中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 魏诗芸哈尔滨工业大学 2019年硕士导师: 卢卫红;崔杰共99页

摘要 : 空间环境具有温度低、辐射强和微重力的特点，在研究生物的空间适应和变异以及诱变育种方面起着重要作用。大量飞行试验表明，空间环境会对各种生物的表型、代谢过程以及基因蛋白表达产生不同程度的影响。水稻是一种禾本科植物，基因组相对较小、内含... 展开空间环境具有温度低、辐射强和微重力的特点，在研究生物的空间适应和变异以及诱变育种方面起着重要作用。大量飞行试验表明，空间环境会对各种生物的表型、代谢过程以及基因蛋白表达产生不同程度的影响。水稻是一种禾本科植物，基因组相对较小、内含子较少、基因密度高、生长周期短。为了探索空间飞行对植物光合作用的影响，探索其生物效应的分子机制，本课题通过实践十号对水稻东农423和东农416的种子进行空间搭载实验，从对水稻F1代生理指标、蛋白表达水平和基因转录水平进行比较分析，对空间飞行所引起的光合作用蛋白与基因变化规律多层面研究，并获得如下结果：测定空间飞行后水稻东农416与东农423的F1代生长生理性状并对生理变化进行分析研究。结果显示经过空间飞行后的F1代水稻种子发芽能力与农艺性状与对照组相比无显著变化，光合作用代谢产物含量变化较大，东农423光合色素含量呈先下降再上升的趋势，东农416为下降趋势，F1代光合代谢产物含量变化与F0代相比表现出回归趋势，叶绿素含量变化具有一定遗传趋势。通过iTRAQ技术对经过空间飞行的两个水稻品种F1代三叶期与分蘖期期的蛋白表达量进行检测，利用生物信息学技术分析光合作用相关差异蛋白，并结合F0代蛋白表达量变化进行分析。两个品种水稻F1代差异表达的蛋白质在三叶期数量均多于分蘖期，三叶期上调蛋白数多于下调蛋白数。东农416三叶期有10个光合作用相关蛋白差异表达，6个蛋白表达水平上调，4个下调；东农416分蘖期6个光合作用相关蛋白差异表达，4个蛋白表达水平上调，2个下调；东农423三叶期有9个光合作用相关蛋白差异表达，6个蛋白表达水平上调，3个下调；东农423分蘖期3个光合作用相关蛋白差异表达，均表现为下调。综合分析F1代与F0代两个品种光合蛋白差异情况，仅有1个蛋白即铁氧还原蛋白在两个品种F1代与F0代中均表现出显著下调趋势，其变化具有遗传趋势。通过荧光定量RT-PCR技术，分别对经过空间飞行的两个水稻品种F1代表现出显著差异的蛋白编码基因进行验证，同时对蛋白质表达未发生明显变化的光合作用关键蛋白编码基因表达量的测定。经空间飞行东农416的F1代基因表达量多呈现为上调，而东农423基因表达量多呈现为下调，同时蛋白质表达量变化趋势于基因表达量变化趋势并不完全一致，部分蛋白表达量未发生变化而基因表达量发生显著变化空间飞行对基因的影响大于对蛋白的影响。结合蛋白质表达量变化与基因表达变化结果选择光合作用关键蛋白暗反应关键酶大亚基编码基因克隆其基因编码序列，对于基因序列和启动子序列进行分析，并未发现明显差异变化。收起

关键词 : 水稻空间飞行光合作用蛋白表达量基因表达量

2. 杜甫诗歌中的量范畴研究

[学位论文] 李雅倩长江大学 2020年硕士导师: 吴松共78页

摘要 : “量”是人类认识世界和叙述世界的重要范畴之一。在人类的认知中，客观事物、事件、性状等都具有“量”的因素。人们把认知范畴中的“量”投射到语言系统中便构成了语言的量范畴，名词与事物量和空间量有关，动词往往与动量发生联系，形容词则与性状... 展开

关键词 : 杜诗诗歌创作量范畴基本量派生量表达手段

3. 山东寿光方言程度量表达研究

[学位论文] 郑荣敏河北大学 2023年硕士导师: 蒋静忠共85页

摘要 : 本文研究山东寿光方言的程度量表达。目前学界对于程度量的内涵、外延、量级等方面还存在一定的争议，没有形成一个一致认可的理论框架。本文结合寿光方言的语言材料，对前人理论框架进行补充和完善，建构一个具有更高容纳度和更强解释力的程度量理论... 展开

关键词 : 寿光方言程度量表达语义量级

4. 主观量视角下的副词歧义研究

[学位论文] 张璐辽宁师范大学 2012年硕士导师: 迟永长共31页

摘要 : 语言的“主观性”是指在话语中总是能体现出说话人的“自我”成分，也就是说，说话人在说出一段话的同时总是带有自己对这段话的态度、立场和情感。语言不仅能客观地表达命题，()且融入说话者的主观情感和认识。语言既能表达客观量，也可以表达主观量... 展开语言的“主观性”是指在话语中总是能体现出说话人的“自我”成分，也就是说，说话人在说出一段话的同时总是带有自己对这段话的态度、立场和情感。语言不仅能客观地表达命题，()且融入说话者的主观情感和认识。语言既能表达客观量，也可以表达主观量。缺乏主观认知的语言不能算是名副其实的语言。语言主观量的表达有多种多样的形式，轻重音、语气助词和副词等都是汉语主观量表达的一些重要手段。其中副词是表示主观量的重要形式。随着汉语研究的深入和发展和认知语言学的日益兴起，汉语的主观量问题成为汉语研究的一个热点，学界诸多学者开始研究汉语副词的主观量问题，并发表了多篇研究成果。本文在前人研究基础上，将主观量视角下的副词歧义问题作为重点研究对象。通过实证分析试探求出副词表量产生歧义的原因和基本规律，以及有效消除歧义的基本方法，从而达到深刻认知汉语自身特点和更好服务于对内对外汉语教学的目的。本文选取的是狭义“量”概念作为“主观量”的研究依据，力图通过含有具体数量短语的量对副词主观量的歧义问题做出解析和描写。全文分四个部分，第一部分文献综述，简要介绍主观量的内涵和近些年来国内学者对副词主观量问题的研究情况；第二部分对副词主观量进行限定和分类，汉语主观量的表达方式主要有重音、语气词和副词等，而副词主观量的表达方式部分，根据副词的语义指向不同，按照语言指向前指、后指和双指，对“只”、“仅”、“才”、“就”、“都”等副词的主观量表现手段进行描写和分析；第三部分介绍副词主观量歧义问题出现的原因、表现的类型及消除方式；最后第四部分为结语。在研究方法上我们主要采用比较和归纳，比较就是通过设立单独语境和通过设立增加语境检验在语义表达方面有何不同，在此基础上归纳出能产生歧义的具体条件和规律。本文的用例来源包括两种情况：1.从北京大学汉语研究中心现代汉语语料库中检索到的例句。2.笔者收集到的学术论著或工具书中的用例，引用原文都加注说明。收起

关键词 : 主观量副词歧义语义表达

5. 大鲵c-型和g-型溶菌酶基因的生物信息学分析和表达研究

[学位论文] 刘然然西北农林科技大学 2018年硕士导师: 王立新共75页

摘要 : 中国大鲵(Andrias davidianus)是我国特有的大型两栖动物，现已成为名贵珍稀水产养殖种类，具有重要的经济价值。然而随着大鲵养殖规模的扩大，养殖数量和密度激增，加之生长环境的恶化，导致大鲵病害频发。因此，研究大鲵病理学和免疫学具有重要的意... 展开中国大鲵(Andrias davidianus)是我国特有的大型两栖动物，现已成为名贵珍稀水产养殖种类，具有重要的经济价值。然而随着大鲵养殖规模的扩大，养殖数量和密度激增，加之生长环境的恶化，导致大鲵病害频发。因此，研究大鲵病理学和免疫学具有重要的意义。溶菌酶是一种碱性蛋白酶，能够破坏细菌细胞壁肽聚糖中连接 N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖的β酰氨基葡糖苷键，分解粘多糖，使之成为可溶性的糖肽，从而裂解细菌。溶菌酶作为机体的免疫防御因子，能够抵御外来病原菌的感染，在大鲵非特异性免疫过程中起到非常重要的作用。为此，本研究从大鲵转录组数据库中筛选出了c-型和g-型溶菌酶基因片段，鉴定了两种类型溶菌酶基因的cDNA片段，进行了结构特征、表达特性、病原刺激后表达变化分析，以及体外原核表达和产物活性等方面的研究，得到如下结果：（1）AdlysC的cDNA序列长873 bp，其中开放阅读框ORF456 bp，5’-UTR65 bp， 3’-UTR352 bp，编码152个氨基酸，蛋白分子量是16.86 kDa，等电点是8.66；AdlysG的cDNA序列长948 bp，其中开放阅读框558 bp，5’-UTR 270 bp，3’-UTR为120 bp，编码185个氨基酸，蛋白分子量是20.48 kDa，等电点是8.41。（2）实时荧光定量结果显示，AdlysC在被检测的各个组织中广泛表达，其中在胃和肝脏中的表达量最高，在肠道、脾脏、血液以及肺中的表达较高，在肌肉、肾脏、心脏和脑中表达量较低。AdlysG 表达较为集中，主要在肝脏、脾脏、肺中表达，而在肌肉、肾脏、肠道和皮肤中表达量较低。嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）侵染大鲵后，肝脏和脾脏中 AdlysC和AdlysG 的表达水平均显著上调，预示着其在大鲵免疫防御中的重要作用。（3）构建了pET32a/AdlysC和pET32a/AdlysG重组表达载体，采用大肠杆菌BL21原核表达系统，重组表达rAdlysC和rAdlysG蛋白。通过IPTG诱导表达，Ni2+亲和纯化，包涵体复性等手段，获得了较高纯度的rAdlysC和rAdlysG蛋白。在体外不同pH梯度和温度梯度下，检测了重组蛋白酶的活性，发现rAdlysC和rAdlysG在pH 6.0，30℃下溶菌酶活性最高。通过最小抑菌浓度MIC试验，表明rAdlysC和rAdlysG蛋白对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌有一定的抑菌活性，且rAdlysC抗菌活性高于rAdlysG。研究结果不仅对大鲵溶菌酶基因的功能作用和活性特点有了一定的认知，而且为进一步了解大鲵免疫系统中的功能基因奠定了基础。收起

关键词 : 大鲵溶菌酶基因相对表达量原核表达活性测定

6. 汉语主观量构式研究

[学位论文] 代丽丽华中科技大学 2016年博士导师: 程邦雄共173页

摘要 : 语言具有主观性已经成为研究共识，而主观量则是主观性在量范畴中的具体体现，表达的是说话人基于显性或隐性对比对量信息的主观评价义。在主观性理论和构式语法视野下，量范畴不再仅局限于单纯的数量关系及有具体数量词作为参照量的数量表达，构式成... 展开语言具有主观性已经成为研究共识，而主观量则是主观性在量范畴中的具体体现，表达的是说话人基于显性或隐性对比对量信息的主观评价义。在主观性理论和构式语法视野下，量范畴不再仅局限于单纯的数量关系及有具体数量词作为参照量的数量表达，构式成为表达主观量的有效方式之一。主观量构式是表达主观量的一种语法手段，它是既有自身特点，又集和了语音、词汇等多种主观量表达方法于一身的特殊表达形式。本课题对现代汉语中量范畴的构式表达进行了系统的分类描写分析，针对每类主观量构式的个案进行了两方面的研究：一是分析包括主观量构式的结构、构式义、句法及语用功能等方面的传统分析，二是分析主观量构式的主观性与主观化等方面的认知分析。本文据量的大小对主观量构式进行分类，包括主观大量和主观小量，并关注了前人未关注的主观等量，认为主观等量可视为主观量的一个次类，以此为中点，形成一个向两端延伸的主观量量级链。论文在描写分析过程中将主观量的构建与识解图式化，使研究更具可视性、可感性。全文共五部分，第一部分为绪论，概述了选题来源、意义以及相关研究状况及不足，明确本课题研究视角，对主观量以及构式等进行了界定、特点与功能的概括分析，并对主观量构式进行分类。第二部分描写分析了主观大量构式，主要分节描写分析了有数词、副词、代词标记、趋向动词的主观大量构式，以及含有比较结构的主观大量构式。第三部分描写分析了主观小量构式，首先对主观小量进行了界定分析，继而分节介绍了由数量结构“（一）个”构成的主观小量构式、含有比较结构的主观小量构式、通过否定获得突显的主观小量构式以及新兴表达“小+X（谓）”。第四部分主观等量构式。等量表达也离不开对比，构式可以通过正向对比以及反向对比表述主观等量信息。正向对比即肯定形式的比较结构，汉语中主要有“X像/跟/和/与/同Y一样（W）”、“X有Y那么W”、“（X）和/跟Y差不多（W）”，反向对比即否定性比较“不比”构成的“X不比YW”，后者的主观性更强。最后一部分总结了全文内容。收起

关键词 : 现代汉语主观量量范畴构式语法数量表达

7. 毛竹Lhca基因的克隆和光照在转录水平对其表达的调控

[学位论文] 唐文莉中国林业科学研究院 2008年博士导师: 彭镇华共118页

摘要 : 本论文采用RT-PCR法，从毛竹中克隆了捕光叶绿素a/b结合蛋白基因LhcaPe01(GenBank EU035496)；LhcaPe02(GenBank EU121593)；LhcaPe03(GenBank EU366147)；LhcaPe04(GenBank EU366146)的全长。运用生物信息学方法对其核苷酸序列、编码的氨基酸序列进行... 展开本论文采用RT-PCR法，从毛竹中克隆了捕光叶绿素a/b结合蛋白基因LhcaPe01(GenBank EU035496)；LhcaPe02(GenBank EU121593)；LhcaPe03(GenBank EU366147)；LhcaPe04(GenBank EU366146)的全长。运用生物信息学方法对其核苷酸序列、编码的氨基酸序列进行分析以及蛋白结构进行预测。为了解析毛竹PSI四条基因的功能，对毛竹进行了不同光照强度的处理，根据荧光参数的变化判断胁迫程度采集叶片，进行荧光实时定量PCR，选用GAPDH和β-actin作为内参基因，正常光照的叶片作为对照，采用最大二阶导数(2-ΔΔCt)的方法进行Lhca基因的相对定量，此外对同一时期不同组织Lhca四条基因的表达进行相对定量。本论文QRT-PCR采用SYBR-GreenⅠ嵌合荧光与熔解曲线结合法检测Lhca基因家族成员。本论文得出如下结论： (1) LhcaPe01基因cDNA全长为1051 bp，序列从第39 bp开始到第779 bp含有1个开放阅读框和一个中止密码子，编码246个氨基酸。在5′端有38 bp的非编码区，在3′端含有242 bp的非编码区和Poly(A)30 bp。此外，通过DNASTAR软件预测，LhcaPe01编码的蛋白质等电点和分子量分别为5.4000和22107.34Da。通过ExPASy网站对序列进行分析得出：核酸序列中与光合相关的信号区有2个4Fe-4S铁还原氧化蛋白的信号区和2个2Fe-2S铁还原氧化蛋白的信号区。该基因编码的氨基酸序列含有3个蛋白激酶C磷酸化位点；2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点；5个N－肉豆蔻酰位点；2个叶绿素a/b结合蛋白位点。 (2) LhcaPe02基因cDNA全长为1100 bp，序列从第74bp开始到第862bp含有1个开放阅读框和一个中止密码子，编码262个氨基酸。在5′端有73 bp的非编码区，在3′端含有234 bp的非编码区和Poly(A)14bp。LhcaPe02编码的蛋白质等电点和分子量分别为6.14和28095.11 Da。该基因序列含有2个4Fe-4S铁还原氧化蛋白的信号区，推导的氨基酸序列中含有氨基化合物位点为、蛋白激酶C磷酸化位点、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、N－肉豆蔻酰位点和叶绿素a/b结合蛋白位点。 (3)LhcaPe03基因cDNA全长为1149 bp，序列从第76 bp开始到第861 bp含有1个开放阅读框（open reading frame, ORF）和一个中止密码子，编码261个氨基酸。在5′端有75 bp的非编码区，在3′端含有288 bp的非编码区和Poly(A)27 bp。LhcaPe03编码的蛋白质等电点和分子量分别为5.08和27686.79 Da。该基因核酸序列含有3个2Fe-2S铁还原氧化蛋白的信号区和2个4Fe-4S铁还原氧化蛋白的信号区，推导的氨基酸序列中含有氨基化合物位点、蛋白激酶 C磷酸化位点、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、N－肉豆蔻酰位点和叶绿素a/b结合蛋白位点，还有一个yiaA/B two helix domain。 (4)LhcaPe04基因部分cDNA为1071 bp的基因，含有完整的编码框，序列第1 bp开始到第738 bp含有1个开放阅读框和一个中止密码子，编码245个氨基酸。5′端未克隆出非编码区，在3′端含有304 bp的非编码区和Poly(A)29 bp。LhcaPe04编码的蛋白质等电点和分子量分别为6.95和26898.83 Da。该基因核酸序列含有2个2Fe-2S铁还原氧化蛋白的信号区，推导的氨基酸序列中含有蛋白激酶C磷酸化位点、N－肉豆蔻酰位点、N－糖基化位点和叶绿素a/b结合蛋白位点。 (5)通过 NCBI Blast软件分析得出与毛竹 Lhca基因同源性较高的物种是水稻和大麦。毛竹Lhca四条基因之间的核酸序列同源性高于推导的氨基酸序列的同源性。四条基因编码的四种蛋白分子二级结构组成，LhcaPe01与其它三条基因差别较大，而LhcaPe02、LhcaPe03和LhcaPe04三者之间差别不明显。根据SWISS MODEL预测和模拟，毛竹、大麦、水稻和玉米Lhca四条基因编码的蛋白模型较相似，毛竹PSI四种蛋白之间的差异较大。 (6)刚竹属三种竹种——红壳竹、毛竹和角竹保守区内核酸序列同源性非常高，Lhca1基因的同源性高达99％以上；Lhca2基因的同源性高达98％以上。总体而言，同属竹种的同源性高于毛竹与禾本科的水稻和大麦；三个竹种Lhca1基因的同源性又相对高于Lhca2基因，说明刚竹属内竹种的Lhca1基因比Lhca2基因更保守。 (7)PSΙ四条基因Lhca1～4在不同组织——新叶、老叶、茎尖、茎秆和笋中都有表达，但在不同组织中的表达水平存在差别。Lhca1基因在新叶中的表达量最高；Lhca2基因在老叶中的表达量最高；Lhca3基因和Lhca4基因在茎尖中的表达量最高。四条基因的表达量在不同组织中均以Lhca1基因最高；所有样品中以Lhca3基因在笋中表达量最低；四条基因在茎尖中的表达量均较高。 (8)不同光照处理的叶片，PSΙ四条基因表达量顺序均为Lhca1>Lhca4>Lhca2>lhca3，强光下表达下调，弱光下表达上调，上调和下调的幅度不同。光强为3000μmol·m-2·s-1时，四条基因表达都出现下调，表达量分别是正常的89.5％，30.6％，48.3％，63.9％；下调幅度顺序为Lhca2>Lhca3>Lhca4>Lhca1。光强为2000μmol·m-2·s-1时，表达量分别是正常的27.9％，17.8％，69.7％，35.1％；下调幅度顺序为Lhca2>Lhca1>Lhca4>Lhca3。光强为1600μmol·m-2·s-1时，表达量分别是正常的73.3％，51.8％，35.7％，85.4％；下调幅度顺序为Lhca3>Lhca2>Lhca1>Lhca4。低光处理20天后叶片的相对表达量基本升高。光强为1000μmol·m-2·s-1时，四条基因表达都出现上调，表达量分别是正常的116.7％，115.4％，187.9％，102.4％；上调幅度顺序为Lhca3>Lhca1>Lhca2>Lhca4。光强为500μmol·m-2·s-1时，Lhca1、 Lhca3、和Lhca4基因表达上调，Lhca2基因基本不变；表达量分别是正常的237.4％，99.1％，122.2％，147.5％；上调幅度顺序为Lhca1>Lhca4>Lhca3>Lhca2。光强为10μmol·m-2·s-1时，表达量分别是正常的607.2％，168.5％，219.2％，149.6％；上调幅度顺序为 Lhca1>Lhca3>Lhca2>Lhca4。1600μmol·m-2·s-1光强表达量随时间的变化为：四条基因变化均呈一直下降趋势，先陡后缓。10和500μmol·m-2·s-1光强表达随时间延长，四条基因均先急速上升，然后缓慢下降，最终到达一个平衡点。收起

关键词 : 毛竹 Lhca基因表达量光照强度

8. 玉米苗期耐盐性的全基因组关联分析

[学位论文] 王炳才华中农业大学 2017年硕士导师: 代明球共81页

摘要 : 盐胁迫是危害玉米生长、发育和产量形成的主要非生物逆境之一。不同玉米品种耐盐性存在显著差异，导致玉米品种间耐盐性差异的遗传基础目前还不清楚。理解玉米耐盐性的遗传基础有利于培育耐盐玉米品种，以减轻盐胁迫对玉米产量的影响。本研究应用关联... 展开盐胁迫是危害玉米生长、发育和产量形成的主要非生物逆境之一。不同玉米品种耐盐性存在显著差异，导致玉米品种间耐盐性差异的遗传基础目前还不清楚。理解玉米耐盐性的遗传基础有利于培育耐盐玉米品种，以减轻盐胁迫对玉米产量的影响。本研究应用关联分析方法寻找导致不同玉米耐盐性差异的遗传变异，为探究玉米苗期耐盐性的遗传基础提供线索。以存活率为指标调查了445份遗传变异广泛的玉米关联群体品种的耐盐性，结果显示不同玉米品种的耐盐性在关联群体中存在显著差异。其中CIMBL42、CIMBL131、CML361和CIMBL60等材料的耐盐性高，这些材料可作为优良的遗传资源用于耐盐基因的定位或耐盐品种的育种工作中。以约124万个覆盖全基因组的SNP标记对玉米耐盐性进行全基因组关联分析，我们找到了196个与盐胁迫显著关联的SNP标记，这些标记分布于112个候选基因。112个候选基因中有6个分布在连锁分析定位的玉米盐胁迫QTL中，GRMZM2G001334和GRMZM2G106056两基因位于主效QTLqRL2s(PVE=22％)中，GRMZM2G132450基因位于一个大效应的QStr1(PVE＞10％)和QTWC1位点中，GRMZM2G445905基因和GRMZM2G070252基因分布在qRRDWSDW1s中，GRMZM2G153454基因位于一个约770Kb大小的QSkc7中。对这112个基因进行功能注释，发现21个参与盐、旱、冷、热和病害等逆境胁迫，10个参与脱落酸、乙烯、生长素、油菜素甾醇和茉莉酸激素信号，12个参与代谢途径。对112个候选基因进行盐胁迫下的基因表达量分析显示:有64个基因的表达模式在盐胁迫下发生明显变化;参与逆境胁迫、激素信号、代谢和发育过程的基因在这64个基因中有不同程度的富集。这些与玉米苗期盐胁迫关联的标记和基因为耐盐玉米品种的培育提供了潜在的遗传资源。收起

关键词 : 玉米盐胁迫因功能注释表达量

9. 高繁山羊发情周期中卵巢内LHR的定位及其mRNA表达规律研究

[学位论文] 宋翔山东农业大学 2009年硕士导师: 王树迎共55页

摘要 : 卵泡的发育和卵子的成熟是一个复杂的过程，多种激素的共同作用，包括促性腺激素、性激素、促性腺激素释放激素。而作为促性腺激素之一的黄体生成素便是其中最为重要的激素之一。作为一种优秀的高产地方品种，济宁青山羊发情周期卵巢内的LHR表达量定然... 展开卵泡的发育和卵子的成熟是一个复杂的过程，多种激素的共同作用，包括促性腺激素、性激素、促性腺激素释放激素。而作为促性腺激素之一的黄体生成素便是其中最为重要的激素之一。作为一种优秀的高产地方品种，济宁青山羊发情周期卵巢内的LHR表达量定然有其独特之处，而其独特的LHR表达量的变化很可能是导致其多产的重要因素之一。因此本研究采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学的方法分析济宁青山羊在发情周期不同阶段卵巢内LHR的分布情况和表达规律。试验结果表明： 1.发情周期的不同阶段内济宁青山羊卵巢中LHR mRNA的表达呈现一定的规律性，间情期表达量最低，发情前期表达量开始升高，发情期表达量最高，发情后期表达量锐减，直至降至间情期水平。 2.基因表达结果分析表明，LHR基因在发情周期内卵巢的表达量变化的比值依次为：间情期：发情前期：发情期：发情后期为(1.0±0.16)：(15.73±2.59)：(63.72±11.10)：(2.04±0.63)。统计结果表明，发情期LHR的表达量与其他三个情期差异极显著(p<0.01)，发情前期，发情后期、间情期之间LHR表达量差异不显著(P>0.05)。 3.济宁青山羊卵巢中LHR阳性物质主要见于颗粒细胞、膜细胞、卵母细胞以及卵泡血管周围间质。结果显示发情周期中LHR阳性细胞数量均随着卵泡发育水平而增加。其中发情期阳性细胞最多，发情后期其次，发情前期再次，间情期最少。 4.间情期，发情前期，发情期，发情后期卵巢总LHR阳性细胞数目的比值分别为(35±4.04)：(211±6.56)：(60±4.58)：(26±6.00)。发情周期四个阶段均为阳性细胞数目随着卵泡的发育和卵泡体积的增大而增多。其中发情期卵泡阳性细胞数目与其他三个阶段差异显著(P<0.05)，发情后期与发情期前期和间情期之间差异显著(P<0.05)，而发情前期和间情期之间差异不显著(P>0.05)。收起

关键词 : 山羊发情周期卵巢 LHR表达量

10. 胃癌中piR-9994、piR-30715的表达意义及其与PIWIL4的相关性

[学位论文] 夏言福建医科大学 2019年硕士导师: 郑雄伟;林贤东;胡丹共48页

摘要 : 目的： piRNA（Piwi-interactingRNA）是一种特异性表达的内源性小分子非编码RNA，主要表达于生殖细胞中，通常与PIWI蛋白结合而发挥生物学作用。近年来在越来越多的肿瘤细胞中发现piRNA有异常表达，而胃癌中piRNA的表达情况及其与PIWI蛋白相关性... 展开目的： piRNA（Piwi-interactingRNA）是一种特异性表达的内源性小分子非编码RNA，主要表达于生殖细胞中，通常与PIWI蛋白结合而发挥生物学作用。近年来在越来越多的肿瘤细胞中发现piRNA有异常表达，而胃癌中piRNA的表达情况及其与PIWI蛋白相关性的报道则比较少，本研究旨在筛选出在胃癌（GastricCancer，GC）组织及癌旁组织中差异性表达的piRNA，分析其表达特点及其与胃癌患者临床病理特征的关系，探寻piRNA与PIWIL4（Piwi-Like4）表达的相关性及其在胃癌患者预后中的作用，揭示其在胃癌临床诊治过程中的潜在价值。方法： 1.收集2014年～2015年福建省某三甲医院进行外科手术的50例胃癌患者的胃癌组织和癌旁组织，并对患者预后进行随访。 2.提取新鲜胃癌及癌旁组织中总RNA，利用人piRNA芯片（HumanpiRNAchip）筛选出差异性差异性表达的piRNAs。 3.应用即时荧光定量PCR（Realtimequantitativepolymerasechainreaction，RT-qPCR）的方法检测相关piRNA在胃癌及癌旁组织中的差异性表达，并分析其与肿瘤大小，部位，分型，浸润深度，TNM分期，神经血管侵犯和淋巴结转移等临床病理特征的相关性。 4.选取对应胃癌及癌旁组织制作石蜡组织芯片（TissueMiroarray，TMA），利用免疫组织化学（Immunohistochemistry，IHC）的方法分别检测PIWIL4在胃癌、癌旁中的表达情况。 5.结合胃癌患者随访信息，分析piRNA及PIWIL4与患者术后总体生存率（Overallsurvival，OS）的相关系，探寻piRNA及PIWIL4在胃癌患者预后中的作用。结果： 1.通过人piRNA芯片共鉴定出了50个在胃癌、癌旁组织中有差异性表达的piRNAs，其中17个在胃癌组织中高表达，33个低表达，进一步通过预实验筛选出2个与胃癌密切相关的piRNAs，即piR-hsa-9994与piR-hsa-30715。 2.piR-9994与piR-30715在胃癌组织中的表达量均显著高于癌旁组织（均P＜0.01）。 3.当胃癌侵袭深度为T3和T4时，piR-9994的表达水平显著高于T1和T2（P=0.023），是前者的4倍；按TNM分期，Ⅲ、Ⅳ期的表达量显著高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌（P=0.001），上升4.6倍；淋巴结转移组的表达量是未转移组3倍(P=0.045)。 4.当胃癌浸润深度为T3和T4时，piR-30715的表达量显著高于T1和T2（P=0.034），上升4.4倍；按TNM分期，Ⅲ、Ⅳ期的表达量显著高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌（P＜0.001），提升6.2倍；淋巴结转移组的表达量是未转移组5.1倍(P=0.017)。 5.PIWIL4在胃癌组织中的表达率为46%（23/50），显著高于癌旁组织中的14%（7/50），两者差异有统计学意义（x2=12.190，P＜0.001）。 6.胃癌组织中piR-9994表达与PIWIL4表达呈正相关（r=0.318，P=0.024）；胃癌中piR-30715的表达和PIWIL4的表达呈正相关（r=0.333，P=0.018）。 7.piR-3071高表达组总体生存率（OS）比低表达组差（P=0.024），PIWIL4阳性表达组总体生存率比阴性组差（P=0.025）；PIWIL4是胃癌预后独立的不良因素。结论： 1.piR-9994在胃癌组织中过表达并与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移密切相关，piR-9994可能通过调节PIWIL4表达来参与胃癌的发生、发展，piR-9994可能成为诊断胃癌和确定胃癌恶性程度的分子标记物。 2.piR-30715在胃癌组织中过表达并与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移及胃癌患者预后密切相关，piR-9994可能通过调节PIWIL4表达来参与胃癌的发生、发展与转移，piR-30715可能成为诊断胃癌、确定胃癌恶性程度及预后判断的分子标记物。收起

关键词 : 胃癌 piR-9994 表达量 piR-30715 PIWIL4