摘要: 背景 膜性肾病(Membranous nephropathy,MN)是成人肾病综合征常见的病理类型，其特征是肾小球上皮下间隙存在免疫复合物沉积，临床表现为蛋白尿合并水肿。其中70％-80％的患者为病因不明的特发性膜性肾病(Idiopathic membranous nephropathy,IMN)。... 展开 背景 膜性肾病(Membranous nephropathy,MN)是成人肾病综合征常见的病理类型，其特征是肾小球上皮下间隙存在免疫复合物沉积，临床表现为蛋白尿合并水肿。其中70％-80％的患者为病因不明的特发性膜性肾病(Idiopathic membranous nephropathy,IMN)。最新资料显示，IMN发病率不断增长，较十年前翻了一倍，因此探索IMN的病因及发病机制一直是肾脏病领域的研究热点。 已知 M 型磷脂酶 A2 受体(M-type phospholipase A2 receptor,PLA2R)为成人IMN最常见的靶抗原，其特异性抗体(aPLA2Rab)是IMN发生、发展及预测预后的标志性分子。而PLA2R抗体产生机制不明，目前认为是由于PLA2R抗原表位暴露诱发自身免疫活化引起，而基础研究已经证实，氧化应激是诱导PLA2R抗原表位暴露的关键因素。临床研究发现，空气细颗粒物、吸烟与IMN的发生、发展密切相关，而PM2.5、吸烟可造成肺组织炎症和氧化应激损伤。因此，本课题拟从肺肾相互作用角度入手，探讨肺部氧化应激在IMN中的致病作用及其可能机制。 方法 1、选取我院经肾脏穿刺活检病理确诊为IMN的患者，检测其血清PLA2R抗体及CAT、SOD和MDA等氧化应激指标，并分析患者血清外泌体PLA2R的表达。 2、选取我院因肺癌行肺叶切除术的患者，将患者分为吸烟组和非吸烟组,检测肺组织PLA2R、氧化应激分子SOD2两者与肺泡上皮细胞的共定位情况,并分析肺组织外泌体PLA2R的表达。 3、体外实验以脂多糖(LPS)刺激肺上皮细胞，探究氧化应激对肺上皮细胞PLA2R表达的影响。 结果 1、IMN患者血清氧化应激指标MDA与PLA2R抗体水平、24h尿蛋白定量均呈正相关，而SOD与PLA2R抗体水平呈负相关。 2、与非吸烟组相比，吸烟组肺组织PLA2R的表达明显增强，PLA2R、SOD2均与肺泡Ⅱ型上皮细胞共定位。 3、以LPS刺激肺上皮细胞可以导致其PLA2R表达上调，谷胱甘肽可抑制LPS引起的PLA2R的上调。 4、免疫电镜及纳米流式证实IMN患者血清中存在PLA2R+外泌体，统计发现PLA2R+外泌体比例与血清PLA2R抗体水平呈正相关。 5、吸烟组肺组织来源的外泌体PLA2R表达升高，同时Western-blot检测发现巨噬细胞标记物CD206在外泌体中高表达。 结论 1、IMN患者血清氧化应激指标、PLA2R+外泌体均与IMN疾病程度相关。 2、吸烟者肺泡Ⅱ型上皮细胞PLA2R及SOD2表达上调，体外实验LPS刺激肺上皮细胞导致氧化应激及PLA2R的表达增强，推测肺部氧化应激是PLA2R抗原表位暴露的始动因素。 3、吸烟者肺组织可以分泌PLA2R+外泌体，推测肺组织来源的PLA2R+外泌体具有免疫原性，可能导致PLA2R抗体产生并参与IMN发病机制。 收起