中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 全文婕南华大学 2017年硕士导师: 贺冬秀共70页

摘要 : 摘要：目的：确定野菊花的体外抗肿瘤活性部位与体外抗肿瘤活性成分，初步探讨其抗肿瘤作用机制，为进一步开发利用野菊花提供实验数据。方法：1.以70%乙醇为溶剂，65℃条件下加热回流提取野菊花总提物(chrysanthemum indicum extract，CIE )，... 展开摘要：目的：确定野菊花的体外抗肿瘤活性部位与体外抗肿瘤活性成分，初步探讨其抗肿瘤作用机制，为进一步开发利用野菊花提供实验数据。方法：1.以70%乙醇为溶剂，65℃条件下加热回流提取野菊花总提物(chrysanthemum indicum extract，CIE )，依次使用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对CIE进行萃取，得到野菊花石油醚部位提取物(Petroleum ether extract, PEE )、乙酸乙酯部位提取物(Ethyl acetate extract，EAE )、正丁醇部位提取物(N-butyl alcohol extract，NAE )，称重计算产率,同时采用一系列特征显色试验对不同极性部位的化学成分类型进行初步的理化鉴定。 2.使用倒置显微镜观察法、CCK-8法检测CIE、PEE、EAE和NAE对人肺癌细胞A549、人慢性骨髓性白血病细胞K562、人乳腺癌细胞MCF-7和人肝癌细胞HepG2细胞形态和增殖的影响，Hoechst染色法、划痕实验法和Transwell小室法评价PEE、EAE、NAE对MCF-7细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响。 3.根据野菊花抗肿瘤活性筛选结果，使用硅胶柱层析法结合薄层色谱法对PEE和EAE所含化学成分进行进一步分离，同时以MCF-7细胞增殖抑制活性为指标，筛选活性最强的分段产物。结果：1.从1kg野菊花中提取得到CIE共392.2g,产率为39.22%；用一系列有机溶剂萃取得到PEE共56.1g，产率为5.61%，EAE共39.3g，产率为3.93%，NAE共33.8g，产率为3.38%。采用一系列特征显色试验对不同极性部位成分的化合物类型进行初步理化鉴定，其结果表明PEE在FeCl3(水溶液)反应、Dragendorff反应、Wager反应、Mayer反应、Molish反应、Liebermann-Burchard反应、Salkowski反应中呈现明显阳性；EAE在PAULY反应、FeCl3(醇溶液)反应、盐酸-镁粉反应、FeCl3(水溶液)反应、Molish反应、Liebermann-Burchard反应和Salkowski反应中呈现明显阳性。 2.浓度超过150μg/mL的CIE、PEE、EAE和NAE对A549、K562和MCF-7细胞密度与形态影响明显，且在150-250μg/mL范围内对细胞增殖抑制作用呈量效相关性，PEE对MCF-7增殖抑制效果最显著；EAE对MCF-7的诱导凋亡作用、抑制迁移和侵袭作用较好。 3.从PEE中分离得到了9个组分群P1-P9，从EAE中分离得到了6个组分群E1-E6，其中组分E1对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用最为明显。结论：1.野菊花提取物具有抗肿瘤活性，且对乳腺癌细胞MCF-7具有良好的体外抗肿瘤效果； 2.野菊花抗肿瘤活性部位为石油醚极性部位和乙酸乙酯极性部位，其抗肿瘤作用机制可能与诱导肿瘤细胞的凋亡和抑制肿瘤细胞的迁移与侵袭有关； 3.野菊花抗肿瘤活性最强的成分存在于EAE中以石油醚∶乙酸乙酯(70∶30)洗脱下的组分内。收起

关键词 : 野菊花体外抗肿瘤活性抗肿瘤活性部位

2. 毛喉鞘蕊花抗肿瘤活性成分及其指纹图谱研究

[学位论文] 宋爱华湖北中医药大学 2008年硕士导师: 吴和珍;刘焱文共86页

摘要 : 毛喉鞘蕊花Coleus forskohlii(Wild．)Briq．，系唇形科(Labiatae)鞘蕊花属(Coleus Lour．)植物。民间以全草煎服，治疗咳喘、心慌、头晕等症疗效甚佳。现代药理研究表明，该药用植物对肿瘤转移、支气管哮喘、充血性心力衰竭等具有良好的生物活性。 ... 展开毛喉鞘蕊花Coleus forskohlii(Wild．)Briq．，系唇形科(Labiatae)鞘蕊花属(Coleus Lour．)植物。民间以全草煎服，治疗咳喘、心慌、头晕等症疗效甚佳。现代药理研究表明，该药用植物对肿瘤转移、支气管哮喘、充血性心力衰竭等具有良好的生物活性。本论文在前期研究的基础上，采用柱色谱分离法将原抗肿瘤活性部位进一步分离，得A-J10个流份段。以HeLa细胞作为受试对象，采用MTT法进行筛选，结果表明，G段、H段和J段具有明显的抗肿瘤活性，IC50值分别为121μg·mL-1、150μg·mL-1和80μg·mL-1，故确定G段、H段和J段为毛喉鞘蕊花抗肿瘤的活性流份段。采用色谱法对毛喉鞘蕊花上述三个活性流份段进行了较系统的分离纯化，得到14个单体成分，鉴定了其中11个化合物，分别为去甲基柳杉树脂酚(demethylcryptojaponol，G1)、β-谷甾醇(β-sitosterol，G2)、14-去氧鞘蕊酮U(14-deoxycoleon U，H1)、(22E，20S，24R)-5α，8α-桥二氧-麦角甾烷-6，22-二烯-3β-醇[5α，8α-epidioxy-(22E，20S，24R)-ergosta-6，22-dien-3β-ol，H2]、1,6-二乙酰氧基-9-去氧佛司可林(1 α，6β，7β-triacetoxy-8，13-epoxylabd-14-en-11-one，J1)、佛司可林J(1α，9α-dihydroxy-6β，7β-diacetoxy-8，13-epoxylabd-14-en-11-one，J3)、6-乙酰氧基佛斯可林(1α，9α-dihydroxy-6β，7 α-diacetoxy-8，13-epoxylabd-14-en-11-one，J4)、佛司可林H(1α，6β-diacetoxy-8，13-epoxylabd-14-en-11-one，J5)、佛司可林I(7β，9α-dihydroxy-1α，6β-diacetoxy-8，13-epoxylabd-14-en-11-one，J8)、美迪紫檀素(medicarpin，J9)、异佛斯可林(isoforskolin，J16)。其中，化合物美迪紫檀素(medicarpin，J9)为首次从毛喉鞘蕊花及鞘蕊花属植物中发现。另外，化合物G3、H3、J10的结构鉴定尚在进行中。采用MTT法，分别以HeLa细胞、A375细胞和HCT-8细胞作为受试对象，对上述分离得到的化合物进行了抗肿瘤活性初步筛选研究。结果表明去甲基柳杉树脂酚(G1)、14-去氧鞘蕊酮U(H1)、(22E，20S，24R)-5α，8α-桥二氧-麦角甾烷-6，22-二烯-3β-醇(H2)、佛司可林H(J5)、美迪紫檀素(J9)以及G3和J10共7个化合物具有抗肿瘤活性，且其抗肿瘤活性均为首次从毛喉鞘蕊花中发现。从而为进一步阐述毛喉鞘蕊花抗肿瘤作用的物质基础提供了科学依据，也为其深入研究奠定了良好基础。采用HPLC-ELSD色谱法，首次对毛喉鞘蕊花抗肿瘤活性部位进行了指纹图谱的研究，标定了18个共有峰，并对其中8个共有峰进行了归属；指纹图谱方法学的精密度、稳定性和重现性良好，各项技术参数符合国家食品药品监督管理局颁布的《中药注射剂指纹图谱技术要求》；对不同产地和不同生长期毛喉鞘蕊花所测指纹图谱进行分析比较，显示出明显差异，从而为毛喉鞘蕊花药材的移植和资源品质的评价提供了一定的科学依据。收起

关键词 : 毛喉鞘蕊花抗肿瘤活性成分

3. 基于小肠寡肽转运蛋白PepT1的喜树碱类化合物的筛选及体外抗肿瘤活性研究

[学位论文] 王悦东北林业大学 2021年硕士导师: 王洋;郑健共50页

摘要 : 喜树碱（CPT）是从我国特有植物喜树（Camtothecaacuminata）中分离获得的一种具有抗肿瘤活性的萜类吲哚生物碱。但是，喜树碱类化合物水溶性差、稳定性低，限制了在临床上的应用。小肠寡肽转运蛋白1（Oligopeptidetransporter1，PepT1）是一类... 展开喜树碱（CPT）是从我国特有植物喜树（Camtothecaacuminata）中分离获得的一种具有抗肿瘤活性的萜类吲哚生物碱。但是，喜树碱类化合物水溶性差、稳定性低，限制了在临床上的应用。小肠寡肽转运蛋白1（Oligopeptidetransporter1，PepT1）是一类广泛表达在小肠上皮细胞的主动转运蛋白，介导二肽、三肽以及拟肽类化合物的小肠吸收。此外，PepT1在正常细胞与组织中表达较少，而在某些肿瘤细胞中过表达。因此，研究人员将一些吸收差的药物修饰成类似二肽或三肽的结构，在PepT1的介导下，增强了母体药物的口服吸收和肿瘤靶向能力。本研究基于PepT1，对多种喜树碱类化合物进行筛选，考察了喜树碱类化合物对高/低表达PepT1的细胞系的体外抗肿瘤活性。主要研究结果如下： 1、过表达hPepT1的HEK-293T细胞模型的构建：构建好重组质粒pcMV3-SLC15A1，选择不同浓度的质粒，瞬时转染HEK-293T细胞。利用WesternBlot观察hPepT1的蛋白表达，通过细胞摄取PepT1典型底物Gly-Sar考察hPepT1的转运功能，最终确定质粒的最佳转染浓度为0.5?g/孔。 2、基于PepT1的喜树碱类化合物的筛选：利用上述构建好的HEK-293T-hPepT1细胞模型，将喜树碱类化合物与Gly-Sar共同孵育，利用LC-MS/MS法，检测细胞裂解液中Gly-Sar的浓度，筛选得到抑制作用较强的化合物：HCPT、CPT-Phe、CPT-Gly-Val、N-乙酰-CPT-Gly-Val、CPT-Gly-Gly、N-乙酰-CPT-Gly-Gly、t-boc-CPT-Gly-Asp，且不含保护基团的喜树碱类化合物对摄取Gly-Sar的抑制作用更明显。 3、PepT1高/低表达细胞系的筛选：应用免疫荧光、WesternBlot考察了PepT1在多种细胞系的表达水平。结果表明，人结肠癌细胞系Caco-2、人肝癌细胞系HepG2、人胰腺癌细胞系BxPC3中PepT1表达水平较高，而人正常肝细胞HL-7702、人肝癌细胞系Hep3B、人胰腺癌细胞系MPC2则较低。 4、喜树碱类化合物的体外抗肿瘤活性研究：选择高/低表达PepT1的细胞系，以CPT为对照，通过MTT法研究了7种化合物HCPT、CPT-Phe、CPT-Gly-Val、N-乙酰-CPT-Gly-Val、CPT-Gly-Gly、N-乙酰-CPT-Gly-Gly、t-boc-CPT-Gly-Asp的体外抗肿瘤活性，这些化合物都表现出良好的抗肿瘤作用，且在高表达PepT1的HepG2中，体外抗肿瘤活性显著高于低表达PepT1的Hep3B。对于喜树碱二肽化合物，不含保护基团要比含有保护基团的化合物抗肿瘤效果更好。收起

关键词 : PepT1 喜树碱肽类化合物细胞摄取体外抗肿瘤活性抗肿瘤活性

4. rhIL-15对脐血和成人外周血单个核细胞抗肿瘤活性的影响

[学位论文] 黄娟武汉大学 2002年硕士导师: 邹典定;赵东赤共46页

摘要 : 目的:探讨rhIL-15对脐血(CBMNC)和成人外周血单个核细胞(PBMNC)抗肿瘤活性的影响.方法:采用MTT法分别检测静止的CBMNC和PBMNC对K562和HL-60细胞株的杀伤活性、经不同浓度的rhIL-15及不同效靶比条件下激活的CBMNC和PBMNC抗瘤活性,ELISA法测定培养上清中... 展开

关键词 : rhIL-15 脐血抗肿瘤活性

5. 短叶老鹳草素抗肝癌的作用及机制研究

[学位论文] 林金榕北京协和医学院 2023年硕士导师: 陈四保共97页

摘要 : 肝癌是常见的恶性肿瘤之一，我国是世界上肝癌发病率、死亡率最高的国家。探索肝癌的诊断和治疗，有利于提高我国人民的健康水平以及降低肝癌造成的疾病负担。本课题组前期研究发现，来源于抗肿瘤中药鹅不食草CentipedaminimaL.的短叶老鹳草素(Brevil... 展开肝癌是常见的恶性肿瘤之一，我国是世界上肝癌发病率、死亡率最高的国家。探索肝癌的诊断和治疗，有利于提高我国人民的健康水平以及降低肝癌造成的疾病负担。本课题组前期研究发现，来源于抗肿瘤中药鹅不食草CentipedaminimaL.的短叶老鹳草素(BrevilinA,BA),对包括三阴性乳腺癌、鼻咽癌、黑色素瘤、结肠癌等多种肿瘤都有很好的抑制活性，但目前还尚未有将短叶老鹳草素应用于抗肝癌方面的研究报道。因此，本文旨在对短叶老鹳草素体外和体内抗肝癌的活性进行研究，并对其作用机制作探讨。本论文采用MTT实验考察BA对肝癌细胞HepG2、Huh7、Hep3B和PLC/PRF/5细胞活性的抑制作用;采用集落形成实验考察BA对肝癌细胞HepG2、Huh7和PLC/PRF/5细胞增殖的抑制作用;采用Transwell迁移和侵袭实验考察BA对HepG2和Huh7细胞迁移和侵袭能力的抑制作用;采用流式细胞术考察BA对HepG2和Huh7细胞周期的阻滞作用;采用WesternBlot实验考察BA对HepG2和Huh7细胞周期相关蛋白表达的影响;采用流式细胞术考察BA对HepG2和Huh7细胞凋亡的诱导作用;采用裸鼠皮下接种人肝癌细胞Huh7的动物模型考察BA对体内Huh7细胞增殖的抑制作用;采用H&E染色法考察BA对肿瘤组织和主要器官的影响;采用RNA-sequence与WesternBlot实验考察BA抗肝癌的作用机制。体外实验结果表明，BA可以抑制HepG2、Huh7、Hep3B和PLC/PRF/5细胞的生长，抑制HepG2、Huh7和PLC/PRF/5细胞的集落形成能力，抑制HepG2和Huh7迁移和侵袭的能力，将HepG2和Huh7的细胞周期阻滞于G2/M期，并诱导HepG2和Huh7细胞凋亡。体内实验结果表明，在裸鼠皮下接种人肝癌细胞Huh7的动物模型中，BA可以显著抑制肝癌肿瘤的生长，并对裸鼠体重无明显影响。H&E染色结果显示，给药组裸鼠的肿瘤组织产生了明显的细胞间隙、细胞核颜色变淡、核仁体积缩小、坏死面积增大;而给药组裸鼠的心、肝、脾、肺、肾与阴性对照组相比，均无明显组织损伤和病变，这表明BA可抑制肿瘤的体内生长，且生物安全性良好。机制研究表明,BA诱导细胞周期阻滞与下调周期相关蛋白cdc2和CDK6有关。进一步采用RNA-sequence与WesternBlot实验发现，BA可以促进MAPK信号通路的表达，并且抑制mTOR和STAT-3信号通路的表达。综上所述，BA在体外对多种肝癌细胞表现出抑制活性，可以阻滞细胞周期、诱导凋亡、抑制迁移和侵袭;同时，对荷瘤裸鼠体内肿瘤的生长有显著抑制作用，且无明显毒性。作用机制研究初步发现，BA抗肝癌的活性与上调MAPK信号通路和抑制mTOR和STAT-3信号通路有关。本论文的完成，为未来将BA应用于肝癌的防治提供了理论基础。收起

关键词 : 肝癌短叶老鹳草素抗肿瘤活性

6. Solasodine甾体生物碱化合物的结构修饰研究以及硝唑尼特和替唑尼特的合成工艺研究

[学位论文] 高培君华东理工大学 2010年硕士导师: 卓超共93页

摘要 : 肿瘤是危害人类生命健康最主要的疾病之一,天然产物具有良好的抗肿瘤的活性,同时毒副作用小。天然产物中的甾体生物碱类化合物具有良好的提高免疫力和抗肿瘤活性。本文设计了与solasodine结构类似的目标化合物,和合成该目标化合物需要的重要中间体A1、... 展开

关键词 : 抗肿瘤活性甾体结构优化

7. 卵叶娃儿藤抗肿瘤活性成分的研究抑制素β亚基片段肽的合成

[学位论文] 甄月英北京协和医学院(中国医学科学院) 1999年硕士导师: 庾石山;鲁桂琛共92页

摘要 : 卵叶娃儿藤为萝摩科娃儿藤属的植物,是中国传统的有毒中草药.该课题组在对广西产的卵叶娃儿藤根的95%乙醇粗提物的药理研究中,发现其生物碱成分对HL-60、L<,1210>及Bel<,7402>肿瘤细胞具有明显的抑制作用.为了能够发现新型的抗肿瘤活性成分,研究人员对卵叶娃儿藤的化... 展开

关键词 : 卵叶娃儿藤抗肿瘤活性成分

8. 文蛤多肽的生物提纯及抗肿瘤活性研究

[学位论文] 秦敬如青岛科技大学 2019年硕士导师: 刘均洪共73页

摘要 : 众所周知，癌症已经成为威胁人类健康的疾病之一，仅次于心血管疾病位居第二。知道，传统的肿瘤治疗方法对人体有强大的副作用，寻找合理的方法和高效低毒的药物来预防和治疗癌症的发生是国内外医学界专家研究的热点内容，也是药学界的主流话题。世界... 展开众所周知，癌症已经成为威胁人类健康的疾病之一，仅次于心血管疾病位居第二。知道，传统的肿瘤治疗方法对人体有强大的副作用，寻找合理的方法和高效低毒的药物来预防和治疗癌症的发生是国内外医学界专家研究的热点内容，也是药学界的主流话题。世界上海洋资源无比丰富，物种多样性为抗肿瘤新药的研究提供了物质基础。最近几十年，已经有多种抗肿瘤活性物质被发现并应用于临床中，其中，文蛤用于治疗癌症已经有悠久的历史了。在前人的基础上，本文就文蛤抗肿瘤作用进行了介绍。从其体液中分离得到一种新的活性物质，并对其抗肿瘤活性进行了研究。本课题组采用了一系列的生物分离技术，主要有硫酸铵分级沉淀、离子交换层析、疏水层析、凝胶层析等，对文蛤体液进行分离纯化，并得到了一种新的活性物质，对肿瘤具有较好的抑制作用。SDS-PAGE凝胶电泳检测到该多肽的分子量大小为15KDa，并将其命名为MM-15。用BCA法检测蛋白浓度，采用MTT法检测MM-15对肿瘤细胞株（人肺癌A549、人肝癌BEL-7402、人结直肠癌HCT-116、人卵巢癌HeLa细胞、人胰腺癌Aspc-1）和正常细胞株（乳腺细胞MCF-10A和小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3）的生长抑制活性。按照上述排列顺序，MM-15对上述细胞株的IC50值依次为31.80μg/mL、47.75μg/mL、64.3μg/mL、46.00μg/mL、45.13μg/mL、149.51μg/mL和123.13μg/mL。研究结果表明，MM-15具有广谱抗肿瘤活性，其中对人肺癌A549的抑制效果最好，而对于两种正常细胞无明显作用。后续以人肺癌细胞A549作为研究对象，探究了MM-15的浓度及作用时间对肿瘤细胞增殖的影响。结果表明，随着MM-15浓度的增加对A549细胞抑制作用也逐渐增强，IC50为30.30μg/mL；MM-15作用于A549两天后效果达到最佳，且药效可持续至三天以上。对于文蛤多肽MM-15抗肿瘤活性的研究，为其抗肿瘤机制研究及基因重组改造奠定了物质基础，也为恶性肿瘤的治疗开辟了新的途径，具有广阔的发展前景。收起

关键词 : 文蛤多肽生物提纯抗肿瘤活性

9. 泥螺（Bullacta exarata）提取物的抗肿瘤活性及其机理初探

[学位论文] 朱佳华东理工大学 2007年硕士导师: 许学书共56页

摘要 : 从海洋软体动物开发抗肿瘤药物正成为研发抗肿瘤新药的热点。海洋生物生长在高盐、高压、缺少光照等的特殊环境,在其生长代谢中,产生积累了大量化学结构独特并具有特殊生理活性和功能的物质。泥螺为我国沿海丰富的生物资源,因此,本研究对泥螺提取物的... 展开

关键词 : 泥螺抗肿瘤活性细胞周期

10. 黄芪对大剂量顺铂所致肾毒性防护的研究

[学位论文] 孔庆志武汉大学 2001年硕士导师: 袁宏银共30页

摘要 : 目的:通过动物实验证实中药黄芪对顺铂所致肾毒性有防护作用,指导临床替代或部分替代水化,达到扩大大剂量顺铂适用范围的目的;继动物实验之后,研究临床实践中黄芪对大剂量顺铂肾毒性防护的作用.结论:动物实验证明黄芪确能防护顺铂所致的肾毒性且不影响... 展开

关键词 : 抗肿瘤活性黄芪顺铂肾毒性