摘要: 目的：肝细胞肝癌恶性程度高，转移早，预后差，是危害人类健康的常见肿瘤。目前肝癌早期诊断和手术技术已经有所提高，但其术后复发率仍很高。Her-2/neu基因的扩增及其编码产物的过表达与多种肿瘤的发生、发展、预后有关，已有大量文献报道。尽管国外... 展开 目的：肝细胞肝癌恶性程度高，转移早，预后差，是危害人类健康的常见肿瘤。目前肝癌早期诊断和手术技术已经有所提高，但其术后复发率仍很高。Her-2/neu基因的扩增及其编码产物的过表达与多种肿瘤的发生、发展、预后有关，已有大量文献报道。尽管国外有部分学者的研究指出在肝癌中Her-2/neu基因的扩增较少[1]。但国内关于Her-2/neu基因在肝癌的报道较少。对于表达Her-2/neu基因++或+++的乳腺癌，赫赛汀的治疗已经得到肯定，但对于Her-2/neu基因高表达的肝癌，如果能使用赫赛汀有效，就可能为肝癌的治疗提供另一途径。Carver RS[2]在动物实验中发现ErbB2表达的ErbB蛋白仅在胚胎的肝实质中被检测到，且在出生后第3周就消失，即使肝部分切除术也不能被诱导产生。国内黄必军[3]等经双色荧光原位杂交(dual FISH)检测42例原发性肝癌间期细胞核中Her-2的扩增和17号染色体的数目及比值，发现21.4％的肝细胞癌HER-2有扩增，在单细胞核水平检测到定位于17q11.2-q12的HER-2基因有扩增，从分子细胞遗传学水平验证了血清学、免疫组织化学及比较基因组杂交的结果。HER-2编码的膜糖蛋白具有促进肿瘤细胞浸润、转移的功能，经分析发现，HER-2扩增病人的肿瘤比无扩增病人的肿瘤有增大的倾向，HER-2扩增患者的术后预后较差，与Heinze等[4]用ELISA法检测HER-2蛋白表达的结果相吻合，HER-2拷贝数与性别、临床分期、肿瘤大小、术后复发及术后2年生存期无关(P>0.05)，但与年龄、AFP水平和HBV感染有关(P<0.05)。曾志武等采用免疫组织化学方法检测肝癌、肝硬化和正常肝组织中Her-2/neu蛋白的表达，结果表达率依次为37.5％(15/40)、10%(1/10)和无表达，其表达与肝癌类型无关，与肿瘤包膜侵犯、病理分级及肿瘤转移有关，而与肿瘤大小、AFP水平及肝硬化无关，考虑Her-2/neu基因可作为肝癌独立的预后因子[5]。Huang TJ[6]研究指出Her-2/neu基因与肝癌的体积大小、术后生存期有关，且与大肝癌关系较大。Heinze T[7]研究提示c-erb B2与肝癌生存期有关。 方法：⑴使用免疫组化和荧光定量聚合酶链检测的方法，进行Her-2/neu基因表达水平的检测，分析HER-2癌基因表达与年龄、性别、肿瘤大小、HBV感染、AFP水平、肝硬化、临床病理分期、生存期等关系⑵本实验中计量资料用算术均数(或几何均数)士标准差((x)±SD)描述，两种以上均数检验采用t检验，两个独立样本的阳性比率检验和两种方法的独立性检验采用x2检验。 结果：①荧光定量RT-PCR检测肝组织中HER2/neu基因mRNA方法的成功建立。②荧光定量RT-PCR方法检测HER2/neu基因方法具有很好的重复性和稳定性。③临床标本检测结果：实时定量RT-PCR检测HER2/neu基因在肝癌中的过表达率为40％，HCC中HER-2阳性表达率显著高于肝硬化及正常肝组织，有明显的统计学意义。免疫组化检测在HCC、肝硬化组织中的阳性表达率分别为40％，10％，而正常肝组织未见表达。HCC中HER-2阳性表达率显著高于肝硬化及正常肝组织。④组织中HER2/neu基因的表达水平与肝癌的临床因素，病理学因素和生物学因素的相关性：HER-2/neu蛋白表达与是否合并肝硬化、侵袭性、癌组织Edmondson分级明显相关，在合并肝硬化、侵袭性高危组、癌组织Edmondson分级Ⅳ级的HCC患者中，HER-2/neu蛋白阳性表达率明显增高。⑤HER-2与HCC预后的关系：HER-2表达阳性患者的5年生存率为25.00％，平均生存时间为21.2个月；阴性表达患者5年生存率为44.44％，平均生存时间为46.5个月，Kaplan-Meie法分析两组间存在显著差异，显示HER-2表达阳性对预后有显著影响。 结论：⑴免疫组化与荧光定量RT-PCR检测Her-2基因在肝组织中的表达上有着很好的一致性，统计学分析表明定量结果不具有显著性差异。⑵HER-2/neu基因的表达在肿瘤细胞侵袭性生长或转移中起着一定的作用，与肿瘤进展有密切关系。⑶Her-2/neu基因可作为肝癌独立的预后因子。⑷对于Her-2/neu基因高表达的肝细胞肝癌，使用赫赛汀有可能为肝癌的治疗提供另一途径。 收起