摘要: 第一部分SYB对肝癌细胞增殖的影响 目的：研究红花黄色素B（saffloweryellowB，红花黄色素B）对肝癌细胞生长增殖能力的影响。 方法：使用不同浓度SYB作用于HepG2（Humanhepatoellularcarcinomas，人肝癌细胞）后，利用细胞计数试剂盒-8（CCK-8... 展开 第一部分SYB对肝癌细胞增殖的影响 目的：研究红花黄色素B（saffloweryellowB，红花黄色素B）对肝癌细胞生长增殖能力的影响。 方法：使用不同浓度SYB作用于HepG2（Humanhepatoellularcarcinomas，人肝癌细胞）后，利用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）实验方法检测细胞增殖情况。分别将终浓度0、50、100、150、200nmol/mlSYB加入HepG2细胞中,培养12h、24h、36h和48h不等。并利用CCK-8检测细胞增殖情况。 结果：SYB作用于肝癌细胞系HepG2后，随着作用浓度及作用时间不同，抑制细胞增殖能力也会发生相应变化。统计学结果显示：在SYB浓度在0nmol/ml、50nmol/ml、100nmol/ml、150nmol/ml、200nmol/ml时与对照组相比较HepG2细胞增殖能力均受到抑制，且p＜0.05具有显著统计学差异，其中，SYB浓度为150nmol/ml、36h时，HepG2细胞的增殖能力受到抑制最明显。基于以上浓度测定实验，发现SYB最佳抑制浓度为150nmol/ml、最佳抑制时间为36h。 结论：1.SYB可以抑制肝癌细胞系HepG2的增殖能力。 2.不同浓度的SYB对HepG2的增殖能力均有抑制作用。 3.当SYB浓度为150nmol/ml，作用时间36h时，抑制HepG2细胞增殖能力最显著，从而确定下一步实验的SYB浓度。 第二部分SYB作用于肝癌细胞系HepG2后，检测抑癌基因miR-133b的表达 目的:SYB作用于HepG2细胞后，提取总RNA后，对抑癌基因miR-133b（MicroRNA-133b，微小RNA-133b片段）片段表达情况进行研究分析。 方法：使用最佳抑制浓度为150nmol/mlSYB作用于肝癌细胞系HepG2后，利用RT-PCR（reversetranscription-polymerasechainreactio，逆转录-PCR）方法得到ctDNA（complementaryDNA，互补脱氧核糖核酸），然后在不同时间段（0、20、40、60min）用荧光定量PCR（Polymerasechainreaction，全称聚合酶链式反应）检测miR-133b表达情况，并对其进行研究分析。 结果：实验结果发现，SYB作用于20min、40min及60min的miR-133b表达量均高于0min的表达量，并有明显的统计学差异（P＜0.05）。SYB作用40min及60min时的miR-133b表达量高于20min的表达量，具有明显的统计学差异（P＜0.05）。而作用40min与60min之间的miR-133b表达量无明显差别（P＞0.05）。表明当作用于40min时miR-133b表达水平已达到最高水平，延长作用时间不能使其表达量进一步升高。 结论：1.SYB主要作用于HepG2后可提高细胞中的抑癌基因miR-133b表达。 2.通过时间梯度实验发现，与对照组(0min)相比较，实验组（20、40、60min）时miR-133b的表达均明显升高。其中，在40min时miR-133b的表达水平最高，延长作用时间不能提高miR-133b的表达水平。 3.SYB通过促进HepG2细胞中miR-133b的表达升高而抑制HepG2的增殖能力。由此进一步推论SYB通过促进抑癌基因miR-133b的表达而抑制肿瘤的增殖能力，并最终使肿瘤生长得到抑制。 收起