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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 目的: 探讨慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)患者中OSM与紧密连接(TJs)的相关性及意义,以及呼吸道病毒作为一种鼻黏膜致炎因子,引起人鼻黏膜上皮细胞中抑瘤素M(OSM)表达的情况。 方法: 1、检测鼻息肉组织(n=83)和健康对照组(n=48)... 展开 目的: 探讨慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)患者中OSM与紧密连接(TJs)的相关性及意义,以及呼吸道病毒作为一种鼻黏膜致炎因子,引起人鼻黏膜上皮细胞中抑瘤素M(OSM)表达的情况。 方法: 1、检测鼻息肉组织(n=83)和健康对照组(n=48)中紧密连接蛋白ZO-1, claudin-1和occludin及OSM的表达情况。OSM同ZO-1,claudin-1和occludin蛋白表达情况进行相关性分析。 2、体外气液界面培养人鼻黏膜上皮细胞(n=11)经H3N2流感病毒感染后,检测OSM的表达情况,及免疫荧光染色检测OSM与病毒血凝素(HA1)和不同上皮细胞标志物(mucin5AC,α-tubulin和p63)之间共染色情况。 结果: 1、qPCR结果显示紧密连接蛋白OSM,ZO-1,claudin-1和occludin在鼻息肉中与健康对照组中均有表达。鼻息肉组织中ZO-1和claudin-1的mRNA相对表达水平低于对照组,差异具有统计学意义(P均<0.0001)。而occludin的mRNA在两组之间表达差异无统计学意义(P=0.6632)。OSM蛋白主要表达在鼻黏膜上皮细胞和上皮下组织,且mRNA表达情况及总荧光强度值均较对照组升高,差异具有统计学意义(P<0.05, P<0.0001)。OSM蛋白表达水平与ZO-1、claudin-1和occludin的蛋白表达水平均成负相关。 2、体外气液界面培养人鼻黏膜上皮细胞,经H3N2流感病毒感染后,qPCR检测表明OSM的mRNA表达升高,同mock对照时间点相比感染8,24,48小时后增高的倍数分别为2.2,4.7和3.9倍。在感染24小时达到最高,差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光共染色OSM和HA1,发现在24和48小时有共染色情况,检测各时间点总荧光强度(Total fluorescence intensity, TFI),发现OSM有升高趋势,mock,8h,24h和48h的TFI值分别为0.033×107,0.144×107,2.99×107和2.94×107。在H3N2感染 24小时后,OSM同人鼻黏膜上皮细胞中的杯状细胞标志物mucin5AC,纤毛细胞标志物α-tubulin,和基底细胞标志物p63进行免疫荧光共染色,结果显示OSM同纤毛细胞标志物α-tubulin及杯状细胞标志物mucin5AC发生共染。 结论: 1、鼻息肉组织中TJs的表达降低,且与OSM的表达情况呈负相关; 2、H3N2流感病毒引起人鼻黏膜上皮细胞中OSM的高表达,并可能导致上皮TJs功能障碍;鼻黏膜上皮细胞中的纤毛细胞和杯状细胞可能是OSM的重要来源。 收起
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