摘要: 该课题的研究内容包括以下四个部分:第一部分:人CD154基因克隆、在大肠杆菌中的表达和单克隆抗体的制备;第二部分:人CD154基因真核表达载体的构建、表达和基因免疫制备抗人CD154单克隆抗体.第三部分:抗人CD154单克隆抗体抑制免疫应答的实验研究;第四部... 展开 该课题的研究内容包括以下四个部分:第一部分:人CD154基因克隆、在大肠杆菌中的表达和单克隆抗体的制备;第二部分:人CD154基因真核表达载体的构建、表达和基因免疫制备抗人CD154单克隆抗体.第三部分:抗人CD154单克隆抗体抑制免疫应答的实验研究;第四部分:抗人CD154基因工程单链抗体的构建.小结;该文研究在国内首次克隆到人CD154基因,并在大肠杆菌得到表达,采用人GST-hCD154融合蛋白作免疫原制备抗人CD154单克隆抗体.为真核表达产物的鉴定奠定了基础.该文研究成功构建含有人CD154基因的真核表达质粒并在CHO细胞得到表达;在国内外首次采用DNA免疫研制了CD154单克隆抗体,可以有效避开大量分离纯化抗原,并且所得到的抗体可以针对天然抗原,为抗人CD154抗体的功能研究提供了物质基础.用该研究研制的抗人CD154单克隆抗体,进行抑制免疫应答作用的实验研究,结果显示:在体外实验中,此抗体可以抑制淋巴细胞增殖;在SCID鼠体内重建人的免疫功能后进行研究,结果显示,抗人CD154单克隆抗体可以抑制人IgG的产生,提示所研制的抗人CD154单克隆抗体能够抑制免疫反应,为应用于临床打下了基础.该研究在国内外首次构建人CD154基因工程单抗体,使抗人CD154单抗应用于人体内治疗成为可能,为特异性抑制免疫反应的临床应用奠定了基础. 收起