摘要: 目的：研究AAV2 rep78基因及其蛋白质产物对人肝癌细胞HepG2的凋亡及其途径的影响。 方法：用脂质体转染法将AAV2 rep基因真核表达载体pCI/neo-Rep78瞬时转入HepG2细胞，以未转染的HepG2细胞及转染空载体pCI/neo的HepG2细胞为对照；分别抽提三组细... 展开 目的：研究AAV2 rep78基因及其蛋白质产物对人肝癌细胞HepG2的凋亡及其途径的影响。 方法：用脂质体转染法将AAV2 rep基因真核表达载体pCI/neo-Rep78瞬时转入HepG2细胞，以未转染的HepG2细胞及转染空载体pCI/neo的HepG2细胞为对照；分别抽提三组细胞总RNA，RT-PCR检测AAV2 rep78基因在各组的表达；MTT法检测三组细胞的增殖活性，TUNEL法检测各组细胞凋亡情况；以β-actin为内参，半定量RT-PCR法检测凋亡相关基因Fas、FasL、Bax、Bcl-xL、c-myc表达量的变化。 结果：AAV2 rep78转染HepG2细胞后，RT-PCR扩增出AAV2rep78基因片段，空载体组及正常对照组均未扩增出相应片段。HepG2细胞转染AAV2 rep78基因后，与对照组细胞相比增殖能力明显下降，凋亡增多，差别有统计学意义(P<0.01)；转染AAV2 rep78基因的HepG2细胞Fas、FasL、Bax、Bcl-xL、c-myc mRNA相对表达量均较转染空载体组和未转染质粒组明显增高，差别有统计学意义(P<0.01)。 结论：成功将AAV2 rep78基因转染入HepG2细胞，并在细胞中表达。转染AAV2 rep78基因可同时上调Fas、FasL、Bax、Bcl-xL、c-myc表达，促进HepG2细胞的凋亡，并抑制细胞增殖。 收起