摘要: 目的： GATA4作为心脏发育核心转录因子，在心脏发育早期开始表达，并在心肌中持续表达至成年。本课题组前期研究发现GATA4的表达受到组蛋白乙酰化调控，CBP/P300属于组蛋白乙酰化酶的两个亚型。本研究中，我们将明确GATA4在小鼠胚胎心脏发育过程中... 展开 目的： GATA4作为心脏发育核心转录因子，在心脏发育早期开始表达，并在心肌中持续表达至成年。本课题组前期研究发现GATA4的表达受到组蛋白乙酰化调控，CBP/P300属于组蛋白乙酰化酶的两个亚型。本研究中，我们将明确GATA4在小鼠胚胎心脏发育过程中的时序表达，并阐明CBP/P300介导组蛋白修饰对GATA4的表观遗传调控机制。 方法： 选取胎龄11.5天（E11.5）至新生0.5天胎鼠心脏；利用RT-PCR检测胎鼠心脏中GATA4的表达，染色质免疫共沉淀（CHIP）检测GATA4基因启动子区组蛋白H3K9ac、H3K9me2、H3K9me3水平及与CBP/P300的结合水平。体外培养心肌祖细胞，利用CBP30干预心肌祖细胞，探讨CBP/P300对GATA4表达的调控机制。 结果： 1.GATA4表达量在E14.5高于E11.5（P<0.05），E14.5后各组间比较无差异（P>0.05）。CHIP结果显示GATA4启动子区组蛋白H3K9ac水平在E14.5高于E11.5，E17.5高于E14.5（P<0.05）；H3K9me2、H3K9me3水平及与CBP/P300的结合水平在E14.5高于E11.5、E17.5（P<0.05）。 2.不同浓度（0.5μM、1μM、2μM、4μM）CBP30分别使心肌祖细胞GATA4表达量较对照组降低，且以2μM降低最明显（P<0.05）。2μM CBP30干预心肌祖细胞6h、12h、24h、48h后，GATA4表达量较对照组降低，且以6h降低最明显（P<0.05）。CHIP结果显示GATA4启动子区组蛋白H3K9ac、H3K9me2、H3K9me3水平及与CBP/P300的结合水平在CBP30组较对照组都明显降低（P<0.05）。 结论： CBP/P300介导组蛋白H3K9乙酰化修饰参与调控GATA4在小鼠胚胎心脏发育过程中的时序表达。 收起