摘要: 【目的】： 1. 观察经一定浓度FTY720-P溶液浸泡后的同种异体骨移植修复兔桡骨大段骨缺损的修复效果，并评估此种联合方式的有效性和可行性。 2. 初步探讨FTY720-P在同种异体骨移植修复骨缺损中可能的治疗机制。 【方法】： 1. 同种异体骨... 展开 【目的】： 1. 观察经一定浓度FTY720-P溶液浸泡后的同种异体骨移植修复兔桡骨大段骨缺损的修复效果，并评估此种联合方式的有效性和可行性。 2. 初步探讨FTY720-P在同种异体骨移植修复骨缺损中可能的治疗机制。 【方法】： 1. 同种异体骨的制备：解剖完整取出新西兰大白兔四肢长骨，脱蛋白脱脂脱钙后以25kGy 60Co辐照灭菌，并采用逐渐降温的方法逐步降温，最后将同种异体骨放入-80℃深低温冰箱中保存。 2. 建模及分组：选用成年新西兰大白兔36只，雄性，体重2~3kg，建立右侧桡骨中段15mm骨缺损，然后将动物随机分组，随机抽取12只动物为FTY720-P联合同种异体骨治疗组，12只为单纯同种异体骨移植治疗组，剩余12只动物为单纯自体骨移植治疗组。 3. 影像检查及Lane-Sandhu影像学评分：分别在术后第4周，第8周，第12周各组随机抽取6只动物经耳缘静脉注射2%戊巴比妥麻醉后进行X线摄片检查，随后与实验室人员一同进行Lanne-Sandhu评分，并记录结果。 4. 组织学检查及免疫组化检测：分别在术后第4周、第8周、第12周各组随机抽取3只动物经空气法处死后，完整取出右前肢桡骨，脱钙满意后行常规HE染色，光镜下观察标本HE染色情况。随后标本处理后行免疫组化检测，观察内源性BMP-2表达情况，并随机选取3个400倍放大视野使用Image-Pro Plus 6.0软件进行平均光密度值半定量分析。 5. 生物力学检测：术后12周各组剩余的6只动物空气法处死，人工弯曲后无断裂及明显弯曲的桡骨样本进一步行三点弯曲试验，记录最大弯曲强度。对侧正常桡骨同时进行三点弯曲试验以获得标准值。 【结果】： 1. 影像学检查及Lane-Sandhu影响学评分：术后第4周，实验组移植骨与宿主骨交界处近端观察到骨痂形成。第8周，实验组移植骨与宿主骨交界处近远端均观察到骨痂形成，且骨痂形成的量大于单纯同种异体骨移植对照组及自体骨移植对组。第12周，实验组及自体骨移植对照组移植骨与宿主骨完全融合。在骨移植后第4、8、12周实验组、自体骨移植对照组Lane-Sandhu评分均高于单纯同种异体骨移植对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；实验组与自体骨移植对照组术后各时间点Lane-Sandhu评分两两比较无统计学意义（P＞0.05）。 2. 组织学观察：术后4周，实验组桡骨断端及移植骨周围见少量炎细胞，大量骨痂形成；单纯同种异体骨移植对照组桡骨断端周围较多炎细胞聚集及大量纤维组织增生；自体骨移植对照组桡骨断端及移植骨周围见大量骨性骨痂，植入体内可见少量血管。术后8周，实验组桡骨断端见大量编织骨，移植骨内见少量血管生成，骨髓腔内形成骨小梁、可见少量骨髓；单纯同种异体骨移植对照组移植骨与周围编织骨部分融合，融合部位植入体内可见极少量小血管；自体骨移植对照组桡骨断端形成大量板层骨，与移植骨融合，骨髓腔再通。术后12周，实验组桡骨断端可见大量板层骨生成，移植骨与新生的板层骨融合；单纯同种异体骨移植对照组移植骨与新生骨组织基本融合，周围见少量板层骨；自体骨移植对照组移植骨骨皮质重塑，但较正常骨皮质薄。 3. BMP-2免疫组织化学染色：术后4周、8周、12周各组中BMP-2均可见阳性表达，主要表达于新生成骨质的骨陷窝、新生骨附近成骨细胞胞浆以及纤维性骨痂基质内。术后4、8、12周各组平均光密度值无明显差异（P＞0.05）。 4. 生物力学检测：三点弯曲试验显示实验组修复后的桡骨最大弯曲强度大于单纯同种异体骨移植对照组（P＜0.05），但与自体骨移植对照组比较最大弯曲强度无明显差异（P＞0.05）。 【结论】： 1. 通过浸泡的方式将FTY720-P联合同种异体骨修复大段骨缺损可促进移植骨与宿主骨的融合，增强移植骨力学强度，达到与自体骨修复相当的效果，方法可行有效。 2. FTY720-P可能通过促进局部血管生成、抑制局部炎症反应来促进同种异体骨与宿主骨的融合。 收起