摘要: 目的：本课题的目的是在体内、体外抗凝血活性评价的导向下，比较水蛭炮制前后的药效学差异，并对水蛭中具有抗凝血活性部位进行追踪分离，希望获得水蛭新的活性部位及单体化合物。 方法：体外抗凝血实验以活化的部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原... 展开 目的：本课题的目的是在体内、体外抗凝血活性评价的导向下，比较水蛭炮制前后的药效学差异，并对水蛭中具有抗凝血活性部位进行追踪分离，希望获得水蛭新的活性部位及单体化合物。 方法：体外抗凝血实验以活化的部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)为指标，体内抗凝血实验以凝血时间、出血时间为指标，并结合抗栓实验对炮制前后的水蛭进行抗凝血的药效学评价。生水蛭、制水蛭分别用水煎煮和无水甲醇提取，通过体内、体外抗凝血实验比较其抗凝血活性，选出活性最强的提取方法；水蛭用无水甲醇回流提取后，浓缩液依次以正己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压回收溶剂得到不同极性溶剂的提取部位；对有药理活性的部位进行化学成分分析。 结果：实验结果表明水蛭生品的水煎剂的抗凝血作用要明显优于炮制品水煎剂，而水蛭生品的甲醇提取物的药理作用最好，并具有一定的量效关系。水蛭甲醇提取物经萃取得正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、水溶液四部分，活性评价结果表明乙酸乙酯部分是主要的抗凝血有效部位，正己烷和水溶液部分也表现出了不同程度的抗凝血作用。 正己烷部分通过GC-MS分析，分离鉴定出了11个化合物，主要为不饱和脂肪酸类，其中包括：12-甲基十四烷酸甲酯、11-十六碳烯酸甲酯、13-二十二烯酸甲酯等。乙酸乙酯部分通过柱层析分离得到一个单体化合物，经结构分析鉴定为胆固醇。 结论：水蛭烫制后水煎剂入药其抗凝血作用会明显降低。水蛭应生品入药，生品的药理作用明显优于炮制品；水蛭甲醇提取物的抗凝活性明显优于水提物，说明水蛭中可能存在除水蛭素以外的其它抗凝血成分。水蛭甲醇提取物四个萃取部位的乙酸乙酯部分的抗凝血药理作用最强。正己烷部分和水溶液部分也有一定的抗凝血活性，而正丁醇部分没有表现明显的药理活性。对水蛭抗凝血的正己烷部分进行GC-MS分析表明，正己烷部分大部分是脂肪酸类化合物。 收起