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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 慢性疼痛是全球重大公共卫生问题之一,常伴有不同程度的神经系统病理改变,而这些主要是由于相应基因的表达水平发生变化所致。MicroRNA(miRNA)是长为19~24个核苷酸的非编码小RNA,可调控基因的表达。它们与细胞增殖、分化、凋亡和肿瘤发生等密切相... 展开 慢性疼痛是全球重大公共卫生问题之一,常伴有不同程度的神经系统病理改变,而这些主要是由于相应基因的表达水平发生变化所致。MicroRNA(miRNA)是长为19~24个核苷酸的非编码小RNA,可调控基因的表达。它们与细胞增殖、分化、凋亡和肿瘤发生等密切相关。很多疾病的miRNA表达谱都已明确,但与慢性疼痛相关的miRNA表达谱尚未明确。 目的: 本研究首次应用miRNA芯片筛选慢性神经病理性疼痛大鼠脊髓背角差异表达的miRNA,并预测其调控的靶基因,为进一步阐明其在慢性疼痛机制中的作用打下基础,也为进一步的疼痛治疗提供可能的靶点。 方法: 雄性SD大鼠40只随机分为5组(n=8):NaIve组、Sham组、CCI组、CFA组与NS组,建立CCI(ChronicConstrictiveInjury)模型和CFA(CompleteFreudAdjuvant)模型。取腰膨大脊髓背角,运用miRNA芯片技术筛选CCI模型差异表达的miRNAs,再用miRNAs特异的引物进行荧光实时定量RT-PCR验证差异表达的miRNAs。进而用荧光实时定量RT-PCR验证CFA模型中相关miRNAs的表达水平。利用nuRNA靶基因数据库预测差异表达miRNAs可能调控的靶基因。 结果: CCI模型和CFA模型手术侧后足机械性痛阈和热痛敏阈值显著下降(P<0.05),表明两种模型均已成功建立。miRNA芯片结果显示,CCI组与Sham组及Naive组相比,表达水平上调的有nuR-99b,表达水平下调的有miR-34b、m1R-325-5p、miR-349、miR-674-3p与miR-879。荧光实时定量RT-PCR结果与miRNA芯片结果基本相符。CFA模型miR99b表达上调,nuR-674-3p表达下调。分别利用三个数据库MIRANDA、TARGETSCAN、PICTAR对miRNA的靶基因进行分析,取其交集进行综合分析。 结论: CCI神经病理性疼痛和CFA慢性炎性疼痛可导致大鼠脊髓背角miRNA的表达发生变化。这些miRNA及其调控的靶基因可能为进一步慢性疼痛的研究打下基础,并为慢性疼痛的治疗提供靶点。 收起
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