摘要: 第一部分： PM2.5对人支气管上皮细胞氧化应激-JAK2/STAT3信号通路的影响 目的： 探讨 PM2.5通过氧化应激对人支气管上皮细胞 JAK2/STAT3信号通路和细胞因子的影响，为研究PM2.5引起呼吸系统疾病的发生机制提供新思路。 方法： 利用传统浸... 展开 第一部分： PM2.5对人支气管上皮细胞氧化应激-JAK2/STAT3信号通路的影响 目的： 探讨 PM2.5通过氧化应激对人支气管上皮细胞 JAK2/STAT3信号通路和细胞因子的影响，为研究PM2.5引起呼吸系统疾病的发生机制提供新思路。 方法： 利用传统浸入式方法培养支气管上皮细胞16HBE，用PM2.5和氧化应激干扰剂N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）处理16HBE细胞后测定细胞内 ROS水平、GSH:GSSG比值、JAK2、STAT3的基因和蛋白表达；用PM2.5、NAC和AG490（JAK抑制剂）处理16HBE细胞后检测细胞上清液中IL-6、IL-8的含量及COX-2的蛋白表达。 结果： 1、染毒12h和24 h后，50μg/ml PM2.5组和100μg/ml PM2.5组16HBE细胞内ROS水平高于生理盐水对照组，GSH:GSSG比值低于生理盐水对照组，PM2.5暴露+NAC保护组 ROS水平低于各自 PM2.5暴露组，而 PM2.5暴露+NAC保护组GSH:GSSG比值高于各自PM2.5暴露组，且差异均有统计学意义（P<0.05）。 2、染毒12h和24 h后，50μg/ml PM2.5组和100μg/ml PM2.5组16HBE细胞内JAK2、STAT3基因和蛋白表达均高于生理盐水对照组，PM2.5暴露+NAC保护组JAK2、STAT3的基因和蛋白表达均低于各自PM2.5暴露组，且差异均有统计学意义（P<0.05）。 3、100μg/ml PM2.5组上清液中IL-6、IL-8含量及COX-2蛋白表达量高于生理盐水对照组，5mmol/L NAC组，6μmol/L AG490组，100μg/ml PM2.5+5mmol/L NAC组，100μg/ml PM2.5+6μmol/L AG490组，且差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论： PM2.5能对支气管上皮细胞造成氧化损伤，并可能通过氧化应激调节支气管上皮细胞JAK/STAT信号通路和相关细胞因子的产生。 第二部分： PM2.5对人支气管上皮细胞IL4R-JAK3/STAT6-Eotaxin信号通路的影响 目的： 探讨 PM2.5对人支气管上皮细胞 JAK3/STAT6信号通路和细胞因子的影响，为PM2.5引起的呼吸系统疾病的发生机制提供新思路。 方法： 利用传统浸入式方法培养支气管上皮细胞16HBE，用PM2.5和IL-4处理16HBE细胞后测定16HBE细胞IL-4Rα蛋白的表达、JAK3和STAT6蛋白基因的表达情况；用PM2.5、IL-4和AG490处理16HBE细胞后测定细胞内Eotaxin的含量。 结果： 1、50μg/ml PM2.5和100μg/ml PM2.5剂量组IL-4Rα蛋白的表达高于生理盐水对照组且差异均有统计学意义（P<0.05），PM2.5和 IL-4共同染毒组的 IL-4Rα蛋白的表达高于IL-4单独染毒组，且差异均有统计学意义（P<0.05）。 2、50μg/ml PM2.5+10ng/mlIL-4组，100μg/ml PM2.5+10ng/mlIL-4组JAK3蛋白和基因表达、STAT6蛋白和基因表达高于生理盐水对照组和10ng/mlIL-4组，且差异均有统计学意义（P<0.05）。 3、100μg/ml PM2.5+10ng/mlIL-4组 Eotaxin含量高于生理盐水对照组、10ng/mlIL-4组、10ng/mlIL-4+6μmol/L AG490组、10ng/mlIL-4+6μmol/L AG490+100μg/mlPM2.5组，且差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论： JAK3/STAT6信号通路参与调控PM2.5对支气管上皮细胞Eotaxin的影响。 收起