中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 周华南京工业大学 1999年博士导师: 欧阳平凯;沈树宝共128页

摘要 : α-酮酸是一类重要的化合物,在食品、医药和化工等行业有重要的应用前景.但现有的α-酮酸的制备方法从工业经济的角度来分析,均有很大的局限性.该文在分析比较的基础上,对海因法制备α-酮酸的工艺路线进行了系统的研究.该文研究了海因及其衍生物的合成... 展开

关键词 : 海因 &alpha -酮酸亚苄基海因苯丙酮酸丙酮酸

2. α-酮酸/氨基酸制剂治疗慢性肾功能不全的研究

[学位论文] 杨宏北京协和医学院(中国医学科学院) 1999年博士导师: 江骥;胡蓓共99页

摘要 : 慢性肾功能衰竭的营养治疗是肾脏病研究的重要领域之一.合理的营养治疗不但能改善肾衰患者的临床症状和体征,而且能够有效地延缓肾功能的进一步恶化,从而提高患者的生活质量.经过大量临床试验证明:较低蛋白饮食并补充α-酮酸配方不但能维持氮平衡及改... 展开

关键词 : 功能肾衰竭营养治疗 &alpha -酮酸配方&alpha -酮酸制剂配比核素示踪法

3. 基于膜结合l-氨基酸脱氨酶重组表达菌株的α-酮酸及其衍生物制备研究

[学位论文] 丁焕茹浙江大学 2018年硕士导师: 梅乐和共80页

摘要 : α-酮酸具有二羰基结构，是多种生理活性物质的合成中间体，在食品、医药及化工行业应用广泛。生物酶法催化氨基酸制备α-酮酸及其衍生物具有高效、环保和成本低的特点。在催化氨基酸产生α-酮酸的酶类中，膜结合L-氨基酸脱氨酶(mL-AAD)不需要辅酶或氨... 展开 α-酮酸具有二羰基结构，是多种生理活性物质的合成中间体，在食品、医药及化工行业应用广泛。生物酶法催化氨基酸制备α-酮酸及其衍生物具有高效、环保和成本低的特点。在催化氨基酸产生α-酮酸的酶类中，膜结合L-氨基酸脱氨酶(mL-AAD)不需要辅酶或氨基受体，不会产生对α-酮酸具有氧化破坏作用的过氧化氢，是制备α-酮酸及其衍生物的较为理想用酶。本文以普通变形杆菌（Proteus vulgaris）的mL-AAD为研究对象，优化了分泌表达策略和条件。在此基础上，利用表达mL-AAD的重组工程菌进行了苯丙酮酸(PPA)、3,4-二羟基苯丙酮酸(DHPPA)及相应衍生物苯乳酸(PLA)、丹参素(SAA)的生物制备过程研究。主要结果有: 1.在pET-28a、pET-20b两个质粒中，分别利用mL-AAD自带的tat信号肽（双精氨酸分泌途径）和pelB（保守分泌途径）-tat整合信号肽介导mL-AAD分泌表达，发现采用自身tat信号肽介导mL-AAD分泌的表达方式(BL21(DE3)-pET-28a-mlaad)可以获得更优的菌体生长性能和脱氨活力。 2.以L-苯丙氨酸(L-Phe)为底物，利用工程菌BL21(DE3)-pET-28a-mlaad制备PPA。在优化条件下（pH=8.0，温度37℃，菌体浓度:0.39g/L，L-Phe浓度:150mmol/L），反应42h可得到141mmol/L PPA。在此基础上，利用共表达D-2-羟基异己酸脱氢酶（来自Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus）和甲酸脱氢酶（来自Mycobacterium vaccae N10）的工程菌将制备的PPA转化为PLA，在优化条件下，可得到121mmol/L PLA，综合转化率达到80.7％。 3.以L-多巴(L-Dopa)为底物，利用工程菌BL21(DE3)-pET-28a-mlaad制备DHPPA。在优化条件下（pH=8.5，温度37℃，菌体密度:0.37g/L，L-Dopa浓度:100mmol/L），反应1h可得到28.5mmol/L DHPPA。在此基础上，利用共表达D型乳酸脱氢酶（来自Pediococcus acidilactici DSM20284）和甲酸脱氢酶（来自M.vaccae N10）的工程菌将制各的DHPPA转化为SAA，在优化条件下，可得到11.66mmol/L SAA。收起

关键词 : &alpha -酮酸 &alpha -酮酸衍生物膜结合L-氨基酸脱氨酶工程菌制备工艺

4. 手性镍配合物催化下β-酮酸与β,γ-不饱和-α-酮酸酯的不对称脱羧Aldol反应研究

[学位论文] 魏爱佳天津大学 2015年硕士导师: 郑艳;马军安共70页

摘要 : 手性叔醇化合物是许多天然产物和医药中间体的重要结构单元。因此，如何高效构建手性叔醇化合物是化学家研究的热点课题之一。其中，醛或酮与α-酮酸酯的不对称Aldol反应是合成该类化合物的一种有效方法。 β-酮酸作为一种高活性的酮替代物，通过... 展开

关键词 : 手性叔醇化合物不对称脱羧缩合反应 &beta -酮酸 &beta &gamma -不饱和-&alpha -酮酸酯

5. 单线态氧促进的α-酮酸脱羧与胺的酰胺化反应

[学位论文] 徐文涛合肥工业大学 2017年硕士导师: 许华建共107页

摘要 : 酰胺是普遍存在的有机官能团，作为蛋白质基本构建骨架的酰胺键，不但在生命中扮演着重要角色，也大量存在于药物活性分子和材料中。因此，对于酰胺的合成研究一直受到极大关注。众所周知，羧酸或者羧酸衍生物与胺的缩合反应是合成酰胺最普遍的... 展开

关键词 : 酰胺 &alpha --酮酸胺脱羧酰胺化单线态氧

6. 对亚甲基苯醌的合成及其在脱羧加成反应中的应用研究

[学位论文] 黄高魁江苏科技大学 2018年硕士导师: 高玉华;蒋春辉共87页

摘要 : 对亚甲基苯醌是一种特殊的二烯酮结构，作为一种独特的含有两个α,β-不饱和羰基化合物，具有很强的亲电性。对亚甲基苯醌是一种不稳定的亲电体，这也导致过去一个世纪里，化学研究者对其的研究受到极大的阻碍，但是2,6位含有叔丁基等取代基的对亚甲基... 展开对亚甲基苯醌是一种特殊的二烯酮结构，作为一种独特的含有两个α,β-不饱和羰基化合物，具有很强的亲电性。对亚甲基苯醌是一种不稳定的亲电体，这也导致过去一个世纪里，化学研究者对其的研究受到极大的阻碍，但是2,6位含有叔丁基等取代基的对亚甲基苯醌却具有很好的稳定性。受到邻位亚甲基醌加成反应研究的启发，对亚甲基苯醌近十年来在对称和不对称2,6迈克尔加成反应领域受到广泛的关注。 β-酮酸是一种1,3-二羰基化合物，具有很强的亲核性，在有机合成中可以用来合成许多碳环或杂环类化合物，而且反应活性很高，通用性强，应用广泛。β酮酸的脱羧加成反应、烷基化和曼尼希反应也是合成酮类化合物的方法。但是芳基β酮酸作为底物的报道却很少，主要是因为反应通常需要强酸或过渡金属作为催化剂。本论文中进行对亚甲基苯醌的合成以及对亚甲基苯醌和芳基β-酮酸的1,6-脱羧加成反应的研究，以对亚甲基苯醌为亲电试剂，以芳基β酮酸为亲核试剂，在Lewis酸的催化下的反应。 (1)1,6-二叔丁基苯酚和苯甲醛在甲苯溶剂中，以哌啶为催化剂，通过一锅法进行合成对亚甲基苯醌的反应，并通过改变1,6-二叔丁基苯酚和苯甲醛的原料摩尔比、温度和溶剂等一系列影响因素的讨论，确定最优反应条件。其中以1,6-二叔丁基苯酚和苯甲醛为1.2∶1的投料摩尔比，以甲苯为溶剂，加热回流条件下反应产率可达85%。研究发现，1,6-二叔丁基苯酚在高温下挥发性提高，哌啶的沸点略低于溶剂甲苯的沸点，通过一锅法反应，能够降低以上因素的不利影响。 (2)以对亚甲基苯醌和苯基?酮酸为底物，通过改变催化剂、催化剂的量和溶剂等一系列影响因素的讨论，确定最优反应条件。其中以1mol%三氟甲基磺酸钪催化剂，能够高效的进行脱羧加成反应，目标化合物的收率达到90%以上。研究发现，三氟甲基磺酸钪对该反应的催化活性特别高，反应条件简单，原子利用率高。 (3)以对亚甲基苯醌和芳基?酮酸为底物，以1mol%催化量的三氟甲基磺酸钪为催化剂，以二氯甲烷为溶剂，进行1,6-脱羧加成反应。目标化合物的收率达到90%。研究发现，供电子基团处在苯环上，目标化合物的收率较高于吸电子基团，甚至含有强吸电子取代基三氟甲基酮酸和对亚甲基苯醌没有明显的反应现象。 (4)以对亚甲基芳基醌和苯基?酮酸为底物，1mol%催化量的三氟甲基磺酸钪为催化剂，以二氯甲烷为溶剂，进行1,6-脱羧加成反应。目标化合物的收率达到90%。研究发现，吸电子基团处在苯环上，目标化合物的收率较高于供电子基团。 (5)根据确定的最优反应条件，合成了一系列脱羧加成反应产物，并通过质谱、核磁共振等方法对合成的化合物进行表征。之后我们又对其反应机理进行研究，并通过核磁共振等方法对其未脱羧的中间体进行了表征。收起

关键词 : 1 6-脱羧对亚甲基苯醌芳基&beta -酮酸加成反应

7. Bi-,Sn-改性Pd/MCM-41催化剂构筑及其选择性催化氧化1,2-丙二醇制丙酮酸研究

[学位论文] 李万里江苏大学 2019年硕士导师: 糜建立共79页

摘要 : 通过催化氧化生物质衍生物1,2-丙二醇，可选择性制备丙酮酸和乳酸等精细化学品。目前已报道的通过该催化反应获得丙酮酸的催化剂主要是由贵金属元素（如Pt和Pd）与重金属元素（如Sn和Bi等）组成。这些催化剂的改性元素的掺杂方式较单一导致其较容易流... 展开通过催化氧化生物质衍生物1,2-丙二醇，可选择性制备丙酮酸和乳酸等精细化学品。目前已报道的通过该催化反应获得丙酮酸的催化剂主要是由贵金属元素（如Pt和Pd）与重金属元素（如Sn和Bi等）组成。这些催化剂的改性元素的掺杂方式较单一导致其较容易流失，催化剂活性低和寿命较短，催化获得丙酮酸的效果不理想。通过优化改性元素的掺杂方式可以有效增强催化剂性能。本论文通过利用MCM-41分子筛负载Bi与Pd双金属以及利用Sn掺杂MCM-41分子筛负载Pd纳米颗粒的方法分别构筑出Pd@Bi/M和Pd/SnM催化剂，并将其用于选择性催化氧化1,2-丙二醇制丙酮酸，对催化剂结构与催化活性之间的构效关系、改性元素在反应中的作用、反应动力学等进行研究。主要研究成果如下： 1.通过向Pd/MCM-41催化剂的活性组分Pd中掺杂Bi元素制备出改性后的负载型双金属催化剂Pd@Bi/M。通过XRD、TEM、XPS等测试和催化氧化1,2-丙二醇的结果发现：多孔载体MCM-41很好的将活性组分Pd@Bi进行了分散负载，这有助于提高催化剂的利用率。由于Bi的掺入改变了活性组分Pd表面的电荷状态，从而改变了催化剂的选择性并有助于提高催化剂活性。在相同条件下双金属(Pd4@Bi1)5/M催化剂对丙酮酸的选择性是单金属(Pd)5/M催化剂的3倍。通过拟合反应动力学方程后计算二者的反应活化能分别为26.05kJmol-1和18.65kJmol-1。结果表明，Bi元素的改性掺杂有效的提高了原始催化剂的催化活性及丙酮酸选择性。 2.采用经原位掺杂法改性的(Sn)MCM-41分子筛作载体负载贵金属Pd制备出Pd/SnM(Si/Sn)催化剂。通过XRD、TEM等表征表明当掺杂量适当（Si/Sn比例大于6）时采用原位掺杂可以将Sn元素很好的引入到MCM-41骨架中，并维持较好的分子筛骨架结构。由于助催化剂Sn的加入优化了活性金属Pd的颗粒尺寸，同时提高了催化剂的碱位强度以及改变了催化剂表面电荷情况。在催化氧化1,2-丙二醇的反应中发现：通过改变Sn元素掺杂的数量，催化剂表面的转化频率（TOF）展现出火山曲线的趋势，Pd2/SnM(12)催化剂展现出最高的催化性能，其TOF值是Pd2/MCM催化剂的1.5倍，是Pd2/SnO2的3倍。同时通过拟合反应动力学方程并与Pd2/MCM催化剂相比发现：由于Pd2/SnM(12)催化剂有较小的反应活化能（Ea）和较大的指前因子（A），表明其对丙酮酸的选择性更佳。另外Pd2/SnM(12)催化剂在催化氧化1,2-丙二醇制备丙酮酸的实验中展现出良好的循环性能。收起

关键词 : 1 2-丙二醇 MCM-41分子筛催化氧化丙酮酸

8. 2，6-二氯-1，4-苯醌对草鱼器官中能量代谢的效应研究

[学位论文] 熊淼江汉大学 2023年硕士导师: 郑琦共69页

摘要 : 2,6-二氯-1,4-苯醌(2,6-DCBQ)是一种存在于自来水及泳池水中的新型消毒副产物，其分布广、毒性强，对人类健康构成潜在威胁。为探究2,6-DCBQ诱发的器官毒性与生物体内糖代谢过程的关联性及其毒理机制等，本文以被2,6-DCBQ暴露了不同浓度与时间的草鱼(... 展开 2,6-二氯-1,4-苯醌(2,6-DCBQ)是一种存在于自来水及泳池水中的新型消毒副产物，其分布广、毒性强，对人类健康构成潜在威胁。为探究2,6-DCBQ诱发的器官毒性与生物体内糖代谢过程的关联性及其毒理机制等，本文以被2,6-DCBQ暴露了不同浓度与时间的草鱼(Ctenopharyngodonidella)幼鱼为研究对象开展课题工作。主要的研究内容与研究结果如下: 以2,6-DCBQ暴露后草鱼的心脏组织为核心，观察了心脏与甲状腺的组织形态学变化;测定了与糖代谢相关激素的水平以及相关酶的活性;基于靶向代谢组学技术，分析了组织中糖代谢关联分子的变化。结果显示，2,6-DCBQ暴露可引起幼鱼心脏的心包水肿、间质水肿，以及甲状腺滤泡胶质丢失、上皮细胞增生等现象;干扰了血液中甲状腺激素T3、胰岛素的水平;降低了己糖激酶、果糖磷酸激酶、丙酮酸激酶的活性;改变了糖代谢过程中几种分子的相对含量。联合多种分析结果可以推断，在2,6-DCBQ暴露后，心脏组织中的己糖激酶活性被抑制，干扰了鱼的糖酵解途径;α-酮戊二酸转化为琥珀酸的进程受阻，影响了鱼的三羧酸循环过程。以2,6-DCBQ暴露后草鱼的肝脏组织为核心，观察了其形态学变化;测定了与糖代谢相关分子的水平以及相关酶的活性;基于靶向代谢组学技术，分析了组织中糖代谢关联分子的变化。结果显示，2,6-DCBQ暴露可引起幼鱼的肝脏出现细胞核退化现象;升高了组织中葡萄糖的浓度;降低了三磷酸腺苷的相对水平;降低了己糖激酶、果糖磷酸激酶、丙酮酸激酶的活性;改变了糖代谢过程中几种分子的相对含量。联合多种分析结果可以推断，在2,6-DCBQ暴露后，肝脏组织中的丙酮酸含量减少，鱼的糖酵解途径被干扰;α-酮戊二酸、柠檬酸、琥珀酸的含量增加，鱼的三羧酸循环过程也受到影响。进一步，我们测定了肝脏中一些脂质的含量，并基于靶向代谢组学技术分析了组织中与脂代谢关联分子的变化。结果显示，2,6-DCBQ暴露可导致甘油三酯的含量降低,并且影响了游离脂肪酸与乙酰辅酶A的含量;通过脂肪酸代谢而产生的酮体，其整体呈下降趋势。联合糖代谢异常的结果可推断，在2,6-DCBQ暴露后，鱼体内基于糖代谢的能量供给过程受到抑制，于是，鱼可能通过消耗肝脏组织中的脂质以补充能量。本课题的研究结果在组织形态水平与分子水平上阐述了HBQs的急性器官毒性效应以及可能的分子机制等。研究成果有助于我们更加深入地理解卤代苯醌类消毒副产物的毒理机制，科学地认识其潜在危害并全面地评估其健康风险等。此外，相关成果也具有一定的应用价值，可为自来水厂制定合理的监控标准提供科学依据，在饮用水安全管理方面作出一点贡献。收起

关键词 : 草鱼糖代谢代谢组学丙酮酸激酶 2，6-二氯-1，4-苯醌

9. 3-溴丙酮酸联合顺铂抑制肺癌细胞株A549生长的实验研究

[学位论文] 张梦娇第三军医大学 2016年硕士导师: 胡义德共47页

摘要 : 目前肺癌已成为我国乃至全球范围内发病及死亡率均居首位的恶性肿瘤，并且其发病率和死亡率呈日益上升的态势，以表皮生长因子选择性酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors，EGFR-TKI）为代表的分子靶向治疗... 展开目前肺癌已成为我国乃至全球范围内发病及死亡率均居首位的恶性肿瘤，并且其发病率和死亡率呈日益上升的态势，以表皮生长因子选择性酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors，EGFR-TKI）为代表的分子靶向治疗的应用，尽管取得了引人瞩目的疗效，但紧接着出现的耐药使其治疗陷入瓶颈。近年来研究表明恶性肿瘤细胞中糖酵解明显增强，且糖酵解在肿瘤的发生、发展中扮演着重要角色，大量研究显示通过抑制异常糖酵解可抑制多种肿瘤生长，甚至可杀死肿瘤细胞，3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate，3-BrPA)作为己糖激酶抑制剂这种抑制作用尤为明显，并有望作为新型抗肿瘤药物用于临床。目前关于3-BrPA对肺癌作用的研究国内外极为少见，其对肺癌作用的具体机制也不清楚。本实验研究拟观察3-BrPA、顺铂单用及联用对肺癌细胞株A549增殖的影响，并初步探讨3-BrPA对肺癌A549细胞的增殖抑制作用及其可能机制。目的：观察3-BrPA、顺铂单用及联用对肺癌细胞株A549增殖的影响，并初步探讨3-BrPA对肺癌A549细胞的增殖抑制作用及其可能机制。方法： 1、应用CCK-8(cell counting kit-8)法观察不同浓度的顺铂、3-BrPA单用及联用处理的A549、MRC-5细胞在24h、48h、72小时的增殖情况。 2、选择低于IC50(half maximal inhibitory concentration，半抑制浓度)的3-BrPA(40μmol/L)与顺铂(1 mg/L)单独及联合作用于A549细胞，用药48 h后在倒置相差显微镜下观测各组A549细胞的形态变化，使用流式细胞仪测定各组A549细胞的凋亡率;流式细胞仪分析不同浓度的3-BrPA处理A549细胞48 h后各组细胞周期分布，并计算细胞增殖指数。 3、不同浓度的3-BrPA处理A549细胞48h后，应用己糖激酶(hexokinase，HK)检测试剂盒检测3-BrPA对各组细胞内己糖激酶活性的影响。结果： 1、3-BrPA对A549细胞生长的影响:当3-BrPA浓度高于20μ mol/L时，与阴性对照组比较，其对A549细胞具有明显的抑制作用(P＜0.01)，并且随着3-BrPA浓度的增高、作用时间延长，其增殖抑制作用明显增强(P＜0.05)。且与单用3-BrPA、顺铂组比较，联合用药组对A549细胞的增殖抑制作用显著增强(P＜0.01)。 3-BrPA对MRC-5细胞增殖的影响:CCK-8结果显示，与阴性对照组比较，当浓度在0～80μ mol/L范围内时，3-BrPA对MRC-5细胞无明显增殖抑制作用(P＞0.05)，而当3-BrPA的浓度范围为80-160μ mol/L时对MRC-5仅有轻微抑制作用，3-BrPA对A549细胞的抑制作用在同时间点以及同浓度均显著高于其对MRC-5细胞的抑制作用(P＜0.01)。 2、倒置相差显微镜观察到用药处理A549细胞48h后，3-BrPA组表现为大多数细胞呈现凋亡改变，而联合用药组凋亡细胞数量更多，且凋亡改变更加明显，部分区域甚至呈现细胞碎片、空泡化改变等细胞坏死征象;流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示，与对照组的A549细胞凋亡率（8.103±2.590）％相比较，顺铂组（20.700±5.172）％、3-BrPA组（53.417±5.259）％和3-BrPA与顺铂联用组（77.953±3.587）％的细胞凋亡率均显著增高(P＜0.01)，而联合用药组细胞凋亡率较单一用药组显著增高(P＜0.01);流式细胞仪分析不同浓度的3-BrPA处理A549细胞48h后的细胞周期结果提示随着3-BrPA浓度增高，处于G1期的A549细胞明显增多(P＜0.01)，同时处于S期的A549细胞明显减少(P＜0.01)，细胞较多的被阻滞于G1期，而S期和G2/M期细胞比例显著下降，A549细胞的增殖指数随3-BrPA浓度增高而降低。 3、不同浓度的3-BrPA作用于A549细胞48h后:己糖激酶活性检测结果显示用药组细胞内己糖激酶活性显著低于阴性对照组，且随着3-BrPA浓度增高，细胞内己糖激酶活性逐渐降低。结论： 1、3-BrPA具有抑制肺癌A549细胞增殖的作用、并且与顺铂联用具有协同抗肺癌A549细胞的增殖作用，同时低浓度3-BrPA对正常细胞MRC-5细胞作用不明显，仅高浓度时有轻微抑制作用，提示3-BrPA具有明显抑制肺癌A549细胞增殖的作用，但对正常细胞MRC-5的毒性作用却不明显，并且与顺铂联用具有协同抗A549细胞增殖的作用。 2、3-BrPA具有诱导A549细胞凋亡的作用，同时具有延缓细胞周期进程进而抑制细胞增殖的作用。 3、3-BrPA具有降低A549细胞内己糖激酶活性的作用，并且随其浓度增加，己糖激酶活性逐渐下降。以上研究提示，在体外3-BrPA具有抑制A549细胞增殖，促进A549细胞凋亡，延缓细胞周期进程的作用，且与化疗药物有协同作用，但对正常细胞MRC-5影响却较小。其机制可能与3-BrPA抑制肺癌细胞内己糖激酶活性、阻断其糖酵解进程，进而使肺癌细胞能量代谢受到影响有关。收起

关键词 : 肺癌 3-溴丙酮酸顺铂抗肿瘤作用

10. 17β-雌二醇对低氧性肺动脉高压乳酸代谢的影响

[学位论文] 何平河北医科大学 2021年硕士导师: 袁雅冬共55页

摘要 : 目的：肺动脉高压（PAH）发病机制复杂，涉及多个通路，雌激素对肺动脉高压有保护作用，但雌激素与乳酸代谢在肺动脉高压发病机制中相关联系尚不明确，本研究主要研究雌激素对肺动脉高压的保护机制，探究在此过程中雌激素对M2型丙酮酸激酶（PKM2）的作... 展开目的：肺动脉高压（PAH）发病机制复杂，涉及多个通路，雌激素对肺动脉高压有保护作用，但雌激素与乳酸代谢在肺动脉高压发病机制中相关联系尚不明确，本研究主要研究雌激素对肺动脉高压的保护机制，探究在此过程中雌激素对M2型丙酮酸激酶（PKM2）的作用通路，进而影响糖酵解代谢产物乳酸含量，为肺动脉高压靶向治疗提供新的思路。方法：将42只雌性SD大鼠按随机数字表法平均分为7组（各组n=6）：假手术+常氧组、假手术+低氧组、去势+常氧组、去势+低氧组、去势+常氧+17β-雌二醇（E2）组、去势+低氧+E2组、去势+低氧+PKM2特异性激动剂（TEPP-46）组。去势组即手术切除卵巢；而非去势组（假手术组）则打开腹腔找到卵巢不予处理，直接还纳缝合。低氧组置于低氧箱内饲养，常氧组则给予正常空气。去势+常氧+E2组与去势+低氧+E2组给予E2[20ug/(kg·d)]皮下注射，其余组皮下注射生理盐水。去势+低氧+PKM2特异性激动剂（TEPP-46）组给予TEPP-46[5mg/(kg·2d)]腹腔注射，其余组腹腔注射生理盐水。饲养8周建立低氧性肺动脉高压模型。通过右心导管检测每组动物的平均肺动脉压（mPAP）并称量左右心室、室间隔以计算右心室肥厚指数（RVHI），HE法染色后观察肺小血管形态学变化并检测WA%（血管壁占血管总面积）和WT%（肺小动脉中膜厚度比）。试剂盒法测量乳酸的生成量、丙酮酸水平，免疫荧光法测量活性氧（ROS）表达，免疫荧光法显示PKM2分布及强度，免疫组织化学法测量肺组织及细胞核内PKM2蛋白水平。结果： 1.成功建立了低氧性肺动脉高压大鼠模型低氧组大鼠较常氧组反应迟钝、毛色晦暗、呼吸频率加快、进食水量及活动量均减少，无死亡标本。去势+低氧+E2组较去势+低氧组增长速度快，活动度好。去势+低氧+PKM2特异性激动剂（TEPP-46）组与去势+低氧+E2组生长速度差异不明显，但均较常氧组缓慢。 2.各组样本的mPAP和RVHI 低氧组较常氧组的mPAP和RVHI均升高（P均lt;0.05），且符合肺动脉高压的压力水平。相比于去势+低氧组，去势+低氧+E2组、去势+低氧+PKM2特异性激动剂（TEPP-46）组大鼠mPAP和RVHI均降低（P均lt;0.05），提示雌激素、TEPP-46均可不同程度改善低氧性肺动脉高压。 3.各组肺组织的形态学改变假手术+低氧组与去势+低氧组肺动脉壁增厚，动脉管腔明显狭窄，而去势+低氧+E2组、去势+低氧+PKM2特异性激动剂（TEPP-46）组肺动脉管腔出现不同程度的逆转。其WA%及WT%也均较去势+低氧组小。 4.各项研究指标结果与常氧组大鼠相比，低氧条件下大鼠的乳酸生成量、丙酮酸水平、ROS表达、肺组织PKM2蛋白水平及细胞核PKM2蛋白水平均明显增加，有统计学差异（Plt;0.05）；PKM2免疫荧光结果显示低氧组免疫荧光强度明显强于常氧组，去势+低氧+E2组及去势+低氧+TEPP-46组较去势+低氧组免疫荧光强度稍减弱，但大鼠肺组织细胞核PKM2水平明显降低，有统计学差异（Plt;0.05），提示PKM2核转位减少。结论：长期慢性低氧可诱导低氧性肺动脉高压的发生，Warburg效应使得乳酸含量增多，17β-雌二醇可通过减少ROS进而增强PKM2活性，抑制其核转位，使Warburg效应降低，降低乳酸水平，从而改善肺动脉高压。收起

关键词 : 肺动脉高压 17&beta -雌二醇乳酸代谢丙酮酸活性氧 M2型丙酮酸激酶