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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 目的:探讨慢性炎症性刺激对胃上皮细胞中Hippo-YAP信号通路的影响进而促进胃黏膜发生EMT改变。 方法:体外培养人胃粘膜上皮细胞(GES-1),观察不同时间不同浓度的肿瘤坏死因子(TNF-α)或者N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)体外刺激GES-1细胞... 展开 目的:探讨慢性炎症性刺激对胃上皮细胞中Hippo-YAP信号通路的影响进而促进胃黏膜发生EMT改变。 方法:体外培养人胃粘膜上皮细胞(GES-1),观察不同时间不同浓度的肿瘤坏死因子(TNF-α)或者N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)体外刺激GES-1细胞后通过Western blotting测定刺激前后GES-1细胞中Hippo信号分子、EMT相关分子、CDX2等因子的变化情况。同时,选取最佳刺激条件下,使用细胞免疫荧光技术观察YAP分子在GES-1细胞中刺激前后入核的情况。在相同刺激条件下刺激瞬时转染YAP siRNA的GES-1细胞,通过Western blotting观察干扰前后GES-1细胞中Hippo信号分子、EMT相关分子、CDX2等因子的变化情况。同时通过ELISA测定MNNG体外刺激GES-1细胞前后细胞培养液中TNF-α的含量。 结果:GES-1细胞中Hippo信号分子、EMT相关分子、CDX2等因子的变化存在TNF-α刺激的时间及浓度的依懒性,随着TNF-α刺激的时间及浓度的延长,Hippo-YAP信号通路逐渐被抑制,CDX2分子表达逐渐增加,E-cadherin分子表达逐渐被抑制,N-cadherin分子表达逐渐增加。在相同刺激条件下刺激瞬时转染YAP siRNA的GES-1细胞,上诉因子的变化消失。MNNG刺激GES-1细胞后变化与TNF-α刺激相似,且MNNG刺激GES-1细胞后培养基内TNF-α含量明显增加,考虑MNNG刺激GES-1细胞发生癌前病变与TNF-α相关,且与抑制Hippo信号通路相关。 结论:慢性炎症性刺激对胃上皮细胞中Hippo-YAP信号通路的影响进而促进胃黏膜发生EMT改变。 收起
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