摘要: 目的：探讨细胞间粘附分子（ICAM-1）、E-选择素的表达及其与鼻息肉发生的关系。 方法：选择45例Ⅱ型3期的鼻息肉患者和18例非鼻息肉患者（对照组）进行病例对照研究，应用HE染色、免疫组织化学技术（SP法）观察鼻息肉和正常下鼻甲组织中细胞间粘附... 展开 目的：探讨细胞间粘附分子（ICAM-1）、E-选择素的表达及其与鼻息肉发生的关系。 方法：选择45例Ⅱ型3期的鼻息肉患者和18例非鼻息肉患者（对照组）进行病例对照研究，应用HE染色、免疫组织化学技术（SP法）观察鼻息肉和正常下鼻甲组织中细胞间粘附分子（ICAM-1）、E-选择素的表达及炎性细胞浸润情况。两组病人均在鼻内镜下手术。试验组行内镜鼻窦手术，切取病人的鼻息肉为标本，以下简称NP；对照组取下鼻甲黏膜。标本取下后立即投进10%中性福尔马林固定24小时，常规梯度脱水、石蜡包埋，切片厚度为4μm。检测E-选择素、ICAM-1均采用SP法，具体操作按试剂盒说明书进行。E-选择素工作浓度为1：100，ICAM-1为即用型；用PBS代替一抗作阴性对照，以胞浆有棕黄色或棕红色颗粒状染色者为阳性细胞。步骤简述如下：切片常规脱蜡至水，3%过氧化氢阻断，枸橼酸微波修复2次各4分钟，37℃封闭30 min。分别滴加抗E-选择素和ICAM-1抗体，37℃孵育30 min，4℃过夜第2d再加二抗和三抗（均孵育30min），DAB显色。显色明显后立即终止染色，苏木素复染，透明，封片。HE染色片上嗜酸性粒细胞以双核、胞浆中含大量桔黄色小颗粒为特征，嗜酸性粒细胞浸润程度用高倍镜下（10×40）任选10个视野平均阳性细胞数来表示。对每个标本随机取10个不同视野，计数网格中的阳性细胞数量，取平均值代表嗜酸性粒细胞的个数，所得结果用t检验做统计学处理。对免疫组化染色结果的判定：用MAIS300图像分析系统对每一张免疫组化切片在20倍下随机选取10个视野，每张切片上、下、左、右、中各取2个视野，对视野内的所有细胞测定灰度值，染色越深灰度值越小，表明阳性越强。结果以灰度值大小表示。对灰度值结果以均数标准差进行组间比较，采用SPSS11.0统计软件进行t检验，观察实验组和对照组中两种粘附分子的表达是否有统计学意义，并对两种粘附分子的表达进行相关性分析。 结果：⑴45例鼻息肉标本中可见炎症细胞大量浸润，包括EOS、浆细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、肥大细胞等，其中EOS浸润尤为明显。鼻息肉组嗜酸性粒细胞计数为10.54±2.3，对照组为2.10±1.39，两者相比有显著性差别（P<0.05）。⑵E-选择素在正常对照组中有弱阳性表达，其灰度值大小为144.25±5，20，而鼻息肉组的表达显著增强，其灰度值大小为134.74±2.64，主要在上皮细胞、炎症细胞、内皮细胞和腺上皮细胞中表达，E-选择素在两组之间的表达相比有显著性差别（P<0.01）。同时将E-选择素在鼻息肉中的表达与嗜酸性粒细胞进行相关性分析，显著相关。⑶ICAM-1在正常对照组的胞浆呈弱阳性表达，其灰度值大小为143.10±2.70，而在鼻息肉表达呈强阳性，其灰度值大小为135.75±3.85，主要表达于鼻息肉粘膜上皮及间质、炎症细胞及血管内皮细胞，ICAM-1在鼻息肉和对照组中的表达相比有显著性差别（P<0.05）。同时将鼻息肉中ICAM-1的表达与嗜酸性粒细胞浸润行相关性分析，示两者显著相关（r=0.62）。 结论：鼻息肉组织中大量嗜酸性粒细胞浸润表明嗜酸性粒细胞在鼻息肉的的发生、发展中发挥重要作用；本研究检测到细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、E-选择素在鼻息肉组织中高表达，且免疫组织化学研究结果表明细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、鼻息肉E-选择素高表达于腺体上皮、血管内皮、间质及浸润炎症细胞，与鼻息肉中嗜酸性粒细胞浸润高度一致，表明对嗜酸性粒细胞等炎症细胞从鼻息肉血管附壁，穿过内皮并迁移至间质整个过程可能都具有重要的作用，从而在鼻息肉的形成过程中具有重要的作用。鼻息肉组中浸润炎症细胞以EOS为主，可能与E-选择素继发促进ICAM-1、VCAM-1等表达有关。 收起