中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 郝佳慧扬州大学 2017年硕士导师: 梁昌镛共73页

摘要 : 杆状病毒基因的转录分为早期和晚期，晚期基因的表达开始于病毒DNA复制之后，晚期基因由病毒自身编码的RNA聚合酶转录，除了RNA聚合酶外，病毒还编码了一些晚期表达因子调控晚期基因的表达，这些因子保证了杆状病毒晚期基因的正常转录和翻译。在... 展开杆状病毒基因的转录分为早期和晚期，晚期基因的表达开始于病毒DNA复制之后，晚期基因由病毒自身编码的RNA聚合酶转录，除了RNA聚合酶外，病毒还编码了一些晚期表达因子调控晚期基因的表达，这些因子保证了杆状病毒晚期基因的正常转录和翻译。在杆状病毒AcMNPV中，根据同源性分析，推测ac14、ac40和ac62基因可能是病毒的晚期表达相关因子，但它们的具体功能尚不清楚。本文分别对ac14、ac40和ac62基因进行实验分析，分别构建了缺失型及拯救型重组病毒粒子。转染和感染细胞，光学显微镜、荧光显微镜观察发现，缺失ac14、ac40、ac62三个基因的任何一个，病毒都失去增殖能力，但是拯救型病毒具有感染性。进一步电镜切片观察结果发现，缺失这些基因后，病毒核衣壳无法组装，因此病毒失去感染性。另外，缺失病毒也无法形成多角体。除了回复完整的ac14基因的病毒外，又将全长为801bp的ac14基因截短成1-501bp、1-654bp、1-693bp三段分别插入缺失ac14的病毒基因组中，构建重组病毒粒子。在对全长或截断型ac14的回复病毒感染分析中，发现全长及截短型1-693的回复病毒和野生型病毒具有相似的感染水平，在感染后96h均达到了很高的滴度。这表明片段1-693可以完全拯救缺失病毒增殖能力，但是截断型1-501不能拯救缺失病毒增殖能力，而截断型1-654虽然可以拯救病毒的增殖能力，但病毒增殖缓慢。通过将三个晚期表达因子分别融合EGFP进行亚细胞定位分析，结果显示AC14主要定位于细胞质。而AC40、AC62定位于细胞质和细胞核，病毒感染晚期这两个蛋白分别在细胞核中部和边缘有聚集的现象，可能与其在感染晚期执行晚期基因表达调控的功能相关。另外还分别将晚期启动子Pp6.9与Pvp39和极晚期启动子Ppolh控制的egfp表达框，分别转座插入缺失ac14、ac40或ac62的重组病毒基因组中构建重组病毒，用以分析这些基因缺失对病毒晚期及极晚期启动子的影响。结果显示，任何一个基因缺失的重组病毒中，晚期和极晚期启动子都有微弱表达。其中，ac14基因缺失的重组病毒中，Pp6.9、Pvp39、Ppolh的启动子表达强度稍大;而在ac40、ac62基因缺失的重组病毒中，Pp6.9、Pvp39、Ppolh的启动子只有非常微弱的表达。晚期和极晚期启动子相比之下，极晚期Ppolh的表达更弱一些。本实验对AcMNPV中ac14、ac40和ac62三个基因进行了基础性研究，结果表明它们都是AcMNPV的必需基因，缺失后病毒失去增殖能力。另外，三个基因都影响晚期和极晚期基因的表达，其中ac40和ac62缺失后，晚期及极晚期启动子表达能力大大下降。而ac14缺失后对晚期和极晚期启动子的影响相对较小。另外还发现ac14基因1-654bp区域对于病毒的增殖是必需的。这些发现为进一步揭示晚期基因的表达机制提供了理论基础。收起

关键词 : 杆状病毒 ac14基因 ac40基因 ac62基因基因表达

2. ACE-1、ACE-2基因多态性与新疆和田地区维吾尔族高血压人群的关联

[学位论文] 艾克旦·艾合买提新疆医科大学 2018年硕士导师: 玛依拉·吾甫尔共45页

摘要 : 目的：研究ACE-1，ACE-2基因多态性与新疆和田地区维吾尔族高血压人群的相关性。方法：以新疆和田地区作为研究现场，随机抽取玉田县、洛浦县、和田县、墨玉县作调查点，以2012年5月之12月参加现场调查点健康体检，以≥40岁，无血缘关系的维吾尔族当地... 展开

关键词 : 高血压 ACE-1基因 ACE-2基因基因多态性

3. 新竹番茄曲叶病毒AC2与AC4的功能研究

[学位论文] 谢国辉福建农林大学 2019年硕士导师: 吴祖建;杜振国共68页

摘要 : 菜豆金色花叶病毒属（Begomovirus）是双生病毒科（Geminiviridae）最大的属，包含400多个病毒种。近几十年来，begomoviruses在全球各地暴发，给农业生产造成严重威胁。研究begomovirus的基因功能，有助于认识begomovirus侵染机理，进而为begomoviru... 展开菜豆金色花叶病毒属（Begomovirus）是双生病毒科（Geminiviridae）最大的属，包含400多个病毒种。近几十年来，begomoviruses在全球各地暴发，给农业生产造成严重威胁。研究begomovirus的基因功能，有助于认识begomovirus侵染机理，进而为begomovirus相关病害的防控提供理论支撑。新竹番茄曲叶病毒（TomatoleafcurlHsinchuvirus，ToLCHsV）是一种广泛分布于我国台湾、海南、广东、福建、浙江和江苏等地的begomovirus。本研究对ToLCHsV的AC2和AC4进行了功能解析，主要实验和结果如下：（1）AC2和AC4在ToLCHsV侵染中的作用：通过定点突变构建了三个ToLCHsV突变体：ToLCHsV-ΔAC2（不能表达AC2）、ToLCHsV-ΔAC4（不能表达AC4）和ToLCHsV-ΔAC2-AC4（不能表达AC2和AC4），并通过本氏烟接种实验研究了这三个突变体的侵染性。发现三个ToLCHsV突变体都能系统侵染本氏烟，并造成严重症状。但在症状产生的时间上，ToLCHsV-ΔAC2比野生型ToLCHsV慢1-2天，而ToLCHsV-ΔAC4和ToLCHsV-ΔAC2-AC4比野生型ToLCHsV慢2-3天。在病毒DNA积累的动态上，三个ToLCHsV突变体表现出一定差异：在第9天，它们在本氏烟中的积累水平从高到低依次为ToLCHsV-ΔAC4、ToLCHsV-ΔAC2-AC4和ToLCHsV-ΔAC2，在第18天依次为ToLCHsV-ΔAC2-AC4、ToLCHsV-ΔAC4和ToLCHsV-ΔAC2；在第27天，ToLCHsV-ΔAC2-AC4的积累水平最低，而ToLCHsV-ΔAC2和ToLCHsV-ΔAC4没有明显差别。然而，在所有三个时间点，三个ToLCHsV突变体的积累水平都比野生型ToLCHsV低。（2）AC2与AC4抑制转录后基因沉默（Post-TranscriptionalGeneSilencing，PTGS）和转录水平的基因沉默（TranscriptionalGeneSilencing,TGS）的活性：为判定ToLCHsV的AC2和AC4是否具有PTGS抑制子活性，本研究将这两个蛋白的ORF分别构建到了瞬时表达载体pEarlyGate100，获得pEarlyGate100-AC2与pEarlyGate100-AC4。将pEarlyGate100-AC2与pEarlyGate100-AC4以农杆菌注射的方式分别与一个表达GFPmRNA的二元载体（35S-GFP）共同导入16c本氏烟叶片后观察GFP荧光情况，并检测GFPmRNA积累水平。结果表明AC4能显著抑制PTGS的发生，而AC2没有这种功能。（3）AC2与AC4的亚细胞定位和它们增强异源病毒侵染的能力：为明确ToLCHsVAC2与AC4的的亚细胞定位，本研究将AC2/AC4的ORF分别构建到pEarlyGate101载体，获得能表达AC2/AC4-YFP融合蛋白的二元载体pEarlyGate101-AC2/AC4。将pEarlyGate101-AC2和pEarlyGate101-AC4以农杆菌注射的方式分别导入本氏烟叶表皮细胞，并在导入后的第二天利用共聚焦显微镜观察YFP荧光在细胞中的分布。结果表明，AC2-YFP在细胞质和细胞核中都有分布，而AC4-YFP主要定位于细胞质的叶绿体中。为研究ToLCHsVAC2与AC4是否能增强异源病毒的侵染，本研究以PVX-AC2和PVX-AC4分别接种本氏烟。结果表明，ToLCHsVAC2与AC4都能显著增强PVX的致病性，并能大幅提升PVX在本氏烟中的积累水平。在增强PVX致病性和积累水平上，AC2比AC4活性更强。综上，本研究加深了我们对ToLCHsVAC2与AC4基因功能的认识，为解析ToLCHsV的侵染机理奠定了基础。另外，本研究发现AC2对ToLCHsV的侵染不是必须的，且ToLCHsV的AC4定位于叶绿体，这两点与之前报道的其它begomoviruses的情况明显不同。因此，本研究也为全面认识begomovirusesAC2与AC4的基因功能提供了新的视角。收起

关键词 : 新竹番茄曲叶病毒 AC2基因 AC4基因亚细胞定位

4. 人和马的ACE基因的多态性与耐力的探索与研究

[学位论文] 刘利内蒙古农业大学 2007年硕士导师: 赖双英共31页

摘要 : 提取马血的总DNA，参照Genbank中人、羊、兔的ACE基因中的16、17外显子序列，设计一对保守引物p1，应用PCR技术扩增出目的基因，将其克隆到PMD19-T载体中进行测序并用DNAStar软件进行序列分析。结果显示，扩增出的目的基因长度为345bp，与人的ACE基因... 展开

关键词 : 马 ACE基因基因多态性人基因耐力

5. Ac3基因在SD大鼠胰腺上的表达与胰岛素的关系及运动干预影响

[学位论文] 陈谢广西医科大学 2014年硕士导师: 陈青云共55页

摘要 : 目的:通过建立肥胖大鼠模型，了解AC3基因在高脂饮食诱导的肥胖大鼠胰腺中的表达及运动干预的影响，探讨AC3基因与肥胖、胰岛素的关系，丰富肥胖发病机制及其运动减肥机制。方法:(1)95只SD大鼠，雌雄各半，随机分为对照组(10只)和高脂组(85只)。... 展开目的:通过建立肥胖大鼠模型，了解AC3基因在高脂饮食诱导的肥胖大鼠胰腺中的表达及运动干预的影响，探讨AC3基因与肥胖、胰岛素的关系，丰富肥胖发病机制及其运动减肥机制。方法:(1)95只SD大鼠，雌雄各半，随机分为对照组(10只)和高脂组(85只)。高脂饲料喂养14周，采用肥胖组中体重大于对照组平均体重加三倍标准差为标准判定建成肥胖大鼠模型，达到肥胖大鼠模型标准共37只，随机处理雌雄各5只与对照组比较，余下27只肥胖大鼠随机分为运动组(14只)与非运动组(13只)，进行为期10周的运动干预。 (2)罗氏血糖仪及配套试纸检测空腹血糖，放免法检测空腹胰岛素;用RT-PCR法及免疫组织化学法检测胰腺组织的AC3基因表达情况。结果:(1)AC3蛋白在SD肥胖大鼠胰腺中仅在胰岛细胞表达。 (2)高脂饲料喂养14周后，肥胖雌雄大鼠胰腺AC3基因及蛋白表达较对照组下降(均P＜0.05);而肥胖雌雄大鼠体重、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)及稳态模型评估法胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)较对照组大鼠均升高(均P＜0.05)，胰岛素敏感指数(ISI)低于对照组(P＜0.001);肥胖组雌雄大鼠AC3基因及蛋白的表达与FBG呈正相关，相关系数分别为(r=0.674，P=0.033)(r=-0.715，P=0.020)，肥胖组雌雄大鼠AC3基因及蛋白的表达与FINS、HOMA-IR、ISI无相关性，相关系数分别为(r=-0.601，P=0.066)(r=0.617，P=0.057)、(r=-0.475，P=0.166)(r=0.472，P=0.169)、(r=0.477，P=0.163)(r=-0.478，P=0.163)。 (3)肥胖组和对照组大鼠中雄性大鼠体重、AC3基因及蛋白的表达均高于雌性大鼠(均P＜0.05)，各组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR及ISI在雌雄性之间比较均无差异(P＞0.05)。 (4)运动干预10周后，运动雌雄大鼠胰腺AC3基因及蛋白表达高于非运动组(均P＜0.05);而运动组大鼠体重、FBG、FINS及HOMA-IR较非运动组大鼠均下降(均P＜0.05)，ISI较对照组大鼠升高(P＜0.001);运动组雌雄大鼠AC3基因及蛋白与FBG、ISI呈正相关，相关系数分别为(r=0.884，p＜0.001)(r=-0.905，p＜0.001)、(r=0.770，P=0.002)(r=-0.763，p=0.002)，运动组雌雄大鼠AC3基因及蛋白的表达与FINS、HOMA-IR呈负相关，相关系数分别为(r=-0.867，P＜0.001)(r=0.900，p＜0.001)、(r=-0.781，P=0.002)(r=0.772，p=0.002)。结论:(1)AC3蛋白在SD肥胖大鼠胰腺中仅在胰岛细胞表达，而不表达于其他胰腺组织。 (2)食源性肥胖下调胰腺AC3基因及蛋白的表达 (3)胰腺组织AC3基因及蛋白的表达有性别差异，是否与性激素水平有关，需继续研究加以证实。 (4)运动能增加肥胖大鼠胰腺中AC3基因及蛋白的表达，运动影响了AC3基因表达的机制可能是调控体重及改善胰岛素抵抗。收起

关键词 : 肥胖运动 AC3基因胰岛素

6. 果蝇刚毛调控基因extramacrochaetae上游顺式调控元件的鉴定

[学位论文] 涂剑波四川农业大学 2015年硕士导师: 杨明耀共68页

摘要 : 协同进化表现在生物学不同层面上，在微观上基因表达的协同进化中，顺-反式调控的协同进化已有大量研究，但对同一转录因子结合不同顺式调控元件，多基因调控的协同进化研究甚少。为了研究多基因调控的协同进化，本研究以果蝇背板刚毛作为表型标记进行... 展开协同进化表现在生物学不同层面上，在微观上基因表达的协同进化中，顺-反式调控的协同进化已有大量研究，但对同一转录因子结合不同顺式调控元件，多基因调控的协同进化研究甚少。为了研究多基因调控的协同进化，本研究以果蝇背板刚毛作为表型标记进行研究。果蝇粗刚毛(macrochaetae)的发育受原神经基因achaete-scute(ac-sc)的主导，ac-sc基因受到上游基因激活而表达在刚毛生长的部位。在ac-sc的调控网络中，果蝇extramacrochaetae(emc)基因能够抑制sc基因履行正常的功能，进而抑制粗刚毛的形成，因此emc表达在没有刚毛生长的部位。果蝇sc基因的转录能被刚毛调控基因Pannier(pnr)和Iroquoiscomplex(iro-C)激活，但emc基因的转录调控机制尚不清楚，有研究发现在pnr与iro-C突变的果蝇中，emc表达水平变化，鉴于emc和sc基因表达模式的互补性，推测emc也受到pnr与iro-C的调控，emc和sc应答相同的反式调控模式，在刚毛发育中这两个基因的调控将协同进化。为了验证果蝇emc基因是否也受到pnr与iro-C的调控，本研究主要专注于对emc基因上游顺式调控序列的鉴别和功能研究。鉴于此，本研究设计了一系列实验旨在验证pnr和iro-C基因是否会调控emc的表达，本研究的主要结果如下: (1)首先通过生物信息学方法分析了黑腹果蝇emc基因上游序列中的GATA、TAAT和ACAnnTGT序列，预测了潜在的Pnr结合位点(GATA)和Iro-C结合位点(TAAT和ACAnnTGT); (2)分离克隆出果蝇emc基因上游含有GATA、TAAT和ACAnnTGT保守位点的非编码序列，构建emc基因调控序列的荧光素酶报告基因载体，通过转染细胞和检测荧光素酶活性，在体外利用荧光素酶报告基因系统鉴别出emc基因上游2.3 Kb处的顺式调控元件emcE6; (3)构建emcE6-EGFP报告基因转基因载体，通过显微注射构建得到顺式调控元件emcE6的转基因果蝇，在果蝇体内验证了潜在顺式调控元件emcE6的表达模式和调控活性; (4) GATA位点突变体的荧光素酶报告基因分析发现emcE6中一个潜在的Pnr结合位点具有调控活性，pnr基因参与emc的转录调控; (5)对TAAT位点突变体的荧光素酶报告基因分析发现所鉴定的顺式调控元件emcE6中潜在的Iro-C结合位点无调控活性，本研究表明Iro-C转录因子不参与emc的转录调控。综上所述，本研究试验结果表明在果蝇emc基因上游2.3 Kb处存在一个具有调控活性的顺式调控元件emcE6;erncE6中一个潜在的Pnr结合位点具有调控活性，调控emc的转录:转录因子Iro-C不参与emc的转录调控。本研究在分子水平上研究了果蝇刚毛调控基因emc的转录调控机制，揭示了果蝇DC刚毛发育有关基因emc与sc的调控将协同进化。本研究为进化发育生物学的研究提供了具体的事例，具有一定的理论创新性。收起

关键词 : 果蝇背板刚毛 ac-sc基因基因调控

7. ACE2基因多态性与新疆墨玉县维吾尔族慢性肾脏病的关系

[学位论文] 李芳新疆医科大学 2018年硕士导师: 刘健共46页

摘要 : 目的：探讨肾素血管紧张素转化酶 2（ACE2）基因多态性与新疆墨玉县维吾尔族成人慢性肾脏病(CKD)的关联。方法：以我科在 2013 年 03月-2014年 04 月期间对新疆墨玉县农村维吾尔族成人慢性肾脏病流行病学调查的数据为基础，运用聚合酶连反应和限... 展开

关键词 : 慢性肾脏病 ACE2基因基因多态性

8. 黄瓜（Cucumis sativus L.）性别相关基因EIN3和ACS1G基因多态性研究

[学位论文] 许亮湖南农业大学 2005年硕士导师: 卢向阳;易克共78页

摘要 : 本论文立足于国内外对黄瓜性别相关基因的研究，期望获得黄瓜、西瓜、南瓜EIN3基因序列，提交Genebank，并运用生物信息学手段进行同源性比较为进化及基因功能研究奠定基础；运用直接测序法，克隆不同性型黄瓜的EIN3基因，搜寻新的SNPs，并希望找... 展开

关键词 : 黄瓜 EIN3基因 ACS1G基因基因多态性性别相关基因

9. ACE等基因多态性在我国部分冰上项目基因选材中的研究

[学位论文] 周桐希哈尔滨体育学院 2018年硕士导师: 李丽共85页

摘要 : 研究目的：为了探寻我国冰球等项目运动员运动相关基因的遗传标记,本文通过实验方法对我国冰球、花样滑冰、短距离速度滑冰和短距离短道速滑项目运动员ACE基因I/D多态性、ACTN3基因R/X多态性和CNTF基因A/G多态性的分布情况进行分析，并对这三种... 展开研究目的：为了探寻我国冰球等项目运动员运动相关基因的遗传标记,本文通过实验方法对我国冰球、花样滑冰、短距离速度滑冰和短距离短道速滑项目运动员ACE基因I/D多态性、ACTN3基因R/X多态性和CNTF基因A/G多态性的分布情况进行分析，并对这三种基因的相关研究进行梳理，以确定其多态性与我国这些冰上项目运动员的选材是否具有关联性，为我国这些冰上项目运动员的早期选材提供数据参考。研究方法：本研究以我国130名冰球、花样滑冰、短距离速度滑冰和短距离短道速滑项目优秀运动员作为实验组，155名普通无运动经历的大学生作为对照组。采用聚合酶链式反应方法对ACE基因I/D多态性进行检测，运用限制性片段长度多态性技术对ACTN3基因R/X多态性和CNTF基因A/G多态性进行检测。并对结果进行遗传学平衡定律检验，以确定所检测人群的群体是否具有代表性，所测基因的组间等位基因频率与基因型分布采用卡方检验，根据结果分析三种基因多态性与我国这些冰上项目运动员运动能力的关联性。研究结果： 1、各实验组ACE基因I/D多态性和ACTN3基因R/X 多态性分布均符合Hardy-Weinberg遗传定律（P＞0.05），具有群体代表性，可用作群体研究；各实验组CNTF基因A/G多态性频率分布虽不符合遗传定律（P＜0.05），不具有群体代表性，但由于优秀运动员人数较少且属特殊人群，不能完全套用定律，因此进行统计分析时不影响结果的判断。 2、各实验组ACE基因I/D多态性、ACTN3基因R/X多态性及CNTF基因A/G多态性分布特征与实验组相比均无显著性差异（P＞0.05）。 3、除短距离短道速滑实验组外，其他实验组ACE基因I/D多态性均分布特征与不同项目优秀运动员相比均无显著性差异（P＞0.05）；各实验组ACTN3基因R/X多态性和CNTF基因A/G多态性分布特征与不同项目优秀运动员相比均无显著性差异（P＞0.05）。 4、各实验组ACE基因I/D多态性、ACTN3基因R/X多态性及CNTF基因A/G多态性分布特征与不同地区汉族普通人相比均无显著性差异（P＞0.05）。 5、除短距离短道速滑实验组外，其他实验组ACE基因I/D多态性均分布特征与不同种族普通人相比均有显著性差异（P＜0.05）；各实验组ACTN3基因R/X多态性和CNTF基因A/G多态性分布特征与不同种族普通人相比均有显著性差异（P＜0.05）。研究结论： 1、本研究中个各实验组ACE基因I/D多态性、ACTN3基因R/X多态性及CNTF基因A/G多态性分布特征均与实验组无差异性，不建议作为这些项目基因选材的参考指标。 2、ACE基因I/D多态性在短距离短道速滑与不同项目优秀员之间存在显著性差异，提示该基因多态性可能与项目类型有所关联，但还需更大的样本量来验证。 3、ACE基因I/D多态性、ACTN3基因R/X多态性及CNTF基因A/G多态性分布特征均存在种族间的差异性。收起

关键词 : 冰上项目运动员科学选材 ACE基因 ACTN3基因 CNTF基因

10. 拟南芥ACS7基因转录后调控机制的研究

[学位论文] 熊莉南开大学 2014年博士导师: 王宁宁共96页

摘要 : 植物激素乙烯影响植物生长发育的多个过程，同时它也参与调控植物对环境中生物或非生物胁迫的响应。植物对体内乙烯水平的控制主要通过调节乙烯生物合成的关键酶—1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid synthase,ACC syn... 展开植物激素乙烯影响植物生长发育的多个过程，同时它也参与调控植物对环境中生物或非生物胁迫的响应。植物对体内乙烯水平的控制主要通过调节乙烯生物合成的关键酶—1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid synthase,ACC synthase,ACS)的表达和活性来实现。ACS蛋白由多基因家族编码，它们的表达受到转录和转录后多个水平的调控。根据C-末端结构域的不同，ACS家族成员分为三类，其C-末端氨基酸序列的特点决定了它们翻译后调控的方式。在模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)中，第一类ACS蛋白包含ACS1、2和6，第二类包含ACS4、5、8、9和11，第三类仅包含ACS7一个成员。拟南芥的三类ACS蛋白均是通过泛素/26S蛋白酶体途径降解，其中第一类和第二类ACS的C-末端作为E3泛素连接酶结合以及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)或钙依赖蛋白激酶(calcium-dependent protein kinase，CDPK)磷酸化的靶位点，参与调控这两类ACS蛋白的稳定性;目前，对于第三类ACS蛋白中参与翻译后调控的具体区域或位点仍然不清楚。本课题以模式植物拟南芥的ACS7为代表，研究了第三类ACS蛋白翻译后调控的分子机制。通过对不同物种来源的第三类ACS蛋白以及拟南芥ACS蛋白家族成员的氨基酸序列比对，我们发现第三类ACS蛋白的N-末端相比其他两类ACS的更长，因此推测N-末端可能在第三类ACS蛋白的翻译后调控过程中发挥一定的功能。为了验证这一推论，我们将拟南芥ACS7蛋白N-末端第1-54位氨基酸与报告基因β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase，GUS)进行融合，构建双元表达载体并获得相应的转基因拟南芥ACS7:N7(1-54)-GUS。对转基因幼苗中GUS融合基因表达水平的分析发现，ACS7 N-末端会显著地降低GUS融合蛋白的积累水平和稳定性;进一步分析表明N-末端的第1-14位氨基酸在参与负向调控GUS稳定性方面发挥着主要的作用。同时，我们分别构建了花椰菜花叶病毒（CaMV）35S启动子和可诱导型启动子GVG系统驱动全长(ACS7FL)和缺失N-末端第1-14位氨基酸(ACS7Δ1-14)的ACS7蛋白表达的转基因拟南芥。在GVG:A CS7FL-Flag和GVG:ACS7Δ1-14-Flag转基因拟南芥中发现，两种形式的ACS7蛋白在催化活性上没有差异，但ACS7Δ1-14-Flag蛋白在光下相对于ACS7FL-Flag更为稳定。组成型或诱导过表达ACS7Δ1-14蛋白会促使转基因拟南芥产生更强烈的乙烯响应表型。利用26S蛋白酶体特异性抑制剂MG132处理可以有效地抑制GVG:ACS7FL-lag转基因拟南芥中ACS7FL-Flag蛋白的降解，但对GVG:ACS7Δ1-14-Flag转基因拟南芥中ACS7ΔH4-Flag蛋白的积累没有影响。这些结果表明N-末端参与介导了ACS7的降解，并且这种降解依赖于泛素/26S蛋白酶体途径。我们还发现ACS7 N-末端所介导的蛋白降解受到体内发育和激素信号以及体外环境胁迫信号的调控。首先，N7(1-54)-GUS和ACS7FL-Flag蛋白在ACS7:N7(1-54)-GUS和GVG:ACS7FL-Flag转基因拟南芥黄化苗中的稳定性均高于在光下苗中。对ACS7:N7(1-4)-GUS转基因拟南芥分析还表明，在光照条件下N7(1-54)-GUS融合蛋白主要在种子萌发的后期和成苗的衰老叶片中积累水平较高，而在旺盛生长的幼苗和幼嫩的叶片中几乎没有积累。外源乙烯前体ACC处理、高温、失水和盐胁迫可以抑制N-末端所介导的蛋白降解，提高ACS7:N7(1-54)-GUS转基因幼苗中N7(1-54)-GUS融合蛋白的水平，黑暗处理则促进这一降解过程;另外，生长素可以特异地促进N7(1-54)-GUS融合蛋白在根部的积累。此外，通过将ACS7 N-末端第1-14位氨基酸与实验室前期发现的一个叶片衰老的负调控因子 SSPP(SENESCENCE-SUPPRESSED PROTEINPHOSPHATASE)融合，获得35S:N7(1-14)-SSPP-HA转基因拟南芥。在植物旺盛生长期，我们发现35S:N7(1-14)-SSPP-HA转基因拟南芥由于过表达SSPP基因所引起的表型明显减弱，同时在发育后期部分地保留过表达SSPP造成的晚衰表型。这个结果暗示了ACS7 N-末端所介导的蛋白降解可能不具有ACS特异性，也可以介导其他植物蛋白的降解。收起

关键词 : ACS7基因调控机制植物生长