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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 目的:研究眼外肌卫星细胞的体外生长特点;比较其与骨骼肌卫星细胞免疫荧光特性的异同。 方法:采用肌块组织酶原消化法体外分离并原代培养眼外肌卫星细胞和骨骼肌卫星细胞,光镜下动态观察两种细胞的生长变化。免疫荧光法检测肌管及新生纤维标记... 展开 目的:研究眼外肌卫星细胞的体外生长特点;比较其与骨骼肌卫星细胞免疫荧光特性的异同。 方法:采用肌块组织酶原消化法体外分离并原代培养眼外肌卫星细胞和骨骼肌卫星细胞,光镜下动态观察两种细胞的生长变化。免疫荧光法检测肌管及新生纤维标记物(新生型肌球蛋白重链)、肌源性标记物(结蛋白、肌生成素)、肌纤维母细胞标记物(α-平滑肌肌动蛋白)、肌细胞标记物(肌球蛋白轻链)、眼外肌特异性肌球蛋白等5类6种抗体在细胞的染色情况,比较两种细胞免疫荧光特性的异同。 结果:眼外肌卫星细胞与骨骼肌卫星细胞在体外生长和增殖的过程中形态学变化一致:肌纤维种植后第1天起大量析出,1周内培养皿内呈小梭形细胞样贴壁、迅速增殖并呈相互融合趋势,2周后肌纤维旁赘生大细胞团和细胞团外放射状的肌管形成(表现为新生型肌球蛋白重链的染色阳性),并形成三维的网状结构(表现为α-平滑肌肌动蛋白染色阳性)。两种细胞的免疫荧光染色:结蛋白、肌生成素α-平滑肌肌动蛋白、肌球蛋白轻链均表达阳性;眼外肌特异性肌球蛋白抗体的染色结果,在眼外肌卫星细胞表达阳性而骨骼肌卫星细胞表达阴性。 结论:眼外肌卫星细胞可用酶消化法成功提取,其细胞生长的形态学特点与免疫荧光特性与骨骼肌卫星细胞一致。这两种肌源性干细胞都具有体外增殖并向成肌方向定向分化的能力。 收起
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