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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 第一部分:机械通气致急性肺损伤对大鼠肺泡毛细血管膜通透性的影响 目的:比较不同潮气量通气和脂多糖对大鼠肺泡毛细血管膜通透性及支气管肺泡灌洗液内炎性细胞的影响。 方法:将72只大鼠麻醉后随机分为4组,每组18只。A组:对照组,麻醉及气管... 展开 第一部分:机械通气致急性肺损伤对大鼠肺泡毛细血管膜通透性的影响 目的:比较不同潮气量通气和脂多糖对大鼠肺泡毛细血管膜通透性及支气管肺泡灌洗液内炎性细胞的影响。 方法:将72只大鼠麻醉后随机分为4组,每组18只。A组:对照组,麻醉及气管内插管后保留自主呼吸;B组:小潮气量组,VT=7ml/kg,呼吸频率(R)60/min,FiO2=0.21;C组:大潮气量组,VT=25ml/kg,呼吸频率(R)50/min,FiO2=0.21;D组:脂多糖(LPS)组,静脉注射5mg/kgLPS。B、C、D组大鼠分别于机械通气或LPS静脉注射1h、2h和4h随机处死6只,分为亚组,即1h、2h、4h组。A组于麻醉及气管内插管后1h、2h和4h后随机处死6只作为对照。监测各时点(基值0h,1h,2h,4h)体循环平均动脉压(MAP)、pH和PaO2/FiO2值,对肺组织病理切片进行病理形态学评分,测定血管壁通透性,计算肺湿/干重比和肺水含量,支气管肺泡灌洗液中的白细胞进行计数、分类和总蛋白含量测定。 结论:大潮气量机械通气和脂多糖均可成功复制大鼠急性肺损伤模型,均可使肺泡毛细血管膜通透性增加。小潮气量机械通气未造成大鼠明显急性肺损伤病理生理和组织形态学改变,对肺泡毛细血管膜通透性无明显影响。 第二部分:机械通气致急性肺损伤对大鼠肺组织MMPs/TIMPs的影响 目的:比较不同潮气量通气和脂多糖对大鼠肺组织MMP-2/TIMP-2和MMP-9/TIMP-1蛋白以及mRNA表达变化的影响 方法:将72只大鼠随机分为4组,每组18只。除不静注伊万斯蓝外,实验步骤同第一部分。明胶酶谱法检测支气管肺泡灌洗液内MMP-2、MMP-9酶活性,免疫组织化学方法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1蛋白和mRNA在肺组织表达变化。 结论:大潮气量机械通气和LPS作用可使大鼠支气管肺泡灌洗液和肺组织中MMP-2和MMP-9酶活性以及蛋白、mRNA表达增加,TIMP-1和TIMP-2蛋白和mRNA表达无明显影响。MMP-2和MMP-9过度激活和表达以及MMPs/TIMPs的失衡参与了肺损伤的病理生理过程。 第三部分:机械通气致急性肺损伤大鼠肺组织EMMPRIN表达变化以及三羟异黄酮对VILI的保护作用 目的:比较脂多糖和不同潮气量通气对大鼠肺组织EMMPRIN蛋白以及mRNA表达变化的影响,观察三羟异黄酮(Genistein)对大潮气量通气和脂多糖致肺损伤的保护作用。 方法:在第一部分动物模型制备和分组基础上,增加三羟异黄酮预处理两组:C+G组:三羟异黄酮预处理+大潮气量通气;D+G组:三羟异黄酮预处理+LPS。免疫组织化学方法和RT-PCR观察EMMPRIN、MMP-2、MMP-9蛋白和mRNA在肺组织中表达变化。监测各组各时点(基值0h,1h,2h,4h)MAP、pH和PaO2/FiO2值,对肺组织病理切片进行病理形态学评分,支气管肺泡灌洗液中的白细胞进行计数、分类和总蛋白含量以及MMP-2、MMP-9酶活性测定。 结论:机械通气和脂多糖致急性肺损伤大鼠肺组织EMMPRINmRNA表达升高先于MMP-2及MMP-9mRNA表达升高。EMMPRIN在肺的损害中对MMP的激活及释放起了重要的作用。三羟异黄酮预处理可减轻机械通气和脂多糖致急性肺损伤大鼠肺组织的损害,降低MMP-2和MMP-9在肺组织的表达。 收起
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