摘要: 人体肠道菌群自出生起便定植于人体肠道内，从分类学和功能性组合的角度来看，肠道微生物可能与许多复杂的疾病相关。研究表明，2型糖尿病(type2 d iab etes，T2 D)是一种以胰岛素抵抗和胰岛β细胞的功能减退为主要特征的代谢性疾病，可被遗传、环境等... 展开 人体肠道菌群自出生起便定植于人体肠道内，从分类学和功能性组合的角度来看，肠道微生物可能与许多复杂的疾病相关。研究表明，2型糖尿病(type2 d iab etes，T2 D)是一种以胰岛素抵抗和胰岛β细胞的功能减退为主要特征的代谢性疾病，可被遗传、环境等多种因素所影响，同时也与肠道菌群结构与类型的改变密切相关。中药的口服方剂在服用后经过肠道与定植其中的肠道菌群发生作用。本文选取黄连花薹作为研究对象，结合给药前后肠道微生物结构和类型的改变，探讨肠道菌群在2型糖尿病的发病和治疗中发挥的作用。 具体内容如下：1、以盐酸-甲醇(1:100)溶液提取1g黄连花薹样品，紫外分光光度计测定样品中的总生物碱含量，HPLC测定样品中的小檗碱含量。其中，总生物碱含量为1.67%，小檗碱含量为0.86%。 2、称取50.0g黄连花薹，超纯水提取后浓缩至100 mL，得0.5 g/mL原液。在 MRS肉汤、肠球菌肉汤、和EE肉汤中分别添加25%、20%、10%、7.5%、5%、2.5%体积比的黄连花薹提取液，除鼠李糖乳杆菌和乳酸杆菌在2.5%黄连花薹提取液中呈现轻微的增殖外，大肠埃希菌和粪肠球菌的生长增殖在各浓度中均被抑制。 3、SD雄性大鼠经高糖高脂饲料喂养6周后，小剂量腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。造模成功后，大鼠均出现多饮、多尿、多食和体重减轻的“三多一少”的症状，口服糖耐量实验显示造模组大鼠糖耐量异常。黄连花薹提取液灌胃28天后，造模组血糖水平均出现上升，高剂量给药组上升趋势明显低于造模对照组，中剂量组和低剂量组虽然上升值比造模空白对照组低，但差异不显著。眼后静脉丛取血测定各组大鼠血清中 TG、CHO、HDL-C、SOD、MDA、GS H-Px的含量，结果显示，与造模对照组相比，高剂量给药组的TG、C HO含量明显降低，差异具有显著性，而中剂量组和低剂量组虽然也出现降低，但无显著性差异。相比给药组、造模对照组和正常未造模组，HDL-C、MDA、SOD、GSH-Px含量差异不明显。 4、肠道内容物的DGGE技术分析结果显示，在2型糖尿病大鼠肠道菌群中，拟杆菌门和厚壁菌门数量显著下降，而乳酸杆菌、保加利亚乳杆菌、放线菌门和变形菌门数量会出现增多。给药之后，Blautia glucerasea、Lactobacillus animalis、Pseudomonas fluorescens等均有所下降。造模对照组细菌丰度最高，细菌种类最为丰富。主成分分析显示，造模组与未造模组差异显著，而在造模组中，给药组与造模对照组也具有显著性差异。聚类分析显示，未造模组与造模组相似性为0.36，在各造模组中，给药组与造模对照组相似性也仅为0.5，具有较大差异。 从以上结果可知，在体外菌种培养实验中，除2.5%黄连花薹提取液会轻微促进鼠李糖乳杆菌和乳酸杆菌生长外，各浓度的黄连花薹提取液均抑制大肠埃希菌和粪肠球菌生长，表明加入黄连花薹提取液后，肠道微生物生长平衡被打破，会出现不同程度的抑制。而在体内试验中，高、中、低剂量组给药均会降低血糖值及血清中的TG、 C HO含量，表明黄连花薹提取液对糖尿病有治疗作用。通过DGG E分析，给药后，造模对照组和造模给药组肠道微生物结构发生了明显的变化，乳酸杆菌、鼠李糖乳杆菌等出现了不同程度的下降，因此，黄连花薹提取液可能是通过作用于微生物而发挥其治疗作用，其具体作用机制有待于后续研究。 收起