中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 王翠春山东农业大学 2008年博士导师: 任辉共314页

摘要 : 我国的资本市场从设立至今已经有十多年的发展历程。十几年间,上市公司的数量从最初的十几家发展壮大到今天的一千多家。巨大的市场在为众多企业提供了广阔的筹资空间的同时也给上市公司提供了一个展示自身魅力的舞台,这个魅力就来自于上市公司财务质... 展开我国的资本市场从设立至今已经有十多年的发展历程。十几年间,上市公司的数量从最初的十几家发展壮大到今天的一千多家。巨大的市场在为众多企业提供了广阔的筹资空间的同时也给上市公司提供了一个展示自身魅力的舞台,这个魅力就来自于上市公司财务质量。资本市场上公司股票价格的潮起潮落、变幻莫测,实际上是市场和投资者对上市公司的资产管理和运用质量、债务风险和偿债能力、盈利能力和盈利质量、资本扩张性和公司发展潜力的描述和评价的一种直观反映。上市公司股票价格的变动当然会受到国际和国内经济和政治形势、国家宏观政策法规、行业走向、单个企业的重大利好等多种因素的影响,但其中最重要的因素之一就是公司的财务质量。理性的资本市场股票价格的波动与公司财务质量必然是呈正相关关系。目前,随着资本市场的扩容增速,大量的企业涌入资本市场,虽然上市公司多数都是行业中的优秀代表,但是市场经济的经营法则,优胜劣汰的竞争机制导致上市公司上市后财务质量状况良莠不齐,有些甚至差别较大。公司的财务质量集中反映上市公司的发展状况,因此,对上市公司的财务质量状况进行客观的分析与评价,对于更好地把握上市公司的发展趋势,寻找改善和提升上市公司财务质量的策略,具有极其重要的理论意义和现实意义。我国是一个农业大国,农村人口的数量占全国人口数量的75％左右,调整农业生产结构、加强农村基础设施建设和增加农村劳动力就业、增加农民收入的“三农”问题多年来一直是党和政府的工作重心之一。推动农业企业产业化、规模化经营,做大做强农业企业,把更多的农业龙头企业经股份制改造推向市场,是解决“三农”问题的重要举措。然而,由于行业的自身特点和弱质性特征以及经营环境等因素导致农业上市公司的盈利能力和资产质量较低等一系列问题,在相当大程度上影响了农业上市公司的持续发展。因此,通过客观分析和评价农业这一关系国计民生的重要行业的上市公司的财务质量状况,发现影响农业上市公司财务质量的主要因素,提出更有建设性扶持农业上市公司快速发展的政策建议,也是具有重要现实意义的一件事情。本课题的研究以上市公司财务质量评价的基本理论为基础,按照财务质量评价的基本框架,通过利用主要财务指标一般对比分析和因子分析法对上市公司的财务质量进行客观地评价。从因子得分出发,采用对比分析、回归分析、均值分析和案例结合分析,对上市公司的财务质量及其影响的主要因素进行逐一探究。同时,2007年正逢新会计准则执行元年,在分析评价中,将新会计准则的实施对于上市公司特别是农业行业上市公司财务质量产生的影响进行案例分析。在对上市公司整体和农业上市公司进行财务质量的因子分析的基础上,进一步分析研究我国资本市场的股票价格及其变动与上市公司的财务质量之间的相关关系。最后,基于上述的分析和评价结果得出基本的研究结论并提出有利于改善和提高上市公司财务质量的对策建议。全文的主要内容包括以下六个部分：第一章,导论。在对论文选题的背景和意义进行简要介绍的基础上,简要描述了本文研究的理论基础,明确了本文的研究目的与方法,对相关研究文献进行综述,对本文研究的思路、内容结构以及创新予以概括性描述。第二章,上市公司财务质量评价的基本理论问题。本章研究的内容,既是专门的理论问题,又是后面几章展开的基础。本章首先是对财务质量的概念及其内在特征作出界定,分别分析了财务质量的各类相关利益者的需求,在归纳分析了财务质量的构成要素的基础上,理清了表达公司财务质量的财务指标体系,分析讨论了组织财务质量评价的适宜的方法。第三章,上市公司整体财务质量的综合评价。主要对上市公司财务质量状况的主要指标进行统计描述和分析,以上市公司公开披露的财务数据为依据,在对上市公司主要财务指标进行一般对比分析基础上,对选择的样本公司2006年财务质量状况进行因子分析及对影响综合质量的主因子进行分析；基于2007年新会计准则执行的背景下,对上市公司财务质量发生的变化进行因子分析,将两种会计政策环境下的样本公司的财务质量进行对比分析,最后分析总结上市公司财务质量变化的情况并进行原因剖析。第四章,农业类上市公司财务质量综合评价。在对农业上市公司进行界定的基础上,介绍了农业上市公司的产生发展历程,以便于后续内容的理解。本章同样先使用主要财务指标进行一般对比分析,然后用因子分析法对农业类上市公司在过去的三年间(2004-2006)财务质量分析评价,对行业的重点上市公司进行案例分析,以便更准确地得出分析评价的结论。此外,本章还对新会计准则-生物资产准则实施对上市公司财务质量的影响进行了理论与实证分析。第五章,上市公司财务质量与股价的相关性分析。基于样本公司的财务质量综合得分和诸因子得分,进行Spearman检验上市公司的股票价格与上市公司财务质量及其诸因子之间的相关关系及变化趋势,阐释我国资本市场的股票价格与公司财务质量之间的相关程度,并进行原因分析。第六章,主要结论与建议。依据上述分析研究与结果,本章得出的主要结论是：1、总体上看,我国上市公司的财务质量近年来一直处于不断提升的通道之中；2、上市公司的财务质量存在多样化的群体差异性；3、无论是从总体上看还是从个体上看,上市公司财务质量仍然有待于进一步提高；4、导致我国上市公司形成目前这样的财务质量,原因是多方面的；5、农业类上市公司情况总体上并不理想,但发展势头值得预期；6、总体看来,上市公司的财务质量与其股票价格呈正相关关系的。笔者提出若干对策建议：1、充分认识提高财务质量的重要性；2、抓住体制、机制的改革与完善,解决提高公司财务质量的原动力；3、做大做强主营业务,依托主业的发展壮大提高公司的财务质量；4、努力抓好创新,依靠产品创新和管理创新提高企业的核心竞争力；5、继续加大对农业企业特别是农业上市公司的扶持力度,真正发挥其在社会主义新农村建设中的龙头带动作用；6、加强投资者教育,提高投资者素质,建设成熟稳定的证券市场。收起

关键词 : 上市公司农业上市公司财务质量评价因子分析相关性分析

2. 中国东南部地区及云南省土壤暗色丝孢菌分类研究

[学位论文] 许俊杰山东农业大学 2006年博士导师: 张天宇共294页

摘要 : 土壤真菌系指以土壤作为活动场所完成其全部或部分生活史的真菌，是土壤生态系统的基础，存在丰富的多样性，其中半知菌种类最多，而暗色丝孢菌占半知菌中的大部分。中国气候多样，南北跨越寒温带－温带、暖温带、亚热带和热带4个气候区，地形复杂多变... 展开土壤真菌系指以土壤作为活动场所完成其全部或部分生活史的真菌，是土壤生态系统的基础，存在丰富的多样性，其中半知菌种类最多，而暗色丝孢菌占半知菌中的大部分。中国气候多样，南北跨越寒温带－温带、暖温带、亚热带和热带4个气候区，地形复杂多变，土壤类型多样，植被丰富，土壤中蕴藏着丰富的真菌资源，本研究着重调查我国东南部六省(市)、香港、澳门特区及云南省土壤中的暗色丝孢真菌，以期充分发掘我国的真菌资源，并进一步丰富物种多样性。从上海、浙江、福建、江西、广东、台湾、香港、澳门和云南等9省、市选取有代表性的地点，共采集混合土样570多个，采用稀释平板法和土壤平板法分离获得600余个菌株，鉴定出暗色丝孢真菌53属，113种，其中新种36个，新变种1个，中国新记录种27个，未定名种2个，中国新记录属14个。每种均作详细的形态描述、地点分布(国内分省、直辖市到县级单位)，并对属级、种级特征，以及相似属、种的区别进行了简要讨论。新种为36个：厚膜平脐蠕孢Bipolarischlamydoseptata；瓶生布洛氏菌Bloxamiaphialophora；亚热带头梗菌Cephaliophorasubtropica；不规卷旋孢Cirrenaliairregularis；拟苍白弯孢Curvulariasubpallescens；长孢心形孢Cordanalongspora；球形矛束霉Doratomycesspherica、尖项矛束霉D.fastigium、矩形矛束霉D.oblonga；卵形内多隔孢属Endophragmiellaovalia；多变粘束霉Graphiumvariablum、不规粘束霉Graphiumirregularis；拟倒梨形腐殖霉Humicolasubpyriformis、粉红汉氏孢Hansfordiapinkera、澳门汉氏孢H.macao；红褐小粘束霉Leptographiumhenna；顶孢乳孢Mammariaapicalospora；多变单格孢Monodictysvariabilis、蒜头单格孢M.garlic、大孢单格孢M.macrospora和球形单格孢M.spherica；长孢漆斑霉Myrotheciumlongaspora；云南黑团孢Periconiayunnanesis；版纳瓶霉Phialophorabanna；窄叶皮司霉Pithomycesangustifoliatis；具节侧多隔孢Pleurophragmiumnodulum；拟腐殖齿梗孢Scolecobasidiumsubhumicola、细基齿梗孢S.acutabasica、中国齿梗孢S.sinica、长孢齿梗孢S.longisporium、弯孢齿梗孢S.curvularia、卵形齿梗孢S.ovariform；广东葡萄穗霉Stachybotrysguangdongnensis；椭圆匍柄霉Stemphyliumoblongum、温岭匍柄霉S.wenlingensis、长孢匍柄霉S.longosporium。新记录属14个：布洛氏菌属BloxamiaBerk.&Broome，刺球菌属ChaetopsinaRambelli，心形孢属CordanaPreuss.，指形孢属DactylariaSacc.，黑棘瓶孢霉属EchinobotryumCorda，疣瓶孢属EladiaG.Sm.，内多隔孢属EndophragmiellaSutton，单梗粘束霉HaplographiumBerkeley&Broome，乳孢属MammariaCes.exRabenh，侧多隔孢属PleurophragmiumCostantin，拟葡萄孢属PseudobotrytisKrzemieniewska&Badura，柱霉属ScytalidiumPesante，，四格孢属TetracoccosporiumSzabó，维郎那霉属VernonaeaCiferri&Montemartini。中国新记录种27个：梨孢假壳属的节菱孢无性态ArthriniumstateofApiosporaMontagnei，不规头梗菌Cephaliophorairregularis，肉桂色刺球菌Chaetopsinafulva，多脂长喙假壳菌的鞘孢无性态ChalarastateofCeratocystisadiposa，甘薯长喙假壳菌的鞘孢无性态ChalarastateofCeratocystisfimbriata，希金氏指形菌Dactylariahigginsii，紫棕毛束霉Doratomycespurpureofuscus，黑棘瓶孢霉Echinobotryumatrum，囊状疣瓶孢Eladiasaccula，缢缩内多隔孢Endophragmiellaconstricta，禾谷粘鞭霉Gliomastixcerealis，鲁蠕尔粘鞭霉Gliomastixluzulae，迪拜粘束孢Graphiumdubautiae，拟青霉粘束Graphiumpenicillioides，暗色可乐晶杯菌HaplographiumstateofHyaloscyphadematiicola，最小腐殖霉Humicolaminima，涝生漆斑霉Myrotheciuminundatum，尖侧多隔孢Pleurophragmiumacutum，晦涩小粘束霉Leptographiumreconditum，土栖假葡萄孢Pseudobotrytisterrestris，腐殖齿梗孢Scolecobasidiumhumicola，细小帚霉Scopulariopsisparvula，嗜热柱霉菌Scytalidiumthermophilum，虎尾兰葡萄穗霉Stachybotryssansevieriae，气生四格孢Tetracoccosporiumaerium，芭蕉维郎那霉Veronaeamusae，尖顶维郎那霉Veronaeaapiculatas。新变种1个：柱状矛束霉变种Doratomycescolumnarisvar.columnaris。未名种2个：未名枝孢Cladosporiumsp和Embellisiasp。其余为已知种。所有研究过的分离系的各干制培养物均保存在山东农业大学植物病理学标本室(HSAUP)，同时对活菌株进行了妥善保存。在上述研究的基础上，总结出了有关土壤真菌属级、种级分类标准和适用的培养条件如下： 1.属级分类标准我们所分离到的土壤真菌分生孢子除柱霉属Scytalidium为体生式产孢外，其他都为芽生式产孢，内壁芽生或全壁芽生，但产孢梗(产孢细胞)的延伸方式多样，结合这两个特征可以区分大多数属。由于所涉及的属分生孢子梗大多为菌丝状，因而载孢体的类型只有在少数属的区分时有用。对于分生孢子的形成方式与产孢梗(产孢细胞)的延伸方式都相同的属，产孢细胞的形态、分生孢子的形态、链生或单生、萌发方式、隔膜的形成次序、大小、颜色、以及表面的纹饰等可用于属的进一步区分。菌落特征、颜色以及生长特性在有些属中属于比较稳定特征，对分属具有参考意义。分生孢子梗束、分生孢子座和刚毛的有无也可作为少数属的区分特征。 2.种级分类标准对于同属内的真菌在相同的条件下培养，尽量在条件一致的情况下进行形态比较，免除外部环境对形态的影响。对某些分生孢子形态受培养条件影响的种，还要结合参考前人研究的培养条件，尽量与其保持一致，如细基格孢属Ulocladium，链格孢属Alternaria，弯孢霉属Curvularia，平脐蠕孢属Bipolaris以及突脐蠕孢属Exserohilum等。分生孢子的形状、大小、隔膜、颜色、表面的纹饰等是最重要的种级分类特征，尽管这些特征有一定的变化，但在种内相对稳定。分生孢子梗及产孢细胞的特征在有些属中可以作为主要的分种特征。菌落特征在个别属也可对种进行区分。毛束霉属Trichurus和漆斑霉属Myrothecium中，刚毛可以作为区分种的特征。 3.适合的培养条件总结研究工作的经验，有利于多数土壤暗色丝孢菌产孢的条件主要为：常用的培养基有PDA，PCA，CMA，TWA+W等；培养条件一般为20-25℃，12h光照/12h黑暗，培养l-3周(培养时间根据不同的属产孢时间的长短而定)。机械损伤，以及由此带来的通气改善、适当的低温刺激、近紫外光照射等处理，有助于难产孢菌系产孢。收起

关键词 : 中国东南部地区云南省土壤真菌系暗色丝孢菌分类新种中国新记录属土壤生态系统

3. 北方主要木质藤本植物光合效率及其对水分与光照的响应

[学位论文] 夏江宝山东农业大学 2007年博士导师: 张光灿共282页

摘要 : 本文综合研究了木质藤本植物光合作用效率过程与节水生理机制，确定出主要光合作用效率参数与根一土界面水分含量及叶-气界面光量子通量的定量关系，探索根一土界面水分驱动光合作用的气孔限制机理和叶绿素荧光动力学机制，为干旱瘠薄荒山植被恢复中优... 展开本文综合研究了木质藤本植物光合作用效率过程与节水生理机制，确定出主要光合作用效率参数与根一土界面水分含量及叶-气界面光量子通量的定量关系，探索根一土界面水分驱动光合作用的气孔限制机理和叶绿素荧光动力学机制，为干旱瘠薄荒山植被恢复中优良藤本植物选择及其合理的立地配置提供理论与技术依据。获得以下主要研究成果： (1)叶片光合作用效率的光响应过程及其土壤水分驱动效应藤本植物的光合作用、蒸腾作用及水分利用效率与土壤湿度和光照强度密切相关，而且有明显的阈值响应。确定出14种藤本植物正常生长所允许的土壤水分最大亏缺程度、土壤湿度上限值和适宜的土壤湿度范围，以及有利于植物生长和水分高效利用的适宜光合有效辐射强度及上、下限值。其中以紫藤为例说明如下： ①维持紫藤正常生长(同时具有较高光合速率(P<,n>)和水分利用效率(WUE))的土壤湿度范围，在重量含水量(％)为13.1％～22.6％、相对含水量(W<,r>)在46.5％～80.6％之间，最佳土壤湿度在％为19.9％(W<,r>为70.9％)左右。 ②紫藤对光照环境的适应性较强，在PAR为600～1600μmol·m范围内，P<,n>和WUE都具有较高水平，饱和光强大约在PAR为800～1000μmol·m。 ③紫藤正常生长所允许的最低土壤湿度在W<,m>为10.2％(W<,r>为36.2％)左右，此时允许的最高PAR在1000μmol·m左右，是紫藤叶片光合机构受到破坏的临界点。④建立藤本植物叶-气界面水分传输效率对辐射强度的响应模型，如美国凌霄采用非直角双曲线模型进行模拟光响应过程较好，光响应曲线曲角接近于1，随着重量含水量W<,m>(5.5％～19.4-％)、相对含水量W<,r>(20.1％～71.1％)的递增，光补偿点降低，光饱和点、最大净光合速率及表观量子效率均升高，在W<,m>为19.4％时，达到光补偿点最低(21.61μmol·m)，光饱和点最高(1400μmol·m)。 ⑤随着水分胁迫的加重，光合速率的下降由气孔限制向非气孔限制过渡。如紫藤光合作用非气孔限制的发生与土壤湿度与光照强度密切相关，在W<,m>为15.7％～22.6％(W<,r>为56.0％～80.6％)范围内，光合作用主要受气孔限制，受光照强度的影响较小；超出此范围后，受光照强度的影响较大，出现由气孔限制转变为非气孔限制的PAR临界值。 (2)叶片光合作用效率的日动态及其对土壤水分胁迫的响应①水分充足条件下，影响藤本植物光合作用的主要因子，可以归纳为两类，一类是大气温度和空气相对湿度，一类是光照强度；在重度水分胁迫条件下，一类是光照强度和大气CO<,2>浓度，一类是空气相对湿度。 ②在各种水分条件下，金银花品种的光合速率相对较高，特别是鸡抓花和花叶表现明显。在适度的水分胁迫下，爬藤卫矛、蛇葡萄、大叶扶芳藤的光合速率相对也较高；其次光合速率维持较高值的为美国凌霄、小叶扶芳藤、五叶地锦、三叶地锦、紫藤等几种藤本植物。在水分条件相对较好的情况下，与其他藤本植物相比较，紫藤、五叶地锦、常春藤均表现出较低的光合速率值。 ③随着水分胁迫的加重，多数藤本植物蒸腾速率和水分利用效率表现出下降的趋势，其蒸腾速率的影响因子变化也较为复杂。从单一因子相关性分析和逐步回归方程中的综合影响因子来看，各水分胁迫下，环境因子对美国凌霄水分利用效率的影响较为复杂，多为4～5个环境因子共同影响，其中大气C<,a>、C<,i>、T<,L>对其影响较大。 ④随着水分胁迫的加重，藤本植物类群频率出现的高低，表现为光合速率、蒸腾速率大小以次为高、中等、低，且在对照和轻度水分胁迫下，以高、中等类群的藤本植物品种居多，中度和重度水分胁迫下，以相对低等类群的藤本植物品种居多。 (3)不同土壤湿度下叶片光合作用效率对CO,<2>浓度的响应①土壤水分增高，有利于藤本植物在高CO<,2>浓度下光合作用的进行，对其高浓度CO<,2>的利用起到了促进作用。 ②随着水分胁迫的加重，藤本植物CO<,2>饱和点逐渐降低，在高CO<,2>浓度下，响应曲线变化比较平缓。随着水分胁迫的加重，各CO<,2>浓度下，14种藤本植物出现低光合速率值的机率明显增加。 ③随着水分胁迫的加重，多数藤本植物的CE呈现下降的趋势；常春藤、三叶地锦、紫藤、大毛花、花叶等5种藤本植物的厂呈现增加趋势，其他几种藤本植物在轻度、中度水分胁迫条件下相差不是很大；多数藤本植物的RuBP最大再生速率表现出降低趋势。 (4)叶绿素荧光动力学参数对水分胁迫的响应①随着水分胁迫的加重，藤本植物的F<,v>/F<,m>比值随之下降，光能转化幅度降低，影响光合电子传递的正常进行，从而影响藤本植物的光合作用。 ②随着水分胁迫的加重，藤本植物的φ<,PSIl>值下降幅度依次增大。在对照和轻度、中度水分胁迫下，多数藤本植物的φ<,psIl>值能够恢复到初始值大小，但严重的干旱胁迫会限制了PS Ⅱ反应中心的电子传递，降低了PS Ⅱ电子传递量子产量③随着水分胁迫的加剧，藤本植物NPQ值增大，光抑制的现象加强，以热的形式耗散的那部分光能也随着增加，热耗散能力随着干旱胁迫的加剧而增强。 ④随着水分胁迫的加重，藤本植物．ETR日均值逐渐降低，下降幅度也依次增大。水分胁迫的加重降低光合电子传递速率，在一定程度上不能够有效耗散过剩的光能，从而导致光强过高和干旱胁迫加重对光合机构产生一定的破坏作用。 (5)维持藤本植物高效用水和良好生长的适宜土壤水分阈值与有效辐射强度范围①维持美国凌霄高效生理用水和高光合生产力存在的适宜水分条件，W<,m>为13.5％～19.4％，W<,r>为49.5％～71.1％，适宜的光合有效辐射范围(PAR)为800～1600μmol·m。其他依次为： ②紫藤W<,m>为13.1％～22.6％，W<,r>为46.5％～80.1％，PAR为600～1400μmol·m。 ③常春藤W<,m>为17.6％～20.5％，W<,r>为63.8％～74.3％，PAR为600～1400μmol·m。 ④蛇葡萄W<,m>为8.9％～19.8％，W<,r>为30.8％～68.5％，PAR为1000～1200μmol·m。 ⑤五叶地锦W<,m>为9.7％～14.0％，W<,r>为33.7％～48.7％，PAR为600～1200μmol·m。 ⑥三叶地锦W<,m>为8.9％～15.7％，W<,r>为28.6％～50.2％，PAR为400～800μmol·m。 ⑦大叶扶芳藤W<,m>为9.8％～15.2％，W<,r>为34.0％～52.7％，PAR为6001000μmol·m。 ⑧小叶扶芳藤W<,m>为8.2％～18.3％，W<,r>为32.3％～72.2％，PAR为60012001μmol·m。 ⑨爬藤卫矛W<,m>为11.2％～21.2％，W<,r>为41.0％～77.7％，PAR为600～1000μmol·m。 ⑩大毛花W<,m>为11.4％～19.8％，W<,r>为40.4％～70.3％，PAR为800～1400μmol·m。 ⑩秧花W<,m>为9.0％～17.2％，W<,r>为31.6％～60.5％，PAR为600～1200μmol·m。花叶W<,m>为12.9％～17.9％，W<,r>为46.2％～64.2％，PAR为800～1200μmol·m。蒙花W<,m>为12.0％～16.4％，W<,r>为43.3％～59.2％，PAR为600～1400μmol·m。鸡抓花W<,m>为17.3％～22.3％，W<,r>为60.7％～78.2％，PAR为1000～1400μmol·m。 (6)藤本植物的光适应性和水分适应性特征①鸡抓花、爬藤卫矛、大叶扶芳藤、蒙花等4种藤本植物应属于典型的阳生植物。蛇葡萄、五叶地锦、常春藤等3种藤本植物则为一般的喜光性植物。美国凌霄、大毛花、紫藤、秧花等4种藤本植物属喜光耐阴植物。小叶扶芳藤、三叶地锦、花叶等3种藤本植物应为典型的阴生植物。 ②在维持高光合速率的前提下，对土壤水分的耐水湿性由大到小排序依次为：小叶扶芳藤>紫藤>鸡抓花>爬藤卫矛>常春藤>三叶地锦>秧花>五叶地锦>大叶扶芳藤>美国凌霄>大毛花>蛇葡萄>花叶>蒙花。对土壤水分干旱的适应性由大到小排序依次为：三叶地锦>蛇葡萄>秧花>小叶扶芳藤>五叶地锦>大叶扶芳藤>大毛花>爬藤卫矛>蒙花>花叶>紫藤>美国凌霄>鸡抓花>常春藤。收起

关键词 : 木质藤本植物光合作用土壤水分光照强度叶绿素

4. 中国热带及亚热带地区凋落枯枝暗色丝孢真菌分类研究Ⅰ

[学位论文] 马建山东农业大学 2012年博士导师: 张修国共274页

摘要 : 我国疆域辽阔，生态环境和植被结构类型复杂多样，积累了丰富的适于真菌生存繁衍的凋落枯枝资源，必然蕴涵着种类繁多的暗色丝孢真菌类群，但目前对该类基质的暗色丝孢真菌资源挖掘贫乏，更缺乏属、种系统性调查和分类研究。通过广泛征集我国热带及亚... 展开我国疆域辽阔，生态环境和植被结构类型复杂多样，积累了丰富的适于真菌生存繁衍的凋落枯枝资源，必然蕴涵着种类繁多的暗色丝孢真菌类群，但目前对该类基质的暗色丝孢真菌资源挖掘贫乏，更缺乏属、种系统性调查和分类研究。通过广泛征集我国热带及亚热带地区(包括：海南、云南、广东、福建、湖南及四川)不同生境及植被类型区域凋落枯枝，立足经典分类，借助显微描绘和照相技术，综合种菌形态学、生态学及生物学性状，系统开展了26个暗色丝孢真菌属的分类研究，修订完善了卢曼霉属(Lomaantha)的属级特征，澄清了类葚孢属(Sporidesmiella)、半棒孢属(Hemicorynespora)及假绒落菌属(Pseudospiropes)种级分类的混乱，同时，补充或完善了顶孢霉属(Acrogenospora)等13个属已知种或中国已知种的分类检索表，正确描述鉴定新种31个，中国新记录属4个，中国新记录种18个，中国己报道种43个，丰富了该类群真菌分类研究的内容，为深入开展其它生态地理区域凋落枯枝暗色丝孢真菌属、种资源多样性研究提供经验积累与借鉴。合格描述鉴定的新种、中国新记录属(种)及已报道种分别是：新种31个：海南顶孢霉AcrogenosporahainanensisJianMa&X.G.Zhang，枫香拟棒孢CorynesporopsisliquidambarisJianMa&X.G.Zhang，石楠生爱氏霉EllisembiaphotiniaeJianMa&X.G.Zhang，罗汉松爱氏霉E.podocarpiJianMa&X.G.Zhang，尖顶爱氏霉E.schimaeJianMa&X.G.Zhang，栀子内隔孢EndophragmiellagardeniaeJianMa&X.G.Zhang，枫香内隔孢E.liquidambarisJianMa&X.G.Zhang，润楠内隔孢E.machiliJianMa&X.G.Zhang，龙眼生半棒孢HemicorynesporadimocarpiJianMa&X.G.Zhang，阔孢异参孢HeteroconiumphellodendriJianMa&X.G.Zhang，长窄林氏霉LinkosiahibisciJianMa&X.G.Zhang，芦苇生卢曼霉LomaanthaphragmitisJianMa&X.G.Zhang，香叶拟折孢MinimelanolocuslinderaeJianMa&X.G.Zhang，桑生拟折孢M.moriJianMa&X.G.Zhang，五月茶新葚孢NeosporidesmiumantidesmaeJianMa&X.G.Zhang，桐生新葚孢N.mallotiJianMa&X.G.Zhang，黄叶树生新葚孢N.xanthophylliJianMa&X.G。Zhang，椭孢假绒落菌PseudospiropeslinderaeJianMa，X.G.Zhang&R.F.Castaneda，厚壳桂异棒孢SolicorynesporacryptocaryaeJianMa&X.G.Zhang，榕生异棒孢S.ficiJianMa&X.G.Zhang，女贞异棒孢S.ligustriJianMa&X.G.Zhang，香叶异棒孢S.linderaeJianMa&X.G.Zhang，润楠生异棒孢S.machiliJianMa&X.G.Zhang，阔孢异棒孢S。melicopesJianMa&X.G.Zhang，猴耳环生类葚孢SporidesmiellaarchidendriJianMa&X.G.Zhang，润楠类葚孢S.machiliJianMa&X.G.Zhang，蔷薇类葚孢S.rosaeJianMa&X.G.Zhang，五月茶生葚孢SporidesmiumantidesmatisJianMa&X.G.Zhang，枫香葚孢S。liquidambarisJianMa&X.G.Zhang，润楠葚孢S.machiliJianMa&X.G.Zhang，含笑休氏霉StanjehughesiamicheliaeJianMa&X.G.Zhang。中国新记录属4个：半棒孢属HemicorynesporaM.B.Ellis、异参孢属HeteroconiumPetr.、异棒孢属SolicorynesporaR.F.Castaneda&W.B.Kendr.及布氏霉属StephembruneriaR.F.Castafieda。中国新记录种18个：巨孢顶孢霉AcrogenosporagigantosporaS.Hughes，印度拟棒孢CorynesporopsisindicaP.M.Kirk，栎生拟棒孢C.quercicola(Borowska)P.M.Kirk，单隔拟棒孢C.uniseptataP.M.Kirk，弯曲内隔孢Endophragmiellacurvata(Corda)S.Hughes，圆柱内隔孢E.eboracensisB.Sutton，棍棒形半棒孢HemicorynesporaclavataG.Delgado，Mercado&J.Mena，竹生异参孢HeteroconiumarundicumChowdhry，优雅异参孢H。decorosumR.F.Castaneda，Saikawa&Guarro，休斯拟折孢Minimelanolocushughesii(M.B.Ellis)R.F.Castaneda&Heredia，橄榄色拟折孢M.olivaceusR.F.Castneda&Guarro，梭孢双曲孢Nakataeafusisporo(Matsush.)Matsush.，黏顶假绒落菌Pseudospiropescostaricensis(E.F.Morris)deHoog&Arx，多变异棒孢Solicorynesporapseudolmediae(R.F.Castaneda)R.F.Castaneda&W.B.Kendr.，森林异棒孢S.sylvaticaR.F.Castaneda，Heredia，R.M.Arias&Guarro，丹尼斯拟葚孢Sporidesmiopsisdennisii(J.L.Crane&Dumont)Bhat，W.B.Kendr.&NagRaj，冈村隆史葚孢SporidesmiumtakashiiSubram.，雅致布氏霉StephembruneriaelegansR.F.Castaneda。中国已报道种43个：球头顶孢霉Acrogenosporasphaerocephala(Berk.&Broome)M.B.Ellis，楠木生棒孢CorynesporabeilschmiediaeK.Zhang&X.G.Zhang，来檬棒孢C。citricolaM.B.Ellis，异侧岭棒孢C.euryaeJianMa&X.G.Zhang，厚皮树生棒孢C。lanneicolaDeighton&M.B.Ellis，常春木生棒孢C.merrilliopanacisZ.Q.Shang&X.G。Zhang，密脉木棒孢C.myrioneuronisJianMa&X.G.Zhang，金竹棒孢C.phylloshureaeX.G.Zhang&J.J.Xu，柚木生棒孢C.tectonaeX.G.Zhang&Ch.K.Shi，倒棍棒类棒孢CorynesporellaobclavataL.G.Ma&X.G.Zhang，小乔木树状霉Dendryphiopsisarbuscula(Berk.&M.A.Curtis)S.Hughes，黑色树状霉D.atra(Corda)S.Hughes，阔孢小双枝孢DiplocladiellaaltaR.Kirschner&CheeJ.Chen，小双枝孢D.scalaroidesG.ArnaudexM.B.Ellis，竹生爱氏霉Ellisembiabambusicola(M.B.Ellis)J.Mena&G.Delgado，丝顶爱氏霉E.filiaW.P.Wu，近多变爱氏霉E.paravaginataMcKenzie，长窄孢爱氏霉E.vaga(Nees&T.Nees)Subram.，多变爱氏霉E.vaginataMcKenzie，具喙内隔孢EndophragmiellarostrataP.M.Kirk，三隔内隔孢E.triseptataK.M.Tsui，Goh，K.D.Hyde&Hodgkiss，三隔棒梗孢Exserticlavatriseptata(Matsush.)S.Hughes，脉管棒梗孢E。vasiformis(Matsushima)Hughes，榕生异参孢HeteroconiumficiL.G.Ma&X.G.Zhang，木荷异参孢H.schimaeY.D.Zhang&X.G.Zhang，梭孢林氏霉LinkosiafusiformisW.P.Wu，表生拟树状霉ParadendryphiopsiscambrensisM.B.Ellis，书氏拟侧耳霉PleurotheciopsiswebsteriCazau，Aramb.&Cabello，蜂巢异棒孢Solicorynesporafoveolata(Pat.)Shirouzu&Y.Harada，棒孢类葚孢SporidesmiellaclaviformisP.M.Kirk，浅色类葚孢原变种S。hyalospermavar.hyalosperma(Corda)P.M.Kirk，小孢类葚孢原变种S.parvavar.parva(M.B.Ellis)P.M.Kirk，阔孢葚孢Sporidesmiumaltum(Preuss)M.B.Ellis，粪生葚孢S。coprophilumMatsush.，加纳葚孢S.ghanaenseM.B.Ellis，长喙葚孢S.longirostratumM.B。Ellis，结节葚孢S.nodipes(Penz.&Sacc.)S.Hughes，诺维信葚孢S.novozymiumW.P.Wu，小孢葚孢S.parvum(S.Hughes)M.B.Ellis，角孢葚孢S.pedunculatum(Peck)M.B.Ellis，爬藤葚孢S.rhaphidophoraeK.Zhang&X.G.Zhang，邓氏葚孢S.tengiiW.P.Wu，束梗密格孢Synnemacrodictysstilboidea(J.Mena&Mercado)W.A.Baker&Morgan-Jones。上述研究标本均保存于山东农业大学植物病理学标本室(HSAUP)与中国科学院微生物研究所菌物标本馆(HMAS)。半知菌作为一独立分类群，其分类研究主要依据无性阶段的形态特征，分类界定标准因真菌学家所持观点不同致使形态权重存在差异。在多年分类研究基础上，继承前人分类观点，较系统地概括了凋落枯枝暗色丝孢真菌属、种级划分标准： ①对于以腐生为主的凋落枯枝暗色丝孢真菌，应以自然基质上的形态特征为主要鉴别依据：对于单孢分离可培养的，其培养条件下的特征和产孢表型可作必要补充； ②以载孢体的类型，产孢梗(细胞)的延伸方式及产孢细胞的产孢方式为属级分类的主要依据；产孢位点特征、分生孢子脱落方式(裂解式/破生式)及其突出形态特征如真/假隔膜，单生/链生等不同属间有稳定差异的特征，有时易作为属级鉴别标准；产孢梗的分枝类型(帚状或轮状)、产孢细胞形状、刚毛及子座有无等特征有时对少数属的划分具一定参考价值； ③分生孢子的形状、大小、隔膜、色泽、孢壁纹饰及附属部件特征等是分种的主要依据。在近似种间，共同的、突出的分生孢子形态特征对属的划分也有意义。分生孢子隔膜的有无，形成的顺序和位置，在不同种间，有时甚至在不同属间有稳定的差异，也可作为分种(属)的标准之一； ④在种级分类标准中，分生孢子的形状视为一级标准，分生孢子的大小、隔膜视为二级标准，而分生孢子附属物及色素沉积等则通常视为三级标准。收起

关键词 : 热带地区亚热带地区凋落枯枝暗色丝孢真菌种属分类

5. 奶山羊非泌乳期乳腺组织全转录组特征及乳腺细胞重塑的分子调控机制

[学位论文] 玄荣山东农业大学 2023年博士导师: 王建民共265页

摘要 : 乳腺是哺乳动物位于乳房内的外分泌腺体，可以分泌乳汁来哺育后代。随着生殖周期的发生，乳腺细胞会经历重复的增殖扩张、分泌功能分化和退化等生理过程。特别是在非泌乳期，乳腺细胞会经历凋亡和自噬等退化过程，然后再恢复至妊娠期之前的状态，从而... 展开乳腺是哺乳动物位于乳房内的外分泌腺体，可以分泌乳汁来哺育后代。随着生殖周期的发生，乳腺细胞会经历重复的增殖扩张、分泌功能分化和退化等生理过程。特别是在非泌乳期，乳腺细胞会经历凋亡和自噬等退化过程，然后再恢复至妊娠期之前的状态，从而为新一轮泌乳活动做准备，这表明乳腺细胞具有高度可塑性。当前在啮齿动物和奶牛身上开展的乳腺退化和重塑的研究为乳腺发育与泌乳生物学提供了基础和借鉴，然而奶山羊作为具有重要经济价值的乳用家畜，乳腺退化和重塑过程至今尚未明确。因此，本研究以泌乳末期（产后240天）、干奶期（产后300天）和妊娠后期（配种后140天）的崂山奶山羊乳腺组织为研究对象（每个时期为3个样本），开展了非泌乳期乳腺组织的全转录组学测序，以期揭示非泌乳期乳腺组织的转录组特征，从编码RNA（mRNA）和非编码RNA（miRNA、lncRNA和circRNA）多角度去阐明山羊乳腺细胞退化和重塑的分子调控机制。研究结果主要分为以下四个方面: 1.mRNA组学分析结果显示，本研究成功构建9个山羊乳腺组织转录组文库，每个文库平均获得1.53亿个干净读数，且与山羊参考基因组的比对率≥95％。在3个不同发育阶段（LL、DP和LG）的乳腺组织中共鉴定1,381个差异表达基因。功能富集分析结果表明，差异基因主要富集到与细胞生长、凋亡、免疫，以及营养物质转运、合成和代谢相关的GO术语和KEGG通路中。体液免疫反应、补体激活、中性粒细胞介导的免疫等GO术语的显著富集（FDR＜0.05）表明，免疫系统在维持乳腺组织在退化期间的健康和清除凋亡细胞方面发挥着重要作用。乳腺发育相关的基因模块分析则显示，妊娠激素受体蛋白、细胞生长因子及其受体、以及胰岛素样生长因子结合蛋白的编码基因通过适应性转录变化调节乳腺退化的生理过程。进一步的乳腺生长发育网络分析结果表明，ERBB4被确定为调节乳腺生长发育的核心基因，它在妊娠后期的乳腺组织中高表达。在体外培养的山羊乳腺上皮细胞中过表达ERBB4可调节PI3K-Akt信号通路，减少细胞周期G1/S期阻滞和细胞凋亡，促进乳腺上皮细胞增殖。此外，ERBB4基因还影响启动乳腺退化和促进乳腺细胞重塑的基因（STAT1、STAT3、STAT5B、BCL2L11、CAPN2和LGALS3）的表达。 2.miRNA分析结果显示，本研究成功构建9个小RNA文库，每个文库平均获得2,500万个干净读数且与山羊参考基因组的比对率≥65％。共鉴定了4,038个miRNA,包括3,129个已知miRNA和909个新预测的miRNA。这些miRNA被注释到385个miRNA家族，其中mir-10、let-7和mir-9家族中miRNA数量最多。此外，在3个不同发育阶段的乳腺组织中鉴定了754个差异表达的miRNA。根据miRNA表达量进行聚类分析，获得了6组具有独特表达模式的miRNA簇。簇1与簇4中miRNA在干奶期特异性高表达，其靶基因显著富集到调节细胞形态发生和细胞外基质组织生理过程中(FDR＜0.05),表明这些miRNA的功能可能与干奶期乳腺组织重塑过程相关。簇2与簇5中miRNA在干奶期特异性低表达，其靶基因一方面被显著富集到表皮生长因子受体信号通路和发育生长调节相关的生理过程中，另一方面与细胞凋亡和免疫相关的生理过程也被富集(FDR＜0.05),这可能与退化期的乳腺上皮细胞广泛凋亡有关。此外，簇3中miRNA在妊娠后期高表达，簇6中miRNA在泌乳末期高表达。其中，簇3中miRNA靶基因被富集到乳腺上皮细胞分化、跨突触信号的调节和柱状上皮细胞分化等生理过程，这与妊娠后期乳腺上皮细胞快速增殖和泌乳功能分化有关。簇6中miRNA靶基因被富集到外源性凋亡信号通路的调控、巨自噬的负调控和细胞对肽激素刺激的反应等生理过程。miRNA研究补充了非泌乳期山羊乳腺组织miRNA表达特征，展示了乳腺退化过程中与细胞生长、凋亡和物质代谢等相关的miRNA与及其靶基因之间的调控关系。 3.lncRNA分析结果显示，在非泌乳期山羊乳腺组织中鉴定出3,074个lncRNA且lncRNA的长度更短、外显子数量更少和表达水平普遍低于蛋白编码基因。在三个比较组(LLvs.DP、DPvs.LG和LLvs.LG)中鉴定出331个差异表达的lncRNA,这表明lncRNA在转录水平的表达量在乳腺退化过程中发生了变化。有趣的是，与哺乳期相比，lncRNA在干奶期的表达更为活跃，这表明乳腺lncRNA的表达具有发育时期特异性。GO注释和KEGG通路富集分析表明，lncRNA可以通过多种作用模式调节乳腺中的免疫功能、细胞增殖、凋亡、激素、物质代谢、运输和细胞间通讯等生理过程。其中，顺式作用的lncRNA在干奶期和妊娠后期增强了对乳腺健康的保护。此外，在与乳腺发育相关的lncRNA-miRNA-mRNA网络中，LOC102168552被鉴定为核心lncRNA,它在妊娠后期的表达量高于干奶期和泌乳末期，其表达量与PRLR呈显著正相关，与chi-miR-324-3p呈显著负相关(P.adj＜0.05)。于山羊乳腺上皮细胞原代细胞系的验证试验表明，LOC102168552可通过竞争性结合chi-miR-324-3p,上调PRLR并激活催乳素信号通路，促进细胞增殖，减少细胞周期停滞在G1/S期，以及抑制细胞凋亡。然而，单独过表达LOC102168552并不影响乳腺细胞生长状态和催乳素信号通路。这表明LOC102168552必须依赖chi-miR-324-3p来抑制乳腺细胞凋亡。 4.circRNA分析研究结果显示，本研究共鉴定出11,756个circRNA,其中2,528个circRNA在所有三个阶段均有表达。外显子circRNA数量最多，最少的是反义circRNA。circRNA来源基因分析发现，9,282个circRNA来源于3,889个基因，127个circRNA来源基因未知。组蛋白修饰、GTPase活性调控、细胞极性建立或维持等GO术语显著富集(FDR＜0.05)表明circRNA来源基因功能的多样性。在非泌乳期鉴定了218个差异表达的circRNA。在干奶期乳腺中特异性表达的circRNA数量最多，在泌乳末期最少。这些表明在不同发育阶段的乳腺组织中circRNA表达的时间特异性。此外，本研究还构建了与乳腺发育、免疫、物质代谢和细胞凋亡相关的circRNA-miRNA-mRNA竞争性内源性RNA调控网络。这些发现将有助于理解circRNA在乳腺细胞退化和重塑中的调节作用。综上，本研究在非泌乳期奶山羊乳腺组织中鉴定出一批差异表达的mRNA、miRNA、lncRNA和circRNA。发现与细胞生长、凋亡、免疫、营养转运、合成和代谢等相关的基因或者非编码RNA在非泌乳期发生适应性转录变化，它们对于乳腺退化和乳腺细胞重塑过程具有重要的调控功能。此外，本研究分别揭示了ERBB4和LOC102168552是参与山羊乳腺细胞生长调控的关键基因或lncRNA,能够通过调控PI3K-Akt信号通路影响山羊乳腺细胞生长状态和细胞周期。这些发现有助于深入了解奶山羊乳腺退化和重塑的分子调控机制。收起

关键词 : 奶山羊非泌乳期乳腺组织全转录组特征乳腺细胞重塑

6. 中国华北北部地区土壤中暗色丝孢菌分类研究

[学位论文] 吴悦明山东农业大学 2006年硕士导师: 张天宇共260页

摘要 : 2003-2005年，从处于温带、半湿润季风气候区到寒温带、半干旱干旱大陆性气候的我国华北北部的内蒙古自治区、山西省以及河北北部的不同地区，根据不同地理类型以及不同植被类型，采集混合土样340余份。采用稀释平板法和土壤平板法分离获得800余个菌株... 展开 2003-2005年，从处于温带、半湿润季风气候区到寒温带、半干旱干旱大陆性气候的我国华北北部的内蒙古自治区、山西省以及河北北部的不同地区，根据不同地理类型以及不同植被类型，采集混合土样340余份。采用稀释平板法和土壤平板法分离获得800余个菌株，鉴定出暗色丝孢真菌41属，102种，其中新种4个，中国新记录种27个，中国新记录属1个。每种均作了详细的形态描述，并对属级特征，以及相似属、种的区别进行了简要描述及讨论，以期充分发掘我国的真菌资源，并进一步丰富该类群真菌的多样性。新种为：草原链格孢AlternariagrasslandensisY.M.Wu&T.Y.Zhang；贺兰山小镰孢FusariellahelanshanensisY.M.Wu&T.Y.Zhang；阿尔山单格孢MonodictysaershanensisY.M.Wu&T.Y.Zhang；瘤突齿梗孢ScolecobasidiumtuberculatumY.M.Wu&T.Y.Zhang. 中国新纪录种为：糖节菱孢Arthriniumsacchari(Speg.)M.B.Ellis；印度平脐蠕孢BipolarisindicaRai，Wadhwani&Tewari；褐黄查托斯皮纳孢ChaetospinafulvaRambelli；法斯特金色孢ChrysosporiumfastidiumPittT.Matsushima&H.Asahina,；少隔暗双孢CordanapauciseptataPreuss；椭圆暗双孢CordanaoblongisporaMatsushima；柱状矛束霉DoratomycescolumnarisH.J.Swart；小柄凸脐蠕孢Exserohilunpedicellatum(Henry)Leonard&Suggs；拟青霉粘束孢GraphiumpenicillioidesCorda；短小腐殖霉HumicolabrevisGilmanetAbbott；朗德小粘束霉LeptographiumlundbergiiLagerberg&Melin；亚简单黑乌霉Memnoiellasubsimple(Cooke)Deighton；阿司普鲁斯单格孢Monodictysasperospera(Cooke&Massee)M.B.Ellis；埃德文漆斑霉MyrotheciumadvenaSacc.；卡米卡里漆斑霉MyrotheciumcarmichaeliiGrev.；具臂丝葚霉Papulasporabrachiata(Ellis&Barth.)Crane&Schoknecht；嘉博普瑞恩黑团孢Periconiajabalpurensis1Tiwari&Agrawal；陆生假葡萄孢Pseudobotrytisterrestris(Timonis)Subram.；安利齿梗孢ScolecobasidiumanelliiGraniti；刺突齿梗孢ScolecobasidiumverruculosumRoyDwivedi&Mishra，；布鲁姆普帚霉ScopulariopsisbrumptiiSalvanet-Duval；腐生帚霉ScopulariopsishumicolaGL.Barron；橙色葡萄穗霉StachybotrysaurantiaGL.Barron;加拿大短梗蠕孢TrichocladiumcanadenseHughes；暗色短梗蠕孢Trichocladiumopacum(Corda)Hughes；葫芦形细基格孢Ulocladiumcucurbitae(Letendre&Roumeguère)Simmons；具疣细基格孢UlocladiumtuberculatumSimmons；细尖维郎那霉Veronaeaapiculata(Miller,Giddens&Foster)M.B.Ellis。中国新纪录属为：查托斯皮纳霉属ChaetospinaRambelli，各干制培养物保存在山东农业大学植物病理学标本室(HSAUP)，同时对获得的菌株进行了妥善保存。在上述研究的基础上，总结出了土壤中该类群真菌属级、种级分类标准和适用的培养条件。 1.属级分类标准笔者所分离到的土壤真菌均为芽生式产孢：内壁芽生或全壁芽生，但产孢梗(产孢细胞)的延伸方式多样，结合这两个特征可以区分大多数属。由于所涉及的不同属的分生孢子梗大多散生或丛生，因而载孢体的类型只有在少数属的区分时有用。对于分生孢子的形成方式与产孢梗(产孢细胞)的延伸方式都相同的属，产孢细胞的形态、分生孢子的形态、萌发方式、隔膜的形成次序、大小、颜色、以及表面的文饰等可以用来进一步区分之。菌落特征、颜色以及生长特性在有些属中比较稳定，对分属也具有参考意义而刚毛的有无也可作为少数属的区分特征。 2.种级分类标准同属内的真菌在条件一致的情况下培养后，进行形态比较，其中分生孢子的形状，大小，隔膜，颜色，表面的文饰等是最重要的种级分类特征。分生孢子梗以及产孢细胞的特征在有些属中可以作为主要的分种特征。在毛束霉属Trichurus、漆斑霉属Myrothecium中，刚毛也可用来区分种。 3.适合的培养条件选择对产孢有利且稳定的条件，常用的培养基有PDA，PCA，CMA，TWA+W等；培养温度一般为20-25℃，12h光照/12h黑暗，培养1-3周。机械损伤，以及由此带来的通气改善、适当的低温刺激、近紫外光照射也有助于产孢。收起

关键词 : 中国华北北部土壤暗色丝孢菌新种

7. 家庭农场传承模式及其实现机制研究

[学位论文] 陈金兰山东农业大学 2023年博士导师: 胡继连共254页

摘要 : 家庭农场既保留了家庭经营监督成本低的优点，又融合了现代高效农业生产方式，是新型农业经营主体中的核心主体，也是中国农业未来的发展方向。自2013年中央“一号文件”首次提出鼓励和支持家庭农场发展以来，中国家庭农场得到了快速发展，已经成为保... 展开家庭农场既保留了家庭经营监督成本低的优点，又融合了现代高效农业生产方式，是新型农业经营主体中的核心主体，也是中国农业未来的发展方向。自2013年中央“一号文件”首次提出鼓励和支持家庭农场发展以来，中国家庭农场得到了快速发展，已经成为保障国家粮食安全、农业农村现代化和乡村振兴目标实现的重要载体。但受中国农业从业人口老龄化影响，家庭农场主也呈现老龄化加剧特征，“未来谁来经营家庭农场”的问题开始凸显。中国家庭农场兴起时间较短，政府及社会各界的关注重点主要集中在如何提高家庭农场绩效等方面，忽略了农场主的退出问题。而传承是家庭农场长期可持续发展中不可逾越的一环，也是世界各国都面临的一个难题。发展和壮大家庭农场，需要在增量和存量两方面做好工作，保障存量是实现增量的基础。因此，如何实现家庭农场的顺畅传承，保障现存家庭农场后继有人是家庭农场在新发展阶段面临的新问题。本文围绕家庭农场传承相关问题展开研究，对家庭农场长期可持续发展、保障粮食安全、实现农业农村现代化和乡村振兴具有重要意义。本文在对国内外相关文献梳理归纳的基础上，以制度变迁、农户行为、交易成本、利益相关者等理论为指导，运用双变量Probit、内生转换、AHP、结构方程和博弈等模型及案例分析方法，探讨现代经济社会背景下我国家庭农场传承模式及其实现机制，明确不同传承模式的运行机制与障碍，揭示传统的父子传承模式下“父传”与“子承”的衔接机制及其效应，厘清无法实现父子传承的家庭农场的市场化传承决策机制，在此基础上优化家庭农场传承机制，减少家庭农场传承障碍，以期实现家庭农场顺畅传承，为延长家庭农场生命周期的政策制定提供依据，为实现家庭农场的可持续发展提供现实指导。主要研究结论如下: (1)父子传承和市场化传承为实现家庭农场传承的两大模式，二者的属性、优劣、运行机制等存在显著差异。父子传承模式是家庭农场首要考虑的传承模式，是在情感偏向、经济理性、传统伦理以及法律约束等多重条件下形成的，处于首选地位;而市场化传承模式是在父子传承模式的补充，处于次选地位，但发挥着越来越重要的作用。父子传承具有低交易成本等优势，但也容易滋生“农场孩童”;市场化传承模式有利于提高资源配置效率，但存在高交易成本等弊端。家庭父代与子代是父子传承模式的主要参与者，该模式是在二者意愿衔接的基础上通过传承计划的实施实现家庭农场传承;市场化传承是以现任农场主和继承者交易为核心，并在政府、中介组织等其他利益相关者影响下完成。通过实地调查发现，27.04％的受访家庭农场中“父传”与“子承”意愿能够衔接，父子传承模式存在父子意愿衔接度不高、传承计划缺失等运行障碍;无法实现父子传承的家庭农场中38.81％的期望通过市场化传承模式实现传承，但市场化传承模式存在交易对象难寻、交易过程协商难、制度供给与需求脱节、政府激励不足等运行障碍。 (2)父子传承决策是在内外因素共同影响下做出的家庭预期收益最大化的理性选择，对家庭农场经营行为及其可持续发展具有积极影响。以农户行为理论为指导，基于551份家庭农场调查数据，厘清了“父传”与“子承”的衔接机理，利用Bi-probit模型揭示了“父传”与“子承”意愿的内在联系及其影响因素，并通过内生转换模型验证了“父传”“子承”意愿衔接对家庭农场经营行为的影响。结果如下:一是“父传”与“子承”的衔接是在成本节约和代际利益驱动下实现的，并受内外环境因素影响;二是“父传”与“子承”意愿相互影响，均受经济收益、情感收益、风险感知等因素影响;三是子代涉入和政府支持能够强化经济收益对父子传承意愿的积极作用，弱化风险感知对传承意愿的作用;四是“父传”与“子承”意愿对制度约束的敏感度要高于制度支持，这源于制度的不稳定性与基层政府制度实施手段的机械性;五是经济收益和情感收益对父子传承意愿的影响在其他类家庭农场中更为明显，风险感知在种植类家庭农场中作用更明显，这主要源于其他类型家庭农场具有更强的盈利能力和风险抵御能力;六是父子传承意愿衔接能够对家庭农场当前经营行为产生积极影响，有利于家庭农场长期可持续发展，使家庭农场平均投资规模提高3.39％～17.35％,预期投资的可能性增加12.76％。 (3)市场化传承模式是传承主体实现自有资源“帕累托改进”的选择，交易成本为制约传递主体市场化传承意愿的主要因素，同时交易环境有待改善。以计划行为理论和交易成本理论为指导，基于402份家庭农场调查子样本数据和政府门户网站数据，揭示了难以实现父子传承的农场主市场化传承决策形成机理，利用结构方程探讨了农场主市场化传承意愿的影响因素，并进一步解析了主要制约因素，在分析交易要素发展现状的基础上测算了市场化传承交易市场的发育程度。结果如下:一是市场化传承决策是在传承主体获得收益的内生驱动力和政府等外部主体的利益诉求推动下形成的;二是交易成本为制约农场主市场化传承意愿形成的主要因素，知觉行为控制、行为态度、主观规范对农场主市场化传递意愿形成具有积极影响，各潜变量之间两两相关，相互影响;三是来源复杂的交易成本通过降低家庭农场经营权的供需或抬高交易价格制约市场化传承模式发展，由于传递方是交易成本的主要承担者，高昂的交易成本抑制了其传递意愿的产生，从而增加了家庭农场解体的可能性;四是受访地区家庭农场市场化传承交易市场发育程度为20.91％,尚处于初步发育阶段，配套机制不完善制约了市场发育进程,交易环境有待改善。（4）以机制设计和利益相关者理论为指导，从市场（内部）失灵与政府矫正角度优化了家庭农场传承机制，尽可能的提升家庭内“父传”、“子承”意愿的衔接，并推动市场化传承模式的发展，以期两种模式共同发力，实现家庭农场顺畅传承目标。以“完善动力机制—优化交接机制—构建保障机制”为逻辑主线，提出了父子传承机制优化策略。首先，通过强化经济比较收益、新时期三农认知和制度支持的积极作用以及弱化风险感知的阻碍作用四方面完善家庭农场父子传承的动力机制，提升潜在继承者接管农场的动力;其次，从细化传承计划角度优化了交接机制;再次，提出从增加政策引导与支持、强化家庭农场内部禀赋等方面构建保障机制;最后，通过四个典型案例印证了上述优化策略的可行性与有效性。遵循“产权界定—主体识别—利益相容—监督保障”的逻辑思路，提出了家庭农场市场化传承机制优化策略。首先，基于产权理论界定了家庭农场资产产权归属及其价值;然后，利用“米切尔评分法”将传递者、承接者、中介平台和政府识别为市场化传承中的主要利益主体，并明晰了各方利益诉求;而后，通过博弈分析发现，在四方积极参与市场化传承的条件下，能够大大降低行为实施的交易成本，并且实现了各方利益诉求和总福利最大化，特别是中介平台和政府的加入大大缓和了传递方与继承方的利益冲突;最后，基于上述结论，阐释了充分发挥中介平台与政府力量重构并完善市场化传承双边市场，以保障家庭农场顺畅实现传承的可行性。由此得到，两种传承模式的运行与发展均离不开政府的引导、支持与监管。（5）基于以上研究结论，提出了保障家庭农场传承顺畅实现的政策建议。从保障父子传承模式运行来看，应当提高家庭农场盈利能力，降低风险水平;转变社会对农民的传统认知，提高农场主职业吸引力;优化家庭农场经营环境，减少外部环境障碍;引导家庭农场提早制定传承计划，加强继承者培养。从保障市场化传承模式运行来看，应当设立家庭农场市场化传承准入门槛，降低交易风险;科学界定家庭农场产权归属，建立家庭农场资产评估体系;加快规范统一的家庭农场产权交易平台建设，提高平台利用率;积极寻找潜在继承者并加强培训，改善传承环境。收起

关键词 : 家庭农场传承模式双边市场经营主体实现机制

8. 区域农产品公用品牌建设绩效评价研究

[学位论文] 王雷山东农业大学 2022年博士导师: 张可成共252页

摘要 : 2017年中央一号文件提出要推进区域农产品公用品牌建设，这为进一步提高区域农产品公用品牌建设水平指明了方向。区域农产品公用品牌是最能发挥品牌引领作用的平台性、基础性农产品品牌形式，其建设绩效高低在一定程度上决定了农产品提质增效、农民增... 展开 2017年中央一号文件提出要推进区域农产品公用品牌建设，这为进一步提高区域农产品公用品牌建设水平指明了方向。区域农产品公用品牌是最能发挥品牌引领作用的平台性、基础性农产品品牌形式，其建设绩效高低在一定程度上决定了农产品提质增效、农民增收的效果。近年来，区域农产品公用品牌建设实践取得一定成效，但因品牌建设绩效评价工作复杂，指标不易量化，品牌建设投入效率难以评价，致使产出投入比不高，建设效果不够理想。区域农产品公用品牌建设效果到底如何？如何科学有效量化评价其建设绩效？指标不易量化的问题又如何解决？对这些问题的研究，有助于解决区域农产品公用品牌建设绩效衡量困难问题，形成可量化比较的区域农产品公用品牌建设绩效评价模型、体系及方法，为促进乡村产业振兴提供理论参考和现实指导。基于以上背景，本文以科学有效量化评价区域农产品公用品牌建设绩效为目标，遵循“发现问题—分析问题—解决问题”的研究思路，主要研究内容如下：①相关概念界定及理论分析。界定区域农产品公用品牌及其建设绩效概念，提出理论基础，厘清区域农产品公用品牌建设绩效形成的过程机理及其评价的理论框架。②基于扎根理论方法初步构建由品牌建设投入、品牌建设产出、品牌成长力（由成长系数表示）及自然禀赋（由禀赋系数表示）四维度构成的区域农产品公用品牌建设绩效评价模型及建设绩效评价指标体系。③采用多轮专家打分完成指标筛选，优化区域农产品公用品牌建设绩效评价指标体系；结合BWM法及结构熵权法，采用最小信息熵原理，对区域农产品公用品牌建设绩效评价的各指标权重进行综合赋权。④对品牌建设绩效评价的各指标进行了量化处理，尤其是对13个难以货币化的建设绩效评价指标如政策驱动类评价指标、消费者认同类评价指标及定性判断类评价指标等，采用了改进后的PMC模型、爬虫与文本挖掘法、专家调查结合赋值法等不同的量化模型方法予以量化。⑤以山东省烟台苹果、肥城桃、莱阳梨为例，对区域农产品公用品牌建设绩效进行了综合评价，并总结区域农产品公用品牌建设过程的问题。⑥基于前文分析，识别关键影响因素，提出区域农产品公用品牌建设绩效提升路径。主要研究结论如下：（1）区域农产品公用品牌建设绩效评价应立足于投入产出视角追求投入产出效率最大化。区域农产品公用品牌建设绩效是区域组织在一定时期内为实现其农业发展目标在区域农产品公用品牌建设上诸要素投入的效率。一方面，这里区域组织不仅仅包含区域内的政府或农业企业，还包含区域内的农业行业协会、农业合作社、农户等。另一方面，建设绩效评价不是单纯看产出效果如何，而是从投入产出效率最大化的角度进行综合评价。建设投入涉及到区域农产品建设过程中各主体的资金、技术、管理等投入，建设产出涉及到区域农产品公用品牌建设的直接和间接产出成果。（2）评价区域农产品公用品牌建设绩效是一项非常复杂的工作，需要相应的评价模型与指标体系。评价模型为品牌建设产出比建设投入后再乘以成长系数和禀赋系数。指标体系包括建设投入、建设产出、成长系数、禀赋系数4个一级指标，政府投入、直接产出效果、消费者认同、自然地理资源等12个二级指标以及政府资金投入、品牌溢价收益、政策驱动、水土环境资源适宜性等29个三级指标。通过实践中的案例验证，本研究所构建的绩效评价模型及其指标体系，具有一定的科学性和适用性，计算得出的绩效水平符合客观现实认知，能够合理测度品牌建设绩效水平。（3）区域农产品公用品牌建设绩效评价与一般产品品牌建设绩效评价相比具有其特殊性。区域农产品公用品牌作为公用品牌，具有准公共产品的属性，在乡村振兴的大背景下具有特色农业的外部性特征，其建设绩效评价与一般产品品牌建设绩效评价存在一定的区别。本文构建的评价模型和指标体系体现了这种区别，投入类指标的政府投入和协会投入作为引领主体和持有主体的投入，是公用品牌所特有的；产出类指标的区域效益和衍生效益指标则体现了对外部性的评价；且禀赋系数及成长系数指标里面的公共政策驱动和区域可持续发展基础两个指标也是指向这个特殊性的。（4）我国区域农产品公用品牌建设历经三种模式。①自发生成模式：立足禀赋、农户自发的品牌建设机制。②政府主导模式：政府引领和主导的品牌建设机制。③共建共享模式：多元共治、互利共享的品牌建设机制。根据我国区域农产品公用品牌建设的实践及学术研究经验，共建共享的区域农产品公用品牌建设模式相比而言更加有效。（6）区域农产品公用品牌建设产出评价是一个复杂、动态的过程。区域农产品公用品牌建设不是一蹴而就的，需要多元主体共同、长期协作。区域农产品公用品牌建设是一个系统工程，进行区域农产品公用品牌建设产出评价，不能仅看其直接产出效果，还要关注其间接产出效果，间接产出效果具有外部溢出效应。（5）区域农产品公用品牌建设绩效受到品牌建设投入的影响，但不是唯一影响。区域农产品公用品牌建设投入并不是越多越好，有效的建设投入才能够促进品牌建设具有较好的产出效果及发展潜力。进行区域农产品公用品牌建设时，要避免建设投入越多，建设绩效越高的误区。重要的是如何促进区域农产品公用品牌建设投入的有效性。（7）品牌成长力（由成长系数表示）体现了各品牌建设主体的积极意愿和对品牌建设在内外部环境上的支持，品牌成长力对区域农产品公用品牌建设绩效具有倍数效应。品牌成长力的可持续发展基础指标还恰好体现了对习近平总书记“走以生态优先、绿色发展为导向的高质量发展新路子”重要论述和指示的贯彻落实。当区域农产品公用品牌建设政策体系越完善，消费者对其品牌的认同度越高、品牌可持续发展基础越好，区域农产品公用品牌建设就越能取得突出的成效，因此积极培育品牌成长力对提升区域农产品公用品牌建设绩效具有重要意义。（8）区域农产品公用品牌建设受到区域“自然禀赋”（由禀赋系数表示）的影响。区域农产品公用品牌通常是建立在区域自然地理资源、社会文化资源及已有品牌资源的基础之上的，区域的“自然禀赋”与区域农产品公用品牌匹配度越高，区域农产品公用品牌建设的基础资源条件越优越。对区域农产品公用品牌建设主体而言，重要的是如何充分发掘该区域的“自然禀赋”资源，促进区域农产品公用品牌形成独具区域特色的、具有不可复制性的市场竞争力。（9）政府资金投入、品牌溢价收益、政策驱动、消费者认同等15个影响因素为区域农产品公用品牌建设绩效的关键影响因素。应重点从强化区域农产品公用品牌建设投入有效性、提升区域农产品公用品牌建设产出成效、培育品牌成长力及充分利用区域自然禀赋四个方面提升区域农产品公用品牌建设绩效。强化品牌建设投入有效性：①发挥政府的引导作用；②强化农业行业协会的中枢作用；③发挥农业合作社的促进作用。提升品牌建设产出成效：①促进品牌形成；②推进品牌可持续发展；③加强品牌文化建设。培育品牌成长力：①推进品牌政策落地；②提升消费者认同。充分利用区域自然禀赋：①挖掘区域特色；②培育良好的品牌生态环境；③夯实农业产业基础。收起

关键词 : 区域农产品公用品牌建设绩效评价

9. 中国南方五省农区土壤革螨多样性研究

[学位论文] 刘凯山东农业大学 2022年硕士导师: 谢丽霞共251页

摘要 : 生物多样性倍受全球各界关注，土壤生物多样性是其中研究热点之一。农田生态系统的生态安全与人类密切相关。中国耕地面积广阔，尤其是东部农区，既是主要粮食产区，也是重要的农业生态集中地。土壤革螨是常见三大土壤动物类群之一，分布广泛，数量庞... 展开生物多样性倍受全球各界关注，土壤生物多样性是其中研究热点之一。农田生态系统的生态安全与人类密切相关。中国耕地面积广阔，尤其是东部农区，既是主要粮食产区，也是重要的农业生态集中地。土壤革螨是常见三大土壤动物类群之一，分布广泛，数量庞大，但由于诸多因素使得革螨研究滞后于其他土壤动物。本研究以农区土壤革螨为研究对象，在南方五省农区中选择三种不同生境（农田、人工林、其他生境）的土地，采集土壤革螨标本，通过传统分类和生态学综合研究，探讨土壤革螨物种分布与多样性的关系，为保护土壤动物提供科学依据，推动动物学等基础学科的发展。主要研究结果如下： 1.南方五省农区土壤革螨分类研究共采集土壤革螨2233头，隶属于16科40属137种，其中包括1新种，江西殖厉螨Gaeolaelaps jiangxiensis sp.nov.；1个中国新纪录属，扁绥螨属Platyseius Berlese,1916；11个中国新纪录种，三线扁绥螨Platyseius triangralis Ishikawa,1969、印度扁绥螨Platyseius indicus Bhattacharyya,1968、美艳革伊螨Gamasiphis decoris(Karg,1990)、矛形革伊螨Gamasiphis lanceolatus Karg,1987、利斯塔革伊螨Gamasiphis paulista Castilho,2010、莎瓦革伊螨Gamasiphis salvadori Castilho et al.,2012、三茎革伊螨Gamasiphis trituberosus(Karg,1990)、波形革伊螨Gamasiphis undulatus(Karg amp;Schorlemmer,2009)、固化异球螨Mirabulbus scleoides Ishikawa,1969、美丽革板螨Gamasholaspis blandus Tseng,1993、无爪革板螨Gamasholaspis nonunguis Tseng,1993。本文对每种土壤革螨均进行了主要特征描述，并绘制了背、腹特征图。 2.南方五省农区物种多样性研究共调查到南方五省农区常见属4个，常见种25种，稀有种112种，无优势种。人工林的革螨多样性高于农田和其他生境；人工林的革螨丰富度指数高于农田和其他生境；其他生境的革螨优势度指数高于农田和人工林；人工林的革螨均匀度指数高于农田和其他生境。 3.广东花都区土壤革螨季节动态研究共调查到花都区常见种36种，稀有种15种，无优势种。11月至3月，农田和人工林受温度影响呈现多样性、均匀度、优势度和丰富度指数平缓上升或下降，其他生境多样性和丰富度指数呈大幅度变化。3月至7月，降水量大和人为因素的干扰加强，多样性、优势度、均匀度和丰富度指数呈现先下降后上升的变化，且达到最高峰；7月至9月，气温略降，革螨的数量和种类随之减少，各指数略下降。 4.五省农区土壤革螨区系多样性研究南方五省农区土壤革螨种类在世界动物地理区系划分中呈现出东洋界、古北界依次递减趋势，在中国动物地理区系划分中呈现出华南区、华中区、东北区依次递减的趋势。收起

关键词 : 土壤革螨物种多样性季节变化分布特征

10. 畜禽补体C3d基因克隆及序列分析和重组鸡C3d免疫佐剂效果研究

[学位论文] 刘栋山东农业大学 2010年博士导师: 牛钟相共248页

摘要 : 在生产实践中，传统的疫苗（弱毒苗、灭活苗）对防治动物疫病发挥了重要作用，但近年来该类疫苗暴露出来的免疫效果不佳等缺陷，使研制更安全、高效、廉价的新型疫苗显得非常迫切和必要。基因疫苗主要由真核表达载体和保护性抗原基因构成，此种疫苗与... 展开在生产实践中，传统的疫苗（弱毒苗、灭活苗）对防治动物疫病发挥了重要作用，但近年来该类疫苗暴露出来的免疫效果不佳等缺陷，使研制更安全、高效、廉价的新型疫苗显得非常迫切和必要。基因疫苗主要由真核表达载体和保护性抗原基因构成，此种疫苗与传统疫苗相比，具有设计灵活、安全性高、性质稳定、成本低、同时诱导体液免疫和细胞免疫等优点。然而核酸疫苗存在的问题是产生抗体慢且水平低，需要加入有效的佐剂才能克服这些缺陷；核酸疫苗的佐剂需用分子佐剂，分子佐剂主要有干扰素分子佐剂、白细胞介素分子佐剂、胸腺肽分子佐剂及C3d分子佐剂等，其中C3d分子作为一种新型分子佐剂日益引起人们的关注。补体C3是机体补体激活的经典途径、替代途径以及甘露聚糖结合凝集素（MBL）途径的交汇点的中心成分，是宿主防御机能的一个分子。C3d片段是补体C3的裂解片段之一，是C3分子α链不能被蛋白酶再裂解并仍保持与抗原共价连接的最小片段，具有广泛的免疫学功能。鉴于上述研究背景，本研究在对不同动物补体C3d基因克隆及序列测定比较分析的基础上，探讨了补体C3d在不同畜禽间基因水平上的相关性和差异性；验证了鸡补体C3d原核表达重组蛋白（rChC3d）对大肠杆菌疫苗和新城疫灭活油乳苗的免疫增强作用；然后采用新城疫病毒F基因为试验材料、以鸡补体C3d的受体结合功能区P29作为分子佐剂，构建了C3d-P29.n（n=2、4、6）多聚体分子佐剂新城疫F基因疫苗，并经过检测证明了其具有较好的免疫保护效果。本研究成果为以后研制禽类的其他有效细菌及病毒性疫苗提供了理论基础和技术支撑。本研究主要内容如下： 1、不同畜禽补体C3d基因的克隆及序列分析：从不同畜禽的肝细胞提取总RNA，通过RT-PCR扩增出C3d基因的cDNA，琼脂糖凝胶电泳鉴定后直接克隆到pMD18-T载体，构建pMD18-T-C3d重组质粒，转化大肠杆菌，酶切鉴定后进行序列测定，然后进行C3d序列比较、CR2结合区同源性分析比较。结果表明，畜禽补体C3d基因同源性相差较大，进化树反映出C3d基因具有种的多样性，亲缘关系越近，进化关系也越近。对CR2结合区分析发现，禽类的该区为29个氨基酸，而哺乳动物的为28个氨基酸，两类动物该区氨基酸的同源性仅为40％，而哺乳动物之间的同源性高达80％，证明补体C3d及CR2结合区具有种属的特异性。 2、鸡补体C3d原核表达载体的构建及其重组蛋白的纯化：补体C3d是补体系统（Complement system，CS）中补体C3的最终裂解产物。为研究其免疫增强的生物学功能，利用RT-PCR技术从罗曼蛋鸡肝脏总RNA中扩增出C3d cDNA，经克隆测序证实所得基因为C3d。然后，将其连接至表达载体pET-32a（+），转化E.coli BL21（DE3），通过IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析结果表明，目的基因在大肠杆菌中以包涵体的形式进行了高效表达，Western-blotting证实目的蛋白为C3d。包涵体蛋白通过尿素溶解液洗涤并溶解后，经硫酸铵盐析、透析、浓缩和Sephadex G-200凝胶过滤层析，重组C3d蛋白得到纯化。 3、鸡补体C3d重组蛋白对大肠杆菌疫苗的免疫增强作用研究：从SDS-PAGE凝胶中分离纯化原核表达的重组C3d蛋白，用戊二醛将其与大肠杆菌抗原连接，免疫注射SPF鸡；对照组鸡免疫注射完全弗氏佐剂大肠杆菌疫苗。分别在免疫后的第2、3、4、5、6、7、8、9周采血，用ELISA方法测定血清中的抗体含量，同时测定血清中总补体活性。结果表明，免疫后3周，弗氏佐剂大肠杆菌疫苗诱导鸡体产生的抗体效价高于C3d佐剂疫苗组，但至第4周，弗氏佐剂疫苗组的抗体水平达到高峰（OD值=0.273±0.044），然后迅速下降，到第9周降至0.20±0.055，而C3d疫苗组鸡免疫后的抗体水平持续上升，从免疫后第2周的0.09±0.030上升到第9周的0.275±0.020。证明原核表达的C3d能够促进免疫记忆细胞的产生，并能够使细菌抗原给予免疫细胞持续稳定的刺激，从而使鸡体维持高水平抗体的时间延长。研究结果为研制有效的家禽细菌性疫苗提供了理论依据。 4、鸡补体C3d重组蛋白对新城疫病毒灭活油乳苗的免疫增强作用研究：为进一步探讨重组鸡补体C3d蛋白的佐剂作用，本试验观察了原核表达纯化后的重组鸡补体C3d蛋白和新城疫灭活油乳苗共同免疫鸡群之后，重组鸡补体C3d蛋白对新城疫灭活油乳苗的免疫协同作用。将7日龄雏鸡分为三组进行免疫注射，作用结果显示联合免疫灭活油乳苗和重组鸡补体C3d蛋白的鸡群，在免疫后1～7周（即14～57日龄）整个观察期内，不但其胸腺T淋巴细胞对ConA、法氏囊B淋巴细胞对PMA的反应均明显强于单纯油乳苗免疫组（其中除在接种后第1周时两组鸡的B淋巴细胞增殖OD值差异不显著外，其余各检测时间两组间均表现为差异显著（P<0.05）或极显著（P<0.01），特别是T淋巴细胞增殖情况在接种第2周后均表现为差异极显著（P<0.01））；而且联合免疫组的HI抗体效价水平也持续性高于单纯油乳苗免疫鸡群，并在免疫接种后5～7周时差异显著（P<0.05）。 5、新城疫病毒C3d-P29分子佐剂F基因疫苗的构建及其表达：C3d是补体C3的裂解产物之一，与抗原相连时可以明显提高抗原分子的免疫原性。CR2/CD21在其功能发挥过程中起到重要作用，P29为编码C3d与CR2结合区域的基因。在克隆出C3d cDNA基础上，设计引物克隆P29至pUC19载体，利用同裂酶BamHⅠ和BglⅡ构建pUC-P29.n。酶切获得P29.n，将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1（+）。 6、鸡C3d-P29重组质粒特异性增强鸡补体总活性与C3含量的初步研究：为验证鸡补体C3d-P29分子佐剂作用，本试验比较研究了免疫注射含有鸡C3d-P29基因重组表达质粒之后的鸡血清中补体水平及其补体C3含量与含有异种动物（如小鼠）CR2结合区基因序列重组质粒或空白对照之间的差异，以探讨鸡补体C3d基因重组质粒能否特异性的增强鸡补体总活性与补体C3含量。根据构建的真核表达重组质粒不同分为五组对鸡进行免疫注射，具体为空白对照（PBS）组；pcDNA3.1空质粒组；含有新城疫F基因的pcDNA3.1-F组；含有新城疫F基因以及鸡CR2结合区（P29）基因序列C3d-P29六聚体的pcDNA3.1-F-ChC3d-P29.6组；含有新城疫F基因以及小鼠CR2结合区（P28）基因序列C3d-P28六聚体的pcDNA3.1-F-MC3d-P28.6组。分别采取各组经二免后成年鸡的新鲜血清，测定其补体总活性；利用生化合成的C3α链N端21肽，经免疫家兔后制备的抗鸡C3抗体，具有能够与鸡血清中的补体C3发生特异性反应的特性，用来测定注射过不同真核表达质粒后鸡血清中C3含量差异。结果表明，空白对照（PBS）组；pcDNA3.1空质粒组；pcDNA3.1-F组；pcDNA3.1-F-ChC3d-P29.6组和pcDNA3.1-F-MC3d-P28.6组五个试验组鸡血清中的补体C3含量分别为0.34±0.005mg/mL、1.47±0.008mg/mL、1.70±0.005mg/mL、1.78±0.007mg/mL和4.18±0.008mg/mL。免疫鸡补体C3d（pcDNA3.1-F-ChC3d-P29.6组）的鸡血清中补体总活性和C3含量都远远高于其他组，差异极显著（P<0.01）；并且鸡C3d重组质粒能特异性增强鸡补体总活性与C3含量，差异极显著（P<0.01）。 7、新城疫补体C3d分子佐剂疫苗免疫效果的研究：在克隆了鸡C3d cDNA和新城疫F48E9株F基因cDNA的基础上，构建编码CR2结合区P29基因的多聚体，以此多聚体为分子佐剂构建了新城疫F基因疫苗pcDNA3.1-F-C3d-P29.2、pcDNA3.1-F-C3d-P29.4、pcDNA3.1-F-C3d-P29.6及pcDNA3.1-F，通过了实验室安全检验和效力检验。将含有不同个数P29基因的多聚体作为分子佐剂的新城疫F基因疫苗、新城疫油乳剂灭活苗以及质粒载体作为对照分别免疫SPF鸡，利用MTT法、血凝抑制法（HI）和ELISA等分别检测不同疫苗免疫后的细胞免疫和体液免疫水平，并在免疫后第五周进行了攻毒试验。最后，还进行了重组鸡补体C3d质粒（pcDNA3.1-F-ChC3d-p29.6）及原核表达重组C3d蛋白（rChC3d）对外周血T淋巴细胞增殖效果对比试验。结果表明，以补体C3d-P29为分子佐剂的新城疫F基因重组疫苗安全性好；虽然免疫后抗体水平和保护率不如新城疫油乳剂灭活苗，但是能够抵抗致死量病毒的攻击，具有较好的保护作用，其中以pcDNA3.1-F-C3d-P29.6效果更好；MTT法测定T淋巴细胞转化结果表明，补体C3d-P29.6佐剂能显著促进淋巴细胞转化，多数时间点与油佐剂的效果相当，部分时间点显著强于油佐剂。MTT法检测pcDNA3.1-F-ChC3d-p29.6与rChC3d对外周血T淋巴细胞增殖效果显示pcDNA3.1-F-ChC3d-p29.6免疫组峰值较rChC3d协同免疫组出现时间稍晚，但随后质粒免疫组可维持在更高的水平值。这表明pcDNA3.1-F-ChC3d-p29.6在体内持续的时间更长。本研究中C3d分子佐剂疫苗免疫效果的验证，为进一步开发和利用鸡C3d奠定了基础。收起

关键词 : 补体C3d 分子佐剂核酸疫苗重组蛋白真核重组表达质粒