摘要: 乳腺癌患者占女性肿瘤患者的22.9％,已居妇女恶性肿瘤的首位。尽管其临床治疗手段较为多样，化疗仍是其重要的组成部分。对于不同的腋淋巴结表征，以及不同年龄跨度的乳腺癌患者，术后的辅助化疗能显著提高病人的预后和生存时间。同时，近年来术前新辅... 展开 乳腺癌患者占女性肿瘤患者的22.9％,已居妇女恶性肿瘤的首位。尽管其临床治疗手段较为多样，化疗仍是其重要的组成部分。对于不同的腋淋巴结表征，以及不同年龄跨度的乳腺癌患者，术后的辅助化疗能显著提高病人的预后和生存时间。同时，近年来术前新辅助化疗的开展使部分患者达到降期及保乳的目的，提高了患者的肿块切除率及生活质量。但是，由于患者原发性或者获得性耐药的产生，从而导致化疗失败，极大的影响了乳腺癌患者的总生存率及预后。因此，深入探究乳腺癌化疗耐药的机制，寻找有效的治疗靶点，能够为乳腺癌的临床治疗开拓新思路。 FOXP3（Forkhead box protein3）是叉状头转录因子家族的一员。目前针对FOXP3的研究主要集中在两个方面：①免疫调节。作为CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)特异的标志物及细胞发育和功能的关键调节基因。②肿瘤发生。在乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、神经胶质瘤等多种肿瘤细胞中常检测到FOXP3的低表达或突变。目前针对FOXP3在乳腺癌中的研究尤为深入，研究发现：①FOXP3在乳腺癌细胞中是低表达的，FOXP3能够抑制乳腺癌发生；②FOXP3基因缺失或突变的小鼠乳腺癌的发生率增高，人乳腺癌组织中FOXP3的阳性表达率显著低于正常组织；③过表达FOXP3能够促进乳腺癌细胞凋亡；④FOXP3能够抑制癌基因HER2，SKP2的表达，上调抑癌基因p21的表达。因此，FOXP3是参与肿瘤发生发展的重要基因。 文献报道FOXP3在乳腺癌的增殖、转移和血管生成过程中发挥重要作用，然而对于FOXP3在乳腺癌化疗耐药中的作用却鲜有报道。为进一步扩展FOXP3在乳腺癌中作为抑癌基因的功能，观察FOXP3与乳腺癌化疗耐药之间的关系，我们进行了下列研究工作：①体内外系统验证FOXP3增强乳腺癌化疗敏感性的作用；②高通量筛选FOXP3调控乳腺癌化疗耐药的靶分子，并确认其作用的分子机制；③通过体内、体外实验系统研究FOXP3-ATR通路对乳腺癌化疗敏感性的影响；④在乳腺癌临床样本中检测FOXP3、ATR的表达情况，评价其与乳腺癌化疗耐药之间的关系。 通过以上研究我们发现：①体内外实验均证实FOXP3能显著增强乳腺癌化疗敏感性；②RNA-seq转录组学测序结果表明FOXP3下调DNA损伤修复关键分子ATR的表达，而DNA损伤修复通路的异常是肿瘤耐药机制之一，提示FOXP3可能通过对DNA损伤修复的调控来增强乳腺癌化疗敏感性；③Western-blot，细胞免疫荧光等实验表明，FOXP3能够抑制ATR的表达，双荧光素酶报告基因和ChIP实验证实FOXP3对ATR启动子的调控作用，确定两者相互作用的核心位点。④通过彗星实验，细胞免疫荧光和染色体稳定性检测等方法确证FOXP3通过ATR/Chk1代谢通路调控DNA损伤修复。⑤对120例临床标本的组织芯片的免疫组化发现，FOXP3在乳腺癌耐药组织中的表达水平显著低于敏感组，并且FOXP3和ATR的表达是负相关的。 通过本课题，我们证实FOXP3通过下调ATR来发挥其对乳腺癌DNA损伤修复的抑制；证实FOXP3通过抑制DNA损伤修复增强乳腺癌对化疗药物的敏感性，为乳腺癌克服化疗耐药的靶向治疗提供新思路。 收起