摘要: 本研究以花魔芋和珠芽魔芋为试材进行了魔芋浅层液态培养体系研究，并结合浅层液态培养与秋水仙素溶液浸泡法对魔芋愈伤组织进行了多倍体诱导研究。试验结果如下： ⑴以花魔芋球茎切块为外植体建立了浅层(深约5mm，约10mL)液态培养体系。结果表明，... 展开 本研究以花魔芋和珠芽魔芋为试材进行了魔芋浅层液态培养体系研究，并结合浅层液态培养与秋水仙素溶液浸泡法对魔芋愈伤组织进行了多倍体诱导研究。试验结果如下： ⑴以花魔芋球茎切块为外植体建立了浅层(深约5mm，约10mL)液态培养体系。结果表明，MS+6-BA0.5+NAA0.5+蔗糖3.0％+0.1％PVP(pH5.8)为最优初代培养基；MS+6-BA2.0+NAA0.5+蔗糖3.0％+0.1％PVP(pH5.8)与MS+6-BA1.0+NAA0.5+蔗糖3.0％+0.1％PVP(pH5.8)，二者交替培养为最优芽分化方案；1/2MS+IAA0.5+蔗糖1.5％+0.1％PVP(pH5.8)为最优生根培养基。另外在试材愈伤组织继代3次后发现了A型、B型、C型三种愈伤组织，三者在外观、组织结构和分化能力上存在差异。试验和生产上选择A型和B型愈伤组织进行分化培养可得到高效稳定的分化体系。 ⑵以珠芽球茎切块为外植体建立了浅层液态培养体系。结果表明，MS+6-BA0.5+NAA0.5+蔗糖3.0％+0.1％PVP(pH5.8)为最优初代培养基；MS+6-BA1.5+NAA0.5+蔗糖3.0％+0.1％PVP(pH5.8)与MS+6-BA0.5+NAA0.5+蔗糖3.0％+0.1％PVP(pH5.8)，二者交替培养是最优出芽方案，这样可连续批量获得组培苗。生根最优培养基为1/2MS+IAA0.5+蔗糖1.5％+0.1％PVP(pH5.8)。在继代过程中仅见一种外观乳白色，质地疏松的愈伤组织类型，其石蜡切片发现大量生长中心。 ⑶试验发现浅层液态培养基在防止初代褐变，愈伤组织诱导，芽分化，根分化上均优于固态培养基。在浅层液态培养体系基础上进行了花魔芋多倍体诱导试验。秋水仙素溶液(含二甲基亚砜2％)浓度分别为0.005％、0.01％、0.05％、0.1％，采用浸泡法，浸泡温度为15℃。结果表明，随着秋水仙素浓度和浸泡时间的提高，试材愈伤组织的成活率、分化率均呈下降趋势，而变异率升后降。试材愈伤组织以0.1％的秋水仙素溶液，在15℃下浸泡2小时，接种于分化培养基成活率为83.3％，分化率为64.0％，变异率41.53％。试验通过根尖染色体敲片观察仅发现了二倍体和四倍体个体。 ⑷根尖染色体敲片结果表明，诱导的变异植株为四倍体。本试验进一步研究了四倍体花魔芋的形态特征。对植株外部形态特征观察发现，四倍体植株矮化，叶片变宽，叶形指数变小，充分体现了形态器官的巨大性。魔芋四倍体叶色更加浓绿，叶片下表皮的气孔及其保卫细胞体积明显增大，而气孔密度下降。 收起