤的质量标志物（Q-marker）的确定提供了坚实的基础。收起

关键词 : 酸枣仁汤焦虑样行为药效成分网络药理学动物实验

6. 酸枣仁水提取物体内过程研究

[学位论文] 张敏山西大学 2019年硕士导师: 闫艳共116页

摘要 : 选题依据：酸枣仁始载于《神农本草经》，具有养心补肝，宁心安神，敛汗，生津之功效。现代药理研究表明酸枣仁具有镇静催眠、抗焦虑、抗抑郁、抗炎和抗惊厥等广泛的药理作用。在天然药物化学分离模式下，已阐明了酸枣仁改善睡眠的部分药效物质。然而... 展开选题依据：酸枣仁始载于《神农本草经》，具有养心补肝，宁心安神，敛汗，生津之功效。现代药理研究表明酸枣仁具有镇静催眠、抗焦虑、抗抑郁、抗炎和抗惊厥等广泛的药理作用。在天然药物化学分离模式下，已阐明了酸枣仁改善睡眠的部分药效物质。然而，以天然药物化学研究为手段，借鉴化学药品的质量控制模式与中药的整体作用特点不甚吻合，忽略了中药的复杂性与机体的整体性，割裂了化学成分与体内过程的相互关联。多数情况下，中药有效成分需要吸收入血，通过代谢转化生成活性产物后才能发挥整体药效作用。因此，选取有效成分时，应与药效和代谢关联分析才更精准、全面。那么酸枣仁中哪些成分被吸收进入体内，哪些被吸收进入体内的成分整体协调作用于机体的关键靶点等问题还不清楚。作为中医药临床治疗失眠的首选药味，酸枣仁在临床上多以汤剂的形式服用。综上，以酸枣仁水提取物为研究对象，基于体内过程研究其体内成分群，研究结果不仅对揭示酸枣仁治疗失眠的化学基础，且对其质量评价研究具有重要科学意义。目的：全面表征酸枣仁水提取物口服给予失眠模型大鼠后体内化学成分群，明确体内主要原型成分及代谢产物，探讨不同类型化学成分代谢特点。研究内容与研究方法：1.酸枣仁水提取物制备及质量评价参照中药饮片标准汤剂的研究策略，对酸枣仁水提物的制备过程及质量评价进行研究。以酸枣仁水提取物的出膏率，斯皮诺素、酸枣仁皂苷A和B的含量为指标，对酸枣仁的破碎方法、提取时间和干燥方式进行考察，确定了最优的制备工艺；按照药典方法测定酸枣仁饮片及酸枣仁水提取物中指标成分，考察水提取物的转移率和浸膏率；建立了HPLC-UV/ELSD多维指纹图谱对酸枣仁水提取物进行一致性评价；建立了LC-MS/MS法同时测定酸枣仁水提取物中9种指标性成分的方法。 2.基于高分辨质谱的酸枣仁水提取物体内化学成分的深度表征针对中药多成分体内过程研究缺乏体内成分及其代谢产物对照品的瓶颈问题，探索性地开展了酸枣仁多成分体内代谢过程所需分析新技术和新策略的研究。建立基于UPLCQOrbitrapMS的酸枣仁水提取物体外化学成分研究方法；复制PCPA诱导的大鼠失眠模型，并评价了酸枣仁改善睡眠的药效作用；从样本前处理、色谱质谱条件、数据采集等环节着手，获得高分辨质量数和多级质谱数据；利用特征诊断离子技术，识别靶向化合物并获得其母核信息；以此为基础建立非靶向原型和代谢产物的分析方法；开展了失眠模型大鼠体内复杂成分群研究，并探讨其代谢规律。 3.酸枣仁水提取物中六个主要成分药动学研究应用UPLCQOrbitrapMS技术，以盐酸巴马汀、大豆苷和黄芪甲苷为内标，建立了酸枣仁水提取物中6种主要化学成分在大鼠体内的测定方法；并将该方法应用于酸枣仁水提取物口服给予正常和PCPA诱导的失眠模型大鼠的药动学比较研究。研究结果：1.最终优选确定酸枣仁水提取物制备方法为机械粉碎的方式优于铜冲捣碎；加水煎煮两次，煎煮时间每次均为120min为优；提取液制备成冻干粉的形式保存为优。标准化工艺制备的提取物指纹图谱具有极高的相似性，均在0.9以上。10批酸枣仁水提取物的出膏率为19.28～21.96%，指标成分的转移率为64.10～90.11%，符合标准。LC-MS/MS同时测定9种成分的含量测定方法灵敏度高、专属性强。 2.根据所获得化合物以及精确分子量进行化合物分子式预测，结合不同类化合物的质谱裂解规律与多级质谱碎片信息特征，共鉴定了酸枣仁中41种化合物，包括19种黄酮、11种皂苷、9种生物碱和2种其他类型化合物。酸枣仁高剂量组(30g/kg)可显著升高模型大鼠血清中5-HT含量。基于所建立的体内成分分析策略，从失眠模型大鼠尿液中鉴定了30种原型成分和26种代谢产物；通过提取离子流方式鉴定血液中14个原型和17个代谢产物。PCPA致失眠大鼠体内主要发生的代谢反应类型包括氧化、还原、水解、硫酸酯化、葡萄糖醛酸化和甲基化。 3.UPLCQOrbitrapMS(FullMS模式)同时测定大鼠血浆中6种成分的含量测定方法基质效应干扰小，方法灵敏度较高。与正常大鼠相比，斯皮诺素和6'''-阿魏酰斯皮诺素的血浆暴露量减少，而两者的血浆清除率明显增加。此外，与正常组相比，模型组中酸枣仁皂苷A和B的Tmax显著降低，酸枣仁皂苷A的T1/2明显增加。对于乌药碱和木兰花碱而言，与正常组相比，两者的Cmax、AUC0-t和CL有弱的变化趋势，但无显著性差异。失眠模型条件下，显著影响了大鼠对这6个化学成分的吸收和体内暴露量。结论：通过以上研究，本论文建立了酸枣仁水提取物质量评价方法，为体内过程研究提供了稳定可控的物质基础；在体内外化学成分群对应关系的基础上，提出了LC-HR/MS的靶向化学成分表征策略，为中药体内代谢复杂体系中目标成分的深度表征提供了有益参考；系统表征了血清和尿液中代谢产物，初步阐明了酸枣仁在病理模型条件下体内化学成分群；明确了酸枣仁中三类代表成分的药动学特征，为进一步研究酸枣仁的质量标志物奠定了基础，为构建科学合理的酸枣仁质量标准提供了科学依据。收起

关键词 : 酸枣仁提取物化学成分药代动力学失眠

7. 基于肠道菌群的酸枣叶总黄酮抗氧化作用研究

[学位论文] 付彩山西大学 2020年硕士导师: 闫艳共99页

摘要 : 选题依据：酸枣叶为鼠李科枣属植物酸枣ZiziphusjujubaMill.Var.spinosa(Bunge)HuexH.F.Chou的干燥叶(LZJS)，资源丰富，缺乏有效的利用途径而被浪费。酸枣叶又名棘叶，始载于《本草纲目》，具有“敛疮解毒，治胫臁疮”之功效。酸枣叶中含有丰富的黄酮... 展开选题依据：酸枣叶为鼠李科枣属植物酸枣ZiziphusjujubaMill.Var.spinosa(Bunge)HuexH.F.Chou的干燥叶(LZJS)，资源丰富，缺乏有效的利用途径而被浪费。酸枣叶又名棘叶，始载于《本草纲目》，具有“敛疮解毒，治胫臁疮”之功效。酸枣叶中含有丰富的黄酮、皂苷、氨基酸、核苷类和微量元素等营养成分。现代药理研究表明，酸枣叶具有明显的镇静安神、抗氧化和保护肝脏等多种保健功效。改善睡眠、抗氧化作用的研究是酸枣叶研究领域热点之一。课题组前期研究发现酸枣叶中总黄酮含量可高达8.04%，并且对提取纯化工艺进行优化，得到了酸枣叶总黄酮部位(纯度41%，得率10%)。对总黄酮部位进行表征发现酸枣叶中黄酮类成分多以黄酮醇类(槲皮素、山奈酚)为苷元，具有很高的抗氧化活性。以槲皮素和山奈酚为苷元的化合物不以原型入血，经肠道菌转化为活性物质，被人体吸收利用。因此本研究提出“酸枣叶总黄酮(LZJSF)是否在人体肠道菌群的代谢转化作用下产生了抗氧化活性产物，其在体内是否具有抗氧化作用，作用机制是什么？”的研究假说。对以上问题的回答将有助于对LZJSF的充分开发利用。目的：建立快速、准确、高效的LZJSF质量控制方法；比较LZJSF经正常人肠道菌液转化前后的化学成分及抗氧化活性的变化，以期阐明LZJSF的抗氧化活性产物；以D-gal诱导的氧化损伤大鼠为研究对象，从经典药效学，代谢组学及肠道菌群的角度阐明LZJSF改善D-gal诱导的氧化损伤大鼠的多途径、多靶点作用机制。方法： 1.建立基于多反应监测扫描-数据依赖性获取-增强子离子扫描(Multiple reaction monitoring-Information dependent acquisition-Enhanced product ion scanning ， MRM-IDA-EPI)模式对LZJSF中6种成分定性和定量分析方法并且对其进行方法学考察；采用已建立的方法测定3批样品中6个成分的含量。 2.采用体外离体粪便温孵法对LZJSF进行转化，利用LC-Q-Orbitrap-MS/MS技术对肠道菌转化前后样品中原型成分及代谢产物进行定性和定量分析；并从化学水平采用DPPH·、O2-和Fe3+还原方法及细胞水平采用过氧化氢诱导PC12细胞对转化前后的抗氧化活性进行评价。 3.体内腹腔注射D-gal建立氧化损伤大鼠模型，以Morris水迷宫实验评价LZJSF对D-gal诱导的氧化损伤大鼠学习记忆能力的改善作用，并考察了LZJSF对D-gal诱导的氧化损伤大鼠血清及脑组织中丙二醛(MDA，Malondialdehyde)等抗氧化指标的影响。应用1H-NMR代谢组学技术结合多元统计方法对D-gal诱导的氧化损伤大鼠血清中内源性代谢产物的变化规律及代谢途径进行分析，并考察LZJSF对内源性小分子及代谢途径的调节作用。最后，从肠道菌群的角度考察LZJSF对D-gal诱导的氧化损伤大鼠肠道菌群的影响。结果：1.建立了一种基于MRM-IDA-EPI模式的LC-MS/MS同时测定LZJSF中6种成分含量的方法，在检测灵敏度高、定量准确的MRM基础上，进一步联合EPI扫描在较低浓度条件下生成二级子离子全扫描图，同时定性定量分析，防止出现假阳性峰干扰判断。其中quercetin-3-O-Rob、quercetin-3-O-Rut、quercetin-3-O-β-D-Gal、quercetin-3-O-β-D-Glu、quercetin-3-Rha、quercetin的平均含量分别为10.4%，8.3%，0.1%，0.3%，0.2%，0.005%。 2.成功建立了离体粪便温孵体系，并建立了UPLC-Q-Orbitrap/MS分析LZJSF经肠道菌群转化前后化学成分的分析方法；以槲皮素和山奈酚为母核的苷类化合物经过肠道菌水解为苷元，苷元随后水解为小酚酸类化合物。在转化0h、1h、2h的样品中quercetin-3-O-Rut、quercetin-3-O-Rob、quercetin-3-O-β-D-Glu、quercetin-3-O-β-D-Gal、quercetin-3-Rha、kaempferol-3-O-Rut含量高；转化4h、6h样品中苷元类化合物quercetin、taxifolin、kaempferol含量高；转化24和48h样品中主要含有小酚酸类化合物3,4-dihydroxyphenylaceticacid、3-hydroxyphenylaceticacid、4-hydroxyphenylaceticacid、m-hydroxyphenylpropionicacid、3-phenylpropionicacid、4-hydroxybenzoicacid、p-hydroxyphenylpropanoicacid。对转化前后样品的化学活性测定发现其对DPPH·、O2-的清除能力4h、6h>0h、1h、2h>24h、48h，对Fe3+的还原能力4h、6h>0h、1h、2h>24h、48h。在H2O2诱导PC12细胞损伤也发现相同的趋势，MDA、ROS的含量24h>0h>4h、6h。 3.LZJSF干预D-gal致氧化损伤大鼠的代谢组学与肠道菌群研究(1)LZJSF对D-gal大鼠的干预作用，与Control大鼠比D-gal组大鼠在原平台象限活动路程、活动时间、穿越原平台的次数及游泳速度均小于Control，说明模型成功。比较LZJSF的行为学、血清及脑生化指标，结果表明LZJSF(200 mg/kg)能高效地清除体内多余的自由基，修复生物体的氧化应激损伤，使氧化损伤大鼠的学习记忆力提高。(2)LZJSF对D-gal大鼠的血清代谢组学研究，通过OPLS-DA模型的VIP>1值并结合t-test的发现D-gal组大鼠12个代谢物发生显著变化，给药后组使valine、isoleucine、leucine和aceticacid等11个代谢物回调。MetPA结果显示LZJSF(200 mg/kg)主要通过调节牛磺酸和次牛磺酸代谢，甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢和丙酮酸代谢途径发挥作用。(3)LZJSF对D-gal大鼠的肠道菌群影响。Alpha多样性分析发现，LZJSF(100 mg/kg)和LZJSF(200 mg/kg)组使菌群Alpha多样性恢复，LZJSF(200 mg/kg)组可以通过影响门(Firmicutes、Bacteroidetes、Firmicutes/Bacteroidetes )、科(Lactobacillaceae、Coriobacteriaceae、Bacteroidales-S24-7)、属(Unclassified S24-7、Lctobacillus)水平的菌群丰度而对氧化损伤大鼠的肠道菌群起到调节作用。(4)菌群与差异化合物进行皮尔逊相关性分析发现与氧化损伤相关的差异代谢物与肠道菌群的调节具有正相关性或负相关性。结论：本文建立了一种基于MRM-IDA-EPI模式6种化学成分含量测定方法，方法重复性好、准确度高，可用于LZJSF中6种化学成分的含量测定及质量控制；鉴别了LZJSF肠道菌转化后样品中18种原型成分及7种代谢产物，阐明了LZJSF中以槲皮素和山柰酚为母核的糖苷类化合物的转化规律；4h和6h为总黄酮代谢转化的关键时间点，糖苷类化合物含量显著降低，而苷元明显升高；且其在化学水平及细胞水平抗氧化活性均最强。LZJSF(200 mg/kg)可改善D-gal诱导的氧化损伤大鼠的记忆损伤及氧化应激作用；LZJSF(200 mg/kg)主要通过调节(1)牛磺酸和次牛磺酸代谢(2)甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢(3)丙酮酸代谢发挥抗氧化损伤作用；LZJSF(200 mg/kg)可通过影响门、科、属水平的菌群丰度而对氧化损伤大鼠的肠道菌群起到调节作用。与氧化损伤相关的差异代谢物与肠道菌群的调节具有正相关性或负相关性。收起

关键词 : 酸枣叶总黄酮肠道菌群代谢组学抗氧化活性

8. 正常人肠道菌群对酸枣仁总黄酮的体外代谢研究

[学位论文] 武锦春山西大学 2021年硕士导师: 闫艳共96页

摘要 : 选题依据：酸枣仁为鼠李科植物酸枣ZiziphusjujubaMill.varspinosa(Bunge)HuexH.F.Chou的干燥成熟种子，具有养心安神，敛汗、生津之功效。其化学成分本底清晰，包括皂苷、黄酮、生物碱和脂肪酸等成分。其中，总黄酮质量分数高达3.94%。现代药理学研究... 展开选题依据：酸枣仁为鼠李科植物酸枣ZiziphusjujubaMill.varspinosa(Bunge)HuexH.F.Chou的干燥成熟种子，具有养心安神，敛汗、生津之功效。其化学成分本底清晰，包括皂苷、黄酮、生物碱和脂肪酸等成分。其中，总黄酮质量分数高达3.94%。现代药理学研究表明，酸枣仁总黄酮(ZSSF)具有镇静催眠、抗焦虑、抗抑郁、抗炎和抗惊厥等广泛的药理作用。课题组前期研究表明大鼠口服给予酸枣仁水提物后黄酮类成分的血药浓度低。其他课题组研究表明酸枣仁中主要黄酮类成分斯皮诺素口服生物利用率低，仅为2.2%。ZSSF具有广泛药理活性，然而，ZSSF低生物利用度与广泛有效的药理活性相矛盾。前期开展酸枣仁水提物经正常人肠道菌群孵育后，黄酮苷类成分可代谢转化为相应的苷元。肠道微生物对酸枣仁黄酮类成分的转化降解可能是其口服生物利用度低的原因之一。肠道菌群是人体肠道内的正常微生物，中药在进入机体之后，与肠道微生物菌群发生接触而被代谢，另外一些经肝脏代谢的产物还会通过胆汁的分泌而进入肠道参与肠道菌群代谢，因此研究肠道菌群对药物代谢与药效发挥过程的影响具有重大意义。本研究采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS/MS)分析ZSSF经正常人肠道菌液发酵前后化学成分的变化；采用16SrRNA测序技术对菌群组成进行分析；采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对发酵前后短链脂肪酸进行测定。研究结果为ZSSF体内代谢吸收及作用机制的深入研究提供科学依据。目的：阐明正常人肠道菌群对ZSSF的代谢转化作用；揭示ZSSF对肠道菌群组成和短链脂肪酸含量的作用。研究方法： 1.ZSSF的制备、质控及活性评价采用70%乙醇回流提取，水饱和正丁醇萃取及大孔吸附树脂对ZSSF进行纯化；以斯皮诺素为参照，采用紫外分光光度法测定酸枣仁总黄酮百分含量；建立基于UPLC-QTrapMS/MS法同时定性定量ZSSF中swertisin、viceninII、kaempferol-3-O-rutinoside、spinosin、isovitexin、6''''''-feruloylspinosi和rutin的方法；研究ZSSF对阈剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠潜伏期，睡眠时间及阈下戊巴比妥钠小鼠睡眠率的作用，评价其催眠活性。 2.肠道菌群对ZSSF体外代谢转化研究采集三男三女正常人新鲜粪便，用无菌DPBS溶液稀释产生肠道菌群孵育液。将正常人肠道菌群孵育液与ZSSF于体外厌氧培养箱孵育0、2、4、8、12、24、48h，采用UPLC-QTOFMS/MS方法对ZSSF及其肠道菌转化代谢产物进行定性表征；对转化0、2、4、8、12、24和48h的黄酮原型及代谢产物进行含量测定；并总结其代谢途径。 3.ZSSF对正常人肠道菌群组成及短链脂肪酸含量的影响利用16SrRNA测序技术对转化前后孵育液中的肠道菌群进行高通量测序，分析转化前后正常人肠道菌群alpha多样性、物种组成，并分析其物种差异。采用GC-MS技术对ZSSF体外肠道菌群孵育液中0、2、4、8、12、24和48h的aceticacid、propionicacid、isobutyricacid、butyricacid、isovalericacid、valericacid含量进行测定，分析ZSSF干扰正常人肠道菌群后SCFAs的变化。采用偏最小二乘法(PLS)模型，对不同时间点6个短链脂肪酸绝对含量与7个酸枣仁黄酮成分、3个小酚酸代谢产物的绝对含量进行相关性分析。研究结果： 1.通过提取纯化，得得率为0.4%的ZSSF。采用紫外分光光度法测定总黄酮百分含量为58%。建立了一种基于MRM-IDA-EPI扫描模式同时测定ZSSF中7个黄酮成分的分析方法，对ZSSF中的swertisin、viceninII、kaempferol-3-O-rutinoside、spinosin、isovitexin、6''''''-feruloylspinosi和rutin进行含量测定，计算其质量分数分别为0.20%、0.97%、1.3%、21.4%、0.19%、7.6%、0.4%。药效学研究表明ZSSF低剂量(0.04 g/kg)能显著延长阈剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠时间，ZSSF高剂量(0.16 g/kg)能增加阈下剂量戊巴比妥钠小鼠入睡率。 2.采用UPLC-QTOFMS/MS对ZSSF进行表征，共鉴别了34个黄酮成分，包括19个以genkwanin为母核结构；8个以apigenin为母核结构；3个以kaempferol为母核结构的黄酮成分以及其它4个黄酮。对正常人肠道菌群与ZSSF进行体外孵育后的代谢产物进行表征，鉴定了3-phenylpropionicacid，p-hydroxyphenylpropionicacid，m-hydroxyphenylpropionicacid三个最终代谢产物。厌氧培养条件下，ZSSF与正常人肠道菌液离体培养结果表明，ZSSF中以genkwanin为母核的6-C糖spinosin，6''''''-feruloylspinosin和8-C糖isospinosin均可被分别水解转化为swertisin和isoswertisin；以apigenin为母核的6-C糖isovitexin、8-C糖vitexin和6-C-8-C双碳糖均可被水解转化为apigenin。以genkwanin及apigenin为母核的6-C糖肠道菌代谢速率均快于它们的8-C糖，且与7-C上取代基为羟基(-OH)或甲氧基(-CH3O)无关。Apigenin和kaempferol均能环裂解生成p-HPPA，并进一步生成3-PPA。三种不同母核类型的化合物经肠道代谢后，主要发生了脱糖基和环裂解反应。肠道菌群代谢是酸枣仁黄酮口服生物利用度低的原因之一。 3.采用16SrRNA高通量测序技术发现ZSSF对肠道菌门、属水平的物种组成无显著影响。物种差异结果显示，ZSSF干扰正常人肠道菌后，Eubacteriaceae显著增加，可能是黄酮糖苷肠道菌群水解成苷元及小酚酸的关键菌。对转化不同时间点的肠道菌群代谢产物SCFAs进行测定，结果表明ZSSF干预正常人肠道菌48h后能够显著提高肠道菌代谢产物aceticacid和总SCFAs的生成(p<0.05)，降低isobutyricacid、valericacid、isovalericacid的生成，而对propionicacid、butyricacid无显著影响。基于PLS模型的短链脂肪酸与酸枣仁黄酮原型及代谢产物的相关性分析显示，aceticacid，propionicacid及totalSCFAs与m-HPPA及3-PPA具有较高的正相关性。结论：通过以上研究，建立了ZSSF质量评价方法及对ZSSF及其代谢产物表征的方法，阐明了其代谢途径；初步阐明了ZSSF对肠道菌结构及代谢产物的调控作用。以上研究结果为阐明ZSSF体外代谢转化机制提供了科学依据。收起

关键词 : 酸枣仁总黄酮肠道菌群体外代谢药理活性

9. 酸枣仁潜在效应成分研究

[学位论文] 李强山西大学 2017年硕士导师: 闫艳共84页

摘要 : 酸枣仁来源于药用植物酸枣，是治疗失眠的常用中药。在传统活性筛选模式“提取分离-成分鉴定-活性筛选”下，已经阐明酸枣仁治疗失眠的部分效应成分。但这种以植物化学分离为主导的研究模式忽略了中药的复杂性与机体的整体性，割裂了化学成分在体内的... 展开酸枣仁来源于药用植物酸枣，是治疗失眠的常用中药。在传统活性筛选模式“提取分离-成分鉴定-活性筛选”下，已经阐明酸枣仁治疗失眠的部分效应成分。但这种以植物化学分离为主导的研究模式忽略了中药的复杂性与机体的整体性，割裂了化学成分在体内的相互关联，难以从整体上揭示其效应成分的全貌。因此，需从体外、体内全面认识酸枣仁中发挥作用的效应成分，并结合网络药理学，从成分-效应的角度阐释其潜在效应成分群，为其质量控制提供科学依据。目的: 本论文选择临床上治疗失眠的首选中药酸枣仁作为研究对象，以药效学为指导，从化学成分-体内成分-潜在效应成分思路出发，探讨酸枣仁治疗失眠的潜在效应成分。方法: 采用1H-NMR代谢组学技术研究酸枣仁干预PCPA致失眠大鼠血清中潜在生物标志物，评价其有效性;建立RSLC Q-Extractive轨道离子阱高分辨质谱分析技术，鉴定酸枣仁水提物中化学成分;通过体内-体外物质组关联，采用已建立的分析方法对大鼠灌服酸枣仁水提物后血清中代谢产物进行研究;将入血成分与失眠蛋白网络进行映射，构建“入血成分-失眠蛋白网络”，遴选潜在效应成分。结果: 1.采用1H-NMR代谢组学技术研究失眠大鼠血清生物标志物，找到16个与失眠显著相关的生物标志物，包括8个氨基酸（甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸和谷氨酸等）、肉毒碱、谷氨酰胺、琥珀酸、肌酸、胆碱、甜菜碱、丙三醇和葡萄糖。地西泮组对其中7个失眠生物标志物具有回调作用;酸枣仁水提物低剂量组对其中5个生物标志物具有回调作用;酸枣仁水提物中剂量和高剂量组对13个生物标志物具有回调作用。 2.在酸枣仁水提物中鉴别和推断了25个化学成分，其中包括12个黄酮化合物，8个三萜皂苷，2个脂肪酸类和3个生物碱。通过体内外物质关联分析，在血清中鉴定出15种化学成分，其中包括6个黄酮及1个代谢物，5个三萜皂苷和2个生物碱及1个代谢物。 3.采用Cytoscape软件构建失眠蛋白-蛋白相互作用网络，找到失眠疾病相关靶点143个，主要为5-羟色胺类受体、γ-氨基丁酸类受体、肾上腺素类受体、多巴胺类受体和谷氨酸类受体;入血成分-失眠蛋白网络中初步遴选了5个潜在效应成分，分别是酸李碱、乌药碱、芹菜素、斯皮诺素和酸枣仁皂苷A。结论: 本论文采用分析化学、药理学和信息学等多学科理论与技术，实现了体内与体外相结合，物质与效应相结合的研究模式，探讨酸枣仁治疗失眠的潜在效应成分。首先复制大鼠失眠模型，从代谢组学的角度研究了酸枣仁水提物治疗失眠的有效性，其次明确了酸枣仁的化学成分类别，并通过体内外化学成分的关联，初步确定了入血成分的种类和数量;最后将入血成分映射到失眠蛋白网络，遴选出5个潜在效应物质。本研究初步明确了酸枣仁治疗失眠的5个潜在效应成分，为酸枣仁药用资源及含有酸枣仁中药复方制剂的质量评价提供了科学依据。收起

关键词 : 失眠酸枣仁潜在效应成分代谢组学实验药理

10. 译者行为批评理论视域下的方言英译研究——以《浮躁》葛浩文英译本中陕西方言为例

[学位论文] 安欣长安大学 2021年硕士导师: 闫艳共72页

摘要 : 在中国当代文学中，许多优秀的文学作品中都出现了方言词汇。贾平凹作为陕西本土作家，在他的小说中陕西方言随处可见。贾平凹的作品在国内脍炙人口，但在国际的知名度却略逊一筹。在对其作品外译的过程中，大量的陕西方言对译者们来说是一个无法避免... 展开

关键词 : 《浮躁》方言翻译译者行为批评求真-务实连续统