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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: [背景] 目前广泛应用于临床的预混生物陶瓷封闭剂iRootSP具有持续杀灭细菌生物膜和促进根尖乳头干细胞(humanstemcellsfromtheapicalpapilla,hSCAPs)成骨分化的功能。非编码小分子单链RNA(microRNA,miRNA)在成骨过程中发挥多种作用,其中miR-141-3... 展开 [背景] 目前广泛应用于临床的预混生物陶瓷封闭剂iRootSP具有持续杀灭细菌生物膜和促进根尖乳头干细胞(humanstemcellsfromtheapicalpapilla,hSCAPs)成骨分化的功能。非编码小分子单链RNA(microRNA,miRNA)在成骨过程中发挥多种作用,其中miR-141-3p已被证实参与骨髓间充质干细胞和牙周韧带干细胞的成骨分化过程中,但其在hSCAPs成骨向分化中的潜在机制尚不清楚。本研究的目的是探讨miR-141-3p在iRootSP处理的hSCAPs成骨分化中的作用及潜在机制。 [方法] 组织块联合酶消化法从组织块中提取hSCAPs,用流式细胞术、免疫荧光染色和茜素红染色进行细胞鉴定。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测iRootSP培养后hSCPAs中miR-141-3pmRNA的表达水平。qRT-PCR,westernblot和双荧光素酶报告法证明SPAG9为miR-141-3p下游靶基因。采用碱性磷酸酶(ALP)染色和活性检测、茜素红染色、钙浓度测定、qRT-PCR和westernblot等方法检测iRootSP处理的hSCAPs成骨分化能力及相关成骨因子和信号通路相关因子的表达水平。数据采用单因素方差分析(one-wayANOVA)和Tukey方法进行分析,以确定实验组与对照组之间是否存在统计学差异。P<0.05为差异有统计学意义。 [结果] 在iRootSP处理的人根尖牙乳头干细胞中,miR-141-3p的表达量随着暴露时间的增加而降低;westernblot和qRT-PCR结果显示成骨标志物OCN、OSX、RUNX2和DSPP与miR-141-3p呈负相关,miR-141-3p与SPAG9/MAPK信号轴之间的负调控关系在体外实验中得到验证。 [结论] 生物陶瓷封闭剂iRootSP通过抑制miR-141-3p进而上调SPAG9表达,激活MAPK通路促进hSCAPs成骨分化。本研究结果提示生物陶瓷封闭剂iRootSP在难治性根尖周炎治疗过程中,具有促进根尖周组织骨再生的作用。 收起
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