摘要: 本文以大平二号蚯蚓为原料，对其体内超氧化物歧化酶的理化性质以及提取条件进行了研究，得出以下几点结论： 1．蚯蚓在自然清水中排出体内泥砂需要24h左右，而采用5％硫酸钠和9％硫酸镁处理可使蚯蚓排砂时间分别缩短到18min和30min，提高SOD活性分... 展开 本文以大平二号蚯蚓为原料，对其体内超氧化物歧化酶的理化性质以及提取条件进行了研究，得出以下几点结论： 1．蚯蚓在自然清水中排出体内泥砂需要24h左右，而采用5％硫酸钠和9％硫酸镁处理可使蚯蚓排砂时间分别缩短到18min和30min，提高SOD活性分别为27.2％和27％。 2．在蚯蚓SOD提取过程中外加铜、锌离子可使酶活性提高。单独加铜离子时最适浓度为0.5mmol·L<'-1>，可以提高蚯蚓SOD活性17.0％；单独加锌离子处理时最适浓度为0.04mmol·L<'-1>，提高蚯蚓SOD活性为16.0％；以0.04mmol·L<'-1>锌离子浓度和0.33mmol·L<'-1>铜离子浓度配合，为提高蚯蚓SOD活性的最佳浓度配比，能提高蚯蚓SOD活性19.6％。铜、锌离子处理的SOD同工酶谱分析表明：铜、锌离子处理只提高各同工酶的活性，不影响其带数。 3．温度、pH、提取液体积对蚯蚓SOD活性均有一定的影响。蚯蚓SOD是一种热稳定性很高的酶，35～40℃表现出最高活性，50℃后酶活性降低到最高活性的62.2％；同工酶分析表明50℃后使SOD部分同工酶失活。SOD对pH值变化也是比较稳定的酶类，蚯蚓SOD的最适pH值为7.8～8.2；SOD同工酶分析表明：pH主要影响SOD同工酶的活性，只在pH9.0时有部分同工酶带的丢失。提取蚯蚓SOD的最适提取液体积为蚯蚓鲜重的4倍(ml／g)。 4．通过不同硫酸铵饱和度沉淀蚯蚓SOD研究发现：蚯蚓SOD活性主要集中在60～90％硫酸铵饱和度范围内；这段范围沉淀出的SOD粗产品比活为229.6(U／mg)，产率为55.1％。 5．通过不同浓度丙酮对蚯蚓SOD沉淀研究发现：蚯蚓SOD活性主要集中在丙酮浓度0.7～1.2V范围内，这段丙酮浓度范围提取出的SOD粗产品比酶活为132.1(U／mg)，产率为64.9％，其SOD同工酶分析表明：丙酮沉淀所得产品中含有蚯蚓原液同工酶6条中的5条。 6．对丙酮和硫酸铵沉淀分离的蚯蚓SOD产品进行。POD同工酶分析表明：所得SOD粗产品中不含有过氧化物酶(POD)。 收起