摘要: 本文采用DPPH法研究了加工处理因素对黑加仑花色苷提取物抗氧化能力的影响。通过紫外-可见吸收光谱、荧光光谱以及圆二色谱,研究比较了两种糖苷结构不同的花色苷与牛血清白蛋白(BSA)结合作用的机制,为从分子水平上研究花色苷在体内发挥抗氧化能力的机... 展开 本文采用DPPH法研究了加工处理因素对黑加仑花色苷提取物抗氧化能力的影响。通过紫外-可见吸收光谱、荧光光谱以及圆二色谱,研究比较了两种糖苷结构不同的花色苷与牛血清白蛋白(BSA)结合作用的机制,为从分子水平上研究花色苷在体内发挥抗氧化能力的机制以及通过结构修饰提高花色苷功能特性等提供理论基础。利用 Langendorff离体心脏灌流技术,研究了黑加仑花色苷提取物对大鼠离体心脏缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用,揭示了黑加仑花色苷发挥抗氧化能力保护心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的机制。对于研究花色苷在体内吸收、运输、代谢、发挥抗氧化功能以及研究开发花色苷保健食品等有着重要的意义。 本论文主要分为以下四个部分: 1.第一章综述了花色苷的结构、生理功能和抗氧化研究方法以及MIRI的机制和预防措施,对当前黑加仑花色苷的研究进展进行了介绍。 2.第二章通过使用DPPH法研究了加热温度和食品添加剂对黑加仑花色苷提取物抗氧化能力的影响。实验结果表明,当温度大于70℃时,随着时间的延长黑加仑花色苷提取物DPPH清除率下降幅度较大,高温导致黑加仑花色苷提取物抗氧化能力的急剧下降。蔗糖对黑加仑花色苷提取物具有一定的保护作用,能够增强其抗氧化能力。低浓度的苯甲酸钠能够增强黑加仑花色苷提取物的抗氧化能力,而高浓度的苯甲酸钠会导致黑加仑花色苷提取物抗氧化能力的降低。抗坏血酸会破坏黑加仑花色苷提取物的结构,导致黑加仑花色苷提取物抗氧化能力的严重降低。 3.第三章通过使用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱及圆二色谱研究了矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(Cy-3-glc)、矢车菊素-3-O-半乳糖苷(Cy-3-gal)与牛血清白蛋白(BSA)相结合的作用机制。初步判断出Cy-3-glc、Cy-3-gal与BSA的相互作用属于静态猝灭类型。荧光猝灭光谱显示Cy-3-glc对BSA内源荧光的猝灭率明显大于 Cy-3-gal;Cy-3-glc与 BSA相互作用的结合能力大于 Cy-3-gal。热力学参数的计算结果证明,Cy-3-glc、Cy-3-gal与BSA结合作用的作用力主要是氢键和范德华力,同时ΔG<0表明两种花色苷与BSA之间的相互作用过程属于自发的。竞争结合实验表明,Cy-3-glc、Cy-3-gal在BSA上的结合位点均处于site?。非辐射能量转移理论的计算结果显示,Cy-3-glc、Cy-3-gal与色氨酸残基距离分别为2.56 nm和2.82 nm,表明BSA的荧光猝灭现象与非辐射能量转移有一定的关系。同步荧光光谱、三维荧光光谱和紫外-可见吸收光谱的研究结果表明,Cy-3-glc、Cy-3-gal与BSA之间发生了相互作用,而且使BSA的二级结构也发生了相应的变化。圆二色谱实验的结果进一步表明,与Cy-3-glc、Cy-3-gal的结合作用使BSA二级结构中的α-螺旋含量减少,β-折叠、β-转角和无规则卷曲的含量有所增加。 4.第四章应用Langendorff离体心脏灌流技术研究了黑加仑花色苷提取物对MIRI的保护作用。理化指标的检测结果表明,黑加仑花色苷提取物可降低心肌细胞膜的损伤程度,减少心肌细胞LDH的释放,增加超氧化物歧化酶SOD的活性,降低脂质过氧化,减少丙二醛MDA的生成量,改善心肌缺血再灌注损伤后心脏的功能,提高心肌细胞抗氧化能力。透射电子显微镜观察心肌组织超微结构的变化结果表明,黑加仑花色苷提取物通过抗氧化能力的作用机制,对大鼠离体心脏I/R损伤发挥保护作用。 收起