摘要: 目的： 甲状腺相关性眼病(TAO)的发病机制复杂且尚未明确。本文旨在以免疫学机制作为切入口，初步筛选出甲状腺相关性眼病患病组与正常对照组表达差异的microRNA，为进一步研究与甲状腺相关性眼病相关的特异性microRNA以及功能探索打下基础，也为寻... 展开 目的： 甲状腺相关性眼病(TAO)的发病机制复杂且尚未明确。本文旨在以免疫学机制作为切入口，初步筛选出甲状腺相关性眼病患病组与正常对照组表达差异的microRNA，为进一步研究与甲状腺相关性眼病相关的特异性microRNA以及功能探索打下基础，也为寻找临床上甲状腺相关性眼病的特异诊断指标，以及治疗新靶点提供新的角度。 方法： 收集正常对照组、TAO静止期组和TAO急性期组各3例外周静脉血，提取人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells，PBMC)，提取RNA做新一代高通量microRNA测序，构建TAO及正常对照组的microRNA表达图谱并分析，筛选出不同组别差异表达的microRNA，选取TAO静止期组与正常对照组、TAO急性期组与正常对照组之间共同差异表达明显的4个microRNA。然后利用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR，qrt-PCR)技术，在正常对照组、TAO静止期组和TAO急性期组各5例的扩大样本中验证上述筛选出的microRNA。 结果： 1.microRNA测序结果:TAO静止期组与正常对照组相比，T检验p值＜0.05，且相差倍数＞2的microRNA共有17个，分别为:hsa-miR-3155a、hsa-miR-6718-5p、hsa-miR-939-3p、hsa-miR-653、hsa-miR-4433-5p、hsa-miR-378a-3p、hsa-miR-3160-3p、hsa-miR-1298、hsa-miR-4646-3p、hsa-miR-6503-3p、hsa-miR-378c、hsa-miR-18b-3p、hsa-miR-2467-5p、hsa-miR-548c-5p、hsa-miR-19a-5p、 hsa-miR-30c-2-3p、hsa-miR-3136-5p、hsa-miR-629-3p。 TAO急性期组与正常对照组相比，T检验p值＜0.05，且相差倍数＞2的microRNA共有34个，分别为:hsa-miR-6515-3p、hsa-miR-1306-5p、hsa-miR-4797-3p、hsa-miR-1306-3p、hsa-miR-424-3p、hsa-miR-5001-5p、hsa-miR-6718-5p、hsa-miR-4640-3p、hsa-miR-4680-3p、hsa-miR-3615、hsa-miR-379-3p、hsa-miR-450a-3p、hsa-miR-4635、hsa-miR-99a-5p、hsa-miR-490-3p、 hsa-miR-642b-3p、hsa-miR-548c-5p、hsa-miR-455-5p、hsa-miR-4761-3p、hsa-miR-6513-5p、hsa-miR-382-3p、hsa-miR-215、hsa-miR-19a-5p、hsa-miR-30c-2-3p、hsa-miR-30c-1-3p、hsa-miR-940、hsa-miR-146a-3p、hsa-miR-659-3p、hsa-miR-199a-3p、hsa-miR-125b-1-3p、hsa-miR-1299、hsa-miR-655、hsa-miR-199b-3p、hsa-miR-933、hsa-miR-1197。 其中两部分对照共同差异表达的为hsa-miR-19a-5p、hsa-miR-30c-2-3p、hsa-miR-548c-5p、hsa-miR-6718-5p这4个，且与正常对照组相比，TAO静止期组和TAO急性期组均呈现明显的上调趋势。 2.用实时荧光定量PCR验证的结果:TAO静止期组与正常对照组相比，上述筛选出的4个microRNA检测表达p值均＜0.05，且差异倍数＞2，呈上调趋势。TAO急性期组与正常对照组相比，上述筛选出的4个microRNA检测表达亦为p值均＜0.05，且相差倍数＞2，呈上调趋势。验证结果与测序结果基本相符。 结论： 1.筛选出了TAO静止期组与正常对照组相比差异表达明显的microRNA共17个，TAO急性期组与正常对照组相比差异表达明显的microRNA共34个，共同表达差异的则有4个，均呈上调趋势。 2.用qrt-PCR技术，验证了两个TAO患病组与正常对照组共同差异表达的4个microRNA，差异表达明显，上调趋势与测序结果相符。 收起