摘要: 研究背景及目的 心律失常疾病包括窦性心动过缓，房颤，房室传导阻滞，病态窦房结综合征等在人群中是一种高发疾病。目前已证明超极化激活的环核苷酸门控阳离子通道4(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channels 4，HCN4)发生的... 展开 研究背景及目的 心律失常疾病包括窦性心动过缓，房颤，房室传导阻滞，病态窦房结综合征等在人群中是一种高发疾病。目前已证明超极化激活的环核苷酸门控阳离子通道4(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channels 4，HCN4)发生的突变与心律失常疾病相关。以往报道的HCN4突变大都集中在N末端、转运孔区域、C-连接区、环核苷酸结合区域以及C末端。我们在两例散发的窦性心动过缓并伴有QT间期延长和短阵室速的患者中发现了一个新的HCN4突变，为了确定该突变引起心律失常表型的相关分子机制，我们在临床、遗传学以及功能方面对该突变参与的机制进行了深入研究。 方法及结果 我们首先提取两例散发的窦性心动过缓并伴有QT间期延长和短阵室速患者的血DNA并行心律失常相关基因的Panel测序，发现了一个可能致病的新突变HCN4-R666Q，而其并未在千人基因组和ESP6500中发现。全细胞膜片钳功能实验结果显示与野生型HCN4通道相比，突变通道的电流密度明显下降，但是V1/2没有发生显著的差异。利用相同条件的膜片钳技术，在电极内液中加入1mM8-Br-cAMP，结果显示突变蛋白结合cAMP的能力也没有发生显著的差异;接着，我们使用real-timePCR、western-blot、免疫共沉淀、免疫荧光试验以及电生理检测证实了突变通道的含量下调是由于泛素.蛋白酶体途径加速了其降解，而并非通过自噬和苏木化途径。 结论 我们在两例散发患者中找到了与窦性心动过缓并伴有QT间期延长和短阵室速相关的致病HCN4新突变。通过研究发现蛋白降解加速是导致心律失常表型的潜在机制，同时，在HEK293T细胞中我们发现蛋白酶体抑制剂具有良好的靶向治疗效果。本文研究结果为精准治疗此类突变导致的心律失常搭建了相应理论基础。 收起