摘要: 目的：胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，其占我国肿瘤死亡率的首位，在全球肿瘤死亡率中排第二位[1]。胃癌的发生是一个多因素，多步骤的过程,涉及到一系列原癌基因的异常激活和抑癌基因的失活，进而引起一些信号传导通路的异常。特别是最近通过对Hedgeh... 展开 目的：胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，其占我国肿瘤死亡率的首位，在全球肿瘤死亡率中排第二位[1]。胃癌的发生是一个多因素，多步骤的过程,涉及到一系列原癌基因的异常激活和抑癌基因的失活，进而引起一些信号传导通路的异常。特别是最近通过对Hedgehog(HH)信号通路的研究，显示HH信号通路的异常激活在许多肿瘤包括胃癌的发生发展过程都起了重要的作用。HH信号通路转录因子GLI1是其中所涉及的核心分子。因此本研究首先从GLI1分子在胃癌组织中的表达及其意义方面入手，并重点研究转录因子GLI1在胃癌细胞增殖、侵袭和转移等生物学行为中的作用。 方法: RT－PCR检测6株胃癌细胞和永生化胃粘膜细胞GES-1中HH信号通路分子HH、PTCH、SMO、SUFU和GLI1的表达情况。Real-time PCR检测43例胃癌组织和癌旁组织中转录因子GLI1在RNA水平表达情况。设计合成针对GLI1基因的siRNA并筛选最有效的序列。通过CCK8和软琼脂克隆形成试验检测沉默GLI1基因表达前后胃癌MKN28细胞增殖和体外成瘤能力的改变。通过Transwell小室试验检测沉默GLI1基因表达前后胃癌MKN28细胞侵袭和转移能力的改变情况。 结果：经RT-PCR发现在胃癌细胞株HH信号通路各分子的表达情况存在差异。SHH在6株胃癌细胞系中均表达上调，PTCH在KATOIII细胞系,SUFU在MKN28和KATOIII表达呈下调。表明HH配体过表达为通路重要活化方式，同时PTCH和SUFU表达下调也可导致HH通路激活。43例胃癌组织中GLI1 mRNA阳性表达率为67.9％，并且与肿瘤分化程度相关(P=0．003)，与年龄、性别、Borrmann分型及TNM分期无关(P>0．05)。胃癌MKN28细胞转染GLI1 siRNA后GLI1基因的表达受到明显抑制。GLI1 表达下调后MKN28细胞生长明显缓于阴性对照和未处理组（p＝0.0135），且克隆形成数目及体外克隆形成能力降低。侵袭和转移试验表明，GLI1 siRNA组侵袭和转移细胞数目均低于阴性siRNA组和对照组（p值均〈0.05）而阴性siRNA组和对照组间的差异均无统计学意义。 结论：HH信号通路在胃癌细胞系中被普遍激活,且GLI1 mRNA表达率与肿瘤组织的分化程度相关，可能作为判断胃癌恶性程度的指标之一。特异抑制HH信转录因子GLI1后，降低了MKN28细胞的增殖和克隆形成能力,转染GLI1 siRNA下调GLI1基因表达，在体外抑制胃癌MKN28细胞的侵袭和转移。表明HH信号通路的活化促进了MKN28细胞增殖、侵袭和转移，预示着HH信号通路可能是一个治疗胃癌的潜在靶点。 收起