摘要: 研究目的:异动症是左旋多巴治疗帕金森病后产生的致残性药物并发症，有研究表明异动症的发生可能与突触可塑性相关，突触可塑性分为结构可塑性和功能可塑性，前者指的是突触结构重塑，主要观察树突棘的形态学，后者从电生理角度解释问题。本实验聚焦在... 展开 研究目的:异动症是左旋多巴治疗帕金森病后产生的致残性药物并发症，有研究表明异动症的发生可能与突触可塑性相关，突触可塑性分为结构可塑性和功能可塑性，前者指的是突触结构重塑，主要观察树突棘的形态学，后者从电生理角度解释问题。本实验聚焦在纹状体中型多棘神经元(Medium Spiny Neurons，MSNs)的树突棘结构形态的变化上，探讨异动症的MSNs结构突触可塑性变化以及运用5-HT1A/B激动剂依托拉嗪是否能通过调控以上通路改善异动症，和兴奋性突触后电流观察纹状体MSNs突触功能可塑性，以及观察pERK是否与其相关。 研究方法:(1)利用6-OHDA偏侧帕金森病造模小鼠，左旋多巴诱导产生异动症模型，对异动症及依托拉嗪治疗组进行非随意运动评分(AIMs)观察依托拉嗪是否能改善异动症;(2)利用在背外侧纹状体胞内显微注射Lucifer Yellow染料，(3)及立体定位注射rAAV-D1-mCherry-WPRE-pA，观察树突棘形态学变化，包括密度和不同类型棘的密度，探讨异动症是否通过MSNs，尤以D1MSNs起作用，且依托拉嗪是否通过调控纹状体区MSN结构重塑改善异动症;(4)利用膜片钳系统观察各组兴奋性突触后电流的改变;(5)利用western-blotting观察pERK在各组中的变化。 研究结果:(1)异动症组AMs相比于依托拉嗪组，第一天即有差异，在第14天180分钟的评分里，20、40和60分钟这几个时间点有差异(2)胞内显微注射Lucifer Yellow的结果显示，帕金森病组MSNs比生理盐水组显著下降，异动症模型小鼠组MSNs较帕金森病小鼠模型组有所恢复，主要表现为mushroom的改变，依托拉嗪组比异动症组MSNs有所恢复，主要表现为mushroom和thin的改变(3)立体定位D1-mCherry-AAV后，结果与上一致(4)兴奋性突触后电流中，表示突触后膜的幅度中，PD组比saline组升高，LID组比PD组升高，LID+Elto组比LID组有所恢复;(5)帕金森病组比生理盐水组pERK水平下降，异动症组比帕金森病组有所升高，依托拉嗪组比异动症组有所恢复。 研究结论:(1)依托拉嗪能显著改善左旋多巴诱导产生的帕金森病小鼠异动症(2)总体中型多棘神经元树突棘密度的结果看，异动症组的树突棘相比于帕金森病组上升，其中主要是蘑菇状棘密度的增加，可能是补偿帕金森病下树突棘的大量丢失。依托拉嗪组树突棘密度比异动症组升高，结合行为学表现，可能表示依托拉嗪是通过调控纹状体区MSNs的树突棘结构重塑，尤以D1-MSNs为主改善异动症(3)异动症可能是由于突触后膜电位变化而产生，且依托拉嗪可通过调控纹状体区兴奋性突触后电流的幅度改善异动症(5)依托拉嗪改善LID可能与调控纹状体内pERK水平有关。 收起