中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 何磊哈尔滨工业大学 2023年硕士导师: 唐琳共114页

摘要 : 土工织物由于具有良好的反滤性能及较好的抗拉性能，广泛用于需要保土、透水、防淤堵的相关工程。在实际工程应用中，由于存在管袋充填、上覆加压、不均匀沉降等复杂的因素，土工织物表面会不可避免地产生各种复杂的双向拉应变。然而目前行业标准规定... 展开土工织物由于具有良好的反滤性能及较好的抗拉性能，广泛用于需要保土、透水、防淤堵的相关工程。在实际工程应用中，由于存在管袋充填、上覆加压、不均匀沉降等复杂的因素，土工织物表面会不可避免地产生各种复杂的双向拉应变。然而目前行业标准规定的土工织物孔径指标是在无应变状态下设计的，这使得工程中土工织物在应变下的孔径无法实现预期的反滤作用。土工织物的孔径是其反滤设计的重要的参数，土工织物的孔径大小决定着自身的渗透能力和保土能力，因此研究双向拉应变下的土工织物孔径变化具有很高的实用价值及理论意义。本文所采用了湿筛法测试孔径，不仅能消除静电影响，而且更贴合土工织物与土体作用时的工作状态。选取了工程中常用的3种有纺织物及6种无纺织物，通过拉伸仪进行双向拉伸，开展了不等轴双向拉应变下的孔径分布曲线湿筛试验，测试了应变值及双向应变比对孔径的影响；通过统计三组以上的重复试验结果，绘制了误差棒，分析了湿筛法孔径测试误差产生的原因。 1）有纺织物湿筛试验涉及的应变比（纬向应变：经向应变）包括双向等轴1:1和不等轴2:1、3:1、4:1。纬向应变较大且在不同应变比试验组中保持一致，经向应变按比例变化，纬向应变值设为0%、5%、10%。试验结果表明，随着应变的增大有纺织物孔径有增大的趋势；应变值较大处的离散性也偏大。 2）将有纺织物视为三维立体结构，在前人的理论研究基础上，基于其结构特点引进正弦函数方程，并结合有纺织物的湿筛试验结果建立数学几何模型。该模型可以将原本分开的平面孔隙和剖面孔隙进行结合，定性分析了有纺织物整体孔径变化趋势，与试验结果所得到的变化趋势相吻合。 3）无纺织物的研究测试了3种短纤无纺织物和3种长纤无纺织物，试验涉及应变比（机器方向：垂直机器方向）包括双向1:1、2:1、4:1，机器方向应变测试值为0%、10%、20%、30%；并结合数字图像法统计了纤维方向角随应变值及应变比的变化，从间接的试验结果和内部纤维变化情况相结合的角度解释了无纺织物孔径随着应变的增大而减小的规律。收起

关键词 : 土工织物织物孔径孔径变化湿筛法双向拉应变孔径离散性

2. 微生物固态发酵花生粕制备抗氧化肽的研究

[学位论文] 明强强山东师范大学 2014年硕士导师: 唐琳共110页

摘要 : 论文研究了酵母菌、乳酸菌、黑曲霉、米曲霉和枯草芽孢杆菌等五种微生物固态发酵花生粕的工艺条件,并分别在最佳工艺条件下制备抗氧化肽,测定抗氧化肽的抗氧化活性。通过膜分离方法分离不同分子量段的花生抗氧化肽,研究其不同分子量段花生抗氧化肽的功... 展开论文研究了酵母菌、乳酸菌、黑曲霉、米曲霉和枯草芽孢杆菌等五种微生物固态发酵花生粕的工艺条件,并分别在最佳工艺条件下制备抗氧化肽,测定抗氧化肽的抗氧化活性。通过膜分离方法分离不同分子量段的花生抗氧化肽,研究其不同分子量段花生抗氧化肽的功能性质和理化性质,为花生抗氧化肽作为食品添加剂的应用提供了理论和实践依据。论文共分为以下七部分: 1、第一章综述了花生和花生粕资源的利用现状,花生抗氧化肽的抗氧化机制和主要的制备方法以及微生物固态发酵花生粕的研究成果和研究现状。 2、第二章研究了从6株酵母中筛选出啤酒酵母作为发酵菌种,采用固态发酵技术,以发酵时间、发酵温度、菌液量和营养盐溶液量为试验因素,以可溶性氮含量、DPPH自由基清除率和羟自由基清除率为考察指标,对酵母菌发酵条件进行优化。最优的发酵条件为:营养盐溶液量10 mL,啤酒酵母菌液量3 mL,30℃下发酵60小时。此工艺下制备的花生抗氧化肽的可溶性氮含量达到10.74 mg/mL,发酵液对DPPH和羟自由基清除率分别为93.57%和98.40%。 3、第三章研究了以乳酸菌作为发酵菌种,采用固态发酵技术,以发酵时间、发酵温度、菌液量和营养盐溶液量为试验因素,以可溶性氮含量、DPPH自由基清除率和羟自由基清除率为考察指标,对乳酸菌发酵条件进行优化。最优的发酵条件为:营养盐溶液量25 mL,乳酸菌菌液量5 mL,35℃下发酵60小时。此工艺下制备的花生抗氧化肽的可溶性氮含量达到70.92 mg/mL,发酵液对DPPH和羟自由基清除率分别为95.00%和86.28%。 4、第四章研究了以黑曲霉作为发酵菌种,采用固态发酵技术,以发酵时间、发酵温度、菌液量和营养盐溶液量为试验因素,以可溶性氮含量、DPPH自由基清除率和羟自由基清除率为考察指标,对黑曲霉发酵条件进行优化。最优的发酵条件为:营养盐溶液量15 mL,黑曲霉菌液量1 mL,30℃下发酵36小时。此工艺下制备的花生抗氧化肽的可溶性氮含量达到38.74 mg/mL,发酵液对DPPH和羟自由基清除率分别为81.22%和84.88%。 5、第五章研究了以枯草芽孢杆菌作为发酵菌种,采用固态发酵技术,以菌龄、发酵时间、发酵温度、菌液量、营养盐溶液量、水浴温度和水浴时间为试验因素,以可溶性氮含量、DPPH自由基清除率和羟自由基清除率为考察指标,对枯草芽孢杆菌发酵条件进行优化。最优的发酵条件为:营养盐溶液量16 mL,枯草芽孢杆菌菌液量3.8 mL,45℃下发酵41小时。此工艺下制备的花生抗氧化肽的可溶性氮含量达到123.36 mg/mL,发酵液对DPPH和羟自由基清除率分别为85.25%和89.85%。 6、第六章研究了以米曲霉作为发酵菌种,采用固态发酵技术,以菌龄、发酵时间、发酵温度、菌液量、营养盐溶液量、水浴温度和水浴时间为试验因素,以可溶性氮含量、DPPH自由基清除率和羟自由基清除率为考察指标,对米曲霉发酵条件进行优化。最优的发酵条件为:营养盐溶液量26 mL,米曲霉菌液量5.3 mL,33℃下发酵38小时。此工艺下制备的花生抗氧化肽的可溶性氮含量达到62.28 mg/mL,发酵液对DPPH和羟自由基清除率分别为86.00%和94.58%。 7、比较酵母菌、乳酸菌、黑曲霉、枯草芽孢杆菌、米曲霉五种微生物在最优发酵条件下制备的抗氧化肽的抗氧化活性,发现酵母菌发酵制备的抗氧化肽活性较高,对抗氧化肽的功能性质和理化性质的测定,发现在pH较小或较大时,蛋白溶液的溶解度、起泡性和乳化性更好,且花生蛋白的乳化性和起泡性与溶解度呈正相关。收起

关键词 : 抗氧化肽微生物固态发酵花生粕

3. 平阴玫瑰花色苷纯化工艺优化、分子修饰及应用研究

[学位论文] 赵垒山东师范大学 2011年硕士导师: 唐琳共109页

摘要 : 花色苷是一种水溶性植物色素，是植物组织呈现蓝色、紫色或红色的主要因素，对植物生理及人体生理的保健具有重要作用。玫瑰(Rosa rugosa Thunb)属蔷薇科植物，在我国栽培历史悠久，是我国传统十大名花之一，其花具有很高的食用和药用价值，一般用于提... 展开花色苷是一种水溶性植物色素，是植物组织呈现蓝色、紫色或红色的主要因素，对植物生理及人体生理的保健具有重要作用。玫瑰(Rosa rugosa Thunb)属蔷薇科植物，在我国栽培历史悠久，是我国传统十大名花之一，其花具有很高的食用和药用价值，一般用于提取精油，从提取精油后的玫瑰残渣中提取花色苷，既可解决玫瑰精油厂废渣处理问题，又可获得安全保健的天然色素。本论文主要研究内容如下: (1)在前期提取实验的基础上，通过静态吸附解吸实验筛选出纯化玫瑰花色苷最佳树脂为AB-8。然后研究了AB-8树脂的静态吸附解吸条件，在此基础上研究AB-8树脂的动态吸附解吸条件，通过单因素实验以及响应面实验，得到最佳吸附条件:上柱吸附色素浓度15.63mg/L，pH值1.92，流速7。19BV/h，在此条件下，树脂对玫瑰花色苷的吸附量达到3.42mg；最佳解吸条件乙醇浓度67%、洗脱剂pH值1.1、洗脱流速2.72BV/h、洗脱剂用量3.45BV，在此条件下色素的解吸率99.19%。 (2)将花色苷样品与各种酰基供体(月桂酸、苯丙酸、苹果酸、对香豆酸、阿魏酸、水杨酸、乙酸、丙二酸、柠檬酸)在非水环境中以Novozyme435酶为催化剂进行酰化反应，并且利用液相及其红外检验实验结果，对比实验组和未加酶组实验结果，可以大致推断出，玫瑰花色苷与乙酸以及月桂酸发生了酰基反应，通过公式，粗略的计算花色苷的酰化率。 (3)通过单因素实验获得各个因素较优水平，在此基础上运用PB试验选出在花色苷微胶囊化中有显著影响的因素:芯壁比、固形物含量和进风温度，并且得出三种因素对花色苷微胶囊化的影响顺序:芯壁比>固形物含量>进风温度，然后利用实验设计软件SAS，建立响应值和各个因素之间的响应面分析模型，得到在玫瑰花色苷微胶囊化中的最佳工艺条件:剪切速率13000rpm、剪切时间1min、进风温度161℃、出风温度80℃、芯壁比3.82%、麦芽糊精与β-环糊精比为2、阿拉伯胶比例7。5%、固形物含量25。57%。收起

关键词 : 平阴玫瑰花色苷残渣提取静态吸附解吸纯化工艺分子修饰

4. 黑果枸杞LrMYB3和LrETC1基因的克隆和功能分析

[学位论文] 秦欢四川大学 2021年硕士导师: 唐琳共97页

摘要 : 黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murry.)是茄科（Solanaceae）枸杞属（Lycium）的一种落叶多棘刺灌木，因其果实富含大量的花青素而受到人们广泛关注。花青素是植物中的一种天然色素，具有较强的抗氧化活性，不仅可以帮助植物抵御逆境胁迫，而且对促进人... 展开黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murry.)是茄科（Solanaceae）枸杞属（Lycium）的一种落叶多棘刺灌木，因其果实富含大量的花青素而受到人们广泛关注。花青素是植物中的一种天然色素，具有较强的抗氧化活性，不仅可以帮助植物抵御逆境胁迫，而且对促进人类健康也大有裨益。已有研究表明，MYB转录因子在花青素的合成中起着关键性的调控作用。目前，由于黑果枸杞基因组尚未公布，对其花青素合成的分子调控机制研究较少，因此克隆出黑果枸杞中与花青素合成相关的MYB基因并进行功能研究，可为全面解析其花青素合成的调控网络、进而为提升其果实中花青素的含量奠定理论基础。前期，课题组已经利用黑果枸杞和白果枸杞果实的不同发育阶段测得了转录组数据，根据基因功能注释结果和差异表达基因，筛选鉴定到了两个参与花青素合成调控的MYB转录抑制因子：LrETC1和LrMYB3。本研究即利用生物信息学分析、遗传转化、酵母双杂交等分子生物学技术对LrETC1和LrMYB3基因在花青素合成中的作用进行了研究，具体研究结果如下：（1）从黑果枸杞果实中克隆到了两个与花青素合成相关的MYB转录抑制因子。LrETC1基因的完整CDS序列长度为240bp，编码79个氨基酸，同源蛋白序列比对和保守结构域分析表明其仅含有一个保守的MYB结构域，属于R3-MYB家族。LrMYB3基因的完整CDS序列长度为534bp，编码177个氨基酸，同源蛋白序列比对和保守结构域分析表明其含有两个保守的MYB结构域，属于R2R3-MYB家族。系统进化树表明LrETC1和LrMYB3蛋白均与其它物种中调控花青素合成的MYB转录抑制因子聚在一支，并分别与番茄中SlMYBATV和矮牵牛中PhMYB27转录因子的亲缘关系最近。蛋白亚细胞定位表明转录因子LrETC1和LrMYB3均定位于细胞核。（2）qRT-PCR分析表明，LrETC1和LrMYB3基因在黑果枸杞中的表达量高于白果枸杞，并且在黑果枸杞的各个组织中均有表达，其中在果实中的表达量最高并且其呈现出的表达趋势均随着果实成熟过程中花青素积累量的升高而逐渐升高，到果实完全成熟后表达量下调。转录激活活性分析表明，LrETC1和LrMYB3蛋白在酵母中均不具有转录激活功能。（3）构建植物过表达载体，获得过表达LrETC1和LrMYB3的转基因拟南芥株系，结果显示，与野生型相比，这两个基因的转基因拟南芥种子的种皮颜色较浅，呈现出浅棕色，并且其幼苗在蔗糖胁迫下均无色素积累。qRT-PCR分析显示，拟南芥花青素合成途径相关的结构基因均出现表达下调。进一步在烟草中进行功能验证，遗传转化获得过表达LrMYB3的转基因烟草株系，结果显示转基因烟草的花冠颜色相比于野生型较淡，呈现出淡粉色至只有少量色素积累的白色。qRT-PCR分析显示，转基因烟草花冠中与花青素合成相关的结构基因也都表达下调，尤其是关键结构基因NtDFR、NtANS和NtUFGT。（4）酵母双杂交系统表明LrETC1蛋白只与LrJAF13蛋白互作，而LrMYB3蛋白与LrAN1b和LrJAF13蛋白均能发生互作。荧光素酶报告实验表明转录因子LrMYB3与LrAN1b结合可以降低LrAN1b转录因子对黑果枸杞花青素合成途径中关键结构基因LrDFR的激活效应。（5）利用染色体步移技术克隆到了LrMYB3基因上游2163bp的启动子序列，PlantCARE分析其含有与MYB转录因子的结合位点，初步推测黑果枸杞中的R2R3-MYB转录激活因子可以激活MYB抑制子LrMYB3的表达，从而形成反馈调节机制来平衡黑果枸杞果实中花青素的积累。收起

关键词 : 黑果枸杞 LrMYB3基因 LrETC1基因花青素合成生物学功能

5. 黑果枸杞花色苷的提取工艺优化及体外抗氧化活性研究

[学位论文] 李国秀四川大学 2021年硕士导师: 唐琳共94页

摘要 : 黑果枸杞（LyciumruthenicumMurr.）为茄科枸杞属植物，果实中富含大量的花色苷，具有抗氧化、抗衰老、降血脂等功效，因此开展黑果枸杞果实中的花色苷提取工艺及抗氧化活性研究工作具有重要意义。实验室花色苷提取的常用方法：有机溶剂萃取法、超声波... 展开黑果枸杞（LyciumruthenicumMurr.）为茄科枸杞属植物，果实中富含大量的花色苷，具有抗氧化、抗衰老、降血脂等功效，因此开展黑果枸杞果实中的花色苷提取工艺及抗氧化活性研究工作具有重要意义。实验室花色苷提取的常用方法：有机溶剂萃取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法和生物酶辅助提取法。与上述提取方法相比，双水相萃取法具有一步实现花色苷的分离纯化、经济环保、有较高的萃取率等优点。目前关于黑果枸杞中花色苷的双水相萃取研究鲜见报道，对双水相萃取黑果枸杞花色苷的体外抗氧化活性研究鲜见报道。基于以上研究现状，本文的研究目的是：优化黑果枸杞花色苷提取工艺并比较不同提取方法下得到花色苷的体外抗氧化活性，以期通过本研究工作为黑果枸杞花色苷研究积累更多基础资料。具体内容如下： 1、采取超声酶辅助提取黑果枸杞花色苷的最优提取工艺条件为：液料比25mL/g，提取时间30min，乙醇浓度75%。在此条件下提取甘肃省、新疆维吾尔自治区、青海省、宁夏回族自治区四个地区（后文简称甘肃、新疆、青海、宁夏）的黑果枸杞花色苷，其中来自青海地区的黑果枸杞花色苷含量最高，花色苷含量为（17.92±0.04）mg/g。说明青海地区的黑果枸杞是一种优质的种质资源。 2、EtOH/(NH4)2SO4萃取花色苷的最佳工艺条件为：乙醇质量分数25%，萃取时间为36min，硫酸铵质量分数为23%，在此工艺条件下花色苷含量为（15.46±0.31）mg/g。EtOH/NaH2PO4萃取花色苷的最佳工艺条件为：乙醇质量分数24%，萃取时间为37min，磷酸二氢钠质量分数为27%，在此工艺条件下花色苷含量为（15.02±0.19）mg/g。对EtOH/NaH2PO4双水相体系中磷酸二氢钠进行回收及再利用，回收率和再利用率分别可达91.29±0.22%。以回收的磷酸二氢钠进行双水相萃取黑果枸杞花色苷，其再利用率可达94.20±0.34%。 3、基于花色苷含量、花色苷色价、多糖去除率对花色苷提取效果进行比较。结果表明：双水相萃取花色苷含量与超声酶辅助法相比无显著差别，但是纯度提高了2倍。EtOH/(NH4)2SO4双水相萃取花色苷可以除去90.62%的多糖，EtOH/NaH2PO4双水相萃取可以除去82.16%的多糖。双水相萃取无需额外添加无机酸或者有机酸，此方法更加环保绿色，更加适用于花色苷的提取。 4、在相同的色谱条件和质谱条件下和相同的保留时间，三种提取方法下经过大孔树脂纯化的花色苷均鉴定出了15种相同的花色苷。在其他保留时间下，未发现三种方法下提取的花色苷成分有差异。这说明了双水相萃取相比超声酶辅助法能够完全保留黑果枸杞中的花色苷。 5、不同方法提取花色苷的DPPH、ABTS自由基清除能力、总还原力强弱顺序为：LRN＞LRP＞LRE（LRN：EtOH/(NH4)2SO4双水相萃取法；LRP：EtOH/NaH2PO4双水相萃取法；LRE：超声酶辅助法）。说明双水相萃取花色苷与超声酶辅助提取花色苷相比具有良好的抗氧化活性。细胞实验表明LRN、LRNA（LRN：EtOH/(NH4)2SO4双水相萃取法；LRNA：EtOH/(NH4)2SO4双水相萃取花色苷的AB-8大孔树脂纯化物）双水相萃取的花色苷能通过抑制ROS的产生从而缓解t-BHP诱导正常大鼠肝细胞BRL3A细胞产生的氧化应激损伤。收起

关键词 : 黑果枸杞花色苷超声酶辅助提取双水相萃取工艺优化抗氧化活性

6. 宁夏枸杞叶化学成分分析与保肝活性研究

[学位论文] 辜莞芹四川大学 2021年硕士导师: 唐琳共94页

摘要 : 宁夏枸杞（LyciumbarbarumL.），茄科枸杞属植物，是我国传统药用植物，其果实、根皮、叶均可入药。相较于其传统药用部位果实和根皮，目前关于宁夏枸杞叶的研究较少。枸杞叶又名“天精草”，据记载其具有补虚益精，清热明目的功效，是一种药食两用的... 展开宁夏枸杞（LyciumbarbarumL.），茄科枸杞属植物，是我国传统药用植物，其果实、根皮、叶均可入药。相较于其传统药用部位果实和根皮，目前关于宁夏枸杞叶的研究较少。枸杞叶又名“天精草”，据记载其具有补虚益精，清热明目的功效，是一种药食两用的食物，在民间常用作蔬菜和茶饮。研究表明宁夏枸杞叶具有保肝功效，但其保肝物质基础及作用机制尚不明确。植物多酚在肝脏疾病的治疗中一直受到广泛关注，本研究的主要目的是对宁夏枸杞叶水提物中的酚类成分进行分析，建立体外肝细胞损伤模型，同时结合分子对接和网络药理学方法探讨其保肝活性和作用机制。首先，对宁夏枸杞叶水提物中酚类成分（LBE）进行分析。本研究优化了超高效液相色谱-质谱（UPLC-MS）对宁夏枸杞叶酚类提取物的分析方法，有效缩短了分析时间。从LBE中初步鉴定出10种酚类化合物，外标法定量结果表明1mgLBE中含有绿原酸16.41μg，隐绿原酸3.01μg，芦丁19.75μg，山奈酚-3-O-芸香糖苷1.60μg。其次，建立了t-BHP诱导的大鼠正常肝细胞系BRL3A细胞损伤模型以探究LBE的保肝活性及机制。结果表明，在10-500μg/mL浓度范围内LBE对BRL3A细胞无显著毒性，且LBE可提高受损伤的BRL3A细胞存活率；肝功能指标、氧化应激相关指标、抗氧化酶活性和ROS水平的测定结果表明LBE可通过增强细胞抗氧化活力而减缓细胞所受氧化性损伤；此外，LBE还可通过上调Nrf2下游抗氧化基因和蛋白的表达和下调NF-κB下游炎症因子的表达来发挥其保肝功效，本研究结果表明LBE可通过激活AMPK/GSK3β/Nrf2通路和抑制NF-κB通路来缓解t-BHP所致BRL3A细胞损伤。最后，针对LBE中主要的8个化合物C1-C7和C10，利用分子对接和STRING等在线数据库推定出保肝活性较好的化合物，然后基于网络药理学系统阐述这些化合物发挥保肝活性的潜在机制。分子对接结果显示8个化合物与35个靶蛋白具有高亲和力，据此建立了化合物-靶标（C-T）网络分析得到C7、C3、C5、C6和C10具更多的蛋白靶标和更好的生物活性。再进一步建立化合物-靶标-通路（C-T-P）网络，发现这5个化合物可能以多成分多靶标的方式作用于以AKT1、IL-6、NQO1、MAPK11、MAPK8、SOD1、HO-1、NFKB3为核心的靶标网络，参与调控与AMPK信号通路相关的TNF信号通路、MAPK信号通路、PI3K-AKT信号通路、FoxO信号通路等，以此发挥其保肝功效。综上，本研究对LBE进行了成分分析以及保肝活性和机制研究，证明了LBE中的酚类化合物通过激活AMPK/GSK3β/Nrf2通路发挥体外保肝活性，并进一步地通过分子对接和网络药理学对其物质基础和保肝机制进行了深入的探讨。本研究工作为宁夏枸杞叶开发为新的保肝茶和保健品提供了理论基础和实验数据支撑，并为其他药用植物保肝机制的研究提供了参考方法。收起

关键词 : 宁夏枸杞叶酚类成分保肝活性分子对接网络药理学

7. 花色苷与人血清蛋白、糖化血清蛋白相互作用研究

[学位论文] 高鑫山东师范大学 2018年硕士导师: 唐琳共91页

摘要 : 本文通过荧光光谱、傅里叶红外光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱以及分子对接等技术研究了C3G与HSA、gHSA的相互作用机制；对猝灭机理、结合能力、作用力类型、结合位点数以及作用位点等实验参数进行了分析。并进一步研究了C3G对HSA糖化的影响，对C... 展开本文通过荧光光谱、傅里叶红外光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱以及分子对接等技术研究了C3G与HSA、gHSA的相互作用机制；对猝灭机理、结合能力、作用力类型、结合位点数以及作用位点等实验参数进行了分析。并进一步研究了C3G对HSA糖化的影响，对C3G的抗糖化能力进行了分析，进而对抗糖化作用阶段以及抗糖化方式等进行了推测。最后比较分析了 C3G，D3G 与P3G三种花色苷对HSA糖化的影响，对三种花色苷的抗糖化能力进行了比较，推测了可能影响花色苷抗糖化能力的相关因素。为花色苷对糖尿病的预防与防治提供了一定的理论支持。本论文主要分为以下部分： 1. 综述了花色苷的分类、结构以及部分生理功能。介绍了人血清蛋白的基本结构与糖化机理过程。对距今为止，有关花色苷和血清蛋白作用的研究的进展、方向进行了大体介绍。并进一步论述了相关研究技术在小分子与蛋白间相互作用方面上的应用。对本课题的选题目的、意义以及研究方面进行了描述。 2. 采用荧光、紫外、红外光谱、圆二色谱法、分子对接等分析技术分别研究了C3G与HSA、gHSA的相互作用。实验发现C3G与HSA，gHSA的结合机理为静态猝灭，主要作用力为氢键和范德华力。HSA，gHSA中的色氨酸、酪氨酸残基均受到了C3G影响，但C3G与HSA，gHSA的结合对氨基酸残基的微环境几乎没有影响。从二级结构方面来说，C3G 对二级结构影响较大，且糖化效应能够抑制C3G与血清蛋白的结合作用。通过pH依赖实验证明，pH对C3G 与血清蛋白的结合有较大的影响，且pH 7.4 时，结合能力最强，且蛋白结构发生了N-B转换。分子对接实验也在一定程度上证实了上述实验结果。 3. 运用透射电镜、圆二色谱、红外、原子力显微镜等技术研究了C3G对HSA糖化的影响，实验发现：在孵化期间 C3G 在缓冲液中的稳定性良好，其残留量足以与HSA发生结合作用。在孵化过程中，单纯HSA的粒度半径有一定程度的增加（约10 nm），然而其二级结构并没有发生明显的改变。与葡萄糖相比较，C3G 对 HSA 结构稳定性影响程度更大，且两者之间存在竞争结合关系。此外，实验发现C3G可以通过影响AGEs的形成有效地抑制HSA糖化的进行。并且通过对实验研究数据与相关研究的综合分析，我们推测 C3G的抑制效应主要存在于AGEs形成的第二与第三阶段之间，其可能通过三种不同的方式对AGEs的形成进行影响：抑制果糖胺的重排；诱捕活性羰基化合物以及抑制HSA分子间交联。实验进一步对C3G能够影响HSA交联的原因进行探究发现，C3G对于HSA二级结构与表面粗糙度的影响可能是其能够抑制交联发生的主要原因。 4. 借助紫外可见吸收光谱、荧光光谱、圆二色谱以及原子力显微镜研究了C3G，D3G与P3G三种花色苷对HSA糖化的影响。实验表明，三种花色苷均能够通过影响果糖胺与AGEs的形成对HSA的糖化产生抑制。通过对三种花色苷的比较分析发现，三种花色苷对AGEs生成部位的极性具有不同程度程度的影响（D3G，29 nm>C3G，18 nm>P3G，2 nm）。与C3G相比，P3G与D3G使得HSA样品在280 nm处吸光度的增强（P3G>D3G>C3G）更为明显。花色苷能够有效地抑制由葡萄糖引起的HSA样品的荧光猝灭，且抑制强度为D3G>P3G>C3G。CD图谱显示，P3G与D3G对HSA二级结构的影响强于C3G对HSA的影响程度。原子力显微图谱显示，D3G，P3G并未对HSA表面形态起到保护作用，HSA样品的Rms 粗糙度与平均高度均有一定程度的减小。通过对实验数据的综合分析，我们推测影响花色苷抗HSA糖化作用的主要原因在于花色苷B环的差异性，即受到花色苷本身抗氧化性与极性的影响。通过DPPH法对花色苷抗氧化能力的测定也进一步间接支持了该推测。收起

关键词 : 花色苷人血清蛋白糖化血清蛋白多光谱技术原子力显微镜

8. 大豆膳食纤维酸乳的研制

[学位论文] 刘萍山东师范大学 2010年硕士导师: 唐琳共90页

摘要 : 本文的主要目的是为了研究大豆膳食纤维酸奶制备的最佳工艺流程和工艺参数，以及微观结构和风味分析。在常规酸奶生产的加工理论与设备的基础上，对大豆膳食纤维酸奶的加工工艺进行了探究，主要研究内容包括: 1.通过菌种驯化试验，对乳酸菌进行驯... 展开本文的主要目的是为了研究大豆膳食纤维酸奶制备的最佳工艺流程和工艺参数，以及微观结构和风味分析。在常规酸奶生产的加工理论与设备的基础上，对大豆膳食纤维酸奶的加工工艺进行了探究，主要研究内容包括: 1.通过菌种驯化试验，对乳酸菌进行驯化培养，以适应大豆膳食纤维乳的生长环境。结果表明，驯化至第七代时最适宜大豆膳食纤维酸奶的发酵。 2.通过单因素试验，考察各个因素对大豆膳食纤维酸奶品质的影响，确立最适宜的发酵条件。结果表明:奶粉12%、1%～1.5%大豆膳食纤维、白砂糖6%、19000rpm高速剪切分散乳化2min、95℃杀菌5min、2:1的球杆菌比例、3%的接种量、43℃发酵3.5h，对大豆膳食纤维酸奶的酸度、粘度和口感影响比较小。 3.在对多种亲水稳定剂筛选的基础上，确定变性淀粉、明胶、PGA作为复配稳定剂。应用三因素三水平正交试验设计，得出其最佳配比是3:1.5:1，在此条件下发酵，所得的大豆膳食纤维酸奶的稳定性和感官品质比较好。 4.利用PB试验设计筛选出显著性影响因素，根据中心组合(Box-Benhnken)实验设计原理，采用三因素三水平的响应面分析，得出最佳工艺参数为:膳食纤维1.25%，稳定剂0.57%，接种量3.16%。 5.利用扫描电镜对大豆膳食纤维酸奶的微观结构进行观察，发现在其微观结构中有一系列具有规则的、更加紧密的、均匀的网络结构，这种结构能够有效地保留水分，提高酸奶的持水性能、稳定性，改善酸奶的品质。 6.通过电子鼻对大豆膳食纤维酸奶和品牌酸奶的风味进行对比分析，发现膳食纤维的添加对酸乳的口感影响很小。 7.通过贮藏试验，考察了货架期内理化特性的变化，发现大豆膳食纤维的添加能够延缓酸乳的后酸化，对于延长保质期有一定的帮助。综上实验方法和最优工艺参数，制作出了集营养保健和美味于一体的大豆膳食纤维酸奶，丰富了酸奶的品种和营养价值。收起

关键词 : 大豆膳食纤维酸乳发酵条件稳定剂理化特性

9. 西南地区麻疯树种子的化学成分和种苗离体快繁研究

[学位论文] 李化四川大学 2006年硕士导师: 唐琳共89页

摘要 : 麻疯树(Jatropha curcas L.)为大戟科麻疯树属植物，有广泛的用途。本文研究了麻疯树的部分植化和组培性质以更好的开发我国的麻疯树资源。从西南的6个地区采集了麻疯树种子并分析比较了它们的生物学性状和种子油的理化性质及脂肪酸组成。所有样... 展开麻疯树(Jatropha curcas L.)为大戟科麻疯树属植物，有广泛的用途。本文研究了麻疯树的部分植化和组培性质以更好的开发我国的麻疯树资源。从西南的6个地区采集了麻疯树种子并分析比较了它们的生物学性状和种子油的理化性质及脂肪酸组成。所有样品的百粒重范围为41.8 g～71.39g，出仁率为60．02％～81.43％，种仁含油率为51.76％～57.93％，种子含油率为31.07％～47.17％，不饱和脂肪酸含量为74.89％～79.68％。其中永胜产麻疯树种子的品质最好，它的出仁率为81.43％，种仁含油率57.93％，种子含油率47.17％，不饱和脂肪酸含量79.68％。攀枝花和宁南产的麻疯树种子次之。双柏和罗甸的麻疯树种子油的酸值为0.81，在所有样品的酸值0.81～9.46中为最低。对麻疯树种子及油性质的相关数据进行方差分析。结果表明，不同产地的麻疯树种子的生物学性质、种子油理化性质和脂肪酸组成都有一些差异。麻疯树种子的提取物有杀灭血吸虫宿主螺的活性，并且有报道推测该物质可能为皂苷。然而目前关于麻疯树皂苷的研究报道很少。本实验先用正交法对麻疯树总皂苷的提取工艺中乙醇浓度、提取系统中固液比例、水浴温度和提取次数4个因素进行研究，优选出简便可靠的麻疯树总皂苷提取工艺。其最佳提取条件是：用4倍于材料量的80％的乙醇，在70℃回流提取3次。而后采用脱脂后水浴醇提的方式大量提取，结合大孔吸附树脂和硅胶柱层析分离得到部分大极性物质。通过薄层层析、紫外光谱扫描以及HPLC对这些物质进行了初步检测。为了保存、推广和改良麻疯树的种质，对麻疯树进行了促腋芽分枝和生根诱导实验。发现KT、2,4-D的激素搭配适于诱导愈伤：培养基MS＋1.0mg/LBA＋0.01 mg/L IBA＋5mg/L AgN0<,3>的腋芽分枝效果较好;pH值的变化对腋芽分枝的影响不大；采用瞬时高浓度生长素刺激或者无激素的活性炭培养基都能得到92％以上的生根率。收起

关键词 : 麻疯树种子油腋芽诱导生物学理化性质种苗繁殖化学成分

10. 黄酮类活性成分与血清白蛋白相互作用的研究

[学位论文] 贾万腾山东师范大学 2012年硕士导师: 唐琳共88页

摘要 : 本论文运用荧光猝灭光谱、紫外-吸收可见光谱、红外光谱等多光谱分析手段,从分子水平上研究了四种结构相近的黄酮类小分子与牛血清白蛋白(BSA)在模拟生理条件下的相互作用.通过对结合作用过程各结合参数的研究讨论,对比了不同黄酮与BSA结合作用的光谱... 展开本论文运用荧光猝灭光谱、紫外-吸收可见光谱、红外光谱等多光谱分析手段,从分子水平上研究了四种结构相近的黄酮类小分子与牛血清白蛋白(BSA)在模拟生理条件下的相互作用.通过对结合作用过程各结合参数的研究讨论,对比了不同黄酮与BSA结合作用的光谱特征,对黄酮类活性成分在体内运输与代谢、药物分子设计和功能性食品研发等有重要意义. 本论文共分为以下四部分: 1.第一章综述了血清白蛋白的分子结构、植物黄酮的分类和主要生理功能、大分子与小分子结合的相关背景知识和常用研究方法,并介绍了目前该领域的研究进展和一些尚待解决的问题. 2.第二章讨论了实验操作方式对大分子与小分子结合荧光猝灭体系的影响,并研究了模拟生理环境下槲皮素与BSA相互作用的光谱特征.求得了不同温度下的猝灭常数和结合常数,证明在本实验条件下,槲皮素与BSA的相互作用为单一的静态猝灭.求得槲皮素在BSA上结合位置与212位色氨酸的结合距离为1.783 nm.由求得的热力学参数,证明槲皮素与BSA之间的主导作用力为静电引力.同步荧光光谱和红外光谱结果分别表明槲皮素对BSA的二级结构有一定影响.金属离子实验结果表明,对于不同结合参数,不同金属离子的影响程度是不同的. 3.第三章通过紫外-可见吸收光谱、荧光猝灭法、同步荧光法和红外光谱法研究了木犀草素、橙皮素和牛血清白蛋白的结合作用过程.根据实验结果,初步判断木犀草素与牛血清白蛋白的作用属于动态猝灭和静态猝灭并存的混合猝灭,橙皮素与与牛血清白蛋白的作用属于动态猝灭,且木犀草素对牛血清白蛋白的内源荧光的猝灭程度明显高于橙皮素.热力学参数计算结果表明,橙皮素、木犀草素和BSA之间都存在静电引力.同步荧光光谱实验结果表明木犀草素和橙皮素与 BSA结合的位点可能在色氨酸残基附近.紫外-可见吸收光谱结果表明 BSA可以与木犀草素、橙皮素发生相互作用,且对BSA结构改变情况不同,红外光谱结果进一步说明木犀草素、橙皮素对BSA二级结构产生了不同影响. 4.第四章研究了生理浓度下Ca2+,K+,Cu2+,Mg2+,Fe3+这5种金属离子对芹菜素-BSA体系Ksv，Ka和n的影响,发现Mg2+影响最大.选择pH值、NaCl浓度、Mg2+浓度为单因素,研究了在实验水平范围内Ksv、Ka和n的值与pH值、NaCl浓度、Mg2+浓度的关系.通过响应面法实验,得到了Ksv、Ka和n与pH值、NaCl浓度、Mg2+浓度的多元二次回归方程.在实验研究的因素水平范围内,通过响应面分析得出:对于Ksv、Ka的值,NaCl浓度的影响最大;对于n值,pH值的影响最大.此结论可为用荧光猝灭光谱法研究功能小分子与生物大分子之间的相互作用时,在选择实验条件方面提供一些借鉴. 收起

关键词 : 黄酮活性成分血清白蛋白相互作用荧光猝灭光谱特征