摘要: 第一部分不同机械通气条件下大鼠肺PAI-1表达的变化 目的： 观察不同机械通气条件下大鼠肺PAI-1表达的变化情况。 方法： 清洁级成年雄性SD大鼠72只，重量250?300克,按照随机数字表分为C、S、R、L四组（n=18）:对照组（C组，自主呼吸组）... 展开 第一部分不同机械通气条件下大鼠肺PAI-1表达的变化 目的： 观察不同机械通气条件下大鼠肺PAI-1表达的变化情况。 方法： 清洁级成年雄性SD大鼠72只，重量250?300克,按照随机数字表分为C、S、R、L四组（n=18）:对照组（C组，自主呼吸组）,小潮气量组（S组， VT=6ml/kg），常规潮气量组（R组,VT=10ml/kg），大潮气量组（L组， VT=40ml/kg），各组按机械通气时间（2h、4h、6h）再随机分为3个亚组（n=6）。C、S、R、L组作气管切开插管处理后，C组保留自主呼吸，S、R、L组接小动物呼吸机给予机械通气，呼吸机参数均设置为RR70次/分，FiO221％、PEEP0 cmH2O。实验结束后处死大鼠，快速剖开胸腔取右肺组织称重后测定湿重/干重比值(W/D)，测定肺组织细胞凋亡率（TUNEL法），肺组织经HE染色后光镜下进行肺损伤评分。比较不同潮气量、不同机械通气时间下大鼠肺PAI-1表达情况。同时收集大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）,测定PAI-1和IL-8的表达情况。应用Real-timePCR技术检测大鼠肺组织中PAI-1mRNA的表达。 结果： 与C组比较，L组机械通气2h光镜下可见肺组织内弥散存在出血点，机械通气4h肺组织内可见大量散在出血点，肺泡间隔增宽，肺泡腔渗液较多，机械通气6h肺组织结构破坏严重，光镜下可见极少量完整肺泡组织，肺组织功能基本丧失。肺组织损伤评分、肺湿重/干重比值(W/D)及肺组织细胞凋亡率随着通气时间的延长均显著性升高，差异有统计学意义(P<0.05)，C组与S组比较肺组织形态结构无区别，S组机械通气6h未出现明显的肺损伤表现。与C组比较R组机械通气2h、4h时间点肺组织形态结构无明显的肺损伤表现，通气6h光镜下可见肺泡腔内轻度渗液，但肺组织结构正常。 与C组比较L组肺PAI-1、IL-8和PAI-1mRNA随着通气时间的延长表达逐渐上调(P<0.05)，与S、R组中2h、4h、6h三个时间点比较，L组机械通气2h时间点测出PAI-1、IL-8和PAI-1 mRNA表达，4h时间点表达上调明显，6h时间点表达达到顶点，差异具有统计学意义(P<0.05)。C组与S组比较各指标之间无差异。与C组比较R组2h、4h时间点未见PAI-1、IL-8和PAI-1 mRNA表达，6h时间点时PAI-1可见少量表达。 C组与S组内2h、4h、6h三个时间点比较PAI-1、IL-8和PAI-1 mRNA表达没有上调，差异无统计学意义(P>0.05)。R组内通气6h PAI-1、IL-8和PAI-1 mRNA少量表达。L组内2h、4h、6h三个时间点肺PAI-1、IL-8、PAI-1 mRNA随通气时间的延长表达明显上调，差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论： 大潮气量机械通气可诱发大鼠肺组织及肺泡灌洗液中PAI-1表达上调，机械通气2h即可测出肺PAI-1表达，机械通气4h时PAI-1显著上调，6h时PAI-1表达达到高峰。 第二部分不同预处理对机械通气大鼠肺PAI-1表达的影响 目的： 探讨小潮气量机械预处理和七氟醚预处理对机械通气大鼠肺 PAI-1、LI-8和PAI-1mRNA表达的影响及与肺损伤之间的关系。 方法： 清洁级成年雄性SD大鼠18只，重量250?300克,按照随机数字表分三组（n=6）：L组（大潮气量通气组，VT=40ml/kg）、P1组（七氟醚预处理组，2%七氟醚）、P2组（机械通气预处理组，VT=6ml/kg）。P1组大潮气量通气前30分钟吸入2%七氟醚预处理，P2组给予VT=6ml/kg机械通气预处理30分钟，P1组和P2组预处理结束后给予 VT=40ml/kg机械通气。L、P1、P2组均行气管切开插管后接小动物呼吸机给予机械通气4h，呼吸机参数均设置为RR70次/分，FiO221％、PEEP0 cmH2O。机械通气结束即刻静脉注射戊巴比妥（100mg/kg）处死大鼠，留取右肺组织测定湿重/干重比值(W/D)，测定肺组织细胞凋亡率，肺组织经HE染色后光镜下进行肺损伤评分。采集大鼠支气管肺泡灌洗液,测定PAI-1和IL-8的表达情况。应用Real-timePCR技术检测大鼠肺组织中PAI-1mRNA的表达。 结果： L组光镜下肺形态学改变可见肺泡膜明显增厚，肺内散在大量出血点，肺泡发生融合，P1组肺组织结构基本完整，肺泡内渗出液明显。P2组肺泡壁增厚，但未见透明膜形成，肺组织结构完整。 与L组比较P1组、P2组机械通气4h肺损伤评分、肺湿重/干重比值(W/D)及肺组织细胞凋亡指数均降低，差异有统计学意义(P<0.05)。P1组与P2组比较肺损伤评分、肺湿重/干重比值(W/D)及肺组织细胞凋亡指数差异无统计学意义(P>0.05)。 与L组比较P1组、P2组肺泡灌洗液(BALF)中PAI-1、IL-8及肺组织中PAI-1mRNA的表达明显下调，差异具有统计学意义(P<0.05)。P2组与P1组比较肺泡灌洗液(BALF)中PAI-1、IL-8及肺组织中PAI-1mRNA的表达差异无统计学意义(P<0.05)。 结论： 大潮气量、长时间机械通气诱发大鼠肺PAI-1高表达，小潮气量机械通气和七氟醚预处理使机械通气大鼠肺PAI-1、LI-8、PAI-1mRNA的表达下调。提示PAI-1可能与机械通气诱发肺损伤相关，小潮气量及七氟醚可能对肺损伤有保护作用，其机制有待进一步研究。 收起