摘要: 目的:利用Wistar大鼠探索孕期及哺乳期苯并[a]芘暴露对子代血糖及胰岛功能的影响。方法:将30只SPF级Wistar孕鼠，随机分为对照组，苯并[a]芘(BaP)低、中、中高、高剂量染毒组，每组6只。对母鼠采用灌胃方式连续染毒6周，剂量从低到高依次为2、200、80... 展开 目的:利用Wistar大鼠探索孕期及哺乳期苯并[a]芘暴露对子代血糖及胰岛功能的影响。方法:将30只SPF级Wistar孕鼠，随机分为对照组，苯并[a]芘(BaP)低、中、中高、高剂量染毒组，每组6只。对母鼠采用灌胃方式连续染毒6周，剂量从低到高依次为2、200、800、1600ug/kg。实验期间隔天测定各组母鼠体重；母鼠在孕第1天、第10天，哺乳期第10天、第21天禁食12小时，子鼠哺乳结束时禁食12小时，采用尾尖断尾采血法测母鼠及子鼠空腹血糖；实验第6周(哺乳期结束)，腹腔麻醉后摘取各组母鼠及子鼠的胰腺、肝脏组织称重；全自动生化仪检测母鼠及子鼠血清TG、TC、LDL-C、HDL-C的水平；采用大鼠胰岛素(INS)酶联免疫吸附测定试剂盒检测母鼠及子鼠血清胰岛素水平；母鼠及子鼠胰腺组织苏木精-伊红(HE)染色，镜下拍片观察胰腺组织形态学变化；采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)检测母鼠腹主动脉血血清中BaP内暴露浓度;采用焦磷酸测序法检测母鼠及子鼠外周血Pdx-1基因甲基化水平；采用大鼠线粒体转录因子A(Tfam)酶联免疫吸附测定试剂盒检测母鼠及子鼠血清Tfam基因；利用绝对实时荧光定量PCR法检测mtDNA拷贝数。结果:随着染毒剂量增加，母鼠及子鼠的肝、胰腺脏器系数均呈上升趋势。中剂量组母鼠的胰腺脏器系数高于对照组(P＜0.05)；中高、中剂量组子鼠肝脏脏器系数高于对照组(P＜0.05)。GC-MS得出，染毒组母鼠血清中BaP浓度较低，其高剂量组母鼠血清中检测到的BaP浓度为742.856ng/ml，为低剂量组BaP浓度的5倍。母鼠低密度脂蛋白(LDL-C)水平随BaP染毒剂量的增加而增加。高剂量染毒组LDL-C水平显著高于对照组与低剂量组(P＜0.05)。低剂量组高密度脂蛋白(HDL-C)水平与对照组间无统计学差异(P＞0.05),中剂量组、中高剂量组、高剂量组HDL-C水平高于对照组(P＜0.05)。中高剂量与高剂量组母鼠哺乳第20天的空腹血糖值显著高于孕第一天的空腹血糖值(P＜0.05)。哺乳期第21天，各组母鼠胰岛素含量及HOMA指数，经检验无统计学意义(P＞0.05)。子鼠低剂量染毒组、高剂量染毒组空腹胰岛素含量分别与对照组存在统计学差异(P＜0.05)。对照组母鼠及子鼠胰岛呈椭圆形或圆形团索状，边界清晰，胰岛内β细胞分布均匀，排列紧密，胞浆丰富，胰岛细胞间毛细血管丰富红染。实验组随着染毒剂量的增加母鼠及子鼠胰腺胰岛边界模糊，胰岛内β细胞排列稀疏，细胞明显减少，可见空泡变性且部分胰岛细胞内脂质沉积。母鼠及子鼠外周血Tfam基因表达量在组间无统计学差异(P＞0.05)。子鼠对照组胰腺组织mtDNA拷贝数与其余四组间均存在统计学差异(P＜0.05)，其中，mtDNA拷贝数最多的对照组是最少的高剂量组的5.96倍。结论:孕期及哺乳期BaP暴露可造成母鼠及子鼠糖脂代谢指标异常及胰腺组织病理改变。随着染毒剂量的增加子鼠胰腺组织线粒体DNA拷贝数降低。 收起