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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 第一部分SYB对肝癌细胞增殖的影响 目的:研究红花黄色素B(saffloweryellowB,红花黄色素B)对肝癌细胞生长增殖能力的影响。 方法:使用不同浓度SYB作用于HepG2(Humanhepatoellularcarcinomas,人肝癌细胞)后,利用细胞计数试剂盒-8(CCK-8... 展开 第一部分SYB对肝癌细胞增殖的影响 目的:研究红花黄色素B(saffloweryellowB,红花黄色素B)对肝癌细胞生长增殖能力的影响。 方法:使用不同浓度SYB作用于HepG2(Humanhepatoellularcarcinomas,人肝癌细胞)后,利用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验方法检测细胞增殖情况。分别将终浓度0、50、100、150、200nmol/mlSYB加入HepG2细胞中,培养12h、24h、36h和48h不等。并利用CCK-8检测细胞增殖情况。 结果:SYB作用于肝癌细胞系HepG2后,随着作用浓度及作用时间不同,抑制细胞增殖能力也会发生相应变化。统计学结果显示:在SYB浓度在0nmol/ml、50nmol/ml、100nmol/ml、150nmol/ml、200nmol/ml时与对照组相比较HepG2细胞增殖能力均受到抑制,且p<0.05具有显著统计学差异,其中,SYB浓度为150nmol/ml、36h时,HepG2细胞的增殖能力受到抑制最明显。基于以上浓度测定实验,发现SYB最佳抑制浓度为150nmol/ml、最佳抑制时间为36h。 结论:1.SYB可以抑制肝癌细胞系HepG2的增殖能力。 2.不同浓度的SYB对HepG2的增殖能力均有抑制作用。 3.当SYB浓度为150nmol/ml,作用时间36h时,抑制HepG2细胞增殖能力最显著,从而确定下一步实验的SYB浓度。 第二部分SYB作用于肝癌细胞系HepG2后,检测抑癌基因miR-133b的表达 目的:SYB作用于HepG2细胞后,提取总RNA后,对抑癌基因miR-133b(MicroRNA-133b,微小RNA-133b片段)片段表达情况进行研究分析。 方法:使用最佳抑制浓度为150nmol/mlSYB作用于肝癌细胞系HepG2后,利用RT-PCR(reversetranscription-polymerasechainreactio,逆转录-PCR)方法得到ctDNA(complementaryDNA,互补脱氧核糖核酸),然后在不同时间段(0、20、40、60min)用荧光定量PCR(Polymerasechainreaction,全称聚合酶链式反应)检测miR-133b表达情况,并对其进行研究分析。 结果:实验结果发现,SYB作用于20min、40min及60min的miR-133b表达量均高于0min的表达量,并有明显的统计学差异(P<0.05)。SYB作用40min及60min时的miR-133b表达量高于20min的表达量,具有明显的统计学差异(P<0.05)。而作用40min与60min之间的miR-133b表达量无明显差别(P>0.05)。表明当作用于40min时miR-133b表达水平已达到最高水平,延长作用时间不能使其表达量进一步升高。 结论:1.SYB主要作用于HepG2后可提高细胞中的抑癌基因miR-133b表达。 2.通过时间梯度实验发现,与对照组(0min)相比较,实验组(20、40、60min)时miR-133b的表达均明显升高。其中,在40min时miR-133b的表达水平最高,延长作用时间不能提高miR-133b的表达水平。 3.SYB通过促进HepG2细胞中miR-133b的表达升高而抑制HepG2的增殖能力。由此进一步推论SYB通过促进抑癌基因miR-133b的表达而抑制肿瘤的增殖能力,并最终使肿瘤生长得到抑制。 收起
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