中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 关红艳广西大学 2010年硕士导师: 杨洋共71页

摘要 : 本文以猪骨为原料,将其制成骨粉,然后进行酶解并对其酶解产物进行抗氧化分析,同时对酶解液中氨基酸含量进行分析。分别采用高温高压蒸煮和化学试剂脱脂脱钙等方法进行处理制成骨粉,经试验证明最佳工艺为:高温高压(121℃,1kpa)蒸煮2小时,趁热脱去... 展开本文以猪骨为原料,将其制成骨粉,然后进行酶解并对其酶解产物进行抗氧化分析,同时对酶解液中氨基酸含量进行分析。分别采用高温高压蒸煮和化学试剂脱脂脱钙等方法进行处理制成骨粉,经试验证明最佳工艺为:高温高压(121℃,1kpa)蒸煮2小时,趁热脱去脂肪,经水洗、烘干、粉碎制得骨粉,蛋白质含量为24.9%。单酶水解实验。采用中性、碱性、风味、复合蛋白酶以及木瓜蛋白酶五种酶分别对猪骨蛋白进行酶解,以温度、pH值、加酶量、料液比以及酶解时间为单因素,确定各单酶水解的最佳酶解条件,其中碱性蛋白酶水解度最高,最大水解度为23.02%。响应面优化实验。在单酶水解的基础上选取碱性蛋白酶为最佳用酶,以单因素实验为基础,选取温度、加酶量、底物浓度以及酶解时间作为4个因素进行响应面的优化实验,利用Desin Expert软件获得了水解度最高时的各个因素的最佳水解条件为:水解温度51℃、料液比7%、加酶量为5000u/g,酶解时间为5h,理论水解度为23.72%。且该模型具有较好的重复性。双酶分步水解实验。在单酶酶解的基础上,采用中性、碱性、木瓜、复合蛋白酶分别与风味蛋白酶组合进行双酶分步水解,评价其水解效果,确定双酶分步水解可大大提高水解度。其中用内切的碱性蛋白酶和外切的风味蛋白酶组合作用效果最好,先用碱性蛋白酶加酶量为5000u/g,在其最适条件下水解4h,之后再以5000u/g的加酶量加入风味酶进行水解,并且使水解条件保持在风味酶的最适酶解条件,其水解度达到36.9%,且反应过程中不需要调整pH值。猪骨蛋白酶解液的抗氧化实验。本文对猪骨蛋白酶解液的抗氧化性进行了研究,结果表明猪骨蛋白酶解液具有很好的抗氧化性。猪骨蛋白酶解液的还原力和对O2-的清除效果不是很明显,效果均不如Vc和BHT。但猪骨蛋白水解液对OH·自由基及DPPH自由基具有很好的清除效果,酶解液浓度与OH·清除率之间呈正相关,最高清除率达到94.53%,且当浓度为160-40mg/ml时,酶解液对OH·的清除率均优于Vc和BHT。随着酶解液浓度的增大,其对DPPH清除率也逐渐增加,当酶解液浓度为160mg/ml时,对DPPH的清除率达到93.49%。猪骨蛋白酶解液中氨基酸含量丰富且比例合适,符合人体的氨基酸理想模式,可以作为很好的氨基酸食品添加剂。收起

关键词 : 猪骨蛋白酶解反应功能特性酶解产物

2. 红麻微生物脱胶过程中酶及酶解产物的研究

[学位论文] 杨礼富中国农业科学研究院 1999年硕士导师: 刘正初共42页

摘要 : 该文采用一株多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa,编号T1163)对红麻干皮、鲜皮和鲜茎在振荡、静置两种脱胶体系中酶和酶解产物的动态变化规律进行了研究.

关键词 : 红麻脱胶酶酶解产物

3. 壳聚糖酶解及降解产物的分析与应用

[学位论文] 李燕天津科技大学 2018年硕士导师: 赵华共60页

摘要 : 壳聚糖及其降解产物具有无毒性、生物相容性和生物可降解性等优良特性，在食品、农业、环境、组织工程和生物医药等方面有着广泛的应用。目前壳聚糖专一性酶大多数属于诱导酶，基因表达大多受阻遏物/诱导物系统控制，降解产物为阻遏物，限制壳聚糖的酶... 展开

关键词 : 壳聚糖发酵工艺酶解产物降解产物

4. 鲢鱼酶解产物在冷冻鱼糜中的抗冻机理及其应用

[学位论文] 周文娟长沙理工大学 2019年硕士导师: 刘永乐共68页

摘要 : 鲢鱼作为我国的四大家鱼之一，营养价值高，但是其肌间刺多，土腥味重，所以通常加工成鱼糜重组制品。鱼糜重组制品中通常加入蛋白和淀粉，能够增加鱼糜制品的凝胶强度，而且能够降低鱼糜制品的成本。为了鱼糜重组制品缓解冷冻变性，通常在鱼糜中加入... 展开鲢鱼作为我国的四大家鱼之一，营养价值高，但是其肌间刺多，土腥味重，所以通常加工成鱼糜重组制品。鱼糜重组制品中通常加入蛋白和淀粉，能够增加鱼糜制品的凝胶强度，而且能够降低鱼糜制品的成本。为了鱼糜重组制品缓解冷冻变性，通常在鱼糜中加入抗冻剂，商业抗冻剂带有一定的甜昧，不符合现代饮食习惯，所以寻求新的抗冻剂是非常必要的。本课题以鲢鱼为原料，通过测定持水率、蒸煮损失、凝胶强度等，探究大豆分离蛋白、木薯淀粉以及转谷氨酰胺酶的添加量。利用本课题组前期研究的酶解产物加到鱼糜中，以6次冻融循环的凝胶强度、风味物质等变化为指标，探究最佳抗冻效果的抗冻剂。最后，研究酶解产物的抗冻机理。具体的研究结果如下: (1)将大豆分离蛋白、木薯淀粉以及转谷氨酰胺酶添加到鲢鱼鱼糜中，通过凝胶强度、持水性、蒸煮损失等，确定了大豆分离蛋白的添加量为鱼糜质量的9％，木薯淀粉为6％，转谷氨酰胺酶为4U/g蛋白。将添加组与未添加组组进行冻融循环的水分分布以及状态和微观结构分析，表明添加组的A23在6次冻融后，降低了11％，未添加组降低了25％:添加组的在6次冻融后微观结构仍保持高度的交联，而未添加组的在3次冻融后，三维网状结构被破坏。 (2)在最适添加辅料的基础上，研究了在冻融循环过程中抗冻剂对鱼糜相关特性的研究。结果显示，随着冻融次数的增加，所有实验组的白度值呈下降趋势，空白组的白度高于酶解产物组和商抗组:空白组的凝胶强度降低了31.8％，商抗组降低了17.0％，2％酶解产物组降低了11.2％;电子鼻的传感器在冻融循环过程主要对硫化物、氮氧化物灵敏度大，对芳香成分、有机硫化物和甲烷较为灵敏，且2％酶解产物组在冻融循环过程中响应值的变化最小;6次冻融后，添加2％酶解产物的A23、A24分别为81.0％和13.3‰空白组的为80.3％和18.0％，商抗组的为80.2％和15.4％。 (3)将2％酶解产物和商业抗冻剂做对比，研究在冻融循环过程中酶解产物对鱼糜的相关特性的影响。结果表明:鱼糜凝胶在冻融过程中A23随着冻融次数减小，A24增加。2％酶解产物组在0次冻融时的A23为93.47％，A24为3.98％，而商抗组的A23为91.58％，A24为6.17，在6次冻融循环时，同样2％酶解产物组的A23要高于商抗组，A24要低于商抗组;2％酶解产物组的鱼糜凝胶在6次冻融时凝胶网状结构明显:商业抗冻剂表面出现孔洞，凝胶网状结构不明显;在低温显微镜下观察到，蔗糖溶液保持20min后，小冰晶不断融合在一起使冰晶增大，酶解产物组，冰晶更小且数量更少，保持20min后，冰晶的大小变化较小。分离纯化后＜3kDa的组分在低温过程中，形成了较其他两组分更小、更均匀的冰晶，冰晶的形态也更加规律。收起

关键词 : 鱼糜抗冻剂酶解产物抗冻机理

5. Pseudoalteromonas sp.AJ5-913的κ-卡拉胶酶酶学性质及酶解产物分析

[学位论文] 马悦欣中国海洋大学 2008年博士导师: 董双林;江晓路共114页

摘要 : 本论文目的是从海洋环境筛选高活性的κ-卡拉胶酶产生菌株，对筛选菌株的产酶培养条件和培养基进行优化，在此基础上对该菌株进行诱变以提高其酶活力，纯化其κ-卡拉胶酶，并研究该酶的酶学性质，利用此酶制备κ-卡拉胶寡糖，并对其酶解产物的组成和结... 展开本论文目的是从海洋环境筛选高活性的κ-卡拉胶酶产生菌株，对筛选菌株的产酶培养条件和培养基进行优化，在此基础上对该菌株进行诱变以提高其酶活力，纯化其κ-卡拉胶酶，并研究该酶的酶学性质，利用此酶制备κ-卡拉胶寡糖，并对其酶解产物的组成和结构进行分析，为κ-卡拉胶酶酶制剂和κ-卡拉胶寡糖的工业化生产提供理论和技术支撑。通过富集培养技术、初筛和复筛方法从多种海藻和刺参肠道筛选出33株具有κ-卡拉胶降解活性的菌株，其中从刺参肠道筛选出的AJ5菌株产酶活力最高，为1.274 U/mL。依据形态学和生理学特征及16S rRNA基因序列分析，将该菌株鉴定为假交替单胞菌属(Pseudoaltetromonas)，通过比较发现该菌株与已报道该属中的惟一一种产κ-卡拉胶酶菌P.carrageenovora有多种生理生化特征不同。通过单因素试验和正交试验对Pseudoal teromonas sp.AJ5菌株产胞外κ-卡拉胶酶的培养条件进行了优化。实验确定Pseudoalteromonas sp.AJ5菌株的最佳培养条件为：250mL三角瓶装入75 mL发酵培养基、摇床转速150 r/min、接种量7％、pH8.0、培养温度28℃：最佳培养基组成为：κ-卡拉胶1 g/L、牛肉膏2 g/L、NaCl 20g/L、K2HPO4·3H2O l g/L、MgSO4·7H2O 0.5 g/L、MnCl2·4H2O 0.2 g/L、FePO4·4H2O 0.01 g/L。以Pseudoal teromonas sp.AJ5菌株为出发菌株，经紫外线、甲基磺酸乙酯复合诱变和自然选育，获得一株酶活力显著提高的突变株Pseudoal teromonas sp.AJ5-913，发酵产酶活力达6.788 U/mL，比优化前提高了2.9倍。对该突变株进行液体发酵制备出κ-卡拉胶酶酶液，通过30％-80％硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-200凝胶过滤层析和CM-纤维素52阳离子交换层析技术对κ-卡拉胶酶进行纯化和精制，获得电泳纯度的酶蛋白组份，SDS--PAGE确定此κ-卡拉胶酶的分子量为35 kDa。采用Edman降解法测得该酶的N端氨基酸序列为NPTCHIAKPGETTILQECRS，通过与已报道细菌κ-卡拉胶酶的N-末端氨基酸序列比较，没有发现与该酶同样的N-末端氨基酸序列，初步确定为一新κ-卡拉胶酶。采用等电聚焦电泳测得该酶的等电点pI为8.5。通过对该酶酶学性质研究，确定该酶反应的最适pH范围为8，且酶活力在pH6.6-8.6范围内比较稳定，最适温度为55℃，酶活力在28℃下稳定，但经50℃-75℃处理30min，95％的酶活力丧失，最适NaCl浓度50 mmol/L，金属离子Zn2+，Co2+和Cu2+几乎完全抑制酶的活性。动力学参数测定结果表明，AJ5-913菌株的κ-卡拉胶酶水解κ-卡拉胶符合米氏动力学方程，采用双倒数法作图法求得其米氏常数Km值为9.8±0.2 mg/mL。AJ5-913菌株的κ-卡拉胶酶专门水解κ-卡拉胶，对τ-和λ-卡拉胶和琼脂糖没有水解作用。利用AJ5-913菌株所产的κ-卡拉胶酶对κ-卡拉胶进行酶解制备κ-卡拉胶寡糖，通过电喷雾离子化飞行时间质谱(ESI-TOF-MS)和。13C-NMR分析该酶的水解产物，确定该κ-卡拉胶酶专门水解κ-卡拉胶3，6-内醚-D-半乳糖残基和4-硫酸基-D-半乳糖之间的B-1，4糖苷键，产生3，6-内醚-D-半乳糖作为非还原端，D-半乳糖作为还原端的κ-新卡拉寡糖，主要产物是κ-新卡拉二糖硫酸盐、κ-新卡拉四糖硫酸盐、κ-新卡拉六糖硫酸盐、κ-新卡拉八糖硫酸盐和κ-新卡拉十糖硫酸盐，与已报道细菌的κ-卡拉胶酶的酶解产物有所不同。寡糖的抗病毒活性实验显示，3.12μg/mL-200μg/mL的κ-新卡拉寡糖对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的吸附有抑制作用，并且呈现明显的量效关系，表明κ-新卡拉寡糖可干扰HSV-1毒株向Vero细胞的吸附。收起

关键词 : &kappa -卡拉胶酶酶学性质酶解产物

6. 蛋清白蛋白肽生产工艺的研究

[学位论文] 郑云北京化工大学 2006年硕士导师: 蔡木易;谭天伟共60页

摘要 : 本课题对蛋清白蛋白酶解产物的研制工艺条件、产品的理化性质进行了全面深入的研究。 1.利用中性蛋白酶、碱性蛋白和酸性蛋白酶对蛋清白蛋白进行水解，在相同的条件下筛选出符合本实验的最佳用酶，然后通过正交试验确定了这种酶水解的最佳工艺条... 展开

关键词 : 蛋清蛋白肽酶解产物保健食品

7. 花生粕蛋白酶解条件及酶解产物的研究

[学位论文] 宋春辉中国海洋大学 2020年硕士导师: 张莉共97页

摘要 : 花生粕(Peanutmeal，PM)，又称脱脂花生粕(Defattedpeanutmeal，DPM)，是花生榨油过程中的主要副产物，其中蛋白含量约占50%。花生蛋白中富含微量营养素与必需氨基酸，是一种极为有益的蛋白来源。我国每年的花生粕产量达千万吨，其中大部分被用作饲料... 展开花生粕(Peanutmeal，PM)，又称脱脂花生粕(Defattedpeanutmeal，DPM)，是花生榨油过程中的主要副产物，其中蛋白含量约占50%。花生蛋白中富含微量营养素与必需氨基酸，是一种极为有益的蛋白来源。我国每年的花生粕产量达千万吨，其中大部分被用作饲料或者肥料，导致大量蛋白质资源被浪费。酶解是一种反应温和、易于控制、成本低廉的技术。以花生粕为原料，本研究探究了三种蛋白酶的酶解条件，并对酶解产物的理化性质、生物活性与反应过程中的风味变化进行了测定。以蛋白水解度与回收率为指标，探究了三种蛋白酶——GA(杰能科碱性蛋白酶)、GN(杰能科中性蛋白酶)、Protamex的酶解效果。不同酶的酶解效果表现出明显的差异。三种蛋白酶的反应体系在酶添加量为6000U/g花生粕，反应时间8h的条件下表现出了较好的水解度与蛋白回收率。此时，水解度到达60%左右，蛋白回收率在70%左右。测定了三种酶解产物的分子量分布、游离氨基酸含量、溶解度、乳化性与乳化稳定性、游离巯基含量、二硫键含量以及Zeta电位，并就其中的某些性质与花生、花生粕做了对比。结果显示，长时间酶解使花生粕的分子量明显降低，分子量集中分布于200-3000Da的区间内，疏水性氨基酸与必需氨基酸含量增加。相比于花生与花生粕，酶解产物具有更低的等电点，更好的溶解度、乳化性与乳化稳定性：三种酶解产物之间溶解度相差不大，GN酶解产物表现出最好的乳化性与乳化稳定性。可能因为溶解度的问题，花生粕中的游离巯基与二硫键含量较低。相比于花生蛋白，酶解产物的二硫键含量明显增加。Zeta电位的绝对值低于花生粕蛋白，意味着相应蛋白溶液的稳定性可能下降；但是酶解产物的等电点也出现了明显下降，意味着酶解产物在更广泛的范围内具有更好的溶解度。使用电子鼻系统、电子舌系统、气相离子迁移谱联用(GC-IMS)技术测定了酶解过程中的气味、酶解液味道与挥发性有机化合物(VOCs)的变化。结果显示，在反应的4-6h会发生气味突变，不同酶解过程的气味变化情况不同。反应过程中，占优势的气味组分主要是硫化物类，甾醇类，三萜类，萜类、酯类，芳香族化合物类等；在气味变化中增加的组分主要是胺类，芳香族化合物类，脂肪烃含氧衍生物类，有机酸酯和萜类等。在味道上，涩味与苦味在GA与Protamex的酶解液中更为强烈，鲜味，酸味与咸味在GN的酶解液中更为强烈。挥发性有机化合物的成分明显变化发生在第300min时，2-戊酮、2-庚酮、罗勒烯、丙酸乙酯等成分的含量升高。测定了三种酶解产物的抑菌能力与体外抗氧化活性。三者都没有表现出明显的抑制细菌生长的能力；但是GA酶解产物能在35mg/mL与75mg/mL的浓度下表现出抑制扩展青霉孢子萌发的能力。GA酶解产物表现出最好的抗氧化活性，其次是GN与Protamex酶解产物；与维生素C与没食子酸丙酯(PG)相比，三种酶解产物的抗氧化能力主要表现为DPPH自由基清除活性与亚铁离子螯合活性，还原能力较差。对不同分子量级分的对比显示，Mwlt;3kDa的级分具有更好的还原能力与亚铁离子螯合活性，Mwgt;3kDa的级分具有更好的DPPH自由基清除活性。不同级分的差异可以用来生产具有特定活性的多肽产物。本文探索了使用蛋白酶酶解花生粕制备花生多肽的条件，并对所得到的产物进行了理化性质分析，跟踪了酶解过程中的风味变化，为花生粕的高值化利用提供了可供选择的思路。收起

关键词 : 花生粕酶解技术蛋白酶酶解产物理化性质生物活性风味变化

8. 菜籽多糖的酶解及其酶解产物对益生菌增殖作用研究

[学位论文] 王霄合肥工业大学 2015年硕士导师: 孙汉巨共71页

摘要 : 本文研究了菜籽多糖的酶解及其酶解片段的结构，并考察了其对肠道益生菌的体外增殖作用。在筛选最佳修饰酶之后，以从菜籽中提取纯化所得到两种菜籽多糖组分(RP-1和RP-2)为研究对象，通过单因素试验和正交试验，研究了多糖组分的最佳酶解工艺条件;在最... 展开本文研究了菜籽多糖的酶解及其酶解片段的结构，并考察了其对肠道益生菌的体外增殖作用。在筛选最佳修饰酶之后，以从菜籽中提取纯化所得到两种菜籽多糖组分(RP-1和RP-2)为研究对象，通过单因素试验和正交试验，研究了多糖组分的最佳酶解工艺条件;在最佳酶解工艺条件下，酶解后的菜籽多糖经Sephadex G-50柱层析分离纯化，得到两个多糖酶解片段(D RP-1和DRP-2)，同时分析了两者的化学组成和基本结构;考察了菜籽多糖及多糖酶解片段在体外对肠道益生菌的增殖作用及其对益生菌发酵产生短链脂肪酸的影响。主要研究内容及结果如下: 1.菜籽多糖酶解工艺研究。首先，以菜籽为原料，提取纯化得到两种菜籽多糖组分(RP1和RP2)。筛选最佳酶解工具酶，得到纤维素酶对菜籽多糖的修饰效果最佳。通过单因素试验和正交试验分析，得到多糖酶解的最佳工艺条件是:纤维素酶浓度150 U/mL，反应温度50℃，反应pH5。在最优酶解条件下，用纤维素酶酶解RP-1和RP-2，经Sephadex-G50分离纯化，分别得到DRP-1和DRP-2。 2.菜籽多糖及其酶解片段的化学组成和基本结构研究。HPLC分析表明RP-1、DRP-1、RP-2和DRP-2都是相对均一的多糖组分，四者的分子量分别为52485、7184、11908和5526 Da，表明酶解修饰使多糖的分子量减小。紫外吸收光谱图显示RP-1、DRP-1、RP-2和DRP-2均不含核酸。RP-1和RP-2含有蛋白质，而DRP-1和DRP-2不含蛋白质。气相色谱分析表明，RP-1、DRP-1、RP-2和DRP-2均主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成。四种多糖中鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖的摩尔百分含量分别如下:RP-1为1.98、25.32、4.26、6.87、56.31和5.26％; RP2为3.32、48.69、4.98、32.24、8.41和2.63％; DRP-1为2.14、15.67、5.68、3.68、65.24％和7.59％; DRP-2为5.24、35.47、2.69、38.69、12.24和5.67％。经测定，RP-1的总糖、蛋白质、糖醛酸及硫酸根含量分别为68.23、13.26、8.85和9.66％; RP-2中四者的含量分别65.84、19.10、4.90及10.16％。DRP-1的总糖、糖醛酸及硫酸根含量分别为81.40、6.38和12.22％;DRP-2中三者的含量分别为78.43、10.20及11.37％。 3.菜籽多糖及其酶解片段对肠道益生菌的体外增殖作用研究。通过体外培养的方法，以培养基的OD值和pH值为评价指标，研究了菜籽多糖（RP-1和RP-2）及其酶解产物（DRP-1和DRP-2）对青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、两歧双歧杆菌和嗜酸乳杆菌的增殖作用。结果表明RP-1、RP-2、DRP-1和DRP-2对四种菌株均有明显的增殖作用，菜籽多糖酶解片段较菜籽多糖的增殖效果更为明显。RP-1、RP-2、DRP-1和DRP-2对益生菌增殖的最佳浓度在1.5～2％(W/V)，超过这一浓度时，益生菌数量不再增加，甚至出现下降。在益生菌培养过程中，伴随着益生菌数目的增加，培养基的pH值相应降低，说明RP-1、RP-2、DRP-1和DRP-2均可以被益生菌代谢利用，产生有机酸。添加菜籽多糖酶解片段相对于添加菜籽多糖的培养基pH降低更为明显。从生长曲线可以看出，在添加菜籽多糖的培养基中，益生菌培养24～32 h达到稳定期，而在添加菜籽多糖酶解片段的培养基中16～24 h即可达到稳定期。以上结果均表明，菜籽多糖酶解片段比菜籽多糖更容易被益生菌所利用，对益生菌的增殖效果更为明显，因而具有更好的益生元效应。 4.菜籽多糖及其酶解片段对益生菌发酵产生短链脂肪酸的影响。通过体外培养的方法，考察菜籽多糖（RP-1和RP-2）及其酶解片段（DRP-1和DRP-2）对益生菌发酵产生短链脂肪酸的影响。研究表明:(1)三种双歧杆菌发酵产生乙酸、丙酸、丁酸和乳酸，其中主要为乙酸和乳酸，以乙酸最多;嗜酸乳杆菌发酵产生乙酸、丙酸和乳酸，其中主要为乙酸和乳酸，尤以乳酸最多。(2)菜籽多糖及其酶解片段均可增加益生菌发酵产生的短链脂肪酸量，但菜籽多糖酶解片段经发酵后产生的短链脂肪短含量比菜籽多糖高。这些结果证明了菜籽多糖酶解产物具有更好的益生元效应。收起

关键词 : 菜籽多糖酶解工艺酶解产物肠道益生菌体外增殖作用

9. 仙茅多糖酶解产物的分离纯化及结构分析

[学位论文] 杨玲贵州大学 2019年硕士导师: 杨娟共74页

摘要 : 仙茅为石蒜科植物仙茅Curculigo orchioidesGaertn的根茎，具有补肾助阳、益精血、强筋骨的作用，主要用于肾阳不足、虚痨内伤和筋骨疼痛等病症。仙茅多糖能激活小鼠腹腔巨噬细胞分泌细胞因子。研究表明多糖是通过其特异性寡聚糖片段与受体结合从而介... 展开仙茅为石蒜科植物仙茅Curculigo orchioidesGaertn的根茎，具有补肾助阳、益精血、强筋骨的作用，主要用于肾阳不足、虚痨内伤和筋骨疼痛等病症。仙茅多糖能激活小鼠腹腔巨噬细胞分泌细胞因子。研究表明多糖是通过其特异性寡聚糖片段与受体结合从而介导免疫反应的。将仙茅多糖降解成适宜的、低分子量的寡糖片段，不仅对探讨仙茅多糖功能效应及作用机制有着重要意义，还能使多糖结构更为清晰。课题组前期对仙茅多糖酶解产物进行初步的体外免疫活性筛选，得到具有免疫活性的酶解混合物。本论文对具有免疫活性的仙茅多糖酶解产物进行分离纯化，得到具有活性的寡糖组分，主要结果如下： 1.利用DEAE-纤维素和Sephadex G-50凝胶柱层析对仙茅粗多糖进行分离纯化，得到仙茅纯多糖X-2，糖含量为84%。HP LC-PMP法测定X-2单糖组成由Man和Glc组成，摩尔比为Man∶Glc=17∶1。 2.仙茅纯多糖X-2用葡聚糖酶：酶添加量50%、温度为52℃、时间5h、pH6.0的条件下进行酶解，脱盐后用Sephadex LH-20凝胶柱层析分离纯化，主要得到XP1～XP5五个组分。X-2酶解混合物、XP4、XP3单糖组成均为Man和Glc，摩尔比分别为：Man∶Glc=9∶1、2∶1、6:1。质谱、甲基化及GC-MS、1D和2D NMR分析，表明XP5为单糖、XP4结构为[α-Glc-(1→6)-α-Man]的二糖、XP3结构为[α-Man-(1→4)-α-Glc-(1→6)-α-Man]的三糖。原子力显微镜（AFM）观测到X-2是无规则排列的细丝状的分型结构的单分子链，与X-2相比，其酶解产物，各聚合物链分子间未互相缠绕，呈现团状的细丝分型结构，也是无规则、多分枝的单分子链。 3.仙茅纯多糖X-2、酶解混合物XP，寡糖XP1～XP5进行体外免疫活性分析，通过刺激巨噬细胞分泌细胞因子TN F-α、IL-1、I L-2的结果可知。X-2、酶解混合物XP以及寡糖XP1～XP5均能显著诱导巨噬细胞分泌TNF-α，并存在剂量依赖关系，寡糖的诱导能力均低于X-2，其中高、中剂量多数呈现极显著性差异。X-2及其酶解产物均能刺激巨噬细RAW264.7分泌白细胞介素I L-1和I L-2，其中寡糖XP3的高剂量组呈现显著性差异，并且XP3诱导巨噬细胞分泌IL-1能力高于X-2。综合分析，发现寡糖XP3的免疫活性较好。收起

关键词 : 仙茅多糖酶解产物分离纯化免疫活性

10. 猪皮酸解和酶解产物的制备及其抗氧化活性的研究

[学位论文] 陈霞中国农业大学 2007年硕士导师: 戴瑞彤;马长伟共48页

摘要 : 本研究以天然胶原蛋白含量较为丰富的猪皮为原料，用稀酸和胃蛋白酶分别对猪皮胶原蛋白进行降解，用硫氰酸铁法和硫代巴比妥酸反应生成物法测定降解产物的抗氧化活性，筛选出最佳降解条件。因为天然胶原蛋白具有十分稳定的结构，不溶于水和稀酸，所以... 展开

关键词 : 猪皮胶原蛋白酸解产物酶解产物抗氧化活性