中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 杨朝晖山西医科大学 1999年硕士导师: 卢汉生共21页

摘要 : 目的:通过动物实验观察同种骨掺入新鲜自体松质骨颗粒修复在段骨缺损,为其在临床应用提供实验依据和理论基础.结论:1.少量新鲜自体松质骨微粒含有洛性细胞和多种骨活化因子,对骨的以及骨缺损的修复有明显促进作用;2.经化学、物理方法处理后的同种骨有... 展开

关键词 : 自体松质骨同种骨大段骨缺损

2. 应用Ilizarov技术治疗下肢大段骨缺损

[学位论文] 孙雪松延边大学 2009年硕士导师: 吴其常共46页

摘要 : 目的：总结应用llizarov技术治疗下肢大段骨缺损的临床体会，探讨不同病例的术式选择。方法：l6例下肢大段骨缺损，平均8.5 cm，其中股骨3例；胫骨l3例；创伤12例，均伴有不同程度的骨感染和(或)软组织缺损，骨肿瘤切除4例。分别采用肢体短缩加... 展开

关键词 : 下肢大段骨缺损 llizarov技术临床疗效

3. Ⅰ期应用Masquelet技术治疗开放性下肢骨折致急性大段骨缺损的临床研究

[学位论文] 傅献勇杭州师范大学 2021年硕士导师: 曾云记共46页

摘要 : 目的：探讨Ⅰ期应用Masquelet技术治疗开放性下肢骨折所致急性大段骨缺损的临床疗效分析。方法：回顾性分析2018年6月至2020年6月收治的开放下肢骨折所致急性大段骨缺损并接受Ⅰ期Masquelet技术治疗患者的病例资料共12例作为研究组，其中男8人，... 展开目的：探讨Ⅰ期应用Masquelet技术治疗开放性下肢骨折所致急性大段骨缺损的临床疗效分析。方法：回顾性分析2018年6月至2020年6月收治的开放下肢骨折所致急性大段骨缺损并接受Ⅰ期Masquelet技术治疗患者的病例资料共12例作为研究组，其中男8人，女4人，年龄24～54岁，骨缺损长度4.2cm～10.2cm，平均（6.35±1.72）cm，所有患者均于急诊行彻底清创治疗，确定骨缺损范围后急诊Ⅰ期予以Masquelet技术第一阶段抗生素骨水泥置入填充死腔治疗，并用外固定行临时固定，最后行VSD创面负压引流。8～12周后行第二阶段手术，取出骨水泥并自体松质骨植骨后用钢板内固定。同时另取2014年1月至2018年1月收治的开放下肢骨折所致急性骨缺损采用外固定架联合自体松质骨植骨治疗15例患者的病例资料作为对照组进行回顾性分析，其中男9例，女6例，年龄26～56岁，清创后骨缺损长度为4.0cm～11.3cm，平均（6.53±1.94）cm，对照组患者均采用Ⅰ期早期清创、外固定架固定、创面VSD负压封闭吸引及自体松质骨植骨等治疗。两组患者年龄大小、骨缺损长度及病情严重程度无统计学差异。通过随访比较两组患者创面及骨折愈合情况和术后并发症发生率等数据，末次随访采用Paley评分及Johner-Wruhs评分进行骨愈合与预后疗效评价，评估此次改良治疗方案的可行性。结果：两组患者创面愈合情况对比：研究组12例患者中10例Ⅰ期术后创面甲级愈合，2例患者出现浅表皮肤感染，经多次更换VSD负压吸引及换药后达到痊愈；对照组15例患者中Ⅰ期急诊清创术后9例甲级愈合，5例浅表皮肤感染坏死，经多次更换VSD及换药后达到痊愈，1例患者发生深部组织感染伴骨不愈，改行环形支架牵张成骨技术后获得痊愈。研究组创面感染率低于对照组，创面愈合率优于对照组。两组患者骨折愈合情况及患肢预后功能对比：两组所有27例患者均获得随访。研究组随访时间14～32个月，平均（19.92±5.33）个月，12例患者经Ⅱ期植骨重建术后，骨缺损均获得愈合，骨折愈合时间为22～45周，平均（30.42±7.13）周，骨折愈合Paley评分10例为优，2例为良，预后疗效Johner-Wruhs评分8例为优，3例良,1例尚好。对照组随访时间16～36个月，平均（22.20±5.74）个月，15例患者中植骨重建后3例出现骨折不愈合，再次植骨手术后骨缺损获得愈合，1例出现骨不愈合并深部感染，后改行Ilizarov技术后获得痊愈，愈合时间30～110周，平均愈合时间（48.80±17.74）周，Paley评分8例为优，5例良，1例可，1例差，Johner-Wruhs评分7例为优，4例良,3例尚好,1例差。研究组和对照组在骨折愈合时间、并发症发生率、骨折愈合Paley评分及预后疗效Johner-Wruhs评分标准方面均存在显著性差异（P＜0.05）。结论：Ⅰ期应用Masquelet技术可以有效解决开放性下肢骨折急诊清创手术遇见存在较大急性骨缺损的难题，有着并发症少，治疗周期短，骨折愈合率高，愈合时间短，对患者生活影响小及患肢功能恢复良好等优点，是开放下肢骨折伴急性大段骨缺损的有效治疗方法，值得临床尝试应用。收起

关键词 : 急性大段骨缺损开放下肢骨折 Masquelet技术骨缺损

4. 复合异种骨管结合钢板固定修复大段骨缺损的实验研究

[学位论文] 胡前芹福建医科大学 2010年硕士导师: 丁真奇共45页

摘要 : 目的：研究髓腔内复合自体松质骨的复合异种骨管结合钢板固定修复大段骨缺损的效果。方法：采用健康成年山羊24只，随机分成两组，建立胫骨干大段骨缺损模型：实验组行髓腔内复合自体松质骨的异种皮质骨管移植并行钢板固定，对照组行单纯异种皮... 展开

关键词 : 大段骨缺损复合异种骨管钢板髓内钉

5. Masquelet技术治疗长骨慢性骨髓炎骨缺损的临床疗效分析

[学位论文] 李明青海大学 2019年硕士导师: 李钊伟共42页

摘要 : 目的：评估应用Masquelet技术治疗慢性骨髓炎长骨骨缺损的临床疗效。方法：我科采用了Masquelet技术来治疗长骨慢性骨髓炎所引起的节段性骨缺损，我们对2016年9月至2018年12月期间在我科住院治疗的慢性骨髓炎患者进行了筛选，符合本组研究对象的... 展开

关键词 : 慢性骨髓炎大段骨缺损 Masquelet技术临床疗效

6. 硅橡胶密闭通道诱导修复兔长管骨大段骨缺损:一种新的骨诱导方法

[学位论文] 谷峰吉林大学 2022年博士导师: 于铁成共140页

摘要 : 研究背景：因严重创伤、骨肿瘤切除和骨髓炎清创术后出现的长管骨大段骨缺损一直以来是骨科领域治疗的难点。长管骨大段骨缺损导致的骨不连和其他并发症往往会造成肢体残疾等严重后果，给患者造成巨大的痛苦和沉重的经济负担。目前临床治疗长管... 展开研究背景：因严重创伤、骨肿瘤切除和骨髓炎清创术后出现的长管骨大段骨缺损一直以来是骨科领域治疗的难点。长管骨大段骨缺损导致的骨不连和其他并发症往往会造成肢体残疾等严重后果，给患者造成巨大的痛苦和沉重的经济负担。目前临床治疗长管骨大段骨缺损的手段中，自体骨移植仍是金标准。但在骨缺损范围较大的情况时，由于自体骨的来源有限，往往难以获得足够的移植骨，而且大量的自体取骨常会出现许多并发症，包括神经和血管损伤、感染、供骨区慢性疼痛等等。除了自体骨移植，一些其他手段也被应用于长管骨大段骨缺损的修复和治疗，包括Ilizarov技术、Masquelet技术和骨组织工程等方式。不过目前以上几种方式都存在一定的不足，Ilizarov技术需要较为复杂的外固定器械，且在牵张成骨过程中因软组织局部的压力，往往造成患者肢体的持续疼痛，并且伴随着力线偏移、针道感染和神经损伤的风险。Masquelet技术在其治疗的第一阶段通过植入PMMA形成诱导膜，在治疗的第二阶段仍然依赖于自体骨移植。另外Masquelet技术治疗周期漫长，也增加了治疗过程中的不确定性。骨组织工程技术是近年来研究的热点之一，骨组织工程所需的最主要三种生物学要素包括种子细胞、细胞外基质支架和促进生长、分化和血管生成的细胞因子。尽管发展迅速，但目前为止尚无一种最佳材料可以完全解决长管骨大段骨缺损的治疗问题。骨折愈合是一个复杂的生物学过程，其中包含诸多成骨要素，其中任何一个环节受到损害，都有可能使骨折愈合过程受阻，并最终形成骨不连。长管骨大段骨缺损由于局部缺乏骨质和血运，如果在一期治疗无法形成骨愈合，多导致形成萎缩性骨不连。所以长管骨大段骨缺损的治疗，需尽可能使其在一期实现骨愈合，避免骨不连的发生，减少患者痛苦，并提高患者的生活质量和肢体功能。Masquelet技术的膜诱导成骨机制激发了本课题组的的浓厚兴趣，本课题尝试基于这项技术的基本原理和操作，在此基础上进行进一步的探索和改进，以获得一种更为优良的骨诱导技术。同时，探究是否能够不依靠骨移植和种子细胞，单纯使用一种新型的诱导技术来修复长管骨大段骨缺损。目前硅橡胶材料已经广泛应用于生物医学相关领域，包括乳房假体、医用导管和口腔医学等领域，显示出良好的安全性。在周围神经再生研究中，一些研究者使用硅橡胶管套接，用于诱导神经再生，并且得到了良好的效果。但硅橡胶材料用于诱导治疗长管骨大段骨缺损目前尚无文献报道。本课题组基于Masquelet技术的原理和硅橡胶管诱导神经纤维再生的启发，开发了一种全新的骨诱导方法，尝试使用硅橡胶密闭通道，用于诱导修复长管骨大段骨缺损，并设计了相关的体内和体外实验。研究目的：本课题拟通过体内和体外实验，证明硅橡胶密闭通道诱导修复兔长管骨大段骨缺损的有效性，并对其成骨过程和机制进行探究。研究方法： 1.分离、培养SD大鼠BMMSCs，并对提取细胞进行鉴定。 2.设计体外实验，利用提取的BMMSCs，验证硅橡胶材料的生物相容性和长期植入体内的可行性。 3.设计体内实验，建立兔桡骨大段骨缺损模型，手术植入硅橡胶密闭通道进行诱导。在术后1天、3天、7天、14天、4周、8周、12周和16周八个时间点进行取材，探究硅橡胶密闭通道诱导修复长管骨大段骨缺损的有效性。并通过X线、MicroCT、骨组织荧光标记和病理染色等方式，进一步阐释硅橡胶密闭通道诱导成骨的过程。研究结果： 1.本课题成功提取了SD大鼠的BMMSCs，并以此为基础通过体外实验证明，医用硅橡胶材料在细胞毒性、溶血反应、细胞粘附性和对骨髓间充质干细胞的成骨能力影响等方面，均符合植入标准，作为一种植入体内的成骨诱导材料具有可行性。 2.本课题通过体内实验证明了，硅橡胶密闭通道可以诱导兔长管骨大段骨缺损的修复和再生，这一过程是一个软骨内成骨的过程。诱导成骨的初始阶段，密闭硅橡胶通道内形成血肿组织，并形成骨缺损断端的桥接。新生血肿组织中富含成骨相关蛋白、成血管相关蛋白和TGF-β1等因子。随后血肿组织逐渐出现血管化和软骨内成骨，最终软骨组织被成熟骨组织替代完成骨愈合，新生骨组织具有良好的血运。这种诱导方式依赖于硅橡胶通道完整密闭的环境。结论：本实验通过体外和体内实验证明，医用硅橡胶材料具有良好的生物相容性，硅橡胶密闭通道可以诱导修复兔长管骨大段骨缺损，实现骨再生。在本实验中这一过程不依赖植骨，并可以实现骨愈合。硅橡胶通道诱导成骨的过程是一个软骨内成骨过程，早期形成的血肿组织富含成骨和成血管相关蛋白，并逐渐发生血管化和软骨内成骨反应，最终实现骨的再生。在这一诱导过程中，成功的关键因素在于硅橡胶通道的完整密闭环境。这种新的骨诱导方法，为未来临床治疗长管骨大段骨缺损提供了新的思路。本研究创新点: 1.本研究首次提出了“硅橡胶密闭通道诱导修复长管骨大段骨缺损”的方法。用密闭硅橡胶通道连接骨缺损的两端，在局部创造密闭环境，避免了纤维组织长入干扰骨组织的再生，有效避免了骨不连的发生。实验结果显示硅橡胶材料本身不能直接诱导BMMSCs成骨矿化，这进一步说明：诱导成骨关键因素是通道的密闭环境，而不是材料直接诱导成骨。 2.本实验使用的骨诱导方法和以往的Masquelet技术相比，最主要的优势在于治疗过程不需要植骨。本实验不同于骨组织工程技术，不使用种子细胞和复杂的合成材料，目的是提出一种全新的骨诱导方法和成骨理念。 3.本实验中使用的骨缺损模型，缺损长度超过4.5倍骨直径，在同类实验中属于较长节段，这说明本诱导方式具有良好的诱导成骨效果。研究结果揭示了“硅橡胶密闭通道诱导修复长管骨大段骨缺损”的发生机制是一个软骨内成骨的过程。密闭通道内早期形成血肿组织，并在骨缺损两端形成桥接，新生血肿组织中富含成骨相关蛋白、成血管相关蛋白和TGF-β1等因子，可有效诱导成骨。这种诱导方式依赖于硅橡胶通道完整密闭的环境。收起

关键词 : 大段骨缺损诱导成骨硅橡胶成骨分化骨再生

7. 诱导膜促进干细胞迁移对移植骨血管化及成骨的影响和机制研究

[学位论文] 张荣峰陆军军医大学 2020年博士导师: 谢肇共118页

摘要 : 背景及目的：本研究首先通过构建大鼠诱导膜骨缺损模型，结合人工材料植入，研究诱导膜对植入材料成骨基因表达的调节作用，以探讨未来应用人工材料结合膜诱导技术修复骨缺损的可能性。其次，骨替代物临床应用面临的难点，最主要的是移植... 展开背景及目的：本研究首先通过构建大鼠诱导膜骨缺损模型，结合人工材料植入，研究诱导膜对植入材料成骨基因表达的调节作用，以探讨未来应用人工材料结合膜诱导技术修复骨缺损的可能性。其次，骨替代物临床应用面临的难点，最主要的是移植后不能快速建立血运，不能提供营养成分和排出代谢产物，影响了宿主具有成骨作用的干细胞的募集，因此，如何尽快重建局部的血运，这是骨替代物能够顺利骨重建的基础。EPCs具有维持血管内环境稳定的重要生理作用，并在骨缺损部位调节血管新生，促进血管生成，提高人工骨移植的成活率。因此，研究了骨保护素（OPG）改善骨缺损部位EPCs的活性、增强EPCs的迁移功能、促进EPCs形成新生血管的作用，为人工骨的顺利血管化和成骨提供了新思路。另外，成骨细胞在移植骨的新骨形成方面发挥重要作用。目前已经发现在骨的生物学领域，一些LncRNA可通过多种机制调控骨组织的细胞功能，参与骨骼疾病的某些病理过程。截至目前，关于LncRNA在骨形成和重建中作用的研究，主要集中在BMSC和成骨细胞上。因此，又通过干预LncRNA UCA1(尿上皮癌相关1)，研究其对成骨细胞的增殖和成骨相关基因表达的影响，研究其在骨缺损修复中的作用和可能的调节机制，为创造诱导膜内骨替代物移植后的成骨微环境和防止骨吸收，提供新手段。方法： 1、诱导膜技术结合不同生物材料促进成骨基因表达的研究制作生物材料双相磷酸钙（BCP）、氧化海藻酸钠-海藻酸钠（OSA-SA）、氧化海藻酸钠-海藻酸钠-羟基磷灰石（OSA-SA-HA）支架。构建大鼠诱导膜模型，HE和Masson染色观察诱导膜形成情况。诱导膜下股骨钻孔，分别植入BCP、OSA-SA、OSA-SA-HA支架材料，术后1、6、9周取材，RT-PCR检测Runt相关转录因子2（Runx2）、骨形态蛋白-2（BMP-2）、胶原1（Col-I）、碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OCN）成骨基因表达情况，了解诱导膜对生物材料的成骨作用，Western blotting检测第1周p-ERK和ERK的表达，并对p-ERK/ERK的结果进行定量分析，了解诱导膜发挥成骨作用的机制。 2、诱导膜技术中促进移植骨的血管化机制研究体外培养人外周血EPCs，OPG和CXCR4受体阻滞剂(AMD3100)和PI3K受体阻滞剂(Ly294002)预处理后，使用细胞划痕试验和Transwell试验，评估了OPG对EPCs迁移的影响，通过Western blot检测CXCR4及下游p-AKT蛋白表达，研究OPG调节EPCs的作用机制。通过制作大鼠诱导膜合并骨缺损模型，植入骨替代物BCP，并给予OPG处理4周后，通过Micro-CT及HE和Masson染色对骨缺损修复情况进行评估。然后，免疫组化染色检测EPC标记物和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的表达，用免疫荧光染色对骨缺损区域血管生成进行评估。 3、诱导膜技术中促进BMSCs迁移的机制研究体外培养大鼠BMSCs，通过Transwell实验，研究SDF-1诱导BMSCs体外迁移的最佳作用浓度，并研究CXCR4受体阻滞剂AMD3100对BMSCs迁移的影响。通过动物实验制作诱导膜模型，并在诱导膜形成后，进行膜内植入骨替代物BCP，DIR标记BMSCs，注射入动物模型，用活体成像技术研究诱导膜形成过程中，和诱导膜内植骨后，BMSCs在大鼠体内的示踪效应，了解BMSCs向植骨区域迁移情况，探讨BMSCs在诱导膜形成和促进成骨的可能迁移机制。 4、部分促进成骨细胞的增殖和分化机制研究收集52例住院患者和30例健康体检者血清样本，通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测LncRNA UCA1在骨质疏松患者和健康受试者中的表达水平。利用小干扰RNA(siRNA)构建稳定敲除UCA1的大鼠成骨细胞MC3T3-E1。利用细胞计数Kit-8(CCK-8)检测UCA1敲除对成骨细胞增殖的影响，利用EdU染色检测对照组和UCA1敲除组成骨细胞中EdU阳性细胞的比例。RT-PCR检测Runx2、胶原1α1(Col1α1)、OCN、OPG、骨桥蛋白(OPN)、Osterix(OSX)等差异相关基因的mRNA水平，Western blotting检测Runx2蛋白水平。此外，成骨细胞在培养基中培养21天，然后通过茜素红染色(alizarin red staining)和碱性磷酸酶染色(alkaline phosphatase staining，ALP)检测其成骨分化情况。最后，利用Western blotting分析骨形态发生蛋白2(BMP-2)/(Smad1/5/8)信号通路的表达，了解LncRNA UCA1敲除后促进成骨细胞增殖和分化的作用机制。结果： 1、诱导膜动物模型构建后，诱导膜内植入不同材料，RT-PCR检测不同时间段成骨基因的表达，结果显示，BCP组在第1周的Runx2表达量提高明显，而第1周时OSA-SA-HA组的BMP-2具有最高表达量。在COL-I表达方面，BCP组的表达量在三个时间节点均最高；在ALP表达方面，在第6周，BCP组与OSA-SA组均达到最高值；在第9周，三组的ALP表达量均高于Blank组，OSA-SA组最高；在OCN的表达量方面，BCP组第6周达到最大值。说明在诱导膜存在的条件下，BCP组填充支架显示出更好的骨诱导活性，能够在各成骨时序点上明显的上调Runx2，Col-I，ALP和OCN的表达量。在诱导膜技术修复骨缺损时，ERK1/2信号通路也能够良好发挥调控成骨相关基因表达的作用，从而促进骨重建。 2、在细胞划痕实验和迁移实验中，各组间EPC水平的差异，均显示OPG处理组促进细胞迁移，AMD3100和LY294002组则抑制OPG的迁移功能。OPG处理的内皮祖细胞CXCR4和p-AKT水平升高，说明OPG通过CXCR4信号通路对EPCs发挥调节作用。构建诱导膜骨缺损模型，用OPG处理后，免疫组化、免疫荧光染色和Micro-CT提示OPG能促进大鼠骨缺损的血管生成和骨修复，AMD3100和LY294002能消除这些作用。说明在诱导膜存在情况下，OPG可以促进EPCs迁移到植骨区，并通过CXCR4通路发挥血管化的作用，促进新生血管形成和骨修复。 3、体外培养条件下，100ng/mL SDF-1浓度时，诱导BMSCs细胞迁移效应最显著，加入SDF-1抑制剂AMD3100后，迁移细胞数量明显减少，说明SDF-1通过SDF-1/CXCR4轴以浓度梯度方式诱导BMSCs迁移。构建大鼠诱导膜形成模型和诱导膜内植骨模型，DIR碘化物标记BMSCs，不同时间段进行活体成像，可见骨水泥组（诱导膜形成组）和诱导膜内植骨组BMSCs向手术区域迁移；用AMD3100处理后仅少量BMSCs细胞向手术部位聚集，说明手术部位具有较高浓度SDF-1，并且诱导BMSCs参与诱导膜形成，以及诱导膜内植骨后的成骨过程。 4、大部分骨质疏松患者血清LncRNA UCA1表达明显升高，推测UCA1可能参与了骨质疏松的发病机制，即该因子可能具有促进骨吸收、抑制新骨形成的作用。为了深入研究UCA1在成骨细胞中的作用，构建了UCA1敲减的MC3T3-E1细胞。CCK-8检测和EdU染色显示UCA1siRNA组成骨细胞的增殖活性明显高于对照组(p<0.05)，说明抑制UCA1后细胞的增殖能力显著增强。RT-PCR实验表明，UCA1siRNA组Runx2、Collagen1a1、OC、OPG、OPN、OSX在mRNA水平高于对照组(p<0.05)，说明UCA1siRNA组细胞成骨分化能力明显增强，ALP染色和茜红素染色也证实UCA1siRNA组细胞成骨分化能力增强。此外，通过Western blotting检测各组BMP-2、磷酸化Smad1/5/8和总Smad1/5/8蛋白表达水平，显示UCA1敲除后成骨细胞中BMP-2/(Smad1/5/8)信号通路显著激活。结论： 1、在诱导膜存在的条件下，BCP组填充支架显示出更好的骨诱导活性，能够在各成骨时序点上明显的上调Runx2，Col-I，ALP和OCN的表达量。说明诱导膜结合生物材料，可以起到促进成骨的作用，有望在未来替代自体骨移植。 2、在诱导膜结合BCP存在情况下，OPG通过CXCR4信号通路，可以诱导EPCs细胞迁移到骨缺损区域，促进新生血管生成，实现移植骨的血管化，从而有助于新骨形成，增强移植骨的重建能力。 3、体外实验表明SDF-1可以通过SDF-1/CXCR4轴诱导BMSCs迁移。动物活体成像实验发现BMSCs可以大量迁移到手术区域，说明手术区域有大量SDF-1因子，BMSCs被SDF-1募集到手术区域，参与了诱导膜的形成，以及诱导膜内植骨的骨重建过程。 4、针对诱导膜内植入骨替代物后成骨不良的情况，可以通过激活成骨细胞中BMP-2/(Smad1/5/8)信号通路，敲减LncRNA UCA1促进成骨细胞的增殖，促进成骨相关基因的表达。因此，UCA1有望成为骨移植后促进新骨形成、抑制骨吸收新的治疗靶点。收起

关键词 : 大段骨缺损组织修复诱导膜干细胞迁移

8. Masquelet技术中诱导膜不同位置成骨活性差异的相关研究

[学位论文] 高凡冬苏州大学 2022年硕士导师: 芮永军共62页

摘要 : 目的: 通过研究诱导膜不同位置的成骨活性，验证“诱导膜不均匀性”这一假设，同时解释骨移植物不均匀生长这一临床现象，为进一步优化Masquelet技术提供实验依据。指导临床进行早期干预，避免因移植物不均匀生长而造成的患肢术后再骨折的发生。... 展开目的: 通过研究诱导膜不同位置的成骨活性，验证“诱导膜不均匀性”这一假设，同时解释骨移植物不均匀生长这一临床现象，为进一步优化Masquelet技术提供实验依据。指导临床进行早期干预，避免因移植物不均匀生长而造成的患肢术后再骨折的发生。方法: 实验大鼠按照随机数字表法随机分为术后2周、4周、6周、8周组，每组24只，共96只。克氏针联合骨水泥制备大鼠右后肢股骨干10毫米全段骨缺损模型，并在对应的周龄收取相应组别大鼠的诱导膜标本，将获取的诱导膜标本根据不同位置进行划分。对不同位置的诱导膜标本进行实验室检测，通过检测指标比较诱导膜不同位置成骨活性的差异。结果: (1)通过组织学染色可得知诱导膜早期血管口径较小，管壁较薄，仅由几个细胞组成，分布较稀疏;随时间的延长，血管管壁逐渐增厚，口径变大，分布较前明显密集。同时期的不同位置相比，骨缺损近端处血管分布更密集，成熟度更高。股骨纵轴同一侧的血管数量，因位置不同也存在差异。同处于股骨纵轴上方的近、远端，差异在术后6周时最明显，8周时两者差异减小，差异具有统计学意义(P＜0.05);股骨纵轴下方近、远端之间的差异在检测时间内一直较明显，差异具有统计学意义(P＜0.05)。综合来看，骨缺损近端、下方的血管数量和成熟度要高于其他位置; (2)三种检测方式检测的生长因子表达量显示:骨缺损近端、下方的骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及血管生长因子(VEGF)的表达量几乎都高于同时期的其他位置。与同处于股骨横轴一侧的上方相比，骨缺损近端、下方的BMP-2表达量一直较高，差异具有统计学意义(P＜0.05)，从TGF-β1和VEGF的表达量来看，两者之间的差异主要集中在中、晚期(术后6,8周)，差异具有统计学意义(P＜0.05)，早期表达量未见明显差异:位于股骨横轴另一侧的上、下方的生长因子表达量也存在不同，骨缺损远端、下方的BMP-2表达量在早、中期(术后4,6周)明显高于远端、上方，差异具有统计学意义(P＜0.05)，而晚期两者差异不大。对于TGF-β1的表达量，两处的差异只存在于早期(术后2周)，而VEGF的表达量差异出现在晚期(术后8周)，差异并不明显。结论: 骨缺损处诱导膜近端血管数量和成熟度较远端高，下方生长因子表达量较上方高，其中骨缺损近端、下方的诱导膜活性最高，即诱导膜活性存在不均匀性。收起

关键词 : Masquelet技术诱导膜大段骨缺损骨重建骨活性差异

9. FTY720-P联合同种异体骨移植修复兔桡骨大段骨缺损的实验研究

[学位论文] 邓子文广东医科大学 2018年硕士导师: 黄东共48页

摘要 : 【目的】： 1. 观察经一定浓度FTY720-P溶液浸泡后的同种异体骨移植修复兔桡骨大段骨缺损的修复效果，并评估此种联合方式的有效性和可行性。 2. 初步探讨FTY720-P在同种异体骨移植修复骨缺损中可能的治疗机制。【方法】： 1. 同... 展开【目的】： 1. 观察经一定浓度FTY720-P溶液浸泡后的同种异体骨移植修复兔桡骨大段骨缺损的修复效果，并评估此种联合方式的有效性和可行性。 2. 初步探讨FTY720-P在同种异体骨移植修复骨缺损中可能的治疗机制。【方法】： 1. 同种异体骨的制备：解剖完整取出新西兰大白兔四肢长骨，脱蛋白脱脂脱钙后以25kGy 60Co辐照灭菌，并采用逐渐降温的方法逐步降温，最后将同种异体骨放入-80℃深低温冰箱中保存。 2. 建模及分组：选用成年新西兰大白兔36只，雄性，体重2~3kg，建立右侧桡骨中段15mm骨缺损，然后将动物随机分组，随机抽取12只动物为FTY720-P联合同种异体骨治疗组，12只为单纯同种异体骨移植治疗组，剩余12只动物为单纯自体骨移植治疗组。 3. 影像检查及Lane-Sandhu影像学评分：分别在术后第4周，第8周，第12周各组随机抽取6只动物经耳缘静脉注射2%戊巴比妥麻醉后进行X线摄片检查，随后与实验室人员一同进行Lanne-Sandhu评分，并记录结果。 4. 组织学检查及免疫组化检测：分别在术后第4周、第8周、第12周各组随机抽取3只动物经空气法处死后，完整取出右前肢桡骨，脱钙满意后行常规HE染色，光镜下观察标本HE染色情况。随后标本处理后行免疫组化检测，观察内源性BMP-2表达情况，并随机选取3个400倍放大视野使用Image-Pro Plus 6.0软件进行平均光密度值半定量分析。 5. 生物力学检测：术后12周各组剩余的6只动物空气法处死，人工弯曲后无断裂及明显弯曲的桡骨样本进一步行三点弯曲试验，记录最大弯曲强度。对侧正常桡骨同时进行三点弯曲试验以获得标准值。【结果】： 1. 影像学检查及Lane-Sandhu影响学评分：术后第4周，实验组移植骨与宿主骨交界处近端观察到骨痂形成。第8周，实验组移植骨与宿主骨交界处近远端均观察到骨痂形成，且骨痂形成的量大于单纯同种异体骨移植对照组及自体骨移植对组。第12周，实验组及自体骨移植对照组移植骨与宿主骨完全融合。在骨移植后第4、8、12周实验组、自体骨移植对照组Lane-Sandhu评分均高于单纯同种异体骨移植对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；实验组与自体骨移植对照组术后各时间点Lane-Sandhu评分两两比较无统计学意义（P＞0.05）。 2. 组织学观察：术后4周，实验组桡骨断端及移植骨周围见少量炎细胞，大量骨痂形成；单纯同种异体骨移植对照组桡骨断端周围较多炎细胞聚集及大量纤维组织增生；自体骨移植对照组桡骨断端及移植骨周围见大量骨性骨痂，植入体内可见少量血管。术后8周，实验组桡骨断端见大量编织骨，移植骨内见少量血管生成，骨髓腔内形成骨小梁、可见少量骨髓；单纯同种异体骨移植对照组移植骨与周围编织骨部分融合，融合部位植入体内可见极少量小血管；自体骨移植对照组桡骨断端形成大量板层骨，与移植骨融合，骨髓腔再通。术后12周，实验组桡骨断端可见大量板层骨生成，移植骨与新生的板层骨融合；单纯同种异体骨移植对照组移植骨与新生骨组织基本融合，周围见少量板层骨；自体骨移植对照组移植骨骨皮质重塑，但较正常骨皮质薄。 3. BMP-2免疫组织化学染色：术后4周、8周、12周各组中BMP-2均可见阳性表达，主要表达于新生成骨质的骨陷窝、新生骨附近成骨细胞胞浆以及纤维性骨痂基质内。术后4、8、12周各组平均光密度值无明显差异（P＞0.05）。 4. 生物力学检测：三点弯曲试验显示实验组修复后的桡骨最大弯曲强度大于单纯同种异体骨移植对照组（P＜0.05），但与自体骨移植对照组比较最大弯曲强度无明显差异（P＞0.05）。【结论】： 1. 通过浸泡的方式将FTY720-P联合同种异体骨修复大段骨缺损可促进移植骨与宿主骨的融合，增强移植骨力学强度，达到与自体骨修复相当的效果，方法可行有效。 2. FTY720-P可能通过促进局部血管生成、抑制局部炎症反应来促进同种异体骨与宿主骨的融合。收起

关键词 : FTY720-P溶液同种异体骨大段骨缺损修复重建

10. 骨搬运技术结合桃红四物汤治疗胫骨大段骨缺损的临床疗效研究

[学位论文] 纪文强山东中医药大学 2017年硕士导师: 韩铭共47页

摘要 : 目的：胫骨大段骨缺损一直是临床工作中面临的一大难题，而骨搬运技术为这一难题的解决打开了前景，但随着此技术的运用，其术后并发症多、治疗过程漫长等问题不断被发现。如何减少术后并发症的发生以及促进搬运区骨的生长、矿化等问题一直受到国内外... 展开目的：胫骨大段骨缺损一直是临床工作中面临的一大难题，而骨搬运技术为这一难题的解决打开了前景，但随着此技术的运用，其术后并发症多、治疗过程漫长等问题不断被发现。如何减少术后并发症的发生以及促进搬运区骨的生长、矿化等问题一直受到国内外学者的关注。本课题通过研究骨搬运术结合中药桃红四物汤治疗胫骨大段骨缺损的临床疗效，进一步观察骨搬运技术对胫骨大段骨缺损的治疗效果的同时，探讨桃红四物汤对骨搬运过程的影响，旨在寻找一种可行的中西医方法，能尽量减少骨搬运术后并发症，促进骨搬运过程中骨的愈合，提高治疗质量。方法：回顾性研究山东中医药大学第一附属医院骨科2014年2月到2016年10月收治的28例应用骨搬运技术治疗胫骨大段骨缺损缺损范围在6～15cm内的病例进行研究，并按患者意愿选择服用中药与否分为两组。其中，14例服用，设为中药组，余14例未服用，为对照组，中药为桃红四物汤。28例病例根据术前X线、CT测量骨缺损均在6～15cm范围。所有患者入院后根据情况积极清创、抗感染等处理，待炎症等情况稳定后均采用Ilizarov环形外固定架行骨搬运术。术后，对照组给予抗感染、抗凝血、抗血管痉挛治疗，创口常规换药，定期复查X片，指导功能锻炼；中药组在对照组治疗基础上加服桃红四物汤，每日1次，连续6个周。观察并记录骨搬运治疗过程中牵拉痛等主要并发症出现情况，测量计算骨搬运开始后第4、8、12周牵拉区骨痂直径率（callusdiameterratios，CDR）。当X线片可见截骨牵开区域较浓密云雾状骨痂、CDR值＞85%或X线片判断正位和侧位4个皮质中至少有3个位置矿化完全时去除外固定架。最后，观察两组患者主要并发症情况，收集搬运过程中第4、8、12周CDR值及搬运结束后拆除外固定支架所需的时间等数据。最后，对收集的资料、数据进行统计及比较分析。结果：所有患者均获6～24个月随访。28例患者最终都获得临床愈合并拆除外固定架，其中19例骨段会师后3个月内直接愈合。骨搬运外固定架拆除所需时间比较，中药组与对照组平均天数分别是（193.14±44.54）天、（227.71±39.29）天，差异具有统计学意义（P＝0.038，P＜0.05）。测量计算的第4、8、12周中药组牵拉区骨痂直径率（CDR）的平均值均高于对照组,且统计学上有差异（P＜0.05）。主要并发症：28例病例中有15例出现牵拉痛（中药组4例，对照组11例），予停止搬移2天后症状缓解，继续搬移未出现麻痛症状；10例钉道感染（中药组2例，对照组8例），术后经局部换药得到控制；会师端不愈合9例（中药组4例，对照组5例），其中5例经断端加压后愈合良好，4例行切开骨端修整加压固定后愈合。根据统计学分析，中药组牵拉痛、针道感染并发症的出现例数少于对照组，有明显差异（P＜0.05），两组会师端不愈合出现例数无明显差异（P＞0.05）。结论：从此次研究来看，骨搬运技术对胫骨大段骨缺损的总体治疗效果满意。桃红四物汤在骨段搬移过程中能促进牵拉区骨的生长，缩短治疗时间，且在一定程度上能减少骨搬运牵拉痛、针道感染两种主要并发症的发生，减轻患者痛苦，提高治疗质量。收起

关键词 : 胫骨大段骨缺损骨搬运技术桃红四物汤临床疗效