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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 海洋微生物数目庞大、物种丰富,现已发现700多种具有药用价值的海洋生物,海洋药物17个。据NaturalProductReports统计,截止到2020年,每年分离得到的新化合物逐年递增,海洋真菌来源的化合物高达57%,以深海沉积物为宿主的真菌次级代谢产物占海洋真... 展开 海洋微生物数目庞大、物种丰富,现已发现700多种具有药用价值的海洋生物,海洋药物17个。据NaturalProductReports统计,截止到2020年,每年分离得到的新化合物逐年递增,海洋真菌来源的化合物高达57%,以深海沉积物为宿主的真菌次级代谢产物占海洋真菌化合物34%。关于Aspergillusversicolor海洋来源相关文献70多篇,报到该种属的次级代谢产物主要为蒽醌、蒽酮、联苯醚、生物碱、环肽、等多种类型的化合物。它们主要表现的生物活性为抗菌、抗病毒、抗炎、抗增殖、抗饲料、细胞毒、防污、毒鱼毒和杀虫活性等相关活性,其中部分化合物生物活性测试较为理想,活性测试结果超过阳性对照,为先导化合物的发现奠定基础。通过文献研究发现,关于该种属的研究报告有很多,但是文献中样品的采集时间地点都是各不相同,微生物种群在不同宿主或不同生存环境产生不同类型次级代谢产物,这促使我想更深入的进行进一步探索极端环境中生存菌株的与众不同。 本课题是从深海来源的7株不同种属的真菌中,通过TLC,HPLC并结合文献研读,选择这株来源于西太平洋山海区深海沉积物为宿主的深海真菌Aspergillusversicolor(MCCC3A00937)进行系统的化学成分及其生物活性的研究。该实验主要运用了利用薄层色谱法(TLC)、硅胶柱层析法、SephadexLH-20凝胶柱层析法、中压制备液相色谱法(MPLC)、高效液相色谱法(HPLC)等现代色谱技术对该菌株Aspergillusversicolor次级代谢产物进行了分离纯化;通过NMR、MS、UV、IR、ECD等现在波谱学方法与相关文献结合进行数据分析,鉴定化合物结构。结果,从真菌Aspergillusversicolor(MCCC3A00937)次级代谢产物中共分离鉴定了34个化合物,包括10个蒽醌类化合物(化合物1-10),7个联苯醚类化合物(化合物11-17),15个生物碱类化合物(化合物18-32),1个甾醇(化合物33)及1个脂肪酸(化合物34),其中化合物9、14、15、21和32为新化合物。 在已知化合物结构的基础上,对各化合物的相关生物活性进行查阅,进行抗肿瘤活性和抗菌活性的研究,选取测试文献报道的一种抗肿瘤活性为验证,再选取该化合物未测试的细胞株进行细胞毒活性研究。其中对21个化合物进行了抗肿瘤活性测试,采用MTT(HL-60、K562)和SRB(BEL-7402、HCT-116、A549、Hela、MCF-7、GES-1)两种方法对八种肿瘤细胞进行体外研究。实验结果表明:化合物1对HL-60,BEL-704,HCT-116,A549,Hela和MCF-7细胞系均有一定的抑制作用,IC50分别为10.27,4.74,22.12,16.4,8.92,24.26μM;化合物6对Hela细胞具有一定的抑制作用,IC50为16.27μM;化合物7对MCF-7细胞具有一定的抑制作用,IC50为12.25μM。采用微量肉汤稀释法对6个化合物进行抗菌活性测试,测试菌株包括阳性菌株a:StaphylococcusaureusATCC29213;b:BacillussubtilisATCC6051;c:VancomycinresistantEnterococcusfaecalis1010798和阴性菌株d:EscherichiacoliATCC25922;e:Pseudomonasaeruginosa14;f:KlebsiellapneumoniaeWNX-1共6种,实验结果表明,化合物6对阳性菌株S.aureusa,B.subtilisb,VREc具有抗菌的活性,MIC分别为16μM,32μM,8μM。 收起
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