摘要: 目的:阐明活血化瘀方药调控骨髓干细胞在梗死区分化的作用机制。 方法:选取清洁级(200±10)gWistar大鼠140只,雌雄各半,采用文献公认的方法建立大鼠AMI模型,术后24h存活的大鼠随机分为:模型组、中药组、西药组、中西药组、假手术组。除假手术组外,各... 展开 目的:阐明活血化瘀方药调控骨髓干细胞在梗死区分化的作用机制。 方法:选取清洁级(200±10)gWistar大鼠140只,雌雄各半,采用文献公认的方法建立大鼠AMI模型,术后24h存活的大鼠随机分为:模型组、中药组、西药组、中西药组、假手术组。除假手术组外,各组又根据术后1d、7d、14d分为3个亚组,即:模型组(模型组1d、模型组7d、模型组14d);中药组(中药组1d、中药组7d、中药组14d);西药组(西药组1d、西药组7d、西药组14d);中西药组(中西药组1d、中西药组7d、中西药组14d);分组后立即给药,西药组皮下注射G-CSF50ug.kg-1.d-1;假手术组和模型组皮下注射生理盐水50ug.kg-1.d-1;中药组腹腔注射血塞通注射液150mg.kg-1.d-1;中西药组皮下注射G-CSF50ug.kg-1.d-1和腹腔注射血塞通注射液150mg.kg-1.d-1,其中G-CSF每天一次,连用7天,血塞通注射液每天一次,直到处死大鼠前停止,在实验结束时每亚组保证有7只存活大鼠供实验用。采用免疫组化法检测AMI边缘区C-kit十细胞和Ki-67十细胞数、AMI边缘区VEGF及bFGF蛋白表达的情况。 结果: ①AMI边缘区C-kit十细胞数的影响:C-kit十细胞的阳性染色于镜下呈黄褐色,主要表达于AMI边缘区,梗死区表达强度较低。假手术组未见C-kit十细胞表达,24h后各组在AMI边缘区可偶见C-kit十细胞表达,但不明显。7d后中西药组C-kit十细胞数较多,西医组相对较少,模型组可偶见C-kit十细胞出现;14天时各组较同组7d时明显减少,可能由于细胞分化,其表面C-kit抗原减弱所致。 ②AMI边缘区Ki-67+细胞数的影响:假手术组未见Ki-67十细胞,24h后各组在AMI边缘区偶见Ki-67十细胞,但不明显。7d后中西药组Ki-67十细胞最多,西医组较少,模型组偶见Ki-67十细胞出现;14d时各组Ki-67十细胞数较同组7d明显减少。 ③AMI边缘区VEGF、bFGF蛋白表达的影响:VEGF、bFGF的阳性染色镜下多见AMI边缘区,梗死区表达强度不显著。假手术组可见少量弱阳性表达,呈不规则黄褐色点状物;模型组明显多于假手术组,中西药组可见大量阳性表达。但VEGF、bFGF与C-kit十细胞染色结果并不完全平行,显示干细胞归巢分化机制的复杂性。 结论: 1、活血化瘀方药动员骨髓干细胞治疗心肌梗死是可行的; 2、中西药联用较单用中药、西药动员骨髓干细胞效果更明显; 3、活血化瘀方药能改善心肌血供和心肌微环境、为归巢干细胞存活、增殖、分化提供有利的特殊微环境; 收起