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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 目的: 通过观察IgA肾病(IgAN)大鼠肠黏膜的免疫细胞数目和分布的变化从而认识黏膜免疫在IgAN发病过程中的作用,比较应用大黄酸(RH)前后黏膜免疫细胞的变化探讨RH防治IgAN的作用机理,为RH的临床应用提供理论基础。 方法: 将28只SD雌性... 展开 目的: 通过观察IgA肾病(IgAN)大鼠肠黏膜的免疫细胞数目和分布的变化从而认识黏膜免疫在IgAN发病过程中的作用,比较应用大黄酸(RH)前后黏膜免疫细胞的变化探讨RH防治IgAN的作用机理,为RH的临床应用提供理论基础。 方法: 将28只SD雌性大鼠随机分成正常对照组、IgAN模型组、RH预防组和RH治疗组(n=7)。牛血清蛋白(BSA)+脂多糖(LPS)+四氯化碳(CCl4)联合用药构建IgAN模型,RH预防组和RH治疗组大鼠分别在建模前后用RH悬浊液灌胃。均于10周末杀死大鼠,前一天留取24小时尿液进行尿沉渣红细胞计数和24小时尿蛋白的检测。死后剪部分回肠,进行常规HE染色,检测肠黏膜病理变化;取部分回肠和肾组织以液氮保存,OCT包埋,用免疫荧光法检测肾脏IgA的沉积,用免疫组织化学法显示回肠黏膜CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD20+B细胞和CD83+树突状细胞(DCs细胞)。用方网测试系统测量肠黏膜的固有层DCs细胞和淋巴细胞的数密度。用统计学软件SPSS17.0比较各组大鼠固有层树突状细胞和淋巴细胞之间的差异和相关性。 结果: 1. IgAN模型组大鼠尿液检测可见镜下血尿,24h尿蛋白含量增加,肾脏免疫荧光染色可见肾皮质处有绿色颗粒状IgA沉积荧光,大黄酸预防组和大黄酸治疗组上述损伤明显减轻。 2. IgAN模型组大鼠肠道HE染色可见肠绒毛变矮变宽,绒毛间的距离增大,中央乳糜管扩张,固有层结缔组织可见大量炎症细胞和红细胞。RH预防组和RH治疗组肠黏膜损伤不同程度改善。 3.4组大鼠回肠肠黏膜上皮内可见CD3+T细胞。固有层可见CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD20+B细胞与CD83+DCs细胞。 4.与正常对照组相比,IgAN大鼠肠黏膜固有层CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD20+B细胞和CD83+DCs细胞的数密度均增加(p<0.05)。IgAN模型组大鼠肠黏膜的固有层CD83+DCs细胞的数密度与CD4+T细胞的呈显著性相关。CD4+T细胞的数密度与CD20+B细胞的呈高度线性相关。 5.与IgAN模型组相比,RH预防组和RH治疗组大鼠肠黏膜的固有层CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD20+B细胞和CD83+DCs细胞的数密度均减少(p<0.05)。RH预防组大鼠肠黏膜的固有层CD4+T细胞的数密度与CD20+B细胞的呈高度线性相关。RH治疗组大鼠肠黏膜的固有层CD4+T细胞的数密度与CD20+B细胞的呈显著性相关。 结论: 1. IgA肾病大鼠肠黏膜固有层CD20+B细胞、CD4+T细胞及CD83+DCs细胞数密度均增加,提示体液免疫异常活跃,可能与IgA产生的异常增加和在肾脏的沉积有关。 2 IgAN大鼠肠黏膜的固有层的DCs细胞与CD20+B细胞及CD4+T细胞与CD20+B细胞之间呈显著相关性,提示固有层DCs细胞与淋巴细胞相互作用,共同参与肠道免疫调节。 3 RH应用后能使上述各种异常增高的免疫细胞数量得到部分恢复,可能是通过抑制DCs细胞的功能和免疫细胞的互相作用来调节肠道免疫。 收起
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