摘要: 目的:左旋多巴是帕金森病症状治疗的“金标准”。然而，长期应用会导致左旋多巴诱发的异动症(LID)。最近发现，在人类、非人类的灵长类和啮齿类动物的LID中腺苷A2A受体与LID有直接的联系;谷氨酸脱羧酶(GAD)是γ-氨基丁酸合成的限速酶，基底节区GAD表达变... 展开 目的:左旋多巴是帕金森病症状治疗的“金标准”。然而，长期应用会导致左旋多巴诱发的异动症(LID)。最近发现，在人类、非人类的灵长类和啮齿类动物的LID中腺苷A2A受体与LID有直接的联系;谷氨酸脱羧酶(GAD)是γ-氨基丁酸合成的限速酶，基底节区GAD表达变化可能与LID的发生有关，但腺苷A2A受体与GAD65、GAD67的关系在左旋多巴诱发异动症中的作用仍未完全阐明。本研究旨在观察腺苷A2A受体敲除对LID小鼠纹状体内GAD65、GAD67表达的影响。 方法:24只野生型BABL/C小鼠随机分为3组:①野生型对照组(n=8);②野生型PD组(n=8);③野生型LID组(n=8)。24只腺苷A2a基因敲除的BABL/C A2a-/-小鼠被随机分为3组:④A2a-/-对照组(n=8);⑤A2a-/-PD组(n=8);⑥A2a-/-LID组(n=8)。向野生型PD组、野生型LID组、A2aa-/-PD组和A2a-/-LID组小组老鼠左侧纹状体内注射6-羟多巴胺(6-OHDA)毁损多巴胺神经元。野生型对照组和A2a-/-对照组予以0.05％抗坏血酸注射。3周后腹腔注射阿朴吗啡(Apo)诱导小鼠向毁损对侧转圈(AIR)，以＞7圈/分钟视为PD造模成功。术后22天开始每天9:00和15:00，分别向野生型LID组和A2aa-/-LID组小鼠腹腔注射左旋多巴(20 mg/kg)/苄丝肼(5 mg/kg)溶液连续22天，并在注射后第2，7，12，17和21天观察小鼠的不自主行为(AIM)，其它组予以注射生理盐水作为对照。在最后一次注射完药物后取材，进行免疫组化和实时荧光定量PCR检测。 结果:(1)A2a-/-LID组小鼠AIM评分低于野生型LID组，差异有统计学意义(P＜0.05)。(2)免疫组化结果显示，野生型小鼠毁损侧纹状体内GAD65和GAD67水平在对照组、PD组和LID组中均逐渐升高，三组间各两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01); GAD65和GAD67水平在A2a-/-小鼠中亦然(P＜0.05或P＜0.01)。与野生LID组比较，A2a-/-LID组GAD67水平明显下降，且差异有统计学意义(P＜0.01)，而GAD65无明显改变(P＞0.05)。(3)实时荧光定量PCR结果显示，野生型小鼠毁损侧纹状体内GAD65和GAD67 mRNA水平在对照组、PD组和LID组中逐渐升高，且差异具体统计学意义(P＜0.05或P＜0.01); GAD65和GAD67 mRNA水平在A2a-/-小鼠中亦然(P＜0.05或P＜0.01)。与野生LID组比较，腺苷A2a基因敲除LID组GAD67 mRNA水平明显下降，差异有统计学意义(P＜0.01)，而GAD65无明显改变(P＞0.05)。 结论:腺苷A2a基因敲除后，可以减轻LID'小鼠的AIM症状，其机制可能通过调节毁损侧纹状体内GAD67表达下降实现的，但与GAD65表达无关。 收起