中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 刘倍倍苏州大学 2019年硕士导师: 徐兴顺共54页

摘要 : 背景:抑郁症是一种常见的精神类疾病，临床症状主要表现为心境低落，思维迟缓，快感缺失，意志活动减退，认知功能损害，更有严重者可有自杀倾向或行为。目前临床上的抗抑郁药物大多部存在副作用且仅对部分患者有显著地治疗效果。在患有慢性疼痛的患者... 展开背景:抑郁症是一种常见的精神类疾病，临床症状主要表现为心境低落，思维迟缓，快感缺失，意志活动减退，认知功能损害，更有严重者可有自杀倾向或行为。目前临床上的抗抑郁药物大多部存在副作用且仅对部分患者有显著地治疗效果。在患有慢性疼痛的患者中有大约50％的病人会并发抑郁等情感障碍疾病，在镇痛药治疗后其抑郁症状得到改善。因此本实验主要是探究镇痛药美普他酚的抗抑郁作用并探究其作用机制。方法:本研究主要采用ICR小鼠以空间行为限制进行抑郁造模;采用强迫游泳实验和悬尾实验检测小鼠的抑郁样行为学变化;采用Westernblot检测相关蛋白含量的变化，定量PCR检测相关基因的mRNA水平的变化;免疫荧光染色检测细胞增殖的变化。结果:ICR小鼠在通过空间行为限制进行抑郁造模三周后，造模组小鼠较对照组表现出抑郁样行为;腹腔注射给予美普他酚连续治疗三周后(10mg/kg)，造模组小鼠的抑郁样行为得到改善，这提示美普他酚具有抗抑郁作用。在给予美普他酚治疗后的小鼠海马组织中，相较于对照组，给药组的Ahi1的蛋白和mRNA水平均有显著升高;而在Ahi1的基因敲除和Cend1的基因敲除鼠中美普他酚没有起到改善小鼠抑郁样行为的作用;在Ahi1缺失的情况下，小鼠海马组织细胞核内的Cend1的蛋白水平明显下降，而在抑郁造模后的野生型小鼠给予美普他酚两周后(10mg/kg)，Cend1在海马脑区细胞核内含量明显升高;在抑郁造模后的野生型小鼠给予美普他酚两周(10mg/kg)，在给予美普他酚的第二周开始时同时腹腔注射给予5-溴脱氧尿嘧啶(50mg/kg)一周后再灌注切片进行免疫荧光染色，发现在海马齿状回脑区给予美普他酚的野生型小鼠的5-溴脱氧尿嘧啶阳性细胞数目较对照组显著增多。结论:美普他酚具有抗抑郁的作用，其是通过Ahi1/Cend1通路介导其抗抑郁作用，为临床上治疗抑郁症提供新的药物选择。收起

关键词 : 抑郁症美普他酚抗抑郁作用

2. 藏药佐太抗抑郁作用及其机制研究

[学位论文] 陈海娟中国科学院大学 2019年博士导师: 魏立新；尚靖共104页

摘要 : 抑郁症是指一种以情绪显著而持久低落为主要特征的综合征，不但有心境障碍，同时伴随有躯体症状的改变，比如肠易综合征和功能性消化不良等。文献研究表明，胃肠道肠嗜铬细胞分泌的5-HT作为参与调节胃肠运动和分泌功能的重要神经调质，在脑-肠轴介导的... 展开抑郁症是指一种以情绪显著而持久低落为主要特征的综合征，不但有心境障碍，同时伴随有躯体症状的改变，比如肠易综合征和功能性消化不良等。文献研究表明，胃肠道肠嗜铬细胞分泌的5-HT作为参与调节胃肠运动和分泌功能的重要神经调质，在脑-肠轴介导的炎症信号由外周向中枢传递的过程中，对精神性相关的疾病的发生与发展起着重要的调节作用。藏药佐太是藏医通过对水银进行特殊炮制而得到的一种主含硫化汞的蓝黑色粉末制剂。长期的临床应用并未发现佐太有明显的毒性。目前毒性实验暴露剂量远高于临床剂量，也未见明显毒性。佐太(54.5％HgS)和中药朱砂具有相似的组成成分。现代药理研究证明，朱砂具有抗焦虑和抗抑郁等神经调控作用，体内的5-HT信号参与其中。安置精华散是藏药中的传统名方，主要治疗胃肠道疾病，临床观察提示添加佐太的安置精华散（当佐）对特定的胃肠道疾病优于未加佐太的制剂。佐太具有抗抑郁的作用吗？佐太抗抑郁作用的机制是什么？为此，本研究采用慢性轻度不可预见性应激制备大鼠抑郁模型，考察佐太对抑郁模型大鼠中枢神经系统和胃肠神经系统的5-HT信号的影响，从脑-肠轴途径探讨佐太的抗抑郁作用机制，并在细胞水平进行了验证，主要的研究结果如下: (1)慢性轻度不可预见性应激造模4周后，模型组大鼠活动减少，神情倦怠，烦躁易怒，体重增加缓慢，糖水偏好指数下降，血清中5-HT的含量明显降低。佐太可以改善上述指标的变化;硫化汞和佐太表现出相似的作用，安置精华散和当佐之间具有一定的差异。说明佐太的抗抑郁作用与体内5-HT的含量变化相关。 (2)应激导致的抑郁模型大鼠具有明显的海马结构和功能的损伤，表现为海马CA1区和CA3区锥体细胞减少，核固缩和排列松散紊乱，TUNEL-阳性的凋亡神经元显著增加，5-HT1A受体的表达减少。佐太和硫化汞一方面通过下调凋亡相关蛋白Caspase-3的表达和Bax/Bcl-2的比率，减少细胞的的凋亡;另一方面通过上调5-HT1A受体的表达，促进大鼠海马区神经细胞的修复，改善大鼠的抑郁症状。当佐和安置精华散对上述症状的改善具有一定的差异。 (3)抑郁模型大鼠伴有明显的胃和十二指肠结构和功能紊乱，表现为胃粘膜细胞排列紊乱，腺体间隙扩大;十二指肠绒毛长短不一，方向紊乱;胃排空实验胃内残留率增加，小肠推进率减弱;这种病理生理的变化伴随着胃和十二指肠粘膜肠嗜铬细胞数目的减少和功能降低。佐太和硫化汞可以改善抑郁模型大鼠的胃和十二指肠动力减弱，组织粘膜受损，上皮细胞紧密连接破坏;同时可以增加胃和十二指肠5-HT阳性的肠嗜铬细胞的数目，上调胃和十二指肠组织的5-HT合成酶TpH1mRNA的表达，上调5-HT的水平，增强肠嗜铬细胞的功能，改善抑郁导致的胃肠道的病理生理反应。当佐和安置精华散的作用具有差异性。 (4)LPS作用于肠嗜铬细胞3h后，5-HT的分泌减少，促炎因子IL-6和TNF-α的分泌增加，伴随上皮细胞紧密连接蛋白和粘附分子相关基因表达的变化，但是这种变化并没有引起肠嗜铬细胞的凋亡。佐太和硫化汞可以通过下调LrP5mRNA的表达，上调TpH1mRNA的表达，以及上调5-HT3a和TRPA1mRNA的表达调节肠嗜铬细胞5-HT的合成;促进紧密连接蛋白ZO-1和ocln mRNA的表达，抑制粘附分子ICAM-1mRNA的表达，改善LPS诱导的肠嗜铬细胞屏障功能的破坏，对肠粘膜屏障有一定的保护作用。安置精华散和当佐具有一定的差异。 (5)高剂量的佐太和硫化汞暴露后，可以导致胃和十二指肠粘膜受损，细胞紧密结构破坏，上皮间隙扩大，炎性细胞浸润。这种病理变化与胃和十二指肠中5-HT阳性的嗜铬细胞的数目显著增加，5-HT合成酶TpH1mRNA的表达显著增高以及血清中5-HT的含量显著增加相关联。提示高剂量的佐太和硫化汞暴露后，大鼠胃和十二指肠肠嗜铬细胞数目增加和功能活跃，5-HT分泌增高，可能是导致其胃和十二指肠病理变化的原因之一。综上所述，抑郁症可以引起中枢神经系统和胃肠神经系统5-HT信号的改变，从而影响脑-肠互动，导致抑郁状态下的胃肠结构和功能的变化。佐太具有抗抑郁的作用，硫化汞和佐太表现出相似的作用，安置精华散和当佐具有一定的差异。佐太通过改变脑肠轴介导的中枢神经系统和胃肠神经系统的5-HT信号发挥其抗抑郁作用。收起

关键词 : 抑郁症佐太抗抑郁作用

3. 百合地黄汤鲜粉抗抑郁作用药效学研究

[学位论文] 陈洪宝河南中医学院 2007年硕士导师: 苗明三共50页

摘要 : 目的：通过研究鲜百合地黄粉对小鼠悬尾、强迫游泳及利血平拮抗抑郁动物模型的影响，对大鼠慢性应激抑郁模型的影响，探讨鲜百合地黄粉抗抑郁作用的特点和机制，并为百合地黄汤鲜药应用的可行性提供实验基础。方法：采用小鼠尾悬挂实验、小鼠强... 展开目的：通过研究鲜百合地黄粉对小鼠悬尾、强迫游泳及利血平拮抗抑郁动物模型的影响，对大鼠慢性应激抑郁模型的影响，探讨鲜百合地黄粉抗抑郁作用的特点和机制，并为百合地黄汤鲜药应用的可行性提供实验基础。方法：采用小鼠尾悬挂实验、小鼠强迫游泳实验，连续7天灌服鲜百合地黄粉，分别观察小鼠4min内不动时间。腹腔注射利血平造利血平拮抗模型，连续给药7天，观察每组闭眼及30s内出圈动物数。以孤养加慢性不可预见性刺激所致抑郁症大鼠为模型，灌服鲜百合地黄粉，通过测定旷场行为、糖水消耗试验观察行为变化，检测血浆中MDA水平及SOD活力，荧光分光光度法测定脑组织中单胺类神经递质NE、5-HT、DA的含量，观察胸腺、脾脏主要免疫器官的组织形态，探讨鲜百合地黄粉对该模型大鼠的抗抑郁作用及机理。结果： 1．小鼠抑郁模型中，与空白对照组比，鲜百合地黄粉大剂量和盐酸氯米帕明组可明显减少4min内悬尾不动时间；大、中剂量和盐酸氯米帕明组均可显著减少小鼠强迫游泳4min内不动时间；腹腔注射利血平造小鼠抑郁模型成功，与模型组比，大剂量鲜百合地黄粉组和盐酸氯米帕明组可使出圈动物数增加，明显提高小鼠出圈百分率，显著减少小鼠闭眼百分率，中、小剂量鲜百合地黄粉组可使闭眼动物数减少，明显减少小鼠闭眼百分率。 2.以多种复合刺激交替进行的方法成功建立大鼠慢性应激抑郁模型。与模型组相比，鲜百合地黄粉各组和盐酸氯米帕明组均可显著增加大鼠糖水消耗量；可不同程度增加模型大鼠Open-field运动得分、提高血浆SOD活力及脑组织中单胺类递质NE、5-HT和DA水平；可不同程度对抗由慢性应激造模过程中引起的动物胸腺皮质厚度和皮质细胞个数减少，脾脏红白髓分界不清，脾小结缩小，淋巴细胞减少等损伤。结论：鲜百合地黄粉可缩短悬尾、强迫游泳抑郁模型小鼠不动时间，增加利血平拮抗抑郁模型的出圈动物数，减少闭眼动物数。可增加抑郁模型大鼠旷场行为活动的次数、糖水饮用量，降低抑郁模型火鼠血浆MDA水平，提高抑郁模型人鼠血浆SOD活力；增加抑郁模型大鼠脑组织中单胺类神经递质NE、5-HT、DA的含量；改善抑郁模型大鼠脾脏、胸腺组织的组织形态，提高机体的免疫功能。提示鲜百合地黄粉有很好的抗抑郁作用，并且可能足通过提高脑内单胺类神经递质(5-HT、NE、DA)的含量，提高机体抗瓴化能力，提高机体免疫力的途径发挥作用的。收起

关键词 : 鲜百合地黄粉抑郁模型抗抑郁作用

4. 头面部烧伤患者焦虑、抑郁障碍的影响因素分析

[学位论文] 马尚荣河北医科大学 2022年硕士导师: 张庆富共51页

摘要 : 目的：了解头面部烧伤对烧伤患者焦虑、抑郁的影响，探讨头面部烧伤并发焦虑、抑郁的临床影响因素。方法：以河北医科大学第一医院烧伤整形科2019年9月～2021年9月期间收治的，符合此次调查研究纳入标准和排除标准的烧伤患者为研究对象，使用患... 展开

关键词 : 烧伤焦虑抑郁作用

5. 干眼患者的危险因素分析以及干眼和焦虑抑郁的相关性研究

[学位论文] 何晴天津医科大学 2022年博士导师: 魏瑞华共97页

摘要 : 目的： 1.探究干眼门诊中干眼患者的危险因素。 2.探究干眼与焦虑和抑郁之间的相关性以及睡眠和健康焦虑对干眼与焦虑和抑郁之间的中介作用。方法： 1.纳入2021年3月至2021年10月于天津医科大学眼科医院干眼门诊就诊的干眼患者4... 展开目的： 1.探究干眼门诊中干眼患者的危险因素。 2.探究干眼与焦虑和抑郁之间的相关性以及睡眠和健康焦虑对干眼与焦虑和抑郁之间的中介作用。方法： 1.纳入2021年3月至2021年10月于天津医科大学眼科医院干眼门诊就诊的干眼患者467例和非干眼患者236例。所有干眼患者和非干眼患者进行人口统计学问卷、OSDI问卷、干眼的危险因素问卷、Keratograph5M非侵入性眼表综合分析仪检查。采用Logistic回归模型对干眼的危险因素进行分析。 2.纳入2021年3月至2021年10月于天津医科大学眼科医院干眼门诊就诊的干眼患者428例，所有干眼患者进行人口统计学问卷、OSDI问卷、医院焦虑和抑郁量表、匹兹堡睡眠质量指数问卷、Keratograph5M非侵入性眼表综合分析仪检查。采用回归分析和Bootstrap方法研究睡眠对干眼与焦虑抑郁之间关系的影响。 3.纳入2021年3月至2021年10月于天津医科大学眼科医院干眼门诊就诊的干眼患者417例，所有干眼患者进行人口统计学问卷、OSDI问卷、医院焦虑和抑郁量表、简式健康焦虑量表、Keratograph5M非侵入性眼表综合分析仪检查。采用回归分析和Bootstrap方法研究健康焦虑对干眼与焦虑抑郁之间关系的影响。结果： 1.本研究共纳入467例干眼患者，其中男性134例，女性333例，平均年龄是42.94±12.95岁。根据单变量分析，干眼潜在的危险因素包括糖尿病、抑郁、白内障手术、长期配戴隐形眼镜、日间电子产品的使用时间以及夜间电子产品的使用时间。在多变量Logistic模型中，日间电子产品的使用时间大于5小时(OR=4.556,95%CI,2.489,8.341,1.846,P＜0.001)，夜间电子产品的使用时间大于1小时(OR=2.581,95%CI,1.446,4.608,P=0.001)，抑郁(OR=5.072,95%CI,1.086,23.685,P=0.039)均是干眼的危险因素。 2.在干眼患者中，有117例(27.34%)、115例(26.87%)和74例(17.29%)患者分别出现了焦虑、抑郁以及同时出现焦虑和抑郁。其中年龄、户口所在地、月收入、受教育程度、病程是影响焦虑和抑郁的因素(P＜0.05)。年龄大、农村居民更容易出现焦虑和抑郁的情绪(P＜0.05)。此外，月收入低、受教育程度低、病程长的干眼患者更容易出现焦虑和抑郁(P＜0.05)。干眼对抑郁和焦虑的直接效应均是显著的(P＜0.05)。Bootstrap测试显示，睡眠障碍对焦虑的间接效应是显著的(95%CI,0.030,0.149)，对抑郁也是显著的(95%CI,0.055,0.179)。主观睡眠质量对焦虑间接效应是显著的(95%CI,0.203,0.813)，对抑郁也是显著的(95%CI,0.417,1.054)。睡眠潜伏期对焦虑的间接效应是显著的(95%CI,0.004,0.475)，对抑郁也是显著的(95%CI,0.006,0.502)。这些结果表明干眼症状的严重程度通过睡眠障碍、主观睡眠质量和睡眠潜伏期介导的直接和间接效应来影响焦虑和抑郁。 3.在干眼患者中，有106例(25.42%)、110例(26.38%)和68例(16.31%)患者分别出现了抑郁、焦虑以及同时出现焦虑和抑郁。OSDI评分和健康焦虑、抑郁、焦虑呈正相关(P＜0.05)，健康焦虑和焦虑、抑郁之间有显著相关性(P＜0.05)。Bootstrap测试显示，干眼对抑郁的直接效应是显著的(95%CI,0.006,0.044)，对焦虑的直接效应也是显著的(95%CI,0.005,0.040)。健康焦虑对抑郁的间接效应是显著的(95%CI,0.017,0.144)，对焦虑的间接效应也是显著的(95%CI,0.037,0.157)。这表明干眼症状的严重程度通过健康焦虑的直接和间接效应影响焦虑和抑郁。结论： 1.干眼门诊的干眼患者潜在的危险因素包括日间电子产品的使用时间大于5小时，夜间电子产品的使用时间大于1小时和抑郁。 2.干眼与焦虑和抑郁之间存在着明显的相关性。年龄、户口所在地、月收入、受教育程度都是影响干眼患者焦虑和抑郁的因素。 3.睡眠障碍、主观睡眠质量和睡眠潜伏期、健康焦虑可以作为干眼与焦虑和抑郁之间的中介因素。收起

关键词 : 干眼焦虑抑郁作用中介作用

6. 甘草苷抗抑郁作用的主要药效及机制研究

[学位论文] 李海芳北京中医药大学 2008年硕士导师: 王志斌共62页

摘要 : 甘草苷抗抑郁作用的主要药效学及机制研究抑郁症(depression)属于情感性障碍(affective disorder)。主要临床表现为心境抑郁，丧失兴趣，不能体验生活中的乐趣，精力不足，主观能动性降低或丧失，自我评价较低，精神运动迟缓，甚至产生自杀观念或行为... 展开

关键词 : 甘草苷抗抑郁作用药效学抑郁症抗抑郁药毒副作用

7. 氟西汀抗抑郁作用的药理学研究和中药抗抑郁活性的分析

[学位论文] 罗兰南京大学 2001年博士导师: 谭仁祥共81页

摘要 : 抑郁症是一类病因复杂精神性疾病.在发病诱因方面,除该文开头提及的种种外界应激因素外,一些绝症(如恶性肿瘤、艾滋病等)患者往往也会伴有抑郁症症状.因此,在这些疑难绝症的治疗方面应给予相关的高度重视.这不仅可能减轻他们谢世前的身心痛苦,提高其生... 展开

关键词 : 氟西汀抗抑郁作用药理学抗抑郁活性

8. 逍遥散对嗅球摘除抑郁模型大鼠的抗抑郁作用与机制研究

[学位论文] 刘金伟成都中医药大学 2013年硕士导师: 曾南共73页

摘要 : 目的：建立大鼠嗅球摘除抑郁模型，观察逍遥散的抗抑郁作用及干预单胺类神经递质水平、5-HT系统功能等作用机制。方法：采用摘除嗅球方法建立SD大鼠的嗅球摘除抑郁模型，于造模适应性恢复两周后开始灌胃给予逍遥散水煎剂（30g/kg、15g/kg、7.5g... 展开目的：建立大鼠嗅球摘除抑郁模型，观察逍遥散的抗抑郁作用及干预单胺类神经递质水平、5-HT系统功能等作用机制。方法：采用摘除嗅球方法建立SD大鼠的嗅球摘除抑郁模型，于造模适应性恢复两周后开始灌胃给予逍遥散水煎剂（30g/kg、15g/kg、7.5g/kg），连续给药4周。给药期间测定大鼠体重、自主活动、糖水消耗等行为学指标，采用 Morris水迷宫测定模型大鼠学习记忆能力。给药结束后取大鼠血清 HPLC-ECD法检测血清NE、AD、DA、5-HT神经递质含量，分光光度法检测血清中的NO、NOS水平；剖取大鼠海马与皮质部位，ELISA法测定两部位NE、AD、DA、5-HT神经递质含量，实时荧光定量PCR（RT-PCR）法测定海马和皮质部位5-HT1AmRNA、5-HT2AmRNA表达，Western-Blot法测定两部位5-HT1A受体蛋白表达水平，透射电镜法观察模型大鼠海马 CA3区细胞结构的变化；剖取大鼠肝脏与结肠组织，测定SOD、MDA水平。结果：（1）与正常对照组比较，嗅球摘除抑郁模型大鼠表现出体重下降、活动度增加、糖水消耗量下降，且空间学习和探索能力均降低，提示该动物模型的行为学出现异常。此外，模型动物血清、海马与皮质部位单胺类神经递质水平下降，海马与皮质部位5-HT1A mRNA及蛋白表达水平呈降低表现，5-HT2A mRNA表达呈升高趋势，模型动物海马 CA3区细胞结构异常，提示该模型动物单胺类神经递质水平紊乱，5-HT1A/5-HT2A表达失调，行为学异常，可认为模型成功。（2）与模型对照组比较，逍遥散各剂量（30g/kg、15g/kg、7.5g/kg）给药4周后，对体重下降具有改善趋势，对抗模型动物自主活动的异常增强；逍遥散30g/kg、15g/kg剂量给药1周即对模型大鼠的糖水消耗量下降表现出改善作用，给药第2周、第3周则明显改善；逍遥散30g/kg对模型大鼠空间学习和探索能力的下降改善趋势明显。（3）与模型对照组比较，逍遥散能提高模型动物海马、皮质、血清中 NE、AD、DA、5-HT神经递质水平；对模型大鼠海马与皮质部位5-HT1AmRNA表达水平有提高趋势，对5-HT2AmRNA表达水平有抑制趋势，其中逍遥散7.5g/kg显著提高皮质部位5-HT1AmRNA表达水平；逍遥散30g/kg、15g/kg剂量显著提高模型大鼠海马与皮质部位5-HT1A受体蛋白表达水平；逍遥散能减轻模型大鼠海马 CA3区细胞结构的异常。（4）与模型对照组比较，逍遥散30g/kg、15g/kg剂量显著提高模型大鼠血清NO水平；逍遥散各剂量组明显降低模型大鼠肝脏MDA含量，提高肝脏与结肠组织SOD活性，逍遥散15 g/kg显著降低模型大鼠结肠组织MDA含量。结论：逍遥散从行为学、海马神经细胞结构角度表现出对嗅球摘除抑郁模型大鼠的良好抗抑郁效应，其抗抑郁作用机制与其调节单胺类神经递质水平、升高NO水平及抗氧化效应有关，其中提高5-HT水平、5-HT1A受体的mRNA与蛋白表达水平，调控5-HT1A/5-HT2A平衡可认为是其主要机制之一。收起

关键词 : 逍遥散嗅球摘除抑郁模型抗抑郁作用

9. 阿魏酸改善抑郁—疼痛征的相关机制研究

[学位论文] 张璐温州医学院 2013年硕士导师: 潘建春;陈赛贞共53页

摘要 : 一、阿魏酸对CCI小鼠脑内单胺递质的影响研究阿魏酸慢性给药的镇痛作用，初步探讨其作用机制。采用热觉过敏和机械超敏实验，观察阿魏酸慢性给药对CCI小鼠的影响。应用神经化学检测方法，观察阿魏酸连续21天给药对单胺递质和单胺氧化酶活性的影... 展开一、阿魏酸对CCI小鼠脑内单胺递质的影响研究阿魏酸慢性给药的镇痛作用，初步探讨其作用机制。采用热觉过敏和机械超敏实验，观察阿魏酸慢性给药对CCI小鼠的影响。应用神经化学检测方法，观察阿魏酸连续21天给药对单胺递质和单胺氧化酶活性的影响。结果表明，与正常组相比，CCI小鼠的热觉和机械性痛阈都显著降低，而阿魏酸(10、20、40及80 mg·kg-1，p.o.)能显著逆转这一现象。进一步深入研究发现造成这种结果的原因可能是阿魏酸能剂量依赖性地增加海马、额叶皮层和杏仁核的5-HT和NE水平，并能抑制脑内MAO-A的活性。由此可知阿魏酸具有一定的镇痛作用，其机制可能与抑制脑内单胺氧化酶活性，进而增加脑内单胺类神经递质有关。二、阿魏酸在利血平诱导的抑郁-疼痛征中的作用行为学和神经生物学抑郁-疼痛征涉及一系列病理变化，包括神经内分泌和免疫网络功能障碍。抑郁症和疼痛相互影响，但机制仍模糊不清。本研究旨在探讨阿魏酸(FA)对利血平诱导的疼痛和抑郁样行为的作用。结果表明，利血平（1 mg·kg-1，皮下注射3天）导致痛觉敏感性显著升高以及小鼠绝望实验模型中的不动时间显着增加。神经化学实验表明，利血平化小鼠的额叶皮层和海马中神经递质(DA，NE和5-HT)减少，氧化应激、炎症细胞因子和凋亡因子均增加。FA(20，40或80 mg·kg-1，p.o.)扭转了利血平诱导的行为异常及海马和额叶皮层的NE和5-HT的减少。高剂量FA有效地拮抗了氧化和亚硝化应激及炎症反应。此外，FA剂量依赖性地减少了利血平化小鼠额叶皮层和海马的P物质、NF-κB和caspase-3水平。研究结果表明FA通过调节单胺类系统、氧化/抗氧化防御、炎症和细胞凋亡信号传导通路影响利血平引起的疼痛和抑郁样行为。理解FA作为多目标化合物改善抑郁和疼痛的机制，可能为治疗抑郁-疼痛征开辟新的途径。收起

关键词 : 阿魏酸抑郁疼痛征抗抑郁作用痛觉过敏镇痛作用

10. 可预见性温和应激的抗抑郁作用及机制研究

[学位论文] 党瑞丽空军军医大学 2019年博士导师: 招明高共126页

摘要 : 研究背景：重度抑郁症(major depressive disorder, MDD)是一种遗传和环境因素共同作用所导致的严重精神疾病，具有高致残性。然而，现有常规药物治疗对约三分之一的MDD患者无效。因此进一步阐明MDD的病理过程，探索新的防治策略已显得迫在眉睫... 展开研究背景：重度抑郁症(major depressive disorder, MDD)是一种遗传和环境因素共同作用所导致的严重精神疾病，具有高致残性。然而，现有常规药物治疗对约三分之一的MDD患者无效。因此进一步阐明MDD的病理过程，探索新的防治策略已显得迫在眉睫。MDD的病理机制复杂，与长期的社会、心理应激有关。研究表明，不同类型的心理及社会应激可诱导中枢促炎细胞因子表达，而NLRP3炎症小体是介导应激和神经免疫反应的桥梁。自噬是细胞对抗恶劣环境和应激条件的适应性反应，与内稳态的维持和恢复密切相关，在宿主防御系统和机体免疫调节过程中发挥着重要作用。功能正常的自噬系统可防止NLRP3炎症小体的过度激活及IL-1β等促炎细胞因子的过度生成。有意思的是，研究发现不同于社会挫败应激(social defeat stress，SDS)等经典应激MDD动物模型，长期给予大鼠可预见性温和应激(predictablechronicmild stress,PCMS)可显著改善大鼠的情绪、学习和记忆能力，表现出潜在的抗抑郁作用。表明与长期、高强度应激诱发病理反应不同，轻度、可耐受的应激反而有一定的神经保护作用。因此，基于以上研究证据，我们提出应激预适应假说，即机体在轻度、可耐受的应激过程中也在适应着应激环境，从而增加机体对随后持续应激的抵抗能力和耐受性。研究目的： 1.考察各组动物行为学表现，以确证应激预适应假说；考察各组小鼠海马小胶质细胞极化表型(M1/M2)标记分子表达差异，探索PCMS的神经免疫调控作用。 2.利用LPS诱导炎症相关MDD模型，验证PCMS的抗抑郁作用与调节神经炎症反应及炎症小体激活的直接联系。 3.考察PCMS及SDS对海马自噬功能的影响，并明确PCMS的抗抑郁作用是否与对自噬过程的调节有关，并进一步考察PCMS是否经由自噬调节NLRP3炎症小体激活。 4.高通量测序分析PCMS及SDS模型小鼠海马miRNA表达谱差异，并进一步探讨miR-210-3p在应激抵抗及细胞自噬、神经炎症反应中作用。研究方法： 1.预先建立PCMS应激预适应小鼠模型，并随后给予SDS进行MDD造模，考察各组(对照组，PCMS组，SDS组，PCMS+SDS组)小鼠在旷场实验(openfieldtest, OFT)、高架十字迷宫(elevatedplusmaze,EPM)、社交行为实验(socialinteraction test，SI)及强迫游泳实验(forced swim test, FST)中的行为学表现。 2.利用Iba-1免疫荧光标记活化的小胶质细胞；real-timePCR检测以上各组海马M1标志分子IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS及M2标记分子Arginase1、IL-4、IL-10、Ym-1基因表达；BrdU免疫荧光检测海马DG区神经细胞增殖；westernblot测定海马pro-BDNF和m-BDNF蛋白表达变化；酶联免疫试剂盒测定小鼠血中皮质酮含量。 3.预先建立PCMS应激预适应模型，随后腹腔注射LPS诱导炎症相关MDD模型，进一步确证PCMS的神经免疫调节作用。考察各组小鼠在OFT、EPM、FST中的行为学表现；Iba-1免疫荧光标记活化的小胶质细胞；real-timePCR及westernblot检测各组海马炎性细胞因子IL-1β，IL-6、TNF-α的mRNA表达及NLRP3炎症小体组成蛋白表达。 4.Real-timePCR及westernblot测定海马自噬相关蛋白LC3、p62、Beclin-1、ATG5、ATG7及ATG12mRNA及蛋白表达变化；应用自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3)及溶酶体抑制剂氯喹，考察PCMS及SDS对海马自噬流的影响。 5.应用自噬抑制剂3-MA，考察抑制自噬对PCMS抗抑郁作用的影响，westernblot测定NLRP3炎症小体组成蛋白表达变化，验证PCMS是否经由自噬发挥神经免疫调控及抗抑郁作用。 6.高通量测序分析PCMS及SDS小鼠海马miRNAs表达谱差异，并利用real-timePCR验证差异miRNAs，筛选出与自噬、免疫调节密切相关的差异miRNA；利用慢病毒载体分别过表达及抑制筛选出的miR-210-3p，考察行为学验证miR-210-3p在应激敏感性/抵抗性中的作用。 7.构建Atg73’UTR野生型和突变型载体，利用双荧光素酶报告系统验证miR-210-3p对Atg7的调控作用；利用LPS诱导BV2小胶质细胞激活，通过细胞瞬时转染上调/下调miR-210-3p表达，确证miR-210-3p在细胞自噬、NLRP3炎症小体激活及神经炎症反应中的作用。研究结果： 1.相比对照组，SDS诱导了小鼠抑郁样行为，引起小胶质细胞M1型标志物表达上调、M2型标志物表达下调；PCMS本身降低了小鼠在FST中的不动时间、促进海马神经细胞增殖；PCMS缓解了SDS诱导的抑郁样行为，并抑制了SDS诱导的海马小胶质M1型极化。 2.相比对照组，LPS显著诱导了小鼠抑郁样行为及神经炎症反应，而PCMS缓解了LPS诱导的抑郁样行为，并抑制了LPS引起的神经炎症反应及NLRP3炎症小体激活。 3.相比对照组，SDS抑制了海马自噬；PCMS则增强了海马自噬流，改善了SDS引起的海马自噬障碍。 4.3-MA阻断自噬则消除了PCMS对SDS的应激抵抗作用。 5.相比对照组，SDS显著诱导了NLRP3组成蛋白及成熟IL-1β表达，PCMS则抑制SDS引起的NLRP3炎症小体激活；3-MA阻断自噬消除了PCMS对NLRP3炎症小体的抑制作用。 6.高通量测序结果表明PCMS和SDS小鼠海马miRNAs表达谱存在明显差异；进一步验证发现，相比对照组，SDS诱导了海马miR-210-3p表达，而PCMS则抑制了miR-210-3p表达；脑内过表达miR-210-3p的小鼠对急性应激的抵抗能力降低，而抑制小鼠脑内miR-210-3p表达改善了SDS诱导的抑郁样行为，并缓解了SDS引起的自噬抑制作用。 7.双荧光素酶报告实验发现，相比Atg73’UTR突变型载体，miR-210-3p模拟物与野生型载体共转染后荧光值显著下降；BV2细胞转染miR-210-3p模拟物后ATG7蛋白表达水平下调，而转染抑制物则ATG7蛋白表达上调。 8.LPS诱导了BV2细胞miR-210-3p表达，并抑制了LC3-II及ATG7蛋白表达，而抑制miR-210-3p表达物则逆转了LPS对自噬的抑制作用，并缓解LPS诱导的NLRP3炎症小体激活。结论： 1.PCMS应激预适应增强了小鼠对之后SDS的应激抵抗，改善了SDS诱导的抑郁样行为；同时PCMS抑制了海马小胶质细胞M1极化，缓解了SDS诱导的促/抗炎细胞因子失衡。 2.PCMS通过抑制NLRP3炎症小体的过度激活，缓解神经炎症反应及氧化应激损伤，改善了LPS免疫应激诱导的抑郁样行为。 3.维持正常功能的自噬过程对于PCMS增强应激抵抗及神经免疫调控作用至关重要。PCMS通过恢复自噬功能，经由自噬抑制SDS诱导的NLRP3炎症小体激活及下游炎性因子表达，进而起到神经免疫调控作用，最终缓解SDS引起的行为学改变。 4.PCMS通过抑制海马miR-210-3p表达，恢复自噬平衡，抑制炎症小体激活，最终增强对应激的抵抗性，缓解SDS引起行为学异常。收起

关键词 : 抑郁症抗抑郁作用 NLRP3炎症小体 microRNAs