摘要: 生长激素(Growth Hormone，GH)是由脑垂体前叶嗜酸性细胞分泌的一种分子量为22000U的单一肽链的蛋白质激素。GH的基本生理功能是刺激所有机体组织的发育，增加体细胞的体积和数目，它影响几乎所有的组织类型，包括骨、软骨、脂肪组织、免疫系统和生殖... 展开 生长激素(Growth Hormone，GH)是由脑垂体前叶嗜酸性细胞分泌的一种分子量为22000U的单一肽链的蛋白质激素。GH的基本生理功能是刺激所有机体组织的发育，增加体细胞的体积和数目，它影响几乎所有的组织类型，包括骨、软骨、脂肪组织、免疫系统和生殖系统，各器官在GH的影响下生长变大，骨骼增长导致人体的增高，对脑组织和造血系统也有作用。GH同时也具备其他功能，如对蛋白代谢及机体组织构成具有急性或慢性的效应，调节体液平衡、碳水化合物及脂类代谢等。蛋白质合成与分解的平衡决定了机体的蛋白平衡。在生理、病理状态下这种平衡也可通过一些非激素因素而发生一系列改变，例如营养状态、感染等。 自1989年由瑞士Serono公司研制重组人生长激素(rhGH)成功以来，已广泛应用于GH缺乏症的病人，同时研究也证实GH在围手术期能增进机体免疫、增加蛋白合成及改善营养方面的作用。通过减缓机体蛋白及总体细胞群的丢失，GH的临床应用已使不少处于负氮平衡的非肿瘤病人度过难关。 临床上，蛋白-营养不良及严重的负氮平衡极大的阻碍了肿瘤病人的疗效并增加了患者的病死率，此时机体氮平衡的改善显得更为迫切。但顾虑到GH对肿瘤细胞的促增殖效应，在治疗上扩大GH到肿瘤病人的应用仍受到极大的限制，尽管目前对GH潜在刺激肿瘤细胞的作用还存在很大争议，对于肿瘤个体，研究显示外源性GH可延缓机体总蛋白及细胞群的丢失，改善营养，增加瘦体重，增强化疗效果及降低化疗毒性，增进细胞及体液免疫功能，减轻恶病质从而最终使宿主受益。从这个意义上来说，GH可在一定程度上减少肿瘤患者的病死率。但作为有丝分裂原的GH有可能促进组织中的细胞更新而增加了某些细胞的恶性转化素质，对肿瘤细胞也可能加剧其恶性生物学行为。有鉴于该原因，多数临床医师仍坚持认为，对GH应用于肿瘤病人这一问题必须相当谨慎。综合近年来的研究结果，关于GH对肿瘤发生发展的影响这一课题，目前仍有许多亟待解决的问题，具体表现在：1)“GH对肿瘤是否具有促增殖作用”这一命题可能因肿瘤病理类型、研究方法、观察时间的不同而结果各异；2)前瞻性研究仍然缺乏；3)体内外实验的差异，动物实验与临床实验的差异等；4)在作用机制上仍缺乏系统研究；5)流行病学调查的质量：在病例选择上，应注意儿童有无肿瘤高危因素，成人有无足够的随访时间，病人是否为同一中心资料以及GH治疗的剂量、应用时间、疗效的个体差异等偏差。 有鉴于此，我们以胆管癌细胞和胰腺癌细胞作为研究对象作一系列体外研究，观察外源性GH对两株癌细胞增殖的影响，并以流式细胞技术观测GH作用下的细胞周期动力学特征；以安慰剂为对照，对肿瘤细胞分泌的IGF1/2量以ELISA法检测，同时将细胞爬片、固定后，用原位杂交法检测IGF1/2RmRNA的表达，首次从蛋白基因的角度，对GH作用于胆、胰癌细胞的可能机制作出初步阐明。具体的研究内容及结果如下： 一、 GH对胆、胰癌细胞株增殖和细胞周期动力学的影响体外培养胆管癌细胞株QBC939和胰腺癌细胞株BXPC-3至指数生长期，加入不同剂量的GH(终浓度为50ng/ml和100ng/ml)，继续培养2h、24h后分别细胞计数，观察细胞生长曲线的变化及生长周期，发现外源性GH能促进细胞增殖、提高S期细胞百分率及增殖指数(PI)，但与剂量无显著关系。 二、GH对肿瘤细胞分泌IGFs的影响及IGFsRmRNA表达的影响体外培养胆管癌细胞株QBC939和胰腺癌细胞株BXPC-3至指数生长期，加入不同剂量的GH(终浓度为50ng/ml和100ng/ml)，分别继续培养2h、24h后吸取其上清液离心，以ELISA法检测IGFs浓度，同时将分组的胆管癌株QBC939和胰腺癌细胞株BXPC-3爬片、固定后，用原位杂交法检测IGF1/2RmRNA的表达。 研究得出以下结论：GH在体外作用于QBC939细胞和BXPC-3细胞，能促进细胞增殖，使处于DNA合成期的细胞增多；GH能促进肿瘤细胞IGF1的分泌增强，IGF2则否。IGFsRmRNA在肿瘤细胞中呈阳性表达，但只有IGFlRmRNA的表达受GH影响，说明GH．IGFl轴是GH促进肿瘤细胞增殖的可能机制之一。 收起