摘要: 目的： 小胶质细胞是中枢神经系统中极为重要的免疫细胞，正常情况下，小胶质细胞呈分枝状，对中枢神经系统进行免疫监视。脑出血后，血肿成分促进小胶质细胞活化。一方面，小胶质细胞通过经典途径活化转变为M1型，分泌大量促炎因子如TNF-α、IL-6等... 展开 目的： 小胶质细胞是中枢神经系统中极为重要的免疫细胞，正常情况下，小胶质细胞呈分枝状，对中枢神经系统进行免疫监视。脑出血后，血肿成分促进小胶质细胞活化。一方面，小胶质细胞通过经典途径活化转变为M1型，分泌大量促炎因子如TNF-α、IL-6等发挥细胞炎性作用；另一方面，小胶质细胞通过替代途径转化为M2型，分泌神经保护因子如BDNF、IGF1等促进损伤修复。小胶质细胞由静息状态向活化状态呈动态演变过程。极化状态是指小胶质细胞受周围环境影响，呈现不同表型并保留变化功能以维持组织稳态的一种能力。与外周巨噬细胞相比，小胶质细胞在表型极化方面表现出相似和独特的特征，从而具有先天的免疫功能。脑出血后不同时间段小胶质细胞所处的极化状态尚不明确，如果能够抑制小胶质细胞M1极化的有害效应，发挥M2极化状态的神经保护作用对于神经系统疾病的干预具有重要意义。本研究通过探讨小鼠脑出血后小胶质细胞在不同时间点M1及M2型的转化，为未来可能的促炎型M1型向抗炎修复型M2型的转化干预提供潜在依据。 方法： 将48只ICR小鼠随机分为手术对照组与脑出血模型组，两组根据术后不同时间点分为1d、3d、7d三个亚组，各模型组予以Ⅳ型胶原酶制备脑出血模型，手术对照组同时给予等量0.9%氯化钠注射液。术后不同时间点行神经功能评分，后应用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定TNF-α、IL-6、BDNF、IGF1表达量，免疫荧光染色标记小胶质细胞M1型(Iba1+CD80)、M2型(Iba1+CD206)，评价出血后血肿周围组织小胶质细胞活化状态,对TNF-α、IL-6、BDNF、IGF1的表达量和小胶质细胞数量进行相关性分析。 结果： 与各时间点手术对照组相比，各时间点脑出血组均有不同程度的神经功能缺损，1d时最明显(P＜0.01)。同时TNF-α、IL-6蛋白表达量均增多，3d时最明显(P＜0.01)。与同期手术对照组相比，脑出血组BDNF、IGF1蛋白表达量增多，脑出血3d及7d的BDNF及IGF1蛋白表达量显著增多(P＜0.01)。免疫荧光染色显示，在脑出血后1-3d以M1为主，第3dM1型小胶质细胞达到高峰；第7d以M2型小胶质细胞为主；即M1型以出血后早期为主(1-3天)；M2型以出血后恢复期为主(3-7天)。脑出血后，M1型小胶质细胞数量与TNF-α和IL-6的蛋白表达量存在明显的正相关关系，M2型小胶质细胞数量与BDNF、IGF1的蛋白表达量存在明显的正相关关系。 结论： M1型小胶质细胞在脑出血急性期(1-3d)占主要地位，M2型小胶质细胞在脑出血恢复期(7d)占有优势，且M1型小胶质细胞与促炎因子(TNF--α、IL-6)明显相关，M2型小胶质细胞与抗炎保护因子(BDNF、IGF1)明显相关；提示M1型小胶质细胞可能与脑出血后早期水肿相关，而M2型小胶质细胞可能与脑出血后神经修复有关。提示如果脑出血早期干预M1型小胶质细胞向M2型转变可能对于促进血肿清除，减轻早期脑出血后水肿形成，促进神经功能恢复具有一定的意义。 收起